簡介：第一部分動脈粥樣硬化斑塊中納米細(xì)菌的培養(yǎng)與鑒定。目的研究動脈粥樣硬化斑塊中是否存在納米細(xì)菌，并對其進行鑒定。方法將手術(shù)中采獲的12例動脈粥樣硬化斑塊及12例正常動脈血管組織研磨，取上清液培養(yǎng)。培養(yǎng)8周后收集培養(yǎng)瓶底的白色粉末，用納米細(xì)菌單克隆抗體間接免疫熒光法對其進行鑒定，并利用電鏡進一步觀察其形狀。對收獲的納米細(xì)菌進行再培養(yǎng)，每周檢測一次培養(yǎng)基上清液K、NA、CR、MG、CA、P及葡萄糖的濃度。結(jié)果12例動脈粥樣硬化斑塊中10例納米細(xì)菌檢測陽性，2例陰性，12例正常動脈血管組織中1例納米細(xì)菌檢測陽性，11例陰性，卡方檢驗存在顯著性差異P、NA、CR、MG及葡萄糖的濃度無明顯變化P005；而CA、P濃度進行性下降，每周檢測結(jié)果比較存在顯著性差異P、P而不利用K、NA、CL、MG及葡萄糖。第二部分納米細(xì)菌對免主動脈血管平滑肌細(xì)胞生物學(xué)形態(tài)的影響。目的觀察納米細(xì)菌對兔主動脈血管平滑肌細(xì)胞是否具有損傷作用及鹽酸四環(huán)素干預(yù)能否減輕這種損傷。方法光鏡下觀察不同濃度納米細(xì)菌攻擊及195ΜGML鹽酸四環(huán)素干預(yù)48H和72H后的兔主動脈血管平滑肌細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變；四唑鹽MTT比色實驗檢測不同濃度納米細(xì)菌攻擊和195ΜGML鹽酸四環(huán)素干預(yù)48H和72H后的平滑肌細(xì)胞存活和增殖情況；流式細(xì)胞儀檢測不同濃度納米細(xì)菌攻擊和195ΜGML鹽酸四環(huán)素干預(yù)24H后的平滑肌細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果不同濃度納米細(xì)菌攻擊后血管平滑肌細(xì)胞形態(tài)存在不同程度改變，極低濃度時OD0001，0005無明顯變化，隨濃度增加和時間延長，平滑肌細(xì)胞逐漸出現(xiàn)空泡樣變，輪廓不清，細(xì)胞膜損傷破裂，嚴(yán)重時血管平滑肌細(xì)胞被完全破壞。鹽酸四環(huán)素干預(yù)后發(fā)現(xiàn)極低濃度OD0001，0005和低濃度OD001，003005的納米細(xì)菌攻擊對血管平滑肌細(xì)胞形態(tài)學(xué)無明顯影響，但高濃度納米細(xì)菌OD01，03仍可導(dǎo)致大部分平滑肌細(xì)胞損傷和壞死。不同濃度納米細(xì)菌攻擊48H后除OD0001組外各濃度組MTT值低于對照組MTT值，存在顯著性差異P005，其余各濃度組之間比較存在顯著性差異P005。流式細(xì)胞儀檢測發(fā)現(xiàn)不同濃度納米細(xì)菌攻擊24H后，未見明顯血管平滑肌細(xì)胞凋亡，鹽酸四環(huán)素干預(yù)后各濃度組也未見明顯細(xì)胞凋亡。結(jié)論納米細(xì)菌可以損傷兔主動脈血管平滑肌細(xì)胞，濃度越高，攻擊時間越長，損傷程度越重；短時間內(nèi)24小時被納米細(xì)菌攻擊的血管平滑肌細(xì)胞的死亡方式是壞死而不是凋亡；鹽酸四環(huán)素可以減輕納米細(xì)菌對血管平滑肌細(xì)胞的損傷。第三部分納米細(xì)菌損傷兔主動脈血管平滑肌細(xì)胞機制的初步探討。目的從自由基的角度初步探討納米細(xì)菌對兔主動脈血管平滑肌細(xì)胞的損傷機制。方法05MCFARL濃度納米細(xì)菌攻擊兔主動脈血管平滑肌細(xì)胞，分別在0、12、24、48、72小時各時間點取培養(yǎng)基上清液，按照試劑盒說明檢測乳酸脫氫酶LACTATEDEHYDROGENASELDH、超氧化物歧化酶SUPEROXIDEDISMUTASESOD、丙二醛MALONDIALDEHYDEMDA和一氧化氮NITRICOXIDENO的變化。結(jié)果隨著攻擊時間的延長，LDH濃度逐漸升高，與對照組比較存在顯著性差異，各時間點比較存在顯著性差異P005；NO含量逐漸升高，24小時達到高峰后逐漸下降，各時間點濃度與0小時比較存在顯著性差異，各時間點之間比較存在顯著性差異P005。結(jié)論納米細(xì)菌攻擊兔主動脈血管平滑肌細(xì)胞時，可能沒有氧自由基的參與；兔主動脈血管平滑肌細(xì)胞在受到納米細(xì)菌攻擊時，自身分泌了SOD、NO；NO可能參與了平滑肌細(xì)胞的損傷。

簡介：SOOCHOWUNIVERSITY碩士學(xué)位論文論文題目IL1Α不同功能亞型表達系統(tǒng)的構(gòu)建及其在急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞系中的生物學(xué)功能研究研究生姓名張胤晟指導(dǎo)教師姓名劉海燕專業(yè)名稱免疫學(xué)研究方向腫瘤免疫論文提交日期2013年3月IL1Α不同功能亞型表達系統(tǒng)的構(gòu)建及其在急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞系中的生物學(xué)功能研究不同功能亞型表達系統(tǒng)的構(gòu)建及其在急性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞系中的生物學(xué)功能研究中文摘要中文摘要中文摘要第一部分IL1Α不同功能亞型表達系統(tǒng)的構(gòu)建目的IL1Α為IL1家族的主要成員，它在炎癥與腫瘤發(fā)生中都可能發(fā)揮重要的作用。然而，其免疫調(diào)節(jié)作用及機制還不十分明確。有研究發(fā)現(xiàn)IL1Α前體可以入核，但其具體的功能機制并不清楚；另有研究表明，膜型IL1Α可能促進了免疫細(xì)胞的遷移和激活，而肝細(xì)胞壞死后釋放的IL1Α則激發(fā)了過度的炎癥反應(yīng)并促進了腫瘤的發(fā)生。為了能夠研究不同功能亞型的IL1Α在炎癥與腫瘤發(fā)生中的作用，本課題將構(gòu)建體內(nèi)實驗與體外實驗所需要的方法學(xué)平臺，為進一步研究入核型、膜型和釋放的IL1Α與炎癥及腫瘤發(fā)生反應(yīng)的關(guān)系提供研究基礎(chǔ)。