掃描電化學顯微鏡測定DNA.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、掃描電化學顯微術(SECM)作為一種電化學方法,已經用于DNA片斷斑點的表征.目前已經報道的關于SECM測定DNA的文章僅有四篇.在這些工作中,利用直接雜交法將目標DNA片段固定在載玻片上,分別通過銀增強、鳥嘌呤氧化和具有電化學活性的雜交指示劑來表征目標DNA片段.我們首次將DNA夾心雜交法和SECM相結合,利用醇的高效催化作用,進行了DNA的定量分析,并對實際樣品進行了測定.全文分為三部分:第一部分是用固相直接雜交法,通過SECM的收

2、集模式測定DNA.首先利用生物素與鏈霉親和素的結合反應,把生物素化的DNA探針固定在鏈霉親和素覆蓋的聚苯乙烯板上,然后加入生物素化的目標DNA,利用核酸分子雜交使目標DNA與探針發(fā)生雜交.雜交反應結束后,加入鏈霉親和素—辣根過氧化物酶(HRP)結合物,將HRP連接到被測DNA上.利用掃描電化學顯微鏡的收集模式,通過檢測HRP催化氫醌(H<,2>Q)和H<,2>O<,2>反應產生的1,4-苯醌(BQ)來間接檢測目標DNA.第二部分用固相夾

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