不同酶切方式制備殼低聚糖體外抗幽門螺桿菌的研究.pdf

1、目的:研究殼低聚糖體外對(duì)幽門螺桿菌的抑菌作用,實(shí)驗(yàn)結(jié)果將為殼低聚糖作為候選的抑菌保健藥提供重要的理論依據(jù),為藥物的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù),憑借豐富甲殼資源優(yōu)勢(shì),利用廢棄資源服務(wù)人類,大大提高產(chǎn)品的附加值,以創(chuàng)高經(jīng)濟(jì)價(jià)值和增加市場應(yīng)用前景。
　　 方法:(1)采用平板涂布法或者密集劃線法接種細(xì)菌在選擇性哥倫比亞血培養(yǎng)基上,微需氧條件下培養(yǎng),通過觀察菌落形態(tài)和顯微鏡下鏡檢菌體形態(tài)以及進(jìn)行快速尿素酶試驗(yàn)RUT、過氧化氫酶試驗(yàn)和氧化酶試驗(yàn)

2、等生化反應(yīng)以鑒定疑似幽門螺桿菌菌落,并將其分離純化傳代。(2)采用藥敏紙片瓊脂擴(kuò)散法將沾取不同濃度、不同酶切方式以及不同pH值條件的樣品的紙片平貼在涂布好菌液的培養(yǎng)基表面,對(duì)照為沾取滅菌生理鹽水的紙片,倒置塑料平皿在密封培養(yǎng)盒中,迅速置入微需氧產(chǎn)氣袋并于37℃CO2培養(yǎng)箱里培養(yǎng)2～3天,用游標(biāo)卡尺測量抑菌環(huán)直徑,不同條件的每種樣品各做5次,取其平均值,統(tǒng)計(jì)學(xué)LSD-t檢驗(yàn)分析方法處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
　　 結(jié)果:(1)選擇性哥倫比亞血

3、培養(yǎng)基上可見透明針尖樣的菌落或者半透明的菌苔,鏡檢可見革蘭氏陰性呈海鷗狀、S狀彎曲菌或者弧形桿狀菌的典型幽門螺桿菌菌體形態(tài),快速尿素酶試驗(yàn)RUT、過氧化氫酶試驗(yàn)和氧化酶試驗(yàn)等生化反應(yīng)均為陽性特征。(2)以殼聚糖內(nèi)切酶降解的殼低聚糖均有較好的抑菌能力,其中以數(shù)均分子量為1500的殼低聚糖效果最好,其抑菌效果在分子量1.5kDa～10kDa范圍內(nèi)隨分子量減小而增強(qiáng)(P<0.01),并隨著濃度增大而增強(qiáng)(P<0.01),而在pH2.0～4.0