方法利用PCR的方法克隆IL1Α不同亞型，經(jīng)過連接到T載體測序正確后，利用不同限制性內(nèi)切酶組合切割成不同接頭的片段，連接到PCDNA31真核表達載體，MINICIRCLE真核表達載體，PDSRED真核表達載體，PET30B原核表達載體。形成分別用于體內(nèi)活體成像的表達系統(tǒng)，用于原位定位的表達系統(tǒng)，以及用于制備IL1Α入核型多克隆抗體的抗原原核表達系統(tǒng)。最終通過水流動力學(xué)在小鼠肝臟內(nèi)表達，分別利用活體成像技術(shù)，組織切片及激光掃描細(xì)胞儀來檢測體內(nèi)表達情況。結(jié)果分別克隆IL1Α基因的不同亞型片段，連接至不同的表達載體?；铙w成像表達系統(tǒng)可以借助水流動力學(xué)高壓注射的方法在小鼠肝臟內(nèi)表達IL1Α亞型，并且通過活體成像檢測螢火蟲素酶產(chǎn)生的信號來監(jiān)控和檢測IL1Α的表達。在原位定位表達系統(tǒng)中，將小鼠肝臟制作冰凍切片，利用激光掃描細(xì)胞儀檢測其熒光信號。原核表達系統(tǒng)中，使用IPTG誘導(dǎo)能實現(xiàn)大量IL1Α入核型融合蛋白的優(yōu)勢表達。結(jié)論經(jīng)過一系列分子克隆操作，成功構(gòu)建了IL1Α不同功能亞型用于活體成像的真核表達系統(tǒng)和用于原位定位表達檢測的真核表達系統(tǒng)，以及用于IL1Α入核型多克隆抗體制備的原核表達系統(tǒng)。為后續(xù)體內(nèi)與體外表達和功能實驗，以及

簡介：目的探討三氧化二砷AS2O3對小鼠肝臟祖細(xì)胞ADULTHEPATICPROGENITCELLS，AHPCS增殖及代謝的影響。方法應(yīng)用改良SEGLEN二步法結(jié)合機械離心獲取小鼠肝臟祖細(xì)胞，原代培養(yǎng)12天的細(xì)胞用于實驗。實驗組細(xì)胞分別加入含2ΜM和4ΜM的AS2O3培養(yǎng)液，不含AS2O3的培養(yǎng)液作為陰性對照組。采用RTPCR技術(shù)檢測三組細(xì)胞KI67MRNA的變化，免疫熒光法觀察三組細(xì)胞KI67蛋白的表達，WESTERNBLOT技術(shù)檢測三組細(xì)胞PCNA蛋白的表達，酶聯(lián)免疫吸附劑測定法ELISA檢測三組細(xì)胞上清液中尿素濃度的變化。結(jié)果1AHPC接種3～4天后活化增殖，7天后可形成明顯的細(xì)胞克隆，10天后進入穩(wěn)定增殖期，持續(xù)觀察40天細(xì)胞未丟失增殖活性。AHPC接種后第1天強陽性表達ALBUMIN，不表達AFP和CK19。接種后第5天，克隆內(nèi)細(xì)胞開始表達AFP。接種35天左右，克隆內(nèi)部分細(xì)胞強陽性表達CK19，另有部分細(xì)胞強陽性表達ALBUMIN，少數(shù)細(xì)胞仍強陽性表達AFP。2①陰性對照組所含KI67陽性細(xì)胞的比例普遍較高251％±28％，而AS2O32ΜM組188％±10％和AS2O34ΜM組118％±20％的KI67陽性細(xì)胞比例逐漸降低。在對照組與AS2O34ΜM組間，以及AS2O3高低濃度組間可見明顯統(tǒng)計學(xué)差異（P值分別為0005，0027），而AS2O32ΜM組KI67陽性細(xì)胞比例在數(shù)值上較對照組為低，但統(tǒng)計學(xué)差異并不明顯P0177。②KI67MRNA的表達量在AS2O3處理組明顯下降，并以AS2O34ΜM組降低最為明顯。對照組與AS2O32ΜM組間、對照組與AS2O34ΜM組間以及AS2O3高低濃度組間均存在明顯統(tǒng)計學(xué)差異（P值分別為0005，＜0001，＜0001）。而三組間內(nèi)參18SMRNA的表達并無明顯改變，這一結(jié)果表明AS2O3可在轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控KI67的表達。③WESTERNBLOT法比較三組間PCNA蛋白的變化表明隨著AS2O3濃度的增加，PCNA表達逐漸下降，并呈劑量效應(yīng)關(guān)系。④UREA濃度隨著AS2O3濃度增加而逐漸下降。對照組與AS2O32ΜM組間0586±0056NMOLULVS0506±0058NMOLUL，P0022、對照組與AS2O34ΜM組間0506±0058NMOLULVS0410±0045NMOLUL，P＜0001以及AS2O3高低濃度組間0506±0058NMOLULVS0410±0045NMOLUL，P0009）均存在明顯統(tǒng)計學(xué)差異，表明AS2O3降低了細(xì)胞的代謝能力，并呈劑量效應(yīng)關(guān)系。結(jié)論1成功的建立了原代小鼠肝臟祖細(xì)胞AHPC體外培養(yǎng)模型。2體外培養(yǎng)的原代小鼠肝臟祖細(xì)胞AHPC具有較強的增殖能力及雙向分化潛能。3三氧化二砷AS2O3可以抑制原代小鼠肝臟祖細(xì)胞AHPC的增殖，并降低其代謝能力。

簡介：力學(xué)細(xì)胞生物學(xué)是生物工程中的一個主題，也是近代細(xì)胞生物力學(xué)的主流。它研究機械力如何調(diào)控組織的形態(tài)和功能，也研究組織是如何通過細(xì)胞生理學(xué)的變化對力學(xué)刺激進行反饋。根據(jù)美國國家工程院的定義，生物工程包括下列十二個方面系統(tǒng)生理、生物物理、康復(fù)工程、生物力學(xué)、生物材料、生物傳感器、生物環(huán)境、生物圖像、論斷與治療方法、人工臟器、生物催化與反應(yīng)器、生化分離及純化、生化儀器與控制。其中，生物力學(xué)廣泛應(yīng)用于生物工程各方面，因為生物界中，從分子到動植個體無不服從力學(xué)規(guī)律。將傳統(tǒng)的力學(xué)方法與概念應(yīng)用于生物系統(tǒng)的觀察和解釋，就是生物力學(xué)。生物力學(xué)的發(fā)展，解答了許多原來存疑的生命奧秘。由于生物醫(yī)學(xué)研究日新月異的發(fā)展和生命系統(tǒng)的高度復(fù)雜性，諸如動態(tài)的新陳代謝機制，細(xì)胞內(nèi)復(fù)雜的信息接受轉(zhuǎn)換與激化機制以及生理學(xué)、遺傳學(xué)，適應(yīng)和基因調(diào)控的力學(xué)關(guān)系等，都難以用傳統(tǒng)生物力學(xué)手段來觀察及闡明。