質(zhì)量平衡法與定量核磁法對葉酸和人胰島素的純度研究.pdf

1、葉酸是人體必需的維生素，對核酸合成和氨基酸代謝等生理活動具有重要作用，監(jiān)測合成葉酸純品的含量并對其中雜質(zhì)進行分析對相關(guān)藥物的質(zhì)量控制上具有實際意義，但目前對于其有機雜質(zhì)的種類及含量尚無文獻報道。本文采用質(zhì)量平衡法對葉酸雜質(zhì)進行了系統(tǒng)性的分析，利用三重四極桿液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法對葉酸有機雜質(zhì)進行鑒定，得到雜質(zhì)蝶酸、對氨基苯甲酰谷氨酸的含量分別為0.07％、0.31％，卡爾費休水分滴定法測得水分含量為7.60％，離子色譜法測得氯離子含量為0

2、.03％，質(zhì)量平衡法計算葉酸純度值為91.1％±0.6％。本課題中對雜質(zhì)的定性定量分析為葉酸一級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研制奠定了基礎(chǔ)。
　　人胰島素是一種結(jié)構(gòu)較為簡單的蛋白質(zhì)，是體內(nèi)唯一具有降血糖功能的激素，在常用的分析檢測方法中，免疫法缺乏對失活胰島素的識別，而同位素稀釋質(zhì)譜法的前處理過程較為復(fù)雜。本課題研究了定量核磁共振法在人胰島素純度分析中的應(yīng)用。首先利用液相色譜法分離純化，得到了幾乎不含有機雜質(zhì)的高純樣品(液相色譜檢測純度為99.78

3、％)。實驗優(yōu)化了流動相梯度、添加鹽種類及用量、流動相pH、溶劑濃度等純化條件，凍干過程中加入冰袋以降低溫度的方法也大大減弱了樣品在該過程中的降解程度。然后利用定量核磁法對純化后產(chǎn)品進行定量分析，純化后人胰島素及氘代鹽酸的應(yīng)用使得核磁共振譜圖上蛋白質(zhì)與內(nèi)標(biāo)馬來酸的定量峰獨立無干擾，最終得到了人胰島素標(biāo)準(zhǔn)品的準(zhǔn)確量值。最后以純化后人胰島素作為標(biāo)準(zhǔn)品利用液相色譜法對市售樣品進行純度測定。市售人胰島素樣品的純度值為84.52％±1.14％，比傳