大豆堿性多肽對(duì)金黃色葡萄球菌抑制效果及機(jī)理研究.pdf

1、為探討GBP對(duì)金黃色葡萄球菌的抑制機(jī)理，本課題主要介紹了GBP的概況及相關(guān)抑菌劑抑菌機(jī)理的研究方法，探討了GBP對(duì)金黃色葡萄球菌的抑制效果，并研究了GBP對(duì)金黃色葡萄球菌細(xì)胞壁、細(xì)胞膜和細(xì)胞內(nèi)大分子的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：
　　(1)為測(cè)定GBP對(duì)金黃色葡萄球菌的抑制效果及最小抑菌濃度，本試驗(yàn)采用不同濃度GBP處理金黃色葡萄球菌后抑菌圈直徑的大小，來評(píng)價(jià)GBP對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌特性。通過不同濃度GBP處理金黃色葡萄球菌后菌落計(jì)數(shù)

2、的方法，來評(píng)估GBP對(duì)金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度。以及在金黃色葡萄球菌對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期加入不同濃度的GBP后，采用分光光度計(jì)來測(cè)定GBP對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)曲線和抑菌效果的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：GBP可以有效地抑制金黃色葡萄球菌的生長(zhǎng)；而且GBP對(duì)金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度為50μg/ml，且隨著GBP濃度的增大，抑菌效果越發(fā)明顯；對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期加入最小抑菌濃度的GBP時(shí)，細(xì)菌生長(zhǎng)曲線雖然受到抑制但不是特別明顯，濃度達(dá)到2倍最小抑菌濃度后，生長(zhǎng)曲線受到明

3、顯的抑制。
　　(2)通過觀察GBP對(duì)金黃色葡萄球菌細(xì)胞壁的影響，分光光度計(jì)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以推測(cè)GBP能夠破壞和講解細(xì)菌細(xì)胞壁；200μg/mlGBP處理金黃色葡萄球菌不同時(shí)間后，通過原子力顯微鏡可以直觀觀察處理組及空白對(duì)照組的細(xì)胞形態(tài)，結(jié)果表明：GBP處理時(shí)間越長(zhǎng)，其對(duì)金黃色葡萄球菌的形態(tài)學(xué)影響越明顯，細(xì)胞正常的形態(tài)遭到破壞，細(xì)胞壁變得粗糙且有明顯的塌陷和褶皺，甚至出現(xiàn)細(xì)胞的崩潰；不同濃度的GBP處理金黃色葡萄球菌不同時(shí)間后，分光

4、光度計(jì)測(cè)定405nm處的結(jié)果表明存在于細(xì)胞壁與細(xì)胞膜之間的堿性磷酸酶出現(xiàn)泄漏，泄漏量與GBP濃度和處理時(shí)間呈正相關(guān)，即GBP濃度越大、處理時(shí)間越長(zhǎng)，其對(duì)金黃色葡萄球菌的細(xì)胞壁破壞也越強(qiáng)。以上結(jié)果說明，GBP可以影響金黃色葡萄球菌的細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)，造成其通透性增加，甚至出現(xiàn)細(xì)胞壁的破碎。
　　(3)通過紫外分光光度計(jì)在不同波長(zhǎng)下測(cè)定經(jīng)不同濃度的GBP處理過的金黃色葡萄球菌菌液，結(jié)果表明：細(xì)胞膜上的β-半乳糖酶和細(xì)胞內(nèi)的核酸、蛋白、還原糖

5、出現(xiàn)泄漏，泄漏量隨著GBP濃度的增加和處理時(shí)間的增加而增加。說明GBP能改變金黃色葡萄球菌的細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)，使細(xì)胞膜的通透性增加，使細(xì)胞膜上的物質(zhì)或細(xì)胞內(nèi)的部分物質(zhì)能夠泄漏到細(xì)胞外。細(xì)胞的正常生理活動(dòng)因此受到干擾，細(xì)胞內(nèi)外的滲透壓失去平衡，進(jìn)而細(xì)菌生長(zhǎng)受到抑制，甚至出現(xiàn)死亡。
　　(4)對(duì)金黃色葡萄球菌細(xì)胞內(nèi)大分子的抑制實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，GBP可以抑制金黃色葡萄球菌細(xì)胞內(nèi)呼吸鏈脫氫酶的活性，而且抑制了胞內(nèi)DNA和蛋白質(zhì)的生物合成，抑制效果