二氫卟吩e6載藥膠束的制備與評價.pdf

1、聚合物膠團系兩親性嵌段或接枝共聚物，在水性介質中自發(fā)形成核-膜結構的膠粒，共聚物的疏水片段形成膠粒的內核，親水片段形成外膜。聚合物膠團的內核可以作為疏水性藥物的儲庫，將藥物增溶在核心，外膜可以維持膠團在水性環(huán)境中的穩(wěn)定性，對藥物起保護作用，提高藥物的穩(wěn)定性，聚合物膠團對藥物具有緩釋作用。膠團特有的納米級粒徑可有效促進聚合物膠團的“滲透與保留作用”，賦予其被動靶向腫瘤組織的功能，同時通過對聚合物膠團表面進行配體或抗體修飾可幫助其達到主動靶

2、向的目的。聚合物膠團對難溶性藥物、大分子藥物和基因治療藥物在載體給藥方面具有獨特的優(yōu)勢，與傳統(tǒng)的低分子量表面活性劑相比，聚合物膠團具有更低的臨界膠團濃度，因而在體循環(huán)中具有更高的穩(wěn)定性。
　　 本研究以18.0 KDa的低分子量殼聚糖(chitosan oligosaccharide，CSO)為原料，以碳二亞胺為偶合劑，將硬脂酸(stearic acid，SA)的羧基以共價鍵的形式結合到殼聚糖鏈的游離氨基上，得到殼聚糖硬脂酸嫁接

3、物(stearic acidgrafted chitosanoligosaccharide copolymer，CSO-SA).以三硝基苯磺酸法測定嫁接物氨基取代度；以芘熒光法測定該嫁接物在水中的臨界膠團濃度；以熒光淬滅法測定該嫁接物在水中自聚集后形成的疏水核區(qū)域數(shù)；以微粒粒度及表面電位分析儀測定嫁接物膠團在水中的粒徑與表面電位。同時以光敏劑二氫卟吩e6(chlorin e6，Ce6)為模型藥物，進行嫁接物膠團載藥性能研究。考察膠團載藥

4、前后粒徑與表面電位變化，并進行包封率測定。以A549為模型細胞進行嫁接物膠團的細胞攝取實驗。利用殼聚糖鏈游離氨基和葉酸分子游離羧基的反應活性，對殼聚糖硬脂酸嫁接物進行葉酸修飾，考察葉酸修飾前后嫁接物膠團理化性質的變化。以A549(FR=(-))，MCF-7(FR=32％)細胞系為模型細胞，考察葉酸修飾對細胞選擇性攝取嫁接物膠團的影響，以二氫卟吩e6為模型藥物，考察葉酸修飾對膠團載藥行為和細胞攝取的影響。
　　 經生物酶降解得到重

5、均分子量為18.0 KDa的低分子量殼聚糖在水中具有良好的溶解性。采用偶合反應對其進行疏水性修飾，得到氨基取代度為4.96％±0.10％的殼聚糖硬脂酸嫁接物(CSO-SA)，在水中的臨界膠團濃度為36.27±1.51μg/mL。1.0 mg/mL濃度的嫁接物膠團溶液中，單個CSO-SA分子形成的疏水性微區(qū)域數(shù)為4.55個。1.0 mg/mL濃度的嫁接物膠團溶液，其數(shù)均粒徑為28.9 nm，表面電位為39.1±0.5 mV。
　　

6、 葉酸修飾的殼聚糖硬脂酸嫁接物，可以提高嫁接物在水中的自聚能力，并進一步增加單個嫁接物分子形成的疏水核數(shù)。A549(FR=(-))，MCF-7(FR=32％)細胞系對嫁接物載藥膠團的藥物攝取實驗結果表明，葉酸分子的表面修飾，使腫瘤細胞A549對藥物的攝取無明顯影響，但顯著增加了葉酸受體過表達的腫瘤細胞MCF-7(FR=32％)對藥物的攝取百分率。葉酸分子的表面修飾，對Ce6載藥膠團的藥物包封率和載藥量無影響，但在一定程度上減少了藥物的體

7、外釋放量。
　　 以Hela細胞系為模型細胞，采用四唑藍比色法考察Ce6包載前后的細胞毒性.在無光照條件下，Ce6在CSO-SA和FA-CSO-SA包載后，對Hela細胞的24h半數(shù)致死量增加，說明載藥膠團可以降低藥物的毒性。在光照條件下，Ce6、CSO-SA/Ce6和FA-CSO-SA/Ce6對Hela細胞的毒性作用明顯增加。FA-CSO-SA/Ce6的安全系數(shù)最大，說明采用較小的光敏劑量就可以達到與游離藥物相當?shù)墓鈩恿π?/p>