簡介：四川大學博士學位論文磁性附著體靜磁場對人牙齦成纖維細胞和人牙周膜成纖維細胞生物學效應的基礎研究姓名胥春申請學位級別博士專業(yè)口腔臨床醫(yī)學指導教師巢永烈20040420四川大學2001級3A腔醫(yī)學博士專業(yè)學位論文縮略詞表縮略詞英文全稱中文名稱HGFHUMANGINGIVALFIBROBLASTHUMANPERIODONTALLIGAMENTFIBROBLAST記SLA人牙齲成纖維細胞人牙周膜成纖維細胞MTIOD人BPSCAMSFCMPIPCDCDKSMILLITLA345DIMETHYLTHIAZOL2YL25DIPHENYLTETRAZOLIUMBROMIDEDIUMETHYLSULPHOXIDELASERSCANNINGCONFOCALMICROSCOPELENGTHWIDTHRATIOINTEGRATEDOPTICALDENSITYACTINBINDINGPROTEINSCELLADHESIONMOLECULESFLOWCYTOMETRYPROLIFERATIONINDEXPROGRAMMEDCELLDEATHCYCLINDEPENDENTKINASES特斯拉毫特斯拉四甲基偶氮哇鹽二甲基亞楓激光掃描共聚焦顯微鏡長寬比積分熒光強度肌動蛋白相關蛋白細胞粘附分子流式細胞術增殖指數(shù)程序性細胞死亡細胞周期蛋白依賴激酶

簡介：分類號密級UDC學號406521611282南昌大學碩士研究生學位論文沉默沉默ΒCATENIN表達對人胃癌細胞生物學表達對人胃癌細胞生物學行為的影響行為的影響SILENCINGΒCATENININFLUENCETHEBIOLOGICALBEHAVISOFGASTRICCANCERCELLS潘安萍培養(yǎng)單位（院、系）南昌大學第一附屬醫(yī)院指導教師姓名、職稱熊建萍教授申請學位的學科門類醫(yī)學學科專業(yè)名稱腫瘤學論文答辯日期2014年6月6日答辯委員會主席評閱人2014年6月摘要II摘要背景背景胃癌是一種常見疾病，多數(shù)患者被診斷時已屬晚期，錯失手術的機會，導致胃癌患者生存期短，生活質量差。近年來，ΒCATENIN被發(fā)現(xiàn)是一種癌癥相關蛋白，被證明在多種腫瘤細胞中高表達。ΒCATENIN除與癌細胞增殖、凋亡、侵襲轉移相關，還與腫瘤的化療敏感相關。但是目前對于ΒCATENIN與腫瘤之間關系的研究多數(shù)是在腸癌、乳腺、肝癌等中進行，對于胃癌細胞的研究尚少。本研究希望通過構建ΒCATENINRNAI干擾慢病毒感染胃癌AGS、MGC803細胞株，下調胞內ΒCATENIN的表達來研究此蛋白對胃癌細胞生物學行為的影響。目的目的探討通過沉默胃癌AGS、MGC803細胞株細胞中ΒCATENIN蛋白的表達，觀察ΒCATENIN的表達量下調對此兩株胃癌細胞的增殖、凋亡、侵襲力以及5FU敏感性的影響，并初步探討其分子機制，為胃癌的診治提供新思路。方法方法1制作慢病毒載體ΒCATENINRNAI433LVΒCATENINRNAI慢病毒液及ΒCATENINNEGATIVELV空載體慢病毒液，分別轉染胃癌AGS、MGC803細胞株。實驗分組實驗組（感染ΒCATENINRNAI慢病毒的AGSRNAI433、MGC803RNAI433）、陰性對照組（感染空載慢病毒的AGSNEG、MGC803NEG）、空白對照組（未處理的AGS、MGC803）。采用QRTPCR及WESTERNBLOT方法分別從MRNA及蛋白水平檢測各組細胞ΒCATENIN在胞內表達情況；2MTT法分別檢測各組細胞對5氟尿嘧啶（5FU）敏感性的差異；3采用TRANSWELL小室法檢測各組細胞體外侵襲、遷移能力的差異；4流式細胞術檢測各組細胞周期及凋亡的差異；5WESTERNBLOT檢測各組細胞ΒCATENIN下游靶基因編碼蛋白和5FU代謝酶的差異。結果結果1慢病毒成功感染胃癌細胞，得到穩(wěn)定轉染細胞株。QRTPCR及WESTERNBLOT檢測實驗組細胞在MRNA和蛋白水平上較對應陰性對照組均出現(xiàn)顯著下調P＜

