無孔剛性色譜介質的制備及其表征.pdf

1、本文旨在合成一種可以實現(xiàn)快速、高分辨率分離效果的高分子離子交換介質。首先以聚乙烯吡咯烷酮（PVPK-30）為分散劑，甲基丙烯酸縮水甘油酯（GMA）為聚合單體，在水與乙醇體系中，利用偶氮二異丁腈（AIBN）引發(fā)聚合反應，并在反應期間加入交聯(lián)劑三（2，甲基丙烯酸甲酯）丙烷（TRI），合成了剛性、單分散的高分子GMA微球，簡稱為PGMA。實驗中，考察了不同的乙醇/水比例和不同的交聯(lián)劑加入量對微球粒徑和機械強度的影響。分別采用粒徑分析儀、掃描電

2、鏡和高效液相色譜測試了微球的粒徑分布、外形和機械強度。結果顯示，得到了平均粒徑為4.9微米，呈單分散，表面光滑無孔，機械強度良好的色譜介質。 通過在微球表面修飾了磺酸基，得到了一種陽離子交換介質。實驗中采用了兩種不同的方法在介質表面修飾磺酸基，一是利用亞硫酸鈉直接與微球上的環(huán)氧基進行反應，二是利用硝酸鈰氨引發(fā)劑的作用，在活性羥基位點上接枝聚2-丙烯酰胺-2-甲基丙磺酸（AMPS）高分子鏈。其中AMPS本身也是一種強離子交換劑。最

3、后利用了紅外光譜和濕法稱重驗證磺酸基在介質上的接枝反應。 利用溶菌酶作為模型蛋白比較了這兩種不同修飾方法后的介質對蛋白的靜態(tài)吸附容量，發(fā)現(xiàn)接枝了AMPS高分子鏈的介質，蛋白吸附量提高了一倍以上。進一步利用自制的高分子微球填充色譜柱，進行HPLC分離蛋白質實驗，結果顯示采用了這種懸浮聚合法得到的微球，具有良好色譜操作性能。而通過由硝酸鈰氨引發(fā)的接枝反應，可以得到一種合成方法簡易的色譜介質，同時也可以采用這種方法在微球表面接枝上更多