簡介：點(diǎn)擊查看更多人破骨細(xì)胞形成抑制因子-骨保護(hù)素基因克隆、重組表達(dá)和初步的生物學(xué)活性研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：第四軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文HPV16E6/E7對人角質(zhì)形成細(xì)胞的生物學(xué)特性及其生長調(diào)控因子的影響姓名馬翠玲申請學(xué)位級別博士專業(yè)皮膚病與性病學(xué)指導(dǎo)教師劉玉峰200051第四軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文HPVL6E6／E7基因?qū)θ私琴|(zhì)形成細(xì)胞的生物學(xué)特性及其生長調(diào)控因子的影響摘要隊乳頭瘤病毒HPV是小DNA病毒，主要感染人的上皮細(xì)胞，可誘導(dǎo)皮膚粘膜的多種增生性損傷，目前至少鑒定出有70種以上HPV亞型，特定的HPV亞型易感染特定的解剖部位。約有35型HPV與生殖道感染有關(guān)且可通過性傳播。多數(shù)HPV感染的結(jié)果是慢性的良性增生，少數(shù)類型與生殖器惡性腫瘤有關(guān)，其中HPVL6型是與宮頸上皮內(nèi)腫瘤及鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)的最常見類型。HPVL6在體外可以引起小鼠成纖維細(xì)胞系的惡性轉(zhuǎn)化及人角質(zhì)形成細(xì)胞的永生化，但永生化細(xì)胞并無裸鼠致瘤性。HPVE6／E7基因在病毒轉(zhuǎn)化過程中起重要作用，E6、E7可能通過分別與P53和PRB結(jié)合，改變其腫瘤抑制作用誘導(dǎo)細(xì)胞永生化，但是其它一些主要的細(xì)胞生長調(diào)節(jié)基因也是E6、E7作用的目標(biāo)，HPVE6／E7引起細(xì)胞永生化的機(jī)理仍然不清楚。有報道永生化細(xì)胞的細(xì)胞周期蛋白表達(dá)異常，但是正常細(xì)胞向永生化或惡性轉(zhuǎn)化過程中，尤其是病毒感染早期細(xì)胞生長調(diào)節(jié)改變的研究較少。HPV體外轉(zhuǎn)染細(xì)胞為研究病毒和細(xì)胞基因之間的相互作用機(jī)理以及細(xì)胞的生長調(diào)節(jié)異常與癌變的關(guān)系方面提供了一個理想模型。／為了探討HPVL6E6／E7基因?qū)θ私琴|(zhì)形成細(xì)胞生長及其調(diào)控因子的影響，我們從“HPVL6E6／E7轉(zhuǎn)染人角質(zhì)形成細(xì)胞”、“轉(zhuǎn)染細(xì)胞的生物學(xué)特征觀察”和“HPVL6E6／E7對人角質(zhì)形成細(xì)胞生長及其調(diào)控因子的影響”等方面進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)研究。倍果顯示、1．人角質(zhì)形成細(xì)胞感染表達(dá)HPVL6E6／E7重組逆轉(zhuǎn)錄病毒后，形成G418抗性克隆，通過傳代培養(yǎng)獲得多個能長期培養(yǎng)的角質(zhì)形成細(xì)胞，其中來自三個轉(zhuǎn)化克隆的細(xì)胞體外培養(yǎng)20代以上；2．HPVL6E6／E7轉(zhuǎn)染的人角質(zhì)形成細(xì)胞表達(dá)角蛋白、細(xì)胞間形成橋粒結(jié)構(gòu)，證實(shí)其來源于表皮角質(zhì)形成細(xì)胞。經(jīng)細(xì)胞基因組SOUTHERN印跡分析證實(shí)E6／E7基因已整合至轉(zhuǎn)化的人角質(zhì)形成細(xì)胞中，核酸原位雜交、WESTERN印跡實(shí)驗(yàn)和HPVL6E6／E7抗原間．2．