簡介：目的NK細胞作為機體固有免疫的重要組成部分是機體抗腫瘤、抗感染的第一道天然防線。其殺傷功能的出現(xiàn)不需要預先刺激或致敏，無MHC組織相容性復合物限制性。NK細胞不僅能夠介導對腫瘤細胞的天然殺傷作用，還能夠調節(jié)特異性和非特異性免疫應答。過繼轉輸活化的或同種異體的NK細胞，已經(jīng)應用于白血病和某些實體腫瘤的治療中。白細胞介素15IL15由多種組織和細胞亞群產(chǎn)生，與IL2在功能上有許多相似之處，可以誘導CD34的細胞分化為NK細胞，并且能夠促進NK細胞的增殖，增強NK細胞的殺傷活性。我們已經(jīng)建立了IL15基因修飾的NK92細胞系，證實IL15的基因修飾能夠增強NK92細胞對多種腫瘤的殺傷能力。與NK92細胞相比，NKL細胞有著不同的殺傷譜，比如，NKL對于人胃癌細胞系SGC7901的殺傷能力強于NK92細胞，因此可以作為NK92的重要補充。NKL細胞系由ROBERTSON等建立，來源于CD3CD16CD56的大顆粒淋巴細胞自血病患者的外周血。NKL依賴于IL2生長，具自然殺傷活性和ADCC效應，其增殖反應也與正常的CD16CD56DIMNK細胞相似。NKL是NK細胞系中與原始NK細胞最為相近的，因此成為過繼免疫治療的又一重要選擇。本文建立了穩(wěn)定轉染HIL15的NKL細胞系，證明IL15基因修飾的NKL細胞具有更強的增殖、抗凋亡和對肝癌細胞的殺傷作用，并初步探討了其分子機制。方法1電轉將IL15基因穩(wěn)定轉染入NKL細胞系。2CTLL2增殖分析測定細胞培養(yǎng)上清中IL15的生物學活性。3酶聯(lián)免疫吸附分析測定細胞培養(yǎng)上清中IL15的濃度。4RTPCR檢測三種NKL細胞中凋亡相關基因和殺傷相關基因的表達水平。5CCK方法用于分析三種NKL細胞在不同濃度IL2和IL15條件下的增殖水平。6流式細胞術檢測三種NKL細胞凋亡、周期以及膜表面NKG2D和NKG2A分子的表達。7MTT方法檢測三種NKL細胞的細胞毒作用。結論NK細胞作為固有免疫的重要組成部分，是抵御病毒感染和腫瘤細胞的第一道防線，由于無需抗原預先作用，就可直接殺傷腫瘤和病毒感染的靶細胞，因此，在腫瘤免疫監(jiān)視和早期抗感染免疫過程中起重要作用。應用NK細胞系成為腫瘤生物治療的重要手段，其中NK92細胞已經(jīng)進入期臨床試驗。為了克服NK細胞系在應用中的某些不足，基因修飾已經(jīng)成為增強NK細胞殺傷活性的主要手段。迄今為止，已有IL2，IL15，SCF，CD20等多種基因用于修飾NK92細胞，取得重要進展。為了獲得臨床應用的NK細胞株，我們成功建立了IL15基因修飾的NKL細胞株，IL15基因修飾的NKL細胞株在低劑量IL2和IL15條件下表現(xiàn)出更強的增殖能力，并且在無血清饑餓狀態(tài)下表現(xiàn)出較強的抗凋亡作用。進一步研究表明，在IL15基因修飾的NKL細胞中，抗凋亡基因BCL2、BCLX1、MCL1表達水平顯著升高，凋亡基因BIM、NOXA、FAS的表達水平則降低。更為重要的是NKLIL15細胞不僅在體外能夠有效殺傷肝癌細胞HEPG2、H7402、PLCPRF5，亦能顯著增強體內對裸鼠人肝癌移植瘤的抑制作用。這種抗腫瘤效應與NKLIL15細胞IFNΓ、FASL和PERFIN基因的表達水平提高相關。因此，人IL15基因修飾的NKL細胞的生物學特征更有利于臨床過繼免疫治療的應用。