研究力學(xué)環(huán)境（刺激）對人類健康、疾病或損傷的影響，闡明其機制，進而發(fā)展出治療的新路途、新技術(shù)、新醫(yī)藥，這些都是現(xiàn)代生物力學(xué)所期待的。本研究論文以人的前交叉韌帶ACL和內(nèi)側(cè)副韌帶（MCL）的成纖維細(xì)胞物理性質(zhì)的改變、受力及變化為主軸，從傳統(tǒng)的力學(xué)分析、細(xì)胞受力后的應(yīng)答以及對力學(xué)刺激的反饋等方面進行深入研究，并在此基礎(chǔ)上進一步探討損傷后無法自然愈合的前交叉韌帶的修復(fù)機制。本論文實驗共分四部份（第二、三、四、五章）。第一部份（第二章）研究人韌帶成纖維細(xì)胞對膠原Ⅰ型和膠原Ⅲ型黏附強度的差異以及信號通路對ACL和MCL成纖維細(xì)胞黏附纖維結(jié)合基質(zhì)蛋白的影響。在韌帶損傷后新的結(jié)締組織形成之前的炎癥性過程中，韌帶成纖維細(xì)胞嵌入韌帶愈合組織基質(zhì)，遷移進入損傷部位。遷移過程中細(xì)胞運動性對細(xì)胞黏附細(xì)胞外基質(zhì)蛋白有重大影響。ACL和MCL成纖維細(xì)胞對膠原Ⅰ型和膠原Ⅲ型的黏附機制揭示了細(xì)胞對損傷修復(fù)過程應(yīng)答的行為。膠原Ⅰ型和膠原Ⅲ型是兩種原纖維膠原，由ACL和MCL成纖維細(xì)胞分泌并在細(xì)胞外空間裝配成長的電纜狀的原纖維。膠原Ⅰ型和膠原Ⅲ型是構(gòu)成ACL和MCL兩種韌帶的主要結(jié)構(gòu)蛋白。本研究通過微量吸管抽吸技術(shù)測定ACL和MCL成纖維細(xì)胞從由膠原Ⅰ型和膠原Ⅲ型構(gòu)成的基質(zhì)上分離下來所需要的力。我們測定了來自于ACL的約1，200個成纖維細(xì)胞和來自于MCL的約1，600個成纖維細(xì)胞的黏附強度（黏附力黏附單位）。我們還研究了ACL和MCL成纖維細(xì)胞黏附纖維結(jié)合蛋白（基質(zhì)的一種黏附蛋白）中的信號通路，其中重點研究了環(huán)磷酸腺苷和CA2磷脂通路，以明確在細(xì)胞結(jié)合黏附和鋪展在纖維結(jié)合蛋白表襯的表面過程中整合受體介導(dǎo)的信號。用信號通路樹狀抑制因子處理細(xì)胞后，測定單個細(xì)胞的黏附強度。用帶有定量熒光系統(tǒng)（IMAGE1F軟件）和硅增強器靶管（HAMAMATSU光學(xué)電子設(shè)備）的FURA2（鈣離子選擇熒光探針）研究細(xì)胞內(nèi)鈣的分布，基于這個平行實驗，確定細(xì)胞內(nèi)鈣在ACL和MCL間整聯(lián)介導(dǎo)的黏附中的作用。結(jié)果MCL成纖維細(xì)胞在細(xì)胞溶質(zhì)游離鈣中對纖維結(jié)合蛋白的結(jié)合增強22倍，而ACL成纖維細(xì)胞在鈣中無明顯變化。第二部份（第三章）通過電穿孔技術(shù)向ACL和MCL成纖維細(xì)胞中轉(zhuǎn)入放射整聯(lián)橋接蛋白抑制因子（踝蛋白、粘著斑蛋白和A輔肌動蛋白）后，兩種細(xì)胞表現(xiàn)出不同的黏附力，這種抑制因子可以顯著減弱ACL和MCL細(xì)胞的黏附，同時可以降低張力絲的形成和細(xì)胞延伸率。分別用細(xì)胞松弛素D和秋水仙堿阻斷肌動蛋白絲和微管的裝配后，也可以顯著減弱ACLMCL細(xì)胞的黏附性。ACL和MCL成纖維細(xì)胞的黏附都依賴細(xì)胞骨架裝配，然而，在許多方面ACL和MCL對細(xì)胞骨架裝配的依賴性是不同的，特別是對原肌球調(diào)節(jié)蛋白（在肌動蛋白絲的自由端或尖端發(fā)現(xiàn)的一種成帽狀蛋白），外源性原肌球調(diào)節(jié)蛋白釋放后，MCL黏附出現(xiàn)增強。一般說來，韌帶細(xì)胞黏附依賴（1）肌動蛋白絲裝配張力絲形成，它們可以影響整聯(lián)蛋白的空間分布；（2）放射整聯(lián)橋接蛋白的功能，它能影響整聯(lián)蛋白構(gòu)形變化。所有這些調(diào)節(jié)因素對細(xì)胞黏附性都有重大影響。第三部份（第四章A、B）主要研究炎癥條件下韌帶細(xì)胞的遷移，增殖和愈合。經(jīng)過出血、炎癥、增殖和組織重建這個有序的過程后，韌帶開始愈合。在細(xì)胞水平上，愈合包括細(xì)胞的脫離，對傷口周圍基質(zhì)的黏附，遷移和增殖。本部分研究的目的是確定在相同的炎癥條件下，ACL和MCL成纖維細(xì)胞的遷移和應(yīng)答是否存在本質(zhì)區(qū)別。我們設(shè)計了兩組實驗，一組是制造各種寬度的創(chuàng)口（通過用接種環(huán)在融合的細(xì)胞層上制造無細(xì)胞區(qū)域來模擬體外創(chuàng)傷），使細(xì)胞可以遷移到這個無細(xì)胞缺口區(qū)域，另一組是添加炎癥因子TNFAC5A和脂多糖。隨著傷口的寬度增加，兩種類型的韌帶細(xì)胞的恢復(fù)率都下降（ACL的斜面為013HRΜM而MCL的斜面為010HRΜM）。使用三種炎癥因子都能降低兩種韌帶細(xì)胞的恢復(fù)率，愈合速度比對照組慢14～23倍。然而，在兩組實驗中，ACL成纖維細(xì)胞對炎癥因子的更為敏感，MCL細(xì)胞的恢復(fù)率更高（快12～34倍）。第四部份（第五章）通過使用切削刃研究開發(fā)一種基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPS）抑制因子雞尾酒式療法來幫助損傷ACL愈合，減少將來用韌帶組織移植進行的ACL重建。由于ACL缺乏足夠的愈合應(yīng)答，盡管采用了各種方法修補損傷后ACL的重建功能，并多年來沿用這種方法，但效果很不理想，包括同種異體移植，異種移植和自體移植。后來，也采用來自于髕韌帶、髂脛帶、半腱肌和股薄肌腱的組織。然而，從這些器官獲得的組織供體部位的強度和功能的不一致，可能會導(dǎo)致次級并發(fā)癥。并且衰退的ACL重建花費昂貴，還需要進行復(fù)雜的外科手術(shù)。在過去的十年中，我們實驗室證明了ACL和MCL在細(xì)胞水平和分子水平上存在一些本質(zhì)的區(qū)別。