高壓均質(zhì)法制備BSA包裹磁性微球及其免疫層析應(yīng)用研究.pdf

1、生物大分子包裹的磁性微球水溶性好，非特異性吸附低，生物相容性好，有多種反應(yīng)活性功能基團(tuán)（如-COOH、-NH2等），可偶聯(lián)具有生物活性的物質(zhì)（如抗原、抗體、酶等），在外加磁場作用下容易進(jìn)行分離和導(dǎo)向，廣泛應(yīng)用于靶向藥物、酶固定、細(xì)胞快速分離、疾病診斷等領(lǐng)域。
　　本文中，用高壓均質(zhì)法制備了牛血清白蛋白包裹磁性微球（SPIO@BSA）。通過Plackett-Burman和 Box-Behnken實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化了制備條件。優(yōu)化的高壓均質(zhì)

2、制備條件為：制備條件(A)為0.44、制備條件(B)為140、制備條件(C)為2.2、制備條件(F)為10000、制備條件(G)為30、制備條件(J)為600、制備條件(H)為25、制備條件(K)為1。透射電鏡（TEM）和動態(tài)光散射（DLS）顯示 SPIO@BSA為球形，水合粒徑為245.8±3.4nm，PDI為0.199±0.031，有良好的單分散性。振動樣品磁強(qiáng)計(jì)（VSM）檢測其飽和磁化強(qiáng)度為35.3emu/g，具有超順磁性和良好的

3、磁響應(yīng)性。熱重分析（TGA）顯示微球SPIO@BSA中磁含量達(dá)62.0％，BSA約占28.4%。電導(dǎo)滴定法測定SPIO@BSA表面羧基含量為0.14mmol/g。
　　分別在SPIO@BSA表面標(biāo)記克倫特羅單克隆抗體（mAbCLE）和重組乙肝e抗原單克隆抗體（MceAb）。用間接競爭磁性免疫層析法檢測克倫特羅，光學(xué)比色法及磁信號檢測法檢測IC50分別為0.16ng/mL和0.09ng/mL。用雙抗夾心磁性免疫層析法檢測重組乙肝e抗