簡介：獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學位論文，是本人在導師的指導下，獨立進行研究工作所取得的成果。除文中已注明引用的內容以外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果，也不包含為獲得江蘇大學或其他教育機構的學位或證書而使用過的材料。對本文的研究做出重要貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明。本人完全意識到本聲明的法律結果由本人承擔。學位論文作者簽名石扦／LL≯0年蟈’歸學位論文版權使用授權書江蘇大學、中國科學技術信息研究所、國家圖書館、中國學術期刊光盤版電子雜志社有權保留本人所送交學位論文的復印件和電子文檔，可以采用影印、縮印或其他復制手段保存論文。本人電子文檔的內容和紙質論文的內容相一致，允許論文被查閱和借閱，同時授權中國科學技術信息研究所將本論文編入中國學位論文全文數(shù)據(jù)庫并向社會提供查詢，授權中國學術期刊光盤版電子雜志社將本論文編入中國優(yōu)秀博碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫并向社會提供查詢。論文的公布包括刊登授權江蘇大學研究生院辦理。本學位論文屬于不保密妙／學位論文作者簽名J彳鐘沙心年。加6J白指導教師簽名尖鑰H夢移手

簡介：目的成纖維細胞FBS是參與創(chuàng)面愈合的主要細胞，可合成、分泌膠原蛋白、糖胺多糖等細胞外基質和多種細胞因子。研究表明，在糖尿病難愈性創(chuàng)面中，F(xiàn)BS增殖能力較正常皮膚和糖尿病急性創(chuàng)面有很大削弱。故提高FBS的增殖能力可能是加速創(chuàng)面愈合的重要方法。糖尿病足潰瘍在中醫(yī)學屬脫疽范圍，黃芪具有托毒排膿，生肌止血，促進壞死細胞重新生長的作用。臨床研究證實中藥黃芪可以促進糖尿病足潰瘍創(chuàng)面愈合，但其機制不清楚。本研究利用黃芪多糖APS干預體外培養(yǎng)的糖尿病足潰瘍FBS，觀察黃芪多糖對體外培養(yǎng)的糖尿病足潰瘍FBS數(shù)量、形態(tài)及分泌增殖功能、細胞衰老的影響，從細胞的角度來探討黃芪多糖促進潰瘍創(chuàng)面愈合的機制。方法1糖尿病足病截肢患者10例，均符合1999年WHO糖尿病診斷標準，其中男性6例女性4例，年齡57±82歲，其空腹血糖FBG94±16MMOLL，餐后2小時血糖P2BG142±24MMOLL，糖化血紅蛋白HBA91±10％，糖尿病足潰瘍病程超過4周，排除下肢靜脈性潰瘍。按WAGNER分級法在Ⅲ級6例，Ⅳ級4例。標本取材于患者潰瘍邊緣及截肢最遠端組織。正常對照者10例，取自年齡、性別等與前兩組基本相匹配的非糖尿病外傷及骨科截肢患者的手術切口，無系統(tǒng)性硬化病、腎病等疾病的病例。2取材后用組織塊法培養(yǎng)FBS，經(jīng)免疫組化抗波形蛋白和抗角蛋白染色，證實為FBS。46代細胞用于實驗。3加入不同濃度的黃芪多糖分別為25UGML、10UGML、40UGML、160UGML、640UGML培養(yǎng)以觀察量效關系，其中160UGML分別培養(yǎng)07天以觀察時效關系。4利用MTT比色試驗評價糖尿病足潰瘍FBS的增殖能力。5通過羥脯氨酸測定了解糖尿病足潰瘍FBS的膠原分泌功能。6利用Β半乳糖苷酶染色陽性率評價糖尿病足潰瘍FBS的老化情況。7TRAPPCR測定糖尿病足潰瘍FBS端粒酶活性。結果1FBS的鑒定培養(yǎng)的FBS6小時貼壁，呈多角形、長梭形，免疫組化鑒定結果顯示波形蛋白表達陽性，角蛋白表達陰性。2不同濃度的APS于預48小時后增加或減少FBS的數(shù)量。3不同濃度的黃芪多糖于預48小時后促進或抑制FBS的增殖能力。4不同濃度的黃芪多糖干預48D時后增加或降低FBS的膠原分泌功能。5不同濃度黃芪多糖對FBS衰老情況的影響根據(jù)MTT法檢測成纖維細胞增殖的結果，得出黃芪多糖的最佳作用濃度及時間，由于Β半乳糖苷酶SABGAL染色陽性率隨細胞代齡增加而增加，本實驗儀檢測黃芪多糖160UGML組濃度、第48代成纖維細胞PSAΒGAL酶染色陽性率。