聚合離子液體包覆硅膠納米材料在蛋白質(zhì)分離中的應(yīng)用.pdf

1、聚合離子液體(PILs)是一種新興的高分子材料，本論文將聚合離子液體固定在納米硅膠顆粒表面，并用于蛋白質(zhì)的分離純化，拓展了聚合離子液體在生命科學(xué)中的應(yīng)用。
　　采用γ-（異丁烯酰氧）丙基三甲氧基硅烷為硅烷化試劑對納米硅膠顆粒表面進(jìn)行修飾，引入可聚合的末端雙鍵。通過離子液體單體（1-乙烯基-3-乙基咪唑溴代鹽）和交聯(lián)劑（1，4-丁基-3，3'-二-1-乙烯基咪唑二溴代鹽）的共聚反應(yīng)，得到聚（1-乙烯基-3-乙基咪唑溴代鹽）共價(jià)包覆的

2、納米復(fù)合材料PIL@SiO2。對PIL@SiO2復(fù)合材料進(jìn)行紫外-可見光譜(UV-Vis)、透射電鏡(TEM)、掃描電鏡(SEM)、Zeta電位等表征。
　　以PIL@SiO2復(fù)合材料作為固相萃取劑，考察了其在蛋白質(zhì)分離純化中的性能。結(jié)果表明，PIL@SiO2對酸性蛋白具有明顯的選擇性。本實(shí)驗(yàn)以卵清蛋白的分離純化為評(píng)價(jià)指標(biāo)，通過改變聚合過程中離子液體單體的用量，在pH6.0時(shí)，5.0 mg PIL@SiO2復(fù)合材料對1 mL200

3、μg mL-1卵清蛋白的最大吸附效率為95％。卵清蛋白在復(fù)合材料表面的吸附行為符合Langmuir模型，最大吸附容量為333.3 mg g-1。吸附在固相材料表面的卵清蛋白可用0.2％（m/v）的SDS溶液進(jìn)行洗脫，洗脫回收率為60％。圓二色光譜表明經(jīng)透析除去SDS后，卵清蛋白的二級(jí)結(jié)構(gòu)不發(fā)生改變。將所建立的方法用于雞蛋白中卵清蛋白的選擇性分離，并采用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度驗(yàn)證，結(jié)果表明經(jīng)該方法分離得到的卵清蛋白具有較高純度