實驗初步研究證明了基質(zhì)金屬蛋白酶2（MMP2）和MMP9在ACL和MCL上的活動對分子和細(xì)胞過程產(chǎn)生不利影響，這些過程包括基質(zhì)消化、組織重建和組織再生。本部分研究聚焦于炎癥和生長因子作用下，在細(xì)胞水平（體外），組織水平（體外）和動物模型水平（體外）上MMP家族蛋白對ACL基質(zhì)的重建和愈合的影響。我們發(fā)現(xiàn)MMPS的過度表達是ACL損傷后無法自然愈合的重要原因。通過減弱MMPS分子表達和破壞它的平衡是改進組織再生和重建能力，促進傷口愈合和增強ACL生理強度的有效方法。這一前沿的研究工作是工程學(xué)、醫(yī)學(xué)和生物學(xué)的交叉融合，是在體外從細(xì)胞、分子水平上對生物體細(xì)胞、組織和器官的研究。本論文的系列研究主要探索了力學(xué)環(huán)境對成纖維細(xì)胞生命活動的影響及調(diào)控。研究目的是闡明韌帶損傷后的力學(xué)過程與生物學(xué)過程，如重建、適應(yīng)性變化、修復(fù)機制和基因調(diào)控之間的相互關(guān)系，從而發(fā)展出一個新的方法，以解決前交叉韌帶損傷后無法自然愈合的醫(yī)學(xué)難題。研究結(jié)果解釋了ACL成纖維細(xì)胞與MCL成纖維細(xì)胞在創(chuàng)傷愈合能力上的差異，在細(xì)胞、分子水平上揭示了這兩種細(xì)胞對損傷修復(fù)過程不同的應(yīng)答行為。進而發(fā)現(xiàn)其不同內(nèi)在特性是愈合能力差異的根本原因，即存在著一些本質(zhì)的區(qū)別，進一步研究擬定出一種ACL修復(fù)的雞尾酒式調(diào)制配方。

簡介：廣東醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文人鼻咽癌細(xì)胞系（CNE2Z）放射殘存細(xì)胞生物學(xué)特性及姜黃素放射增敏姓名曹璋申請學(xué)位級別碩士專業(yè)病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師孫寧20050501人鼻咽癌細(xì)胞系CNE2Z放射殘存細(xì)胞生物學(xué)特性及姜黃素放射增敏摘要【目的】放射治療是鼻咽癌的主要治療手段，但放射治療后局部復(fù)發(fā)和遠處轉(zhuǎn)移是病人死亡的主要原因。本實驗觀察人鼻咽癌細(xì)胞系CNE2Z經(jīng)放射處理后存活細(xì)胞生物學(xué)行為的改變探討姜黃素對CNE2Z細(xì)胞放射增敏作用的機制，為姜黃素的L|蠡床應(yīng)用提供理論依據(jù)觀察放射線誘導(dǎo)CNE2Z細(xì)胞血管內(nèi)皮生長因子VEGF的表達情況，尋找預(yù)測鼻咽癌放射治療效果的生物學(xué)指標(biāo)?！痉椒ā咳吮茄拾┘?xì)胞系CNE一2Z經(jīng)放射線處理后繼續(xù)培養(yǎng)，獲得放射殘存細(xì)胞TRL2以及單克隆株TRL21、TRL22，采用細(xì)胞計數(shù)法繪制生長曲線；平板克隆形成實驗繪制細(xì)胞放射存活瞌線；體外侵襲、運動實驗檢測細(xì)胞侵襲、運動能力；免疫細(xì)胞化學(xué)、ELISA和WESTERNBLOT檢測細(xì)胞血管內(nèi)皮生長因子VEGF蛋白表達情況；RTPCR檢測細(xì)胞VEGFMRNA的表達情況，探討放射后存活細(xì)胞的生物學(xué)行為。采用平板克隆形成實驗觀察姜黃素對CNE2Z的放射增敏作用，用流式細(xì)胞儀檢測放射以及藥物處理后CNE2Z細(xì)胞周期的分布，ELISA檢測放射誘導(dǎo)CNE2Z細(xì)胞VEGF表達情況?！窘Y(jié)果】1獲得經(jīng)12GY處理后并能穩(wěn)定傳代的放射殘存細(xì)胞TRL2及單克隆株TRL21，TRL22；2放射殘存細(xì)胞的放射抵抗性提高，侵襲、運動能力增強。VEGF蛋白水平及MRNA水平表達均有明顯增高，與母系CNE2Z比較，差異有顯著性JP001；3姜黃素能顯著降低放射后CNE2Z細(xì)胞的克隆形成率，10PMOL／L和20LAMOT／L姜黃素的放射增敏比SERSF2分別為152和369。單純放射或姜黃素可以導(dǎo)致CNE2Z細(xì)胞的G2／M期阻滯。放射加姜黃素處理后細(xì)胞周期阻滯于G2，M期更加明顯，最高可達856％4放射可以誘導(dǎo)CNE2Z細(xì)胞VEGF的高表達，并呈一定的時間、劑量依賴性?！窘Y(jié)論】1人鼻咽癌細(xì)胞系CNE2Z經(jīng)12GY放射處理后能獲得穩(wěn)定傳代的放射殘存細(xì)胞及單克隆株，其放射抵抗性、侵襲運動能力提高，這與VEGF

簡介：【研究背景】材料表面特性對細(xì)胞的黏附、增殖、分化和凋亡起重要作用，因此，表面修飾是提高材料生物相容性最有效方法之一。隨著納米技術(shù)的發(fā)展，對材料表面進行納米修飾成為材料改性研究的熱點?！痉椒ā糠謩e采用磁控濺射法、堿熱法在材料表面制備納米表面結(jié)構(gòu)，結(jié)合浸泡模擬體液和涂布纖連蛋白等方法對材料表面進行改性；應(yīng)用原子力顯微鏡、掃描電鏡、接觸角測量儀、能譜分析、X射線衍射儀等技術(shù)對材料表征；觀察成骨細(xì)胞和類成骨細(xì)胞（SAOS2）在表面結(jié)構(gòu)上的黏附、鋪展、增殖、細(xì)胞骨架排列的變化，評價材料表面的生物學(xué)性能?！窘Y(jié)果】應(yīng)用磁控濺射法成功制備出金紅石、銳鈦礦和非晶態(tài)的、粗糙度為8NM～10NM的納米級氧化鈦薄膜；成骨細(xì)胞在該薄膜上8小時的黏附和鋪展能力以及36～72小時的增殖速度明顯高于對照組，以銳鈦礦薄膜最為顯著（P＝0000）；細(xì)胞骨架沿細(xì)胞長軸排列，伸展充分。堿熱法處理純鈦能在其表面形成直徑為20NM～40NM納米的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，浸泡模擬體液又能在其表面形成納米羥基磷灰石；SAOS2細(xì)胞在納米網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)上8小時的黏附能力和36～72小時的增殖速度明顯高于純鈦組（P＝0012）；納米羥基磷灰石組36～72小時的細(xì)胞增殖速度明顯低于對照組（P＝0001）；各組表面修飾纖連蛋白后細(xì)胞增殖速度明顯提高，細(xì)胞骨架排列規(guī)律，鋪展充分?！窘Y(jié)論】控制磁控濺射條件，能制備出表面粗糙度相近、晶相不同的納米氧化鈦薄膜，該納米表面能顯著促進成骨細(xì)胞的黏附、鋪展和增殖，對細(xì)胞骨架排列也有顯著影響，其中以銳鈦礦薄膜的生物學(xué)性能最佳；堿熱法處理純鈦能在表面形成納米網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，表面修飾纖連蛋白能顯著促進SAOS2細(xì)胞的黏附、鋪展和增殖。上述兩種材料表面修飾方法對材料表面改性有著重要的意義。

