小麥胚芽蛋白質(zhì)譜識(shí)別及釋放行為研究.pdf

1、小麥胚芽蛋白是以脫脂小麥胚芽為原料經(jīng)過(guò)堿溶酸沉等方式制備而成的蛋白質(zhì)產(chǎn)品，在食品、化工等領(lǐng)域具有重要的應(yīng)用前景。傳統(tǒng)的基于堿溶酸沉技術(shù)的提取工藝存在用水量高、提取率低和乳清廢水排放量大等一系列問(wèn)題。此外，資源利用率和產(chǎn)品附加值較低。本文旨在以麥粕中蛋白質(zhì)為研究對(duì)象研究一種新型的堿溶酸沉提取小麥胚芽蛋白的方法，并在基于質(zhì)譜的蛋白質(zhì)種類識(shí)別的基礎(chǔ)上，研究了不同的提取條件對(duì)小麥胚芽中各種種類的蛋白質(zhì)的釋放行為造成的不同影響。通過(guò)小麥胚芽中試放

2、大實(shí)驗(yàn)可將所得產(chǎn)品應(yīng)用到實(shí)際生產(chǎn)中，并通過(guò)改變提取溫度、溶劑的pH值及提取時(shí)間等因素可進(jìn)一步提高蛋白得率及蛋白含量，主要結(jié)論如下：
　　1.基于HPLC-MS的蛋白質(zhì)識(shí)別方法研究，利用HPLC對(duì)小麥胚芽蛋白提取液進(jìn)行了分離，收集了分離出的主要蛋白質(zhì)組分，采用不同的蛋白酶進(jìn)行酶解的技術(shù)并結(jié)合了高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)對(duì)高效液相分離出各種種類的蛋白質(zhì)進(jìn)行了一一識(shí)別。結(jié)果表明不同種類蛋白質(zhì)在色譜柱中保留時(shí)間的不同，總計(jì)識(shí)別出多種蛋白質(zhì)，

3、其中豐度較高的蛋白質(zhì)有17種。
　　2.脫脂小麥胚芽蛋白質(zhì)釋放行為研究，在蛋白質(zhì)組分識(shí)別的基礎(chǔ)上，對(duì)麥粕中每一種蛋白質(zhì)的溶出過(guò)程進(jìn)行了檢測(cè)，并對(duì)比了所有種類的蛋白質(zhì)在提取過(guò)程中的釋放速率以及釋放量的顯著變化。根據(jù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果可知，低分子量的蛋白釋放速率顯著快于高分子量蛋白質(zhì)的釋放速率，而且動(dòng)態(tài)提取的過(guò)程要比靜態(tài)提取的過(guò)程各組分蛋白的釋放速率要高很多，動(dòng)態(tài)提取過(guò)程中保留時(shí)間為18.78min的色譜峰中Chromosome3B蛋白釋放速

4、率最快，提取2次的蛋白釋放率已達(dá)90％。
　　3.基于小麥胚芽蛋白的酶解方法研究，考察了利用各種蛋白酶在不同的固液比、提取溫度、溶液pH值的條件下水解脫脂小麥胚芽蛋白制備得到小麥胚芽肽。比較木瓜蛋白酶、枯草桿菌蛋白酶,以及混合蛋白酶水解脫脂小麥胚芽蛋白的進(jìn)程曲線，結(jié)果顯示復(fù)合蛋白酶的酶解效果最好，其較佳作用條件為：底物濃度11.11%，pH7.0，溫度45℃，酶與底物比1:200，時(shí)間為60 min。在此條件下，小麥胚芽蛋白的酶解