簡介：我們對人胎胰NIP的生物學(xué)特性做了深入分析在前人工作的基礎(chǔ)上對NIP的培養(yǎng)和體外誘導(dǎo)條件進(jìn)行了摸索和改進(jìn)并對由NIP分化產(chǎn)生的類Β細(xì)胞的生理功能及其對糖尿病模型動物的治療效果進(jìn)行了評價我們首次發(fā)現(xiàn)NIP表達(dá)ABCG2明確了NIP具備干祖細(xì)胞特性首次觀察了NIP的體內(nèi)增殖和分化行為并發(fā)現(xiàn)NESTIN在胃腸腺等其它內(nèi)分泌前體細(xì)胞的表達(dá)和分布并對NESTIN與DNES譜系發(fā)生的可能關(guān)系提出了初步設(shè)想該研究是對成體干細(xì)胞理論和哺乳動物胰腺發(fā)生相關(guān)研究的有益補(bǔ)充為1型糖尿病的細(xì)胞替代治療提供了理論和實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)有助于進(jìn)一步理解中間絲蛋白與細(xì)胞狀態(tài)的密切關(guān)系并對深入探討DNES內(nèi)分泌細(xì)胞的譜系發(fā)生具有一定的參考價值

簡介：臍血已被證明是重要的造血干祖細(xì)胞來源深入研究臍血生物學(xué)特性、體外調(diào)控及機(jī)制對拓寬臍血造血干細(xì)胞移植的臨床應(yīng)用范圍有極其重要的意義隨著新的細(xì)胞分化抗原不斷問世單克隆抗體技術(shù)和分選技術(shù)的不斷進(jìn)步使尋找更好的造血干細(xì)胞表面標(biāo)志成為可能該課題從不同的側(cè)面對以上內(nèi)容進(jìn)行了初步研究第一部分臍血CD34細(xì)胞中端粒酶活性及其亞單位的表達(dá)和意義第二部分FLT3和CKIT在臍血CD34細(xì)胞中的表達(dá)及意義第三部分臍血CD34造血干祖細(xì)胞體外擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)研究第四部分SCF、FL和TPO聯(lián)合抗凋亡機(jī)制研究第五部分臍血AC133造血細(xì)胞功能特性初步探討

簡介：江蘇大學(xué)碩士學(xué)位論文嗅黏膜神經(jīng)干細(xì)胞及嗅鞘細(xì)胞生物學(xué)特性的體外研究姓名王超申請學(xué)位級別碩士專業(yè)內(nèi)科學(xué)指導(dǎo)教師崔國興20100607江蘇大學(xué)碩士學(xué)位論文神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)基，貼壁細(xì)胞中出現(xiàn)大量的圓球形細(xì)胞，該細(xì)胞有聚集生長的特點(diǎn)。大約培養(yǎng)7天后出現(xiàn)半貼壁的神經(jīng)球，呈鳥巢狀。免疫熒光染色發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞中存在較多的NESTIN和CDL33染色陽性的圓形細(xì)胞，NESTIN主要分布于該細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)，CDL33主要分布于細(xì)胞膜，半貼壁的神經(jīng)球也陽性表達(dá)NESTIN和CDL33。2以2％瓊脂糖懸浮培養(yǎng)的神經(jīng)干細(xì)胞以神經(jīng)球的方式旺盛增殖，傳代后的神經(jīng)球形態(tài)規(guī)則，大小較均勻，界限明顯。免疫熒光染色和免疫印跡均證明懸浮培養(yǎng)的第4代神經(jīng)球經(jīng)6小時快速貼壁后，仍然陽性表達(dá)NESTIN和CDL33。3使用含細(xì)胞因子的培養(yǎng)液作用貼壁的神經(jīng)干細(xì)胞24小時后，部分細(xì)胞向四周發(fā)出細(xì)長的突起，突起之間相互交織成網(wǎng)。免疫熒光染色發(fā)現(xiàn)，這些多突起細(xì)胞的胞體和細(xì)長突起均含神經(jīng)絲和酪氨酸羥化酶，免疫印跡也證明了這一點(diǎn)。4．體外擴(kuò)增經(jīng)過三次差速貼壁純化的嗅鞘細(xì)胞，可得到大量梭形雙極細(xì)胞，細(xì)胞排列規(guī)則，形態(tài)一致，呈魚群樣。免疫熒光染色顯示，第L代和第10代的嗅黏膜嗅鞘細(xì)胞均陽性表達(dá)GFAP、S100和P75NTR，且兩代細(xì)胞間無差異。5．第L代嗅黏膜嗅鞘細(xì)胞與第LO代嗅鞘細(xì)胞均能表達(dá)各種神經(jīng)營養(yǎng)素、神經(jīng)肽Y和血管內(nèi)皮生長因子，且各因子第1代的表達(dá)水平均高于第LO代。研究結(jié)論1．通過大鼠嗅黏膜神經(jīng)干細(xì)胞的體外分離與篩選實(shí)驗(yàn)，我們從嗅黏膜中獲得了陽性表達(dá)神經(jīng)干細(xì)胞分子標(biāo)志的半貼壁神經(jīng)球。這

