食品中抗生素殘留的高效液相色譜化學(xué)發(fā)光檢測(cè)法.pdf

1、本論文綜述了化學(xué)發(fā)光分析特別是化學(xué)發(fā)光與其它分析技術(shù)聯(lián)用的研究現(xiàn)狀，以及抗生素的性質(zhì)和食品中抗生素殘留分析方法的研究現(xiàn)狀。指出高效液相色譜(highperformanceliquidchromatography,HPLC)—化學(xué)發(fā)光(chemiluminescence，CL)聯(lián)用技術(shù)由于其將高效的色譜分離手段與高靈敏的化學(xué)發(fā)光檢測(cè)技術(shù)結(jié)合為一體，已成為一種理想的超痕量分離分析工具，有可能利用其解決食品安全中抗生素殘留分析的問題。在此基礎(chǔ)

2、上，本論文以進(jìn)一步挖掘現(xiàn)有化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的分析應(yīng)用潛力、開發(fā)新的化學(xué)發(fā)光體系，發(fā)展食品中抗生素殘留分析新技術(shù)為出發(fā)點(diǎn)，系統(tǒng)研究了34種抗生素對(duì)各種化學(xué)發(fā)光體系的增強(qiáng)和抑制作用規(guī)律、機(jī)理和分析應(yīng)用潛力。在此基礎(chǔ)上，建立了一系列同時(shí)測(cè)定多種抗生素的高效液相色譜—化學(xué)發(fā)光檢測(cè)新方法，并對(duì)其在食品安全中的應(yīng)用進(jìn)行了研究。其具體研究?jī)?nèi)容如下： 1.系統(tǒng)研究了34種抗生素在不同酸性介質(zhì)中對(duì)KMnO4-Na2SO3-β-CD體系的影響，發(fā)現(xiàn)具有

3、多個(gè)共扼雙鍵結(jié)構(gòu)的四環(huán)素類抗生素能顯著增強(qiáng)此體系的化學(xué)發(fā)光。通過對(duì)反應(yīng)前后CL發(fā)光光譜圖和熒光光譜圖的研究，探討了其增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的機(jī)理，提出激發(fā)態(tài)的二氧化硫和激發(fā)態(tài)的β-環(huán)糊精與四環(huán)素類物質(zhì)的脫水衍生物形成的包絡(luò)配合物為此體系的兩個(gè)發(fā)光體。基于四壞素類抗生素對(duì)該化學(xué)發(fā)光體系的增強(qiáng)效應(yīng)，建立了測(cè)定四環(huán)素、土霉素和美他環(huán)素的HPLC-CL方法。對(duì)所測(cè)定的抗生素，該法的檢測(cè)限為0.9-5.0ng/mL，11次日內(nèi)平行測(cè)定的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為3

4、.1-7.4％，9次日間平行測(cè)定的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.2～8.6％。最后，應(yīng)用該法成功地測(cè)定了蜂蜜中四環(huán)素類抗生素的殘留。 2.系統(tǒng)研究了34種抗生素在不同酸性介質(zhì)中對(duì)Ce(Ⅳ)-Ru(bpy)32+-HNO3體系的影響，發(fā)現(xiàn)喹諾酮類抗生素能顯著增強(qiáng)此體系的化學(xué)發(fā)光。通過詳細(xì)分析化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)過程、化學(xué)發(fā)光光譜和紫外—可見吸收光譜，探討了其增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的機(jī)理，提出喹諾酮類物質(zhì)被HNO3氧化形成奎寧(烯醇)結(jié)構(gòu)，然后與Ce

5、(Ⅳ)反應(yīng)形成活性復(fù)合物，這種活性復(fù)合物可以產(chǎn)生自由基與Ru(bpy)32+和Ce(Ⅳ)的反應(yīng)產(chǎn)物Ru(bpy)33+發(fā)生反應(yīng)生成發(fā)光體[Ru(bpy)32+]*，導(dǎo)致化學(xué)發(fā)光。基于喹諾酮類抗生素對(duì)該化學(xué)發(fā)光體系的增強(qiáng)效應(yīng)，建立了測(cè)定氧氟沙星、諾氟沙星、環(huán)丙沙星和洛美沙星的HPLC-CL方法。對(duì)所測(cè)定的抗生素，該法的檢測(cè)限為0.36-2.4ng/mL。并且考察了本方法的精密度和穩(wěn)定性，對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的混合溶液(QNs=50ng/mL)，分

6、別測(cè)定了進(jìn)行了日內(nèi)(n=11)和日間(n=5×3=15)平行測(cè)定，其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別在1.6-4.5％和3.7-6.2％。最后應(yīng)用該法成功地測(cè)定了龍蝦樣品中喹諾酮類抗生素的殘留。 3.發(fā)現(xiàn)鏈霉素對(duì)KIO4-魯米諾-Mn2+體系的化學(xué)發(fā)光增強(qiáng)作用，提出了其機(jī)理。利用其化學(xué)發(fā)光增強(qiáng)作用，建立了鏈霉素的FIA-CL分析新方法。對(duì)所測(cè)定的鏈霉素，該方法的檢測(cè)限為3ng/mL，低于最低殘留檢測(cè)限，對(duì)50ng/mL鏈霉素進(jìn)行15次平行測(cè)定，