對照組、DFUS近端APS160UGML組、DFUS遠端組、正常人組第6天成纖維細胞SAΒGAL染色陽性率分別為65±2％、45±3％、44±2％、5±1％，對照組、DFUS遠端組、DFUS近端APS組成纖維細胞SAΒGAL染色陽性率明顯高于正常人；對照組成纖維細胞SAΒGAL染色陽性率高于DFUS近端APS組；DFUS遠端成纖維細胞FBSSAΒGAL染色陽性率略低于DFUS近端APS組，差異無統(tǒng)計學意義。6糖尿病足潰瘍FBS端粒酶表達陰性結論糖尿病足潰瘍處成纖維細胞增殖能力、膠原合成能力減退，細胞衰老黃芪多糖在10UGML160UGML濃度范圍內能增加體外培養(yǎng)的糖尿病足潰瘍成纖維細胞數(shù)量、促進細胞增殖、增加膠原合成、延緩細胞衰老。

簡介：中南大學博士學位論文氯化鈷缺氧誘導對結腸癌SW480細胞生物學性狀的影響姓名劉祺申請學位級別博士專業(yè)外科學（普通外科）指導教師李永國20050301博士學位論文中文摘要肉結醞癌緇照的生長情況，深入了解竣氧對縫疑辯癯生物學特性的影響。第一郝分缺氧誘導對SW480細驄生長特性的影峨目的；建立缺氧模型并觀察缺氧對SW480細胞增媳能力和化療附受的影響。方法利用氯化鈷COCL2構建缺氧誘導模濺，以MTT試驗觀察不簡程度缺氧條件對SW480細胞存活率，生長瞧線和胖瘸化療耐受的影響。結果1一定程度的缺氧氯化鈷濃度200UMO／1，可默刺激SW480綱脆增整，使辯數(shù)生長期提前；2靛氧誘導辯純療的影響沒有顯著性麓異，但有增加化療耐麓的趨勢。結論缺氧可戳裁激結揚瓣癌纓魏璜疆，薺霹麓瓣瓣瘩綴藏純療其有一定蕊傈護終用。第二懿分缺氧對LTLFLA、SURVIVIN、1TO，1MRNA表達囂影響目的觀察缺氧對腫瘤細胞HIF1ET、SURVIVIN、HO。L基因MRNA表達麴影響。方法剩震RTPCR方法測定不闋濃度氯化鏈COCL2誘導缺氧和不同缺氧時間作用條件卜，SW480細胞陽田1A、SURVIVIN、HOL基因MRNA的表達。結采；1HIFLA、SURVIVIN、HO1基因MRNA表達隨著氯訖鈷濃度靜增加而增強，譬現(xiàn)比較臻強的劑量依賴性；2HIF1A和SURVIVIN基因MRNA表達猩缺氧誘導4H后出現(xiàn)離蜂，HO，1靜表達粼獠誘導辯闖的延長兩逐漸增強；渤HIFLA與SURVIVIN、1401基因MRNA的表達在缺氧誘導量效關系和時效關系中均存在顯著的正褪關性。緒論結合第一部分實驗績采，本實驗露得出以卜I結論1HIFLA可抑制腫瘤細胞凋亡，促進增殖和增加化LL

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簡介：南方醫(yī)科大學博士學位論文肺腺癌細胞中TTF1的表達、突變分析及其轉染對GLC82細胞生物學行為的影響姓名周春輝申請學位級別博士專業(yè)病理學與病理生理學指導教師申洪20080518中文摘要160220區(qū)域有由60個氨基酸組成的具有絕對保守性的同源序列。在正常肺組織中，TTF1表達于成熟的肺泡Ⅱ型上皮細胞和肺導氣部的支氣管上皮細胞的亞段，而I型肺泡上皮細胞始終不表達。TTFL控制著表面蛋白ASPA、表面蛋白BSPB、表面蛋白CSPC和CLARA細胞分泌蛋白CCSP的表達。到目前為止，TTF1是唯一控制4個肺特異性基因的轉錄因子。WILLEMSEN等的研究發(fā)現(xiàn)，一23歲男子因TTF1基因在859860位發(fā)生雜合性插入突變，導致舞蹈癥、智力發(fā)育遲緩、原發(fā)性甲狀腺機能減退以及慢性肺疾病。他們稱此疾病為腦一甲狀腺～肺綜合征。此患者最終死于肺大細胞癌。KANGY等在小鼠模型中發(fā)現(xiàn)，TTF一1表達減少與鼠肺癌的發(fā)生有關，但癌變的具體機制尚不清楚。因此，肺癌發(fā)生是否與TTF1基因異常表達有關受到廣大學者的關注。TTFL在肺癌中的研究表明，肺癌類型不同，TTF1的表達也各異。目前認為，TTF1是肺腺癌和肺小細胞癌的標志物。