簡介：目的骨形成蛋白具有誘導(dǎo)未分化間充質(zhì)細(xì)胞向成骨細(xì)胞、成軟骨細(xì)胞分化促進(jìn)新骨形成的作用隨著研究的深入發(fā)現(xiàn)骨形成蛋白家族不僅具有誘導(dǎo)成骨功能還具有調(diào)控胚胎發(fā)生發(fā)育、營養(yǎng)神經(jīng)及調(diào)控某些腫瘤的發(fā)生與生長的作用由于其具有廣泛的生物學(xué)活性特別是在骨損傷治療等方面所顯示的良好應(yīng)用前景人們將關(guān)注點(diǎn)集中在利用骨形成蛋白進(jìn)行基因治療的研究中初步研究結(jié)果已顯示出了誘人前景本研究利用腺病毒感染種類廣泛不整合宿主細(xì)胞基因、無潛在的致突變性且較易獲得高滴度病毒、轉(zhuǎn)染效率高等特點(diǎn)以復(fù)制缺陷型腺病毒為載體構(gòu)建了含人骨形成蛋白2基因HBMP2的重組腺病毒表達(dá)載體并轉(zhuǎn)染人胚肺成纖維細(xì)胞觀察成纖維細(xì)胞被重組腺病毒表達(dá)載體轉(zhuǎn)染后在成骨活性方面的影響為后續(xù)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究奠定基礎(chǔ)結(jié)論采用體外連接技術(shù)成功構(gòu)建了含HBMP2基因的重組腺病毒表達(dá)載體且體外連接技術(shù)較傳統(tǒng)的同源重組方法簡便并避免了在同源重組過程中產(chǎn)生增殖性腺病毒的可能同時體外實(shí)驗(yàn)見人胚肺成纖維細(xì)胞在轉(zhuǎn)染重組腺病毒后細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變、恢復(fù)了功能活動WESTERNBLOT、堿性磷酸酶染色及體外礦化均為陽性體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)在轉(zhuǎn)染含HBMP2基因的重組腺病毒表達(dá)載體后人胚肺成纖維細(xì)胞向成骨細(xì)胞表型轉(zhuǎn)變具有了骨形成的能力本實(shí)驗(yàn)的成功完成為后續(xù)HBMP2基因治療的應(yīng)用研究奠定了堅實(shí)的基礎(chǔ)

簡介：第二軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文來源于人樹突狀細(xì)胞的新型癌基因樣小G蛋白RABJ的生物學(xué)功能研究姓名陳濤涌申請學(xué)位級別博士專業(yè)免疫學(xué)指導(dǎo)教師曹雪濤20040501第二軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文新型癌基因樣小G蛋白RABJCDKNPCNEEGFPDGFVEGFEGFRPDGFRFCSTNFQPMAPSDAGSCFSV40U‘RTKCKIIDNAPKGFPRFPLPTGPMSFGMCSFLL一4SGPSESLSCYCLINDEPENDENTKINASENUCLEARPORECOMPLEXNUCLEARENVELOPEEPIDERMALGROWTHFACTORPLATELETDERIVEDGROWTHFACTORVASCULARENDOTHELIALGROWTHFACTOREGFRECEPTORPDGFRECEPTORFETALCALFSERUMTUMORNECROSISFACTORAPHORBOLMYRISTATEACETATEPHOSPHATIDYLSERINEDIACYLGLYCEROLSTEMCELJFACTORSIMIANVIRUS40LARGETANTIGENRECEPTORTYROSINEKINASECASIENKINASEIIDNADEPENDENTPROTEINKINASEGREENFLUORESCENCEPROTEINREDFLUORESCENCEPROTEINISOPROPYLBETADTHIOGAIACLOPYRANOSJDEPHENYLMETHYLSULFONYLFLUORIDEGRANULOCYTEMONOCYTECOLONYSTIMULATINGFACTORINTERLEUKIN4SPERMATOGONIAPRIMARYSPERMATOCYTEEARLYSPERMATIDSLATESPERMATIDS細(xì)胞周期蛋白依賴激酶核孔復(fù)合體核膜表皮生長因子血小板源生長因子血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子表皮生長因子受體血小板源生長因子受體胎牛血清腫瘤壞死因子A佛波酯磷脂酰絲氨酸二脂酰甘油干細(xì)胞因子猿猴病毒40大T抗原受體酪氨酸激酶酪蛋白激酶DNA依賴的蛋白激酶綠色熒光蛋白紅色熒光蛋白異丙基硫代一BD半乳糖苷苯甲基磺酰氟粒細(xì)胞單核細(xì)胞集落刺激因子白細(xì)胞介素4精原細(xì)胞初級精母細(xì)胞早期精子細(xì)胞晚期精子細(xì)胞2

