芯片毛細(xì)管電泳分析生物樣品的應(yīng)用研究.pdf

1、生物樣品如DNA和單細(xì)胞等的電泳分析是生命科學(xué)研究領(lǐng)域中的重要組成部分，在靶向藥物的研究、疾病的早期診斷和治療中有廣闊的應(yīng)用前景。由于芯片毛細(xì)管電泳在分析速度和分離效率上比傳統(tǒng)毛細(xì)管電泳都有了數(shù)量級(jí)的提高，樣品和試劑消耗量?jī)H僅只有pL級(jí)，為生物樣品的分析中提供了新的方法?！　”砻娓男允翘岣咝酒?xì)管電泳分離生物大分子性能的關(guān)鍵技術(shù)。本文的目的是建立玻璃芯片上長(zhǎng)壽命、耐侵蝕的永久涂層的制作方法、用芯片毛細(xì)管電泳分離和鑒定DNA片段、并以

2、谷胱甘肽(GSH)和活性氧(ROS)作為模型化合物，研究在芯片毛細(xì)管電泳同時(shí)測(cè)定單細(xì)胞內(nèi)二種不同標(biāo)記物質(zhì)的方法。　　本文第一章綜述了毛細(xì)管電泳/微流控芯片的表面預(yù)處理和涂層技術(shù)、芯片毛細(xì)管電泳分析DNA片段和單細(xì)胞內(nèi)容物的現(xiàn)狀和發(fā)展。　　第二章研究了在玻璃微流控芯片上制作長(zhǎng)壽、耐蝕的永久性涂層方法。為　　第三章研究了微流控芯片上分析DNA片段的各參數(shù)，重點(diǎn)對(duì)篩分介質(zhì)濃度、電場(chǎng)強(qiáng)度、分離距離等做了優(yōu)化，在優(yōu)化的條件下對(duì)PCR擴(kuò)增的單

3、鏈抗體(ScFv)片段做了分析鑒定。大大提高了分析速度，提高了鑒定DNA片段的準(zhǔn)確度?！　〉谒恼率状螌⒀苌鷦㎞DA加入電泳緩沖液，動(dòng)態(tài)標(biāo)記了單細(xì)胞中的谷胱甘肽。通過液壓結(jié)合低電場(chǎng)進(jìn)樣，提高單細(xì)胞的進(jìn)樣速度和長(zhǎng)期穩(wěn)定性。細(xì)胞溶膜后GSH在分離通道中移動(dòng)0.5cm就能與電泳緩沖液中NDA反應(yīng)完全。 第五章在微流控芯片上同時(shí)測(cè)定單個(gè)紅細(xì)胞中的谷胱甘肽(GSH)和活性氧(ROS)。用雙氫羅丹明123(DHR-123)標(biāo)記ROS，用ND