研究表明，除甲狀腺癌和肺腺癌外，TTF1很少表達于其它部位的原發(fā)腺癌或轉移腺癌。因此TTF一1對于胸腔積液中轉移性肺腺癌的鑒別診斷具有很高的應用價值。但是關于TTF1在胸腔積液轉移性肺腺癌中表達的量變規(guī)律，其基因突變與原發(fā)灶1ITFI基因突變位點及類型是否相同，與肺腺癌的發(fā)生、發(fā)展和轉移是否相關，其能否作為肺癌患者胸水中的腫瘤標志物尚不十分清楚。因此本研究擬通過檢測T1FL蛋白及MRNA在惡性胸腔積液不同組織來源的轉移性腺癌細胞中的表達情況，通過定量測試T1F一1蛋白和MRNA的表達強度，從蛋白及MRNA水平探討TTF1作為胸腔積液中轉移性肺腺癌特異性標志物的臨床應用價值；應用PCRSSCP法與DNA測序相結合分析胸水轉移性肺腺癌細胞TTF1第L、2外顯子基因突變情況，探討TTF一1基因突變在肺腺癌發(fā)生、發(fā)展中的作用；構建綠色熒光蛋白真核細胞表達載體PEGFPTTF一1，通過轉染人肺腺癌細胞系GLC82，觀察外源性TTF1基因表達對GLC一82細胞生物學特性的影響。方法Ⅱ

簡介：華中科技大學碩士學位論文干細胞關鍵轉錄因子OCT4在人膀胱移行細胞癌中的表達及對人膀胱癌EJ細胞生物學的影響姓名萬鋒申請學位級別碩士專業(yè)泌尿外科指導教師朱朝輝20110420華中科技大學碩士學位論文華中科技大學碩士學位論文3的的20倍，是正常膀胱組織的341倍，各組差異有統(tǒng)計學意義P005）；成功轉染OCT4SIRNA的膀胱癌EJ細胞RTPCR及WESTERNBLOT分別顯示OCT4MRNA和蛋白表達在相應的癌細胞中明顯下降；與陰性對照組比較，細胞增殖明顯抑制P005；同時細胞凋亡率增加（5273比117）；RNA干擾組明顯抑制EJ細胞遷移力和侵襲力1534185比6307173。結論結論OCT4的表達與膀胱癌的分級和淋巴結轉移密切相關但與臨床分期無關，OCT4的過高表達可能在膀胱癌的發(fā)生發(fā)展中起重要作用；OCT4SIRNA可以有效地抑制膀胱癌EJ細胞OCT4基因的表達，從而抑制腫瘤細胞增殖，促進細胞凋亡，抑制細胞遷移和侵襲，OCT4SIRNA有效的調控EJ細胞惡性生物學行為?！娟P鍵詞】關鍵詞】膀胱移行細胞癌；RNA干擾；OCT4基因；膀胱癌EJ細胞；

簡介：目的研究銀屑病皮膚間充質干細胞SKINDERIVEDMESENCHYMALSTEMCELLS，SMSCS生物學特性，進一步分析銀屑病SMSCS基因表達譜，了解銀屑病患者皮損微環(huán)境中SMSCS變化，為SMSCS參與銀屑病發(fā)病提供理論依據(jù)。方法應用酶消化法分離培養(yǎng)銀屑病組與正常對照組SMSCS，并傳代、擴增，收集第3代SMSCS及其培養(yǎng)上清液，倒置相差顯微鏡下觀察細胞形態(tài)，流式細胞技術檢測細胞免疫表型，分別用成脂、成骨、成軟骨誘導體系鑒定細胞多系分化能力，細胞計數(shù)法繪制第3代細胞生長增殖曲線，ELISA法檢測細胞培養(yǎng)上清液中EGF、TGFΒ1濃度。應用基因芯片技術對其MRNA表達譜進行差異基因篩選。RTPCR法對銀屑病SMSCS部分差異表達基因進行驗證分析。結果①細胞形態(tài)學特性倒置相差顯微鏡下觀察銀屑病組與正常對照組細胞形態(tài)均存在異質性。②細胞表面標志物測定流式細胞儀檢測第3代培養(yǎng)細胞表面抗原CD29、CD44、CD73、CD90及CD105呈高表達，CD34、CD45及HLADR呈低表達。③細胞多向分化潛能測定第3代培養(yǎng)細胞成脂、成骨、成軟骨誘導培養(yǎng)14D，分別用油紅O、茜素紅S、甲苯胺藍染色鑒定脂肪細胞、骨細胞及軟骨細胞，結果均為陽性。④細胞增殖能力檢測細胞生長增殖曲線顯示銀屑病組第3代細胞增殖速度快于正常對照組。⑤分泌細胞因子（表皮生長因子、轉化生長因子Β1）水平測定ELISA試劑盒檢測到銀屑病組SMSCS分泌EGF水平高于對照組P＜005，分泌TGFΒ1水平低于對照組P＜005。