簡介：目的觀察應(yīng)激條件下心肌細(xì)胞中TR3的表達和亞細(xì)胞定位的變化，研究這種變化的生物學(xué)機制，為揭示應(yīng)激機體心肌損傷的病理學(xué)機理提供科學(xué)依據(jù)。方法建立心肌細(xì)胞應(yīng)激損傷的整體動物模型和離體細(xì)胞模型；采用WESTEMBLOTTING方法和細(xì)胞免疫熒光法觀察TR3在應(yīng)激心肌細(xì)胞中的亞細(xì)胞定位；采用熒光探針流動透析裝置測定整體動物心肌細(xì)胞線粒體靜息態(tài)和能化態(tài)的跨膜電位差；采用流式細(xì)胞術(shù)觀察離體心肌細(xì)胞的凋亡率和線粒體膜電位；采用WESTEMBLOTTING法測定應(yīng)激心肌細(xì)胞中細(xì)胞色素C在胞漿和線粒體中的含量；構(gòu)建TR3缺失突變體與GFP的融合表達載體并導(dǎo)入心肌細(xì)胞，尋找應(yīng)激心肌細(xì)胞中TR3線粒體轉(zhuǎn)位的必需氨基酸序列；采用免疫沉淀法檢測應(yīng)激狀態(tài)下心肌細(xì)胞中TR3的絲氨酸磷酸化水平，研究其與TR3在心肌細(xì)胞內(nèi)分布的相關(guān)性。結(jié)果應(yīng)激機體心肌細(xì)胞線粒體中TR3蛋白含量顯著升高，TR3發(fā)生向線粒體的轉(zhuǎn)位；加入核輸出抑制劑LMB后，TR3的核輸出受到阻抑，應(yīng)激心肌細(xì)胞中TR3滯留于胞核，不發(fā)生向線粒體的轉(zhuǎn)位。應(yīng)激條件下TR3向線粒體的轉(zhuǎn)位促進心肌細(xì)胞線粒體膜滲透性轉(zhuǎn)換孔開放、線粒體細(xì)胞色素C釋放及心肌細(xì)胞凋亡；加入LMB阻抑TR3的核輸出后，應(yīng)激心肌細(xì)胞中線粒體膜滲透性轉(zhuǎn)換孔開放、線粒體細(xì)胞色素C釋放及心肌細(xì)胞凋亡均受到阻抑。TR3N端的152個氨基酸對應(yīng)激心肌細(xì)胞中TR3發(fā)生線粒體轉(zhuǎn)位進而導(dǎo)致細(xì)胞凋亡發(fā)揮重要作用。應(yīng)激狀態(tài)下，糖皮質(zhì)激素通過激活PKA通路，導(dǎo)致TR3絲氨酸磷酸化水平的升高進而使TR3發(fā)生線粒體轉(zhuǎn)位，從而引發(fā)心肌細(xì)胞線粒體膜滲透性轉(zhuǎn)換孔開放、線粒體細(xì)胞色素C釋放及心肌細(xì)胞凋亡等生物學(xué)作用；加入H89阻抑PKA通路后，應(yīng)激心肌細(xì)胞中TR3的絲氨酸磷酸化水平降低，TR3的線粒體轉(zhuǎn)位被阻斷，線粒體膜滲透性轉(zhuǎn)換孔開放、線粒體細(xì)胞色素C釋放及心肌細(xì)胞凋亡均受到阻抑。結(jié)論應(yīng)激誘導(dǎo)心肌細(xì)胞中TR3向線粒體轉(zhuǎn)移，并繼而活化細(xì)胞凋亡的線粒體通路，引起心肌細(xì)胞凋亡。TR3N端的152個氨基酸是應(yīng)激心肌細(xì)胞中TR3發(fā)生線粒體轉(zhuǎn)位的必需氨基酸序列。應(yīng)激狀態(tài)下心肌細(xì)胞中PKA通路活化引起TR3絲氨酸磷酸化水平的升高是TR3發(fā)生線粒體轉(zhuǎn)位的重要機制。

簡介：點擊查看更多人脂肪干細(xì)胞基本生物學(xué)特性、表面抗原及成骨、成脂分化潛能的研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：碩士學(xué)位論文純鈦表面堿處理對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)純鈦表面堿處理對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)行為的影響行為的影響邢鶴琳培養(yǎng)類別全日制學(xué)位類型學(xué)術(shù)學(xué)位一級學(xué)科專業(yè)類口腔醫(yī)學(xué)二級學(xué)科專業(yè)口腔臨床醫(yī)學(xué)（修復(fù)學(xué)）研究方向純鈦種植體表面材料改性指導(dǎo)教師郭天文教授（主任醫(yī)師）培養(yǎng)單位第四軍醫(yī)大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院修復(fù)科二O一四年五月第四軍醫(yī)大學(xué)THEFOURTHMILITARYMEDICALUNIVERSITY分類號R7831UDC61631密級公開第四軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文目錄縮略語表1中文摘要3英文摘要6前言10文獻回顧12正文17實驗一純鈦試件表面堿處理及表面性狀分析171材料172方法183結(jié)果194討論235小結(jié)25實驗二骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的原代培養(yǎng)261材料262實驗273結(jié)果與討論28實驗三純鈦試件表面堿處理對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)行為的影響301材料302實驗313結(jié)果344討論425小結(jié)43實驗四堿處理對純鈦試件表面骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨相關(guān)基因表達水平的影響451材料452實驗46