簡介：河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)及知識產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學(xué)位論文在導(dǎo)師或指導(dǎo)小組的指導(dǎo)下，由本人獨(dú)立完成。本學(xué)位論文研究所獲的研究成果，其知識產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。河北醫(yī)科大學(xué)有權(quán)對本學(xué)位論文進(jìn)行交流、公開和使用。凡發(fā)表與學(xué)位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文，第一署名單位為河北醫(yī)科大學(xué)，實(shí)驗(yàn)材料、原始數(shù)據(jù)、申報的專利等知識產(chǎn)權(quán)均歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。否則，承擔(dān)相應(yīng)的法律責(zé)任。研究生簽字膏禾導(dǎo)師簽章圳簪級差易河北醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)聲明本論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特別加以標(biāo)注等內(nèi)容外，文中不包括其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果，指導(dǎo)教師對此進(jìn)行了審定。本論文由本人獨(dú)立撰寫，文責(zé)自負(fù)。研究生簽字衷泰煢參蠊加日ILILLLLILLIILL11111FLIILY1901620目錄中文摘要1英文摘要4研究論文瘦素、BDNF及其受體TRKB在人結(jié)直腸癌細(xì)胞中的表達(dá)與生物學(xué)意義前言8月IJ舌8材料與方法9結(jié)果14附圖16附表17討論23結(jié)論27參考文獻(xiàn)27綜述瘦素、BDNF腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子與人結(jié)直腸癌關(guān)系的研究進(jìn)展31致謝J42個人簡歷43

簡介：為尋找人類皮膚研究合適的動物模型，科學(xué)家們研究了多種動物的皮膚，發(fā)現(xiàn)豬的皮膚在解剖、生理等方面與人類皮膚最為接近。但由于普通商品豬遺傳背景不清晰，個體差異大，生長速度快，不適于用作實(shí)驗(yàn)動物。巴馬香豬是我國獨(dú)特的小型豬種之一，體型小，操作容易，遺傳穩(wěn)定，個體差異小，是一種理想的實(shí)驗(yàn)動物。但其缺乏與人的比較醫(yī)學(xué)生物學(xué)系統(tǒng)基礎(chǔ)資料，制約了巴馬香豬在醫(yī)學(xué)生物學(xué)中的應(yīng)用。無細(xì)胞真皮作為一種有效的臨床用生物材料，具有重要的臨床應(yīng)用價值。但國內(nèi)目前僅有人無細(xì)胞真皮產(chǎn)品面世，且價格昂貴。隨著國家人體器官移植技術(shù)臨床應(yīng)用管理暫行規(guī)定的正式實(shí)施，人組織器官的應(yīng)用將面臨來源、倫理、法律等一系列問題，而且還具有傳染HIV、HBV等血液傳播性疾病的危險。因此，以標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)用小型豬無細(xì)胞真皮替代人無細(xì)胞真皮具有良好的應(yīng)用前景。