⑥基因譜差異表達分析銀屑病組與正常對照組SMSCS基因表達譜顯著不同，共篩選出1927個差異表達基因1090個基因表達呈增高趨勢，837個基因呈降低趨勢其中銀屑病組UHRF1的MRNA水平呈高表達狀態(tài)（P＜005）。結論①本實驗建立了穩(wěn)定的銀屑病SMSCS體外分離、培養(yǎng)、鑒定方法，銀屑病組與正常對照組SMSCS均存在異質性②銀屑病SMSCS生物學活性存在異常③銀屑病SMSCS差異表達基因分析顯示UHRF1的MRNA水平呈高表達。表達上調的UHRF1可能與銀屑病SMSCS生物學特性異常有關。

簡介：SOOCHOWUNIVERSITY碩士學位論文論文題目中強度靜磁場對腫瘤細胞生長的生物學效應研究研究生姓名張磊指導教師姓名車軼專業(yè)名稱發(fā)育生物學研究方向胚胎發(fā)育與功能調控論文提交日期2013年4月中強度靜磁場對腫瘤細胞生長的生物學效應研究中強度靜磁場對腫瘤細胞生長的生物學效應研究中文摘要中文摘要I中文摘要目的探討中強度靜磁場對鼠黑色素瘤細胞B16和人神經(jīng)膠質瘤細胞U251生長的生物學效應，為磁場在腫瘤疾病的治療中的應用提供理論依據(jù)。方法本實驗分三個部分研究中強度靜磁場對B16和U251生長的影響。1采用MTT法測定經(jīng)50200MT靜磁場暴露48H和72H后的細胞存活率，檢測靜磁場暴露對細胞活力的影響。2利用流式細胞術測定靜磁場暴露48H內的細胞周期分布情況，探討靜磁場影響腫瘤細胞生長的機制。3利用生物化學方法測定靜磁場暴露48H內與細胞氧化防御系統(tǒng)相關的蛋白酶活性及抗氧化劑水平，檢測靜磁場對腫瘤細胞代謝過程的影響，探討其與靜磁場影響腫瘤細胞生長的機制的關聯(lián)。結果1對B16和U251進行短時間50200MT靜磁場暴露，可以抑制細胞生長，但隨著暴露時間延長，又轉為促進作用。2100MT和200MT靜磁場暴露對B16和U251的細胞周期分布沒有影響。3100MT和200MT靜磁場暴露48H后，B16和U251的GST活性和GSHGSSG水平表現(xiàn)為先上升后下降；SOD活性和TAOC能力先下降后上升；CAT活性基本沒有受到影響。結論中強度靜磁場可以抑制B16和U251的生長，誘導腫瘤細胞產(chǎn)生氧化應激。關鍵詞中強度靜磁場；腫瘤細胞；細胞周期；生長；氧化應激作者張磊指導教師車軼

簡介：研究背景腎細胞癌是泌尿系統(tǒng)常見惡性腫瘤早期腎癌以外科手術切除為主而晚期轉移腎癌因對放、化療不敏感目前以靶向治療及輔助治療為主。然而多項多中心III期臨床實驗研究發(fā)現(xiàn)目前的腎癌靶向藥物針對晚期腎癌患者還存在完全緩解率低的問題臨床療效尚不能令人滿意尋找新的腎癌藥物靶點成為當前迫切需解決的問題。果蠅ZESTE基因增強子的人類同源物2ENHANCEROFZESTEHOMOLOG2EZH2是一種轉錄抑制因子可明顯抑制抑癌基因或腫瘤轉移相關基因的表達最新研究表明EZH2參與了腎癌的發(fā)生、發(fā)展但其具體作用機制仍不明。RUNX3是RUNT家族的核心成員RUNX3基因是TGFΒ信號轉導通路下游的一個轉錄因子參與TGFΒ介導的生長抑制作用研究表明RUNX3的缺失或失活與乳腺癌、前列腺癌、結腸癌、胰腺癌和胃癌等腫瘤的發(fā)生相關通過CHIP實驗證實在這些腫瘤中EZH2可結合于RUNX3的啟動子區(qū)從而抑制其表達RUNX3是EZH2的直接調控靶分子。然而其在腎癌中是否有相同作用還有待進一步明確。目的研究EZH2與腎癌臨床病理間的關系通過體外細胞學實驗明確EZH2對腎癌細胞生物學作用的影響同時通過尋找EZH2下游的靶基因以明確其具體的調控機制。方法通過免疫組化學法、實時定量PCR法和免疫印跡法分別檢測臨床腎癌標本中EZH2在蛋白水平和MRNA水平的表達情況及與腎癌臨床病理間的關系。