簡介：本文研究了骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植對大鼠急性肺損傷模型的生物學(xué)影響和在損傷修復(fù)中的作用及可能的機制，探討急性肺損傷細(xì)胞治療的可能性。方法首先以密度梯度離心法分離、體外培養(yǎng)并擴增成體大鼠骨髓MSCS，采用免疫細(xì)胞化學(xué)及流式細(xì)胞術(shù)檢測MSCS抗原表達，同時檢測MSCS向骨細(xì)胞及脂肪細(xì)胞的分化能力，并用BRDU或DAPI標(biāo)記MSCS；采用細(xì)菌內(nèi)毒素攻擊法建立大鼠急性肺損傷模型，進行干細(xì)胞移植治療。將72只健康雄性WISTAR大鼠隨機分為3組1正常對照組C，N24，經(jīng)尾靜脈注入05ML生理鹽水；2單純肺損傷組L，N24經(jīng)尾靜脈注射LPS5MGKG，然后立即經(jīng)另一條尾靜脈注入05ML生理鹽水；3急性肺損傷干細(xì)胞移植組LM，N24經(jīng)尾靜脈注入LPS5MGKG，然后立即經(jīng)另一條尾靜脈注入培養(yǎng)并標(biāo)記的大鼠MSCS10106溶于05ML生理鹽水。各組在實驗后2H、4H、6H麻醉狀態(tài)下活殺動物，每個時間點各8只。經(jīng)腹主動脈取血、離心，分離血漿，采用酶聯(lián)免疫吸附法測定血漿中TNFA、IL6的含量；收集肺組織測定濕干重比值、比色法測肺勻漿髓過氧化酶MPO活性、制作組織切片以HE和免疫組化法行病理學(xué)檢查。結(jié)果1骨髓MSCS的分離、培養(yǎng)及抗原表達與多向分化能力密度梯度離心法能成功分離純化大鼠骨髓MSCS。免疫細(xì)胞化學(xué)示大鼠MSCS表達CD29和CD44，不表達造血干細(xì)胞標(biāo)志CD34；BRDU標(biāo)記法陽性率約為74％，DAPI標(biāo)記法陽性率可達90％以上；流式細(xì)胞儀結(jié)果顯示，隨傳代次數(shù)的增多，MSCS增殖能力減弱；BRDU標(biāo)記和未標(biāo)記細(xì)胞增殖周期無明顯差異。體外誘導(dǎo)實驗顯示，MSCS可向脂肪細(xì)胞、成骨細(xì)胞等多向分化。2LPS致傷作用及MSCS移植對ALI的影響組織切片HE染色顯示，LM組肺組織炎癥改變較L組減輕。免疫組織化學(xué)染色顯示MSCS移植后在肺內(nèi)歸巢，并有細(xì)胞形態(tài)的變化，但未檢測到細(xì)胞分子表型的改變。與C組相比，LM組、L組在致傷后肺WD值、組織MPO活性、血漿TNFA及IL6水平均升高P＜001，但LM組以上四個指標(biāo)均較L組降低P＜001。結(jié)論1密度梯度離心法能成功分離純化大鼠骨髓MSCS，所得MSCS具有多向分化能力。2內(nèi)毒素攻擊法可成功建立急性肺損傷模型。3急性肺損傷條件下，移植后MSCS在肺組織內(nèi)歸巢，發(fā)生細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變，并可降低損傷早期肺組織WD值、MPO活性及血漿細(xì)胞因子TNFA、IL6水平，減少白細(xì)胞滯留，從而利于肺組織損傷的修復(fù)。

簡介：隨著老年人在世界人口的比例大幅增加老齡化疾病越來越受到人們的重視。其中骨質(zhì)疏松癥是一種老年人常見的疾病其特點是骨組織低骨量和顯微結(jié)構(gòu)的惡化。這種疾病的發(fā)生極大增加了老年人骨折的風(fēng)險。隨著社會人口老齡化衰老型骨質(zhì)疏松癥及所導(dǎo)致的骨折已成為一個日益重要的健康和社會問題。在動物體內(nèi)骨骼是一個不斷變化的過程骨吸收再重塑并替換為新骨。在年輕人體內(nèi)中骨總體數(shù)量的吸收并形成新骨是平衡的。然而隨年齡增長這種重構(gòu)平衡被打破最終導(dǎo)致骨量減少骨強度降低進而導(dǎo)致骨質(zhì)疏松癥的發(fā)生增加骨折的風(fēng)險。其中股骨骨折極易受到骨質(zhì)疏松癥的影響。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞BMMSCS是從骨髓組織中提取出來的數(shù)量非常稀少但其存在的意義是非常重大的。它具有多向分化功能以維持骨組織的自我更新新骨替換舊骨能力。然而衰老狀態(tài)下BMMSCS的生物學(xué)行為和骨組織的再生能力的相關(guān)報道較少。許多信號通路調(diào)節(jié)干細(xì)胞的分化方向和數(shù)目WNT信號通路作為其中一種信號通路對骨組織改建和新骨形成發(fā)揮了重要作用Β–CATENINΒ–連環(huán)蛋白也是決定干細(xì)胞向成脂或成骨方向分化轉(zhuǎn)換的重要調(diào)控分子。通過前期實驗我們檢測到衰老組織來源的BMMSCS低表達ΒCATENIN提示W(wǎng)NTΒCATENIN信號通路可能與衰老狀態(tài)下BMMSCS的成骨或成脂分化有關(guān)。我們假設(shè)衰老環(huán)境可以使ΒCATENIN發(fā)生改變進而導(dǎo)致WNTΒCATENIN信號通路受抑制使成骨表達下降。目的1探討自然衰老對小鼠骨質(zhì)特征的影響。2分離并提取自然衰老小鼠的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。3檢測自然衰老是否對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖和分化能力產(chǎn)生了影響。4檢測在衰老環(huán)境下ΒCATENIN是否發(fā)生了變化過表達ΒCATENIN后對自然衰老來源的BMMSCS的生物學(xué)功能產(chǎn)生影響。方法1取2月齡和12月齡C57BL6J小鼠各20只利用MICROCT三維立體掃描技術(shù)分別對每只小鼠的后肢股骨骭骺端處進行掃描觀察分析兩組小鼠股骨骭骺端的骨密度及骨小梁相關(guān)指標(biāo)數(shù)值的變化。2將兩組小鼠脫頸處死后剝?nèi)∑涔晒呛兔劰呛蠹羧啥斯墙M織。利用密度梯度離心法貼壁法培養(yǎng)出純度較高的BMMSCS并且采用流式對干細(xì)胞表面分子進行鑒定和細(xì)胞凋亡狀態(tài)的檢測。