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1、目的:通過建立一個(gè)小鼠有氧運(yùn)動(dòng)模型,探討自噬在運(yùn)動(dòng)引起的肌肉建成中的作用及其分子機(jī)制。
方法:建立雌性小鼠轉(zhuǎn)輪運(yùn)動(dòng)模型:6米/分鐘,15分鐘/次,3次/天(8:00,14:00和20:00),5天/周,共8周。采用自噬激活劑海藻糖(1%水溶液,自由飲用)為陽(yáng)性對(duì)照,自噬抑制劑氯喹(10mg/kg體重,腹腔注射),為陰性對(duì)照。Western blot檢測(cè)運(yùn)動(dòng)對(duì)自噬蛋白P62,LC3和CathepsinL,抗凋亡蛋白Bcl-2和前
2、凋亡蛋白Bnip3的影響,TUNEL法檢測(cè)骨骼肌細(xì)胞凋亡的變化情況,HE染色和透射電子顯微鏡檢測(cè)骨骼肌,線粒體和自噬體的形態(tài)變化。
結(jié)果:運(yùn)動(dòng)顯著降低小鼠的體重和腹腔脂肪量,提高自由基的清除能力,促進(jìn)自噬體的形成,增加蛋白LC3-II,Cathepsin L,BCL-2的表達(dá)和減少P62和Bnip3的蛋白表達(dá)。同時(shí),運(yùn)動(dòng)后小鼠骨骼肌中線粒體形態(tài)和細(xì)胞凋亡情況得到明顯改善。運(yùn)動(dòng)引起線粒體中細(xì)胞色素C的增加,細(xì)胞質(zhì)中細(xì)胞色素C的下
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