為了推廣巴馬香豬在醫(yī)學(xué)生物學(xué)中的應(yīng)用，評估巴馬香豬作為人皮膚模型動物在創(chuàng)傷修復(fù)領(lǐng)域的應(yīng)用價值，同時為了開發(fā)巴馬香豬皮膚來源的異種移植生物材料，本課題從比較醫(yī)學(xué)的角度，對巴馬香豬與人皮膚對比進(jìn)行了組織學(xué)結(jié)構(gòu)、免疫組化反應(yīng)特點(diǎn)、超微結(jié)構(gòu)、皮膚膠原蛋白理化特性等的系統(tǒng)研究；同時，制備了巴馬香豬無細(xì)胞真皮，與人無細(xì)胞真皮對比進(jìn)行了安全性有效性評價，以期利用巴馬香豬無細(xì)胞真皮替代人無細(xì)胞真皮而應(yīng)用于創(chuàng)傷修復(fù)領(lǐng)域，為其產(chǎn)品研發(fā)形成基礎(chǔ)，同時也進(jìn)一步比較巴馬香豬皮膚與人皮膚在應(yīng)用特性方面的相似性。全文主要結(jié)果及結(jié)論如下1本課題對巴馬香豬皮膚的組織學(xué)結(jié)構(gòu)、免疫組化反應(yīng)特點(diǎn)、超微結(jié)構(gòu)、膠原蛋白理化特性等進(jìn)行了系統(tǒng)研究，發(fā)現(xiàn)巴馬香豬的皮膚結(jié)構(gòu)除汗腺結(jié)構(gòu)與人不同外，其它結(jié)構(gòu)及其特點(diǎn)與人極為相似。其4月齡小型豬皮膚發(fā)育程度最接近于成人皮膚，各層厚度及結(jié)構(gòu)都與成人皮膚相似。上述研究結(jié)果表明，巴馬香豬可作為研究人類皮膚的模型動物。巴馬香豬在皮膚厚度、分層、真表皮的高低起伏的連接方式、發(fā)達(dá)的淺表血管系統(tǒng)以及皮膚的超微結(jié)構(gòu)都與人類皮膚相似；皮膚中所含細(xì)胞種類和成纖維細(xì)胞、血管內(nèi)皮朗格罕細(xì)胞、肥大細(xì)胞的密度也與人類皮膚相近；具有與人類Ⅰ型膠原、Ⅲ型膠原、層本課題受國家十五重點(diǎn)科技攻關(guān)項(xiàng)目資助，項(xiàng)目編號2004BA717B03粘連蛋白、纖維連接蛋白、中間絲相關(guān)蛋白相似的抗原決定簇，可與抗人血清發(fā)生交叉反應(yīng)，且分布特點(diǎn)與人類皮膚相似；真皮中主要的胞外基質(zhì)構(gòu)成成分Ⅰ型膠原的結(jié)構(gòu)及理化特性也幾乎與人類Ⅰ型膠原相同。但巴馬香豬皮膚中的汗腺為頂泌汗腺，而人類皮膚中主要為外泌汗腺；另外，巴馬香豬皮膚中的色素細(xì)胞在身體的不同部位差異很大；巴馬香豬皮膚缺乏與抗人CD34、ICAM1、S100等抗體對應(yīng)的抗原決定簇。2優(yōu)化了無細(xì)胞真皮的制備方法，制備了巴馬香豬無細(xì)胞真皮，對其與人無細(xì)胞真皮對比進(jìn)行了生物學(xué)特性與安全性有效性評價研究。對巴馬香豬與人無細(xì)胞真皮對比進(jìn)行了胞外基質(zhì)的種類和分布、微生物學(xué)檢測、致敏實(shí)驗(yàn)、淋巴細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)、組織學(xué)相容性實(shí)驗(yàn)、單純無細(xì)胞真皮移植實(shí)驗(yàn)以及結(jié)合大鼠自體皮的復(fù)合移植實(shí)驗(yàn)等實(shí)驗(yàn)研究。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，巴馬香豬無細(xì)胞真皮與人無細(xì)胞真皮的形態(tài)結(jié)構(gòu)、抗原性、生物相容性、血管化速度及動物實(shí)驗(yàn)效果無顯著差異，顯示巴馬香豬無細(xì)胞真皮可望替代人無細(xì)胞真皮應(yīng)用于創(chuàng)傷修復(fù)領(lǐng)域。經(jīng)025％胰酶4℃處理過夜，05％TRITONX100室溫振蕩處理12H制備而成的巴馬香豬無細(xì)胞真皮，具有如下特點(diǎn)成功去除了引起強(qiáng)烈免疫排斥反應(yīng)的表皮和細(xì)胞成分，完整保留了基底膜，與抗原性有關(guān)的胞外基質(zhì)結(jié)蛋白和波形蛋白也得到有效的去除；保留了Ⅰ型膠原、Ⅲ型膠原、Ⅳ型膠原、纖維連接蛋白等與細(xì)胞粘附、生長相關(guān)的胞外基質(zhì)；具有與人無細(xì)胞真皮相似的無菌、無致敏反應(yīng)、生物相容性好、抗原性低、血管化速度快等優(yōu)良的生物學(xué)特性；將其與大鼠自體刃厚皮復(fù)合植入大鼠創(chuàng)面后，巴馬香豬無細(xì)胞真皮與人無細(xì)胞真皮組的移植皮片存活率、創(chuàng)面收縮率相似，且與大鼠同種無細(xì)胞真皮組的移植皮片存活率和創(chuàng)面收縮率無明顯差異，未引發(fā)明顯的免疫排斥反應(yīng)。表明巴馬香豬無細(xì)胞真皮可望替代人無細(xì)胞真皮應(yīng)用于創(chuàng)傷修復(fù)領(lǐng)域。

