大豆堿性多肽對金黃色葡萄球菌抑制效果及機理研究.pdf

1、為探討GBP對金黃色葡萄球菌的抑制機理，本課題主要介紹了GBP的概況及相關抑菌劑抑菌機理的研究方法，探討了GBP對金黃色葡萄球菌的抑制效果，并研究了GBP對金黃色葡萄球菌細胞壁、細胞膜和細胞內(nèi)大分子的影響。實驗結果如下：
　　(1)為測定GBP對金黃色葡萄球菌的抑制效果及最小抑菌濃度，本試驗采用不同濃度GBP處理金黃色葡萄球菌后抑菌圈直徑的大小，來評價GBP對金黃色葡萄球菌的抑菌特性。通過不同濃度GBP處理金黃色葡萄球菌后菌落計數(shù)

2、的方法，來評估GBP對金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度。以及在金黃色葡萄球菌對數(shù)生長期加入不同濃度的GBP后，采用分光光度計來測定GBP對細菌生長曲線和抑菌效果的影響。實驗結果表明：GBP可以有效地抑制金黃色葡萄球菌的生長；而且GBP對金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度為50μg/ml，且隨著GBP濃度的增大，抑菌效果越發(fā)明顯；對數(shù)生長期加入最小抑菌濃度的GBP時，細菌生長曲線雖然受到抑制但不是特別明顯，濃度達到2倍最小抑菌濃度后，生長曲線受到明

3、顯的抑制。
　　(2)通過觀察GBP對金黃色葡萄球菌細胞壁的影響，分光光度計的實驗結果可以推測GBP能夠破壞和講解細菌細胞壁；200μg/mlGBP處理金黃色葡萄球菌不同時間后，通過原子力顯微鏡可以直觀觀察處理組及空白對照組的細胞形態(tài)，結果表明：GBP處理時間越長，其對金黃色葡萄球菌的形態(tài)學影響越明顯，細胞正常的形態(tài)遭到破壞，細胞壁變得粗糙且有明顯的塌陷和褶皺，甚至出現(xiàn)細胞的崩潰；不同濃度的GBP處理金黃色葡萄球菌不同時間后，分光

4、光度計測定405nm處的結果表明存在于細胞壁與細胞膜之間的堿性磷酸酶出現(xiàn)泄漏，泄漏量與GBP濃度和處理時間呈正相關，即GBP濃度越大、處理時間越長，其對金黃色葡萄球菌的細胞壁破壞也越強。以上結果說明，GBP可以影響金黃色葡萄球菌的細胞壁結構，造成其通透性增加，甚至出現(xiàn)細胞壁的破碎。
　　(3)通過紫外分光光度計在不同波長下測定經(jīng)不同濃度的GBP處理過的金黃色葡萄球菌菌液，結果表明：細胞膜上的β-半乳糖酶和細胞內(nèi)的核酸、蛋白、還原糖

5、出現(xiàn)泄漏，泄漏量隨著GBP濃度的增加和處理時間的增加而增加。說明GBP能改變金黃色葡萄球菌的細胞膜結構，使細胞膜的通透性增加，使細胞膜上的物質或細胞內(nèi)的部分物質能夠泄漏到細胞外。細胞的正常生理活動因此受到干擾，細胞內(nèi)外的滲透壓失去平衡，進而細菌生長受到抑制，甚至出現(xiàn)死亡。
　　(4)對金黃色葡萄球菌細胞內(nèi)大分子的抑制實驗結果表明，GBP可以抑制金黃色葡萄球菌細胞內(nèi)呼吸鏈脫氫酶的活性，而且抑制了胞內(nèi)DNA和蛋白質的生物合成，抑制效果