費氏中華根瘤菌WGF03中TsT和SiR基因的功能鑒定.pdf

1、分類號S1543UDC碩士學位論文費氏中華根瘤菌WGF03中7sT和SiR基因的功能鑒定郭美樹論文答辯日期三盟羔生王旦盟學位授予日期墊!埠‘目趣日答辯委員會主席陸光洼嬰究旦費氏中華根瘤菌WGF03中／sT和8iR基因的功能鑒定摘要硫是所有生物體必需的化學元素之一。它與氮相互作用，不僅能夠作為生物體大分子結構組分，而且還能在新陳代謝中發(fā)揮特定作用。近年來的研究表明根瘤菌結瘤因子中的還原性末端，其硫化修飾決定了根瘤菌的宿主專一性。硫代硫酸硫

2、轉移酶由五r基因編碼，通過NCBI網(wǎng)站的Blast比對，與RhizobiumspNGR234在核苷酸水平上有95％的一致性，在氨基酸水平上有98％的相似性。為了鑒定這個基因的功能，我們通過pKl8mobsacB同源雙交換的方式，構建TsT基因的缺失突變體TsTI。7kT基因缺失突變后，在以硫代硫酸鈉為唯一硫源的MM培養(yǎng)基中，突變菌株TsTI不能生長，但是可以利用硫酸鹽、亞硫酸鹽、半胱氨酸和甲硫氨酸為唯一的硫源正常生長。植株實驗發(fā)現(xiàn)，乃丁

3、基因突變后，根瘤菌的結瘤時間推遲l天，競爭結瘤的能力下降，單株的結瘤數(shù)量也有所下降，同時在瘤重、植株干重和固氮酶活方面與野生型菌株SfrediiWGF03存在顯著差異。亞硫酸還原酶是硫代謝途徑中的一個酶，催化亞硫酸鹽還原為硫化物。該酶由SiR基因編碼，通過NCBI網(wǎng)站的Blast比對，發(fā)現(xiàn)該序列與RhizobiumspNGR234在核苷酸水平上有96％的一致性，在氨基酸水平上有98％的相似性。為了鑒定這個基因的功能，我們通過pKl8mo