簡介：中南大學(xué)碩士學(xué)位論文LRRC4IGC2結(jié)構(gòu)域?qū)δX膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞生物學(xué)功能和基因表達(dá)譜影響的初步研究姓名甘凱申請學(xué)位級別碩士專業(yè)病理與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師李桂源20050601侵襲能力的影響，發(fā)現(xiàn)LRRC4野生型和LRRC4一IGC2缺失突變體均能明顯降低癌細(xì)胞的侵襲能力，說明IGC2結(jié)構(gòu)域不是該基因影響癌細(xì)胞侵襲能力的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。通過與包含268個細(xì)胞因子及其受體基因的EDNA微陣列進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)了一些LRRC4及LRRC4．AIGC2基因過表達(dá)后上調(diào)和下調(diào)的細(xì)胞因子及其受體基因，并選擇部分重要基因進(jìn)行RTPCR驗(yàn)證。這些基因很多與神經(jīng)生長、發(fā)育、分化和營養(yǎng)相關(guān)，提示我們LRRC4基因可能參與了腦組織的生長和發(fā)育等。另外我們發(fā)現(xiàn)LRRC4的IGC2結(jié)構(gòu)域可能參與了細(xì)胞信號通路WNTJNK通路，LRRC4基因很可能通過IGC2結(jié)構(gòu)域參與JNK通路調(diào)控腫瘤細(xì)胞的極性分化。這些結(jié)果為我們以后的工作提供了重要的線索。關(guān)鍵詞LRRC4，IGC2，缺失突變體，CDNA微陣列

簡介：目的建立糖尿病老年鼠和健康老年鼠骨髓基質(zhì)干細(xì)胞MSCS在不同血糖微環(huán)境下分離和培養(yǎng)擴(kuò)增的方法并研究MSCS在不同血糖微環(huán)境下的生物學(xué)特性為更好的利用MSCS作為種子細(xì)胞治療多種疾病提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)方法通過密度梯度離心、貼壁篩選法分離培養(yǎng)SD老年鼠MSCS測定其接種貼壁率在倒置顯微鏡下連續(xù)觀察細(xì)胞的形態(tài)變化利用MTT法測定MSCS生長曲線臺盼蘭染色法測定其細(xì)胞活力并利用流式細(xì)胞術(shù)測定細(xì)胞周期和表面標(biāo)記物結(jié)果貼壁率、生長曲線經(jīng)SPSS130統(tǒng)計分析均顯示NL、NH優(yōu)于DH、DLP005而NL優(yōu)于NHP005DL優(yōu)于DHP005細(xì)胞活力、細(xì)胞周期經(jīng)方差分析顯示NL、NH、DH、DL之間有明顯差異P001而細(xì)胞的形態(tài)及細(xì)胞表面標(biāo)記物NL、NH、DH、DL均無明顯差異結(jié)論第1代P1及第3代P3指標(biāo)整體顯示健康組生物學(xué)特性優(yōu)于糖尿病組而且低糖組優(yōu)于高糖組