SAΒ半乳糖苷酶染色方法檢測兩組衰老相關(guān)酶表達變化。3采用MTT方法對兩組細(xì)胞增殖能力進行對比克隆形成方法研究兩組細(xì)胞自我更新能力通過茜素紅染色和油紅O染色及REALTIMEPCR的方法研究兩組細(xì)胞成骨和成脂分化能力的對比。4通過REALTIMEPCR和WESTERNBLOT實驗觀察兩組不同來源細(xì)胞中ΒCATENIN表達的差異。并且構(gòu)建ΒCATENIN質(zhì)粒載體將實驗分為四組2月齡組2月齡成骨成脂誘導(dǎo)組12月齡成骨成脂誘導(dǎo)組12月齡轉(zhuǎn)染成骨成脂誘導(dǎo)。分別對這四組進行茜素紅染色油紅O染色和REALTIMEPCR和WESTERNBLOT實驗方法研究其分化功能的差異。結(jié)果1兩組小鼠股骨經(jīng)MICROCT掃描和圖像研究顯示12月齡小鼠股骨骭骺端的松質(zhì)骨較2月齡組密度減低骨密度下降。兩組骨小梁參數(shù)統(tǒng)計分析表明12月齡組骨體積比總體積BVTV％值、骨小梁數(shù)量TBN1MM和骨密度BMDMGMM3值均明顯低于2月齡組而骨小梁間距TBSUM明顯大于2月齡組兩組間各參數(shù)相比差異均有統(tǒng)計學(xué)意義P2我們成功的從兩組小鼠體內(nèi)提取出了BMMSCS。通過實驗觀察發(fā)現(xiàn)1培養(yǎng)初期細(xì)胞大多為短梭形傳到P3代后細(xì)胞形態(tài)逐漸均一為多角形星型衰老組BMMSCS形狀較為鋪展立體形態(tài)差。到P6代年輕組和衰老組均表現(xiàn)為形態(tài)不規(guī)則鋪展伸開。由此確定以下試驗均用P35代細(xì)胞。2經(jīng)干細(xì)胞表面分子鑒定顯示衰老組小鼠BMMSCS的干細(xì)胞的特異性表達標(biāo)記CD90在細(xì)胞表面標(biāo)記陽性表達下降明顯其余表面標(biāo)記表達無差異。表明本實驗成功從兩組小鼠體內(nèi)提取出了BMMSCS。3SAΒ半乳糖苷酶為衰老性標(biāo)記的染色年輕組僅見少量的SAΒ半乳糖苷酶染色陽性顯示而衰老組小鼠BMMSCS的SAΒ半乳糖苷酶染色陽性細(xì)胞增多。表明從自然衰老小鼠體內(nèi)提出的BMMSCS的明顯比年輕組的BMMSCS要表現(xiàn)出更明顯的衰老狀態(tài)。4細(xì)胞凋亡檢測顯示12月齡組小鼠BMMSCS凋亡水平明顯高于2月齡組。3MTT和克隆形成檢測顯示12月齡組BMMSCS增殖能力和自我更新能力較2月齡組減弱。茜素紅染色顯示12月齡組礦化結(jié)節(jié)形成數(shù)量低于2月齡組。REALTIMEPCR檢測顯示12月齡組BMMSCS成骨誘導(dǎo)后其RUNX2MRNA表達水平明顯低于2月齡組P4通過REALTIMEPCR和WESTERNBLOT檢測在自然衰老小鼠來源的BMMSCS中ΒCATENIN表達較年輕組明顯下降。并且過表達衰老組BMMSCS中的ΒCATENIN后成骨相關(guān)基因RUNX2表達明顯升高成脂相關(guān)基因LPL、PPARR表達明顯下降。實驗結(jié)果表明在衰老組BMMSCS中過表達ΒCATENIN后其成骨能力上升成脂能力下降。結(jié)論112月齡小鼠出現(xiàn)了骨衰老癥狀主要表現(xiàn)為骨密度及骨小梁強度下降212月齡組BMMSCS的生物學(xué)行為相對2月齡組發(fā)生了明顯改變。3在12月齡組BMMSCS中增加ΒCATENIN的表達有可能為增強成骨的形成和減少成脂的形成起到重要作用。

簡介：復(fù)旦大學(xué)博士學(xué)位論文慢病毒介導(dǎo)的RNA干擾抑制骨橋蛋白表達對肝癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響姓名孫冰生申請學(xué)位級別博士專業(yè)外科學(xué)指導(dǎo)教師欽倫秀20070408博士論文中文摘要慢病毒介導(dǎo)的RNA干擾抑制骨橋蛋白表達對肝癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響中文摘要肝細(xì)胞肝癌簡稱肝癌是世界上最常見、惡性度最高的腫瘤之一，位居全球惡性腫瘤發(fā)病率的第6位、死因的第3位，在我國已成為惡性腫瘤的第2位死因。近幾十年來盡管對肝癌的基礎(chǔ)研究和診斷治療都取的了顯著進步，但肝癌的總體預(yù)后仍然很差，并沒有顯著的改善，5年生存率僅為5％左右。手術(shù)治療仍是目前肝癌最有效的方法，但肝癌根治性切除后5年轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)率高達60700．4，其遠期療效仍欠滿意。術(shù)后轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)已成為進一步提高肝癌療效的主要障礙，臨床上迫切需要尋找能預(yù)測肝癌轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)的分子和新的干預(yù)治療方法。骨橋蛋白OSTEOPONTIN,OPN是一種分泌型的磷酸化糖蛋白，可與整合素和CD44結(jié)合，參與腫瘤細(xì)胞的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等過程，許多研究顯示其參與多種惡性腫瘤的發(fā)生和轉(zhuǎn)移。我們前期與美國國立癌癥研究所合作，應(yīng)用EDNAARRAYS技術(shù)在全基因組范圍內(nèi)比較40例不伴與伴有肝內(nèi)轉(zhuǎn)移的肝癌之間、肝內(nèi)轉(zhuǎn)移灶和原發(fā)瘤之間基因表達譜的變化，經(jīng)細(xì)胞及組織表達水平分析，證實OPN表達升高與肝癌轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，應(yīng)用OPN抗體阻斷其作用可抑制肝癌細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移。