運用RNA干擾技術沉默EZH2后先以QRTPCR和WESTERNBLOT法在MRNA水平和蛋白水平驗證EZH2下調情況再通過MTT實驗、流式細胞術檢測EZH2下調后對腎癌細胞增殖、凋亡的影響。并通過QRTPCR法檢測EZH2下游分子RUNX3的表達情況。結果EZH2和RUNX3蛋白在腎癌組織中的陽性表達率分別為679％和375在癌旁正常腎組織的陽性表達率分別為286和673EZH2和RUNX3在腎癌組織和癌旁正常組織中的表達差異均有統(tǒng)計學意義P005。SPEARMAN相關分析顯示二者在腎癌中的表達呈明顯的負相關關系。EZH2表達下調后腎癌細胞的增殖明顯受抑制凋亡細胞明顯增多差異具有統(tǒng)計學意義同時下游分子RUNX3的表達與EZH2呈負相關。結論EZH2通過調控下游分子RUNX3的表達參與腎癌的發(fā)生、發(fā)展EZH2可能成為新的腎癌治療靶點并為新的靶向藥物研究提供了重要的理論依據(jù)。

簡介：目的觀察TOLL樣受體4在乙肝病毒相關肝癌細胞系中的表達及對其生物學活性的影響。方法1、WESTERNBLOT檢測HEP3B、HEPG2215、HEPG2、SMMC7721及HUH7五種肝癌細胞中TLR4蛋白表達情況，選擇TLR4表達高的HBV陽性肝癌細胞作為研究對象。2、構建4個MIRTLR4質粒和一個陰性對照質粒，選擇干擾效果明顯的質粒轉染TLR4表達高的HBV陽性肝癌細胞。實驗分為正常對照組，陰性對照組，干擾質粒3組及干擾質粒4組。通過MTT比色法、克隆平板形成實驗、流式細胞術分別檢測干擾TLR4表達對肝癌細胞增殖、克隆形成、周期及凋亡的影響。結果1、TLR4基因在五種肝癌細胞株中均有表達，在HEP3B細胞中表達最高，其次是SMMC7721、HEPG2215和HEPG2細胞，而在HUH7細胞中表達最低。2、與正常組和陰性對照組相比，干擾TLR4表達后，HEP3B細胞的增殖能力明顯受到抑制P＜005，克隆形成率顯著下降P＜005，S、G2期細胞比列明顯增加P＜005、G1期細胞比例減少P＜005，并可促進細胞凋亡P＜005。結論1、乙肝病毒相關肝癌細胞中TLR4表達上調。2、在體外干擾TLR4表達后，HEP3B細胞系增殖及周期受影響，具體表現(xiàn)為MTT示生長、增殖受限，克隆率下降，凋亡增加，周期阻滯于G2M期。

簡介：中國協(xié)和醫(yī)科大學博士學位論文S100P在人結直腸癌中表達的臨床意義及其對結直腸癌細胞生物學行為的影響姓名張月寧申請學位級別博士專業(yè)內科學消化指導教師魯重美陳原稼20060601中國協(xié)和醫(yī)科人學中國醫(yī)學科學院博士研究生學位論文RAGERNASESDSTEMEDTHSWBXGALRECEPTORFORADVANCEDGLYCATIONEND晚期糖基化終產(chǎn)物受體PRODUCTSRIBONUCLEASESODIUMDODECYLSULFATENNN2NTETRAMETHYLETHYLENEDIAMINETRISHYDROXYMETHYLAMINOMETHANEWESTERNBLOWING5BROMO4一CHLORO3INDOLYLD_DGALACTOSIDE2核糖核酸酶十二烷基磺酸鈉N，N，N，NL一四甲基乙二胺三羥甲基氨基甲烷免疫印跡5溴4氯3吲哚一13D一半乳糖苜

簡介：中樞神經(jīng)系統(tǒng)CNS是由神經(jīng)元和膠質細胞組成。近年來CNS中發(fā)現(xiàn)一類新的膠質細胞類型，依據(jù)其表達NG2硫酸軟骨素多聚糖蛋白的特性，命名為少突膠質細胞前體細胞OPCS。一般認為OPC屬于少突膠質細胞系，但是不表達成熟少突膠質細胞OL的蛋白標記。體外培養(yǎng)條件下證實OPCS也能分化為神經(jīng)元和星形膠質細胞AST，因而認為這類細胞可能是一種多潛能的干細胞。在神經(jīng)元軸突髓鞘化形成前，OPCS在CNS廣泛遷移。盡管OPCS可以分化成為成髓鞘的OL，但是在成熟CNS仍有大量未分化的OPCS保持這種不成熟的狀態(tài)。