稀土熒光配合物修飾去鐵蛋白的制備與應(yīng)用.pdf

1、碩士學(xué)位論文稀土熒光配合物修飾去鐵蛋白的制備與應(yīng)用P r e p a r a t i o na n d A p p l i c a t i o no f L u m i n e s c e n t L a n t h a n i d eC o m p l e x - ·M o d i f i e dA p o f e r r i t i n學(xué) 號： 2 1 Q Q Z Q 星壘大連理工大學(xué)D a l i a n U n i v

2、 e r s i t y o f T e c h n o l o g y大連理工大學(xué)碩士學(xué)位論文摘 要基于稀土熒光生物探針的長壽命熒光特性而發(fā)展起來的高靈敏度時間分辨熒光生化分析技術(shù)可有效消除來自生物體樣品的背景熒光干擾，已經(jīng)在臨床診斷與生物技術(shù)領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。然而，由于稀土熒光生物標(biāo)記物都存在生物親和性的問題，一定程度上限制了其在時間分辨熒光生化分析技術(shù)領(lǐng)域的應(yīng)用。本碩士論文研究利用將E u ( I I I ) 、E u ( I

3、 I I ) ／T b ( I I I ) ( E u ：T b = l ：1 ) 及T b ( 1 1 1 ) 與配體4 ’．苯基．2 ，2 ’：6 ”，2 ”．聯(lián)三吡啶．6 ，6 ”．二甲胺四乙酸的熒光配合物包裹進(jìn)去鐵蛋白中的方法，制備出了可發(fā)出紅、橙、綠系列熒光顏色的稀土配合物修飾蛋白質(zhì)。這種修飾蛋白質(zhì)不僅保持了去鐵蛋白的外部結(jié)構(gòu)，同時還保持了稀土熒光配合物的發(fā)光性質(zhì)。為了驗證修飾蛋白可以作為生物標(biāo)記探針用于時間分辨熒光生化測定中

4、，將包裹了稀土配合物的去鐵蛋白與鏈霉親和素( S A ) 共價鍵合后用于人前列腺特異抗原( P S A ) 的時間分辨熒光免疫測定。結(jié)果表明，S A 經(jīng)蛋白標(biāo)記后依然保持了良好的生物反應(yīng)活性，可用于人P S A 的高靈敏度免疫測定。另外，包裹了稀土配合物的去鐵蛋白還被成功地用于人宮頸癌細(xì)胞( H e L ac e l l s ) 的時間分辨熒光成像測定。上述結(jié)果表明，包裹了稀土熒光配合物的去鐵蛋白可作為一種熒光探針用于時間分辨熒光生化測