糖脂聚合物修飾納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體藥物遞釋系統(tǒng)的抗內(nèi)異疼痛研究.pdf

1、疼痛是子宮內(nèi)膜異位癥的主要臨床表現(xiàn)癥狀，主要采用激素和手術(shù)治療。激素療法副作用大，療效不確切，手術(shù)治療易復(fù)發(fā)，因此，探索藥物治療的新方法是內(nèi)異疼痛新療法發(fā)展的重要方向。ATP及其P2X3受體可能在內(nèi)異癥疼痛敏化及信息傳遞中發(fā)揮了重要作用，A-317491是P2X3選擇性受體拮抗劑，可抑制ATP激活P2X3受體引起的Ca2+內(nèi)流，抑制動(dòng)作電位產(chǎn)生，抑制疼痛。Ca2+內(nèi)流是衡量疼痛的重要指標(biāo)。A-317491作用于P2X3受體高表達(dá)的內(nèi)異病

2、灶，一般情況下，藥物很難分布到該作用位點(diǎn)，藥物療效差。本研究旨在構(gòu)建遞釋A-317491的納米給藥系統(tǒng)，通過給藥系統(tǒng)在P2X3受體高表達(dá)部位的聚集，實(shí)現(xiàn)內(nèi)異疼痛的有效治療。
　　A-317491為難溶性藥物，采用納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體(Nanostructured lipid carriers，NLC)可實(shí)現(xiàn)對藥物的有效包封，但NLC存在針對內(nèi)異病灶P2X3高表達(dá)部位的有效分布問題。本課題組前期研究顯示，糖脂聚合物膠束(Stearic

3、acid-g-chitosanoligosaccharide，CSOSA)在大鼠異位內(nèi)膜組織有較好分布。因此，采用CSOSA修飾的NLC給藥，有可能實(shí)現(xiàn)A-317491的內(nèi)異疼痛有效治療。
　　本研究構(gòu)建了含20wt％液態(tài)油酸的NLC，包封A-317491(NLC/A-317491)。采用CSOSA嫁接物修飾NLC/A-317491，制備CSOSA/NLC/A-317491納米粒，提高其異位內(nèi)膜組織的分布。經(jīng)CSOSA修飾，CSO

4、SA/NLC納米粒荷正電。采用CSOSA∶NLC=2∶1(w/w)的CSOSA修飾NLC，CSO SA/NLC/A-317491納米粒的粒徑為48.1±5.2nm，表面電位為28.3±0.4mV。透射電鏡觀察納米粒呈類球形，分布較均一。CSOSA/NLC/A-317491納米粒的包封率和載藥量分別為64.4±2.6％和2.10±0.1％。CSOSA/NLC/A-317491與NLC/A-317491納米粒72h藥物的累計(jì)釋放百分率分別為

5、58.8±1.57％和39.0±2.22％，CSOSA/NLC/A-317491的釋放速率明顯快于NLC/A-317491。
　　以高表達(dá)P2X3受體的鼠嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(PC12)為模型細(xì)胞，細(xì)胞攝取實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，CSOSA/NLC納米?？捎行П籔C12細(xì)胞攝取。以fluo-4AM為Ca2+熒光染料，考察CSOSA/NLC/A-317491納米粒對Ca2+內(nèi)流的抑制作用，結(jié)果顯示，CSOSA/NLC/A-317491納米粒孵育12

6、h，可有效抑制ATP激活P2X3受體引起的Ca2+內(nèi)流，與A-317491鈉鹽水合物效果相當(dāng)，載藥納米?？删S持更長的作用時(shí)間。
　　近紅外成像結(jié)果顯示，CSOSA修飾的NLC納米粒可明顯提高NLC的裸鼠異位內(nèi)膜組織分布。疼痛生物行為學(xué)結(jié)果表明，CSOSA/NLC/A-317491可減弱模型大鼠機(jī)械和熱痛覺敏感，并維持較長時(shí)間，且不影響正常大鼠的疼痛生物行為。給藥24h，CSOSA/NLC/A-317491可顯著降低模型大鼠DRG(