這需要重新認識其細胞性質、與CNS其它細胞的關系、以及在前體細胞之外的功能。許多實驗證實OPCS在是一種反應性膠質細胞，可能在維持神經(jīng)功能和損傷修復中有作用，從而認為，OPCS可能是OL、AST之外大膠質細胞，但是尚缺乏形態(tài)學和細胞學證據(jù)。OPCS可以與谷氨酸能和GABA能神經(jīng)元形成直接的突觸聯(lián)系，可以接受突觸前神經(jīng)元信號。和神經(jīng)元之間的突觸結構類似，神經(jīng)元OPCS之間的突觸也具有雙脈沖易化現(xiàn)象LTP現(xiàn)象。但是仍不清楚突觸后OPCS不能進行信息持續(xù)傳遞的原因。作為少突膠質系的OPCS，在缺氧缺血性腦損傷HIBD中細胞的變化以及在腦損傷的反應也不清楚。因此，本文首先應用免疫組化技術研究NG2標記的OPCS在正常成年CNS的定位和表達模式。然后觀察圍生期OPCS的細胞生物學特點及HIBD后的變化。最后觀察生后不同階段，OPCS形態(tài)學和電生理學的特點。主要得到以下結果1OPCS廣泛分布于CNS各腦區(qū)。海馬、白質和灰質細胞形態(tài)有差異。在灰質OPCS主要分布于非神經(jīng)元層，細胞呈星形，突起向四周發(fā)散，突起長度多在1040ΜM。與此對應的是，白質OPCS胞體狹長，并行的突起向胞體兩極發(fā)出，與神經(jīng)元軸突走向一致。突起長度多在2050ΜM，比灰質細胞稍長。細胞密度在部分腦區(qū)有集中分布，但是灰質與白質無顯著差異。2OPCS表現(xiàn)與神經(jīng)元和AST不同的電生理特性。海馬CA1區(qū)輻射層的OPCS有小的內向NA電流，大的外向K電流和延遲整流K電流。OPCS表現(xiàn)和神經(jīng)元類似的電壓依賴性NA電流，但是不能在去極化電流刺激下產(chǎn)生動作電位。OPCS具有比AST更高的輸入阻抗RIN，但是在靜息水平對K仍有較大的通透性。在電流鉗模式下，OPCS表現(xiàn)有非線性膜電位反應。而AST則僅有被動膜電位反應。在白質和海馬OPCS的靜息電位、膜阻抗和膜電容也不一致。3圍生期缺氧缺血2H，海馬OPCS顯示更活躍的細胞膜去極化反應。細胞膜特征參數(shù)也有顯著變化，包括膜電容和膜阻抗增加，而靜息電位降低至超極化的水平。瞬時外向鉀電流和內向整流鉀電流幅度增加，而延遲整流鉀電流減少。在不同的刺激模式下，OPCS表現(xiàn)的電流模式?jīng)]有明顯改變，但是電壓依賴性離子通道動力學特性有顯著改變，表現(xiàn)在NA電流、瞬時外向K電流和尾電流激活加快，幅度增加。應用BOLTZMANN擬合各電壓依賴離子通道的半激活電壓和激活斜率因子，均表明HIBD后OPCS興奮性增強。NAK電導率的變化也是如此。然而AST和神經(jīng)元則不表現(xiàn)如此顯著變化。4OPCS持續(xù)表達于CNS生后不同發(fā)育時期。在生后7D海馬和白質的OPCS即可以發(fā)出許多分支的突起，而且細胞數(shù)量在各生后時期最高。蛋白表達水平也是如此。由新生發(fā)育至成年，OPCS突起逐漸增加數(shù)量、豐富、分支復雜、長度增加。電生理特性也顯示隨發(fā)育而呈現(xiàn)瞬時外向K電流和延遲整流K電流均有增加，但是NA隨發(fā)育成熟增加得更明顯，因此NAK電導率也隨著發(fā)育成熟而增加。發(fā)育至成年，雖然去極化反應有所增加，但是NAK電導率遠小于神經(jīng)元，因而OPCS仍然不能產(chǎn)生細胞膜動作電位反應，屬于非興奮細胞?？傊?，本研究從多個方面支持認為OPCS可以作為CNS另一類大膠質細胞1生后發(fā)育中突起增長、分支豐富顯示形態(tài)學的復雜性；2膜電容和NAK電導比率隨發(fā)育成熟而增加；3獨特的細胞生物學特點和在HIBD中的早發(fā)性反應；4與神經(jīng)元和AST不同的形態(tài)學和電生理學特征。