后期研究我們還發(fā)現(xiàn)肝癌患者外周血OPN表達水平與術(shù)后腫瘤轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)及病人的預(yù)后有關(guān)，提示OPN可作為肝癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的預(yù)測指標(biāo)和治療靶點，具有重要的臨床應(yīng)用價值。為此，本課題采用目前國際上較先進的RNA干擾技術(shù)一慢病毒介導(dǎo)的MICRORNAMIRNA干擾，抑制OPN表達并構(gòu)建穩(wěn)定的OPN表達沉默肝癌細(xì)胞株，通過體內(nèi)、體外實驗觀察OPN沉默對肝癌細(xì)胞株生物學(xué)行為的影響，并探討其相關(guān)機制。第一部分慢病毒RNAI載體的構(gòu)建本部分的研究目的是構(gòu)建慢病毒RNAI表達載體，并將其轉(zhuǎn)染人高轉(zhuǎn)移潛能肝癌細(xì)胞株HCCLM3原位接種5周后肺轉(zhuǎn)移率為LOO％，皮下接種5周后肺轉(zhuǎn)移率達100％，并篩選、獲得穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株。方法首先體外化學(xué)合成OPN序列特異性PRE．MIRNHX嘆鏈OPNI．1、OPNI．2、OPNI一3、OPNI4和非特異性對照鏈OPNI3M，并將雙鏈前體克隆進線性質(zhì)粒

簡介：點擊查看更多死亡配體TRAIL的克隆、表達、純化、生物學(xué)活性鑒定及其對常氧和缺氧培養(yǎng)心肌細(xì)胞作用的研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：上海交通大學(xué)碩士學(xué)位論文CCTΖ1在結(jié)直腸癌中的表達及其對結(jié)腸癌細(xì)胞生物學(xué)行為影響的研究姓名王廷峰申請學(xué)位級別碩士專業(yè)外科學(xué)（普通外科）指導(dǎo)教師陸愛國20090501上海交通大學(xué)碩士學(xué)位畢業(yè)論文織，具有顯著性差異（P＜001）。CCTΖ1的表達與結(jié)直腸癌浸潤深度（P＜001）和腫瘤大?。≒＜005）相關(guān)，和結(jié)直腸癌患者的年齡、性別、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤分化程度、腫瘤分期及腫瘤部位無關(guān)。②在所檢測的四株結(jié)直腸癌細(xì)胞株中CCTΖ1均有表達且表達量沒有明顯差異。③成功下調(diào)HCT116細(xì)胞中CCTΖ1的表達。在轉(zhuǎn)染CCTΖ1SIRNA1后24小時，相對于NC組CCTΖ1在MRNA水平下調(diào)8043，在第48H和96HCCTΖ1蛋白質(zhì)的表達分別下調(diào)47和33。④經(jīng)CCTΖ1SIRNA作用的HCT116細(xì)胞生長明顯緩于NC組和LIPOSOME組（P＜005）而NC組和LIPOSOME組間的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。⑤經(jīng)遷移試驗后，CCTΖ1SIRNA遷轉(zhuǎn)移細(xì)胞數(shù)目均低于NC組和LIPOSOME組（P＜005）而NC組和LIPOSOME組間的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。⑥與陰性對照組和LIPOSOME組相比，轉(zhuǎn)染CCTΖ1SIRNA后，在72H內(nèi)沒有明顯促進HCT116的凋亡。結(jié)論結(jié)論①CCTΖ1在結(jié)直腸癌中高表達，并且和結(jié)直腸癌腫塊大小和浸潤深度相關(guān)，有可能成為判斷結(jié)直腸癌患者預(yù)后的一種新型標(biāo)志物和結(jié)直腸癌基因治療的潛在靶點。②下調(diào)CCTΖ1的表達可抑制結(jié)直腸癌細(xì)胞增殖和遷移，但是與細(xì)胞凋亡無關(guān)。表明CCTΖ1可能參與結(jié)直腸癌的發(fā)生發(fā)展過程，但其分子作用機制尚需實驗進一步研究。關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞伴侶素CCTΖ1，結(jié)直腸癌，細(xì)胞增殖細(xì)胞調(diào)亡，細(xì)胞遷移

簡介：中南大學(xué)碩士學(xué)位論文IFNΓ、TNFΑ對口腔粘膜下纖維性變患者頰粘膜成纖維細(xì)胞的生物學(xué)效應(yīng)研究姓名吳穎芳申請學(xué)位級別碩士專業(yè)口腔醫(yī)學(xué)（內(nèi)科）指導(dǎo)教師彭解英200151中南大學(xué)湘雅醫(yī)院碩士學(xué)位論文N卜FB及OSFFB的增殖及膠原合成P005，對濃度為LOON／NL～TOOOU／_L的TNF一Ⅱ刺激OSFFB的增殖及I00～10000U／U1TN卜Q刺激OSFFB膠原合成均有明顯抑翎作用P005。4電鏡下觀察，IFNY處理后的NLLFI及0SFFB的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、游離核糖體較未處理者減少，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)池不擴張，線粒體腫脹，TN卜A處理后則有上述細(xì)胞器增多，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)池擴張，線粒體旺盛。IFNY與TNFA共同作用后，其上述細(xì)胞器較TNFQ單獨作用時減少，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)池擴張減少或不擴張線粒體亦相對減少。一1廠一一，結(jié)論1IFNY抑制NM_FB及OSFFB增殖及膠原合成。2TNFⅡ促進IMFB及OSFFB增殖及膠原合成。3I斛Y抑制刪一FB及OSFFB膠原合成及抑制TNF_N等細(xì)胞因子促膠原合成的作用可能是其抗OSF發(fā)生發(fā)展的重要機理之一。關(guān)鍵詞口腔粘膜下纖維性交成纖維細(xì)胞干擾素一Y腫瘤壞死因子一A