豆類脲酶的提純及應用研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本文探討了金屬螯合親和層析固定相制備的最佳條件：戊二醛濃度0．55％，氨三乙酸濃度0．40 mol／L，反應時間10 h，反應溫度65℃；鎳離子配體較鋅離子配體有更大的固載量；未加配基的載體對脲酶無特異性吸附。利用此固定相對大豆脲酶液進行分離純化， Zn2+柱和Ni2+柱的酶回收率分別為88．5和80．4％，純化倍數(shù)分別為3．7和6．1。
　　用酶催化動力學光度法測定底物及抑制劑含量，試驗了各試劑的用量，以及溫度、pH值對酶催化反

2、應的影響。研究了尿素濃度及抑制劑濃度與反應速度的關系，確定線性范圍，并進行了試樣測定。
　　用殼聚糖作為載體，戊二醛作交聯(lián)劑，對脲酶進行固定化。最佳固定化條件為：聯(lián)酶時間90min，戊二醛濃度0．53%，緩沖液pH7．0。游離酶和固定化酶的最佳反應溫度分別為33℃和70℃，最佳pH值均為7．0，表觀米氏常數(shù)分別為29．8mmol／L和13．9 mmol／L；在70℃存放2 h后，游離酶活力僅為最初值的6％，固定化酶活力則為最初值的

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