簡介：CDAK細(xì)胞是抗CDMCAB和IL2活化的、具有較強(qiáng)細(xì)胞毒活性的免疫效應(yīng)細(xì)胞常用于腫瘤的過繼免疫治療該研究中利用PLIL2SN逆轉(zhuǎn)錄病毒載體向CDAK細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)移入IL2基因轉(zhuǎn)入的IL2基因得到表達(dá)表達(dá)的IL2可彌補(bǔ)CDAK細(xì)胞對IL2的消耗和自分泌IL2的不足增強(qiáng)CDAK細(xì)胞的生物學(xué)功能CDB信號途徑是T細(xì)胞活化所需的協(xié)同刺激信號利用抗CDMCAB與CDAK細(xì)胞活化第一信號抗CDMCAB協(xié)同可增強(qiáng)CDAK細(xì)胞活化的潛能尤其增強(qiáng)CDCDT細(xì)胞的活化CD信號的活化可增強(qiáng)CDAK細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)IL2基因的表達(dá)但在CD信號活化的基礎(chǔ)上導(dǎo)入的IL2基因?qū)DAK細(xì)胞的功能無明顯影響該實(shí)驗(yàn)中對CDAK細(xì)胞的轉(zhuǎn)導(dǎo)及CD協(xié)同活化對其功能的研究為今后更好地應(yīng)用CDAK細(xì)胞于過繼免疫治療打下了一定的基礎(chǔ)

簡介：分類號UDC辛卞科技大挈博士學(xué)位論文人CCLO基因?qū)Ψ伟┘?xì)胞生物學(xué)行為影響的研究申請人姓名指導(dǎo)教師學(xué)科專業(yè)研究方向論文起止時問鐘聲徐永健教授呼吸內(nèi)科肺癌2004，3，～20063同濟(jì)醫(yī)學(xué)院研究生部二OO六年四月華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文人CCL0基因?qū)Ψ伟┘?xì)胞生物學(xué)行為影響的研究中文摘要第一部分CCLO在非小細(xì)胞肺癌NSCLC中的表達(dá)及其與癌細(xì)胞凋亡的關(guān)系目的研究CCIO蛋白在非小細(xì)胞肺癌NSCLC中的表達(dá)并觀察其與癌細(xì)胞凋亡的關(guān)系。方法采用免疫組化技術(shù)檢測CCIO在43例NSCLC及20例肺良性疾病組織石蠟標(biāo)本中的表達(dá)，并借助HPIAS一1000圖像系統(tǒng)對結(jié)果進(jìn)行分析。應(yīng)用TUNEL技術(shù)檢測其中的43例NSCLC癌細(xì)胞的凋亡并分析其與CCIO表達(dá)的相關(guān)性。結(jié)果CCIO在NSCLC中的表達(dá)為4651％20／43，明顯低于肺良性病變組織850％PO05；CCIO表達(dá)陽性肺癌組織細(xì)胞凋亡指數(shù)AI為5585士17822％，CCLO表達(dá)陰性肺癌組織細(xì)胞凋亡指數(shù)AI為28565士13990％，癌細(xì)胞凋亡指數(shù)AI與NSCLC中CCIO蛋白的表達(dá)有顯著相關(guān)性RS一002LL，PO05。結(jié)論。NSCLC中CCIO的表達(dá)下調(diào)，NSCLC細(xì)胞的凋亡的與CCIO的表達(dá)下調(diào)密切相關(guān)關(guān)鍵詞非小細(xì)胞肺癌CCIO；凋亡第二部分構(gòu)建及鑒定人CCLO基因真核細(xì)胞表達(dá)載體

簡介：哈爾濱醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文人肺腺癌ANIP973CDDP耐藥細(xì)胞系的建立及生物學(xué)特性分析姓名張長海申請學(xué)位級別碩士專業(yè)腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師陳公琰20070501哈爾濱醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文3ESTABLISHMENTOFAHUMANLUNGADENOCARCINOMADRUGRESISTANCECELLLINEANIP973CDDPANALYSISOFITSBIOLOGICALPROPERTIESABSTRACTOBJECTIVETOESTABLISHAHUMANLUNGADENOCARCINOMAMULTIDRUGRESISTANTCELLLINEANIP973CDDPTOSTUDYITSBIOLOGICACTERISTICSMETHODSTHEHUMANLUNGADENOCARCINOMAMULTIDRUGRESISTANTCELLLINEA973CDDPWASESTABLISHEDBYINDUCINGHUMANLUNGADENOCARCINOMACELLLINEANIP973WITHSTEPWISEINCREASINGCONCENTRATIONSOFCISPLATINWHICHUSEDTOBETHEFIRSTLINECHEMOTHERAPEUTICDRUGFLUNGCACERTHECELLGROWTHCURVETHEDOUBLINGTIMEWEREDETERMINEDBYCOUNTINGCHANGESINCELLULARMPHOLOGYULTRASTRUCTUREWEREOBSERVEDUNDERINVERTEDMICROSCOPESCANNINGELECTRONMICROSCOPERESPECTIVELYTHECELLCYCLESWEREDETERMINEDBYFLOWCYTOMETRYTHECHEMOSENSITIVITIESOFANIP973CDDPANIP973TOCISPLATINIRINOTECANGEMCITABINEDACARBAZINEETOPOSIDENAVELBINEPHARMUBICINISOFOSFAE5FLUOURACILWERETESTEDIC50MEASUREDBYMTTRESULTSTHEHUMANLUNGADENOCARCINOMAMULTIDRUGRESISTANTCELLLINEANIP973CDDPWASESTABLISHEDSUCCESSFULLYF24MONTHSITSBIOLOGICACTERISTICSWERE1THECELLMPHOUSOFA973CDDPCELLSWEREMEIRREGULARTHANA973CELLSTHEREWASSIGNIFICANTDIFFERENCEINULTRAMICROSTRUCTUREWHILEOBSERVEDBYTHEINVERTEDMICROSCOPESCANNINGELECTRONMICROSCOPE2THERATESOFCELLPROLIFERATIONOFANIP973CDDPANIP973CELLLINESWERENOSIGNIFICANTLYDIFFERENT3CELLCYCLEDISTRIBUTIONOFANIP973CDDPHADCHANGEDCOMPAREDWITHPARENTALCELLSFROMFLOWCYTOMETRYTHEPERCENTAGEOFCELLSING0G1PHASEDECREASEDTO5218WHILETHEPERCENTAGEOFCELLSINSPHASEINCREASEDTO2860THEPERCENTAGEOFANIP973ING0G1SPHASEWERE661137RESPECTIVELYP005THEREWASNOCHANGESING2MPHASEOFTHETWOCELLLINES4THE

簡介：目的和意義應(yīng)用生物信息學(xué)及克隆表達(dá)的方法對乳酸桿菌表層粘附蛋白進(jìn)行篩選和鑒定，并通過抗體封閉及競爭粘附的手段對目的蛋白的粘附作用作進(jìn)一步的驗(yàn)證。根據(jù)腸上皮細(xì)胞模型CACO2細(xì)胞在單獨(dú)使用致病性大腸桿菌EPEC感染，加用乳酸桿菌或粘附蛋白后的生物學(xué)功能改變的不同，包括單層細(xì)胞的完整性和通透性、緊密連接TIGHTJUNGTION，TJ蛋白、FACTIN、ERK、PERK的表達(dá)差異，闡述乳酸桿菌及粘附蛋白對腸上皮細(xì)胞緊密連接蛋白及其生物學(xué)功能的調(diào)控機(jī)制。研究方法1、運(yùn)用生物信息學(xué)及克隆表達(dá)的方法鑒定和篩選乳酸桿菌表層粘附蛋白；2、通過同EPEC競爭粘附腸上皮細(xì)胞，結(jié)合抗體封閉的手段驗(yàn)證目的蛋白的粘附作用；3、采用免疫熒光、WESTERNBLOT方法觀察EPEC、乳酸桿菌或粘附蛋白對腸上皮細(xì)胞緊密連接TJ相關(guān)蛋白CLAUDIN1蛋白、OCCLUDIN蛋白、JAM1蛋白、ZO1蛋白分布變化的影響；FITCPHALLOIDIN染色觀察細(xì)胞骨架FACTIN的表達(dá)變化；4、用MILLIPEERS電阻儀測定單層細(xì)胞跨膜電阻值TER的變化；用高效液相色譜法HPLC測定甘露醇溶液的透過率間接反映單層細(xì)胞的通透性；5、結(jié)合ERK表達(dá)水平的改變，分析乳酸桿菌對腸上皮TJ蛋白的調(diào)控機(jī)制6、所有數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，P005提示差異有統(tǒng)計學(xué)意義，采用SPSS130版統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。結(jié)果1、通過乳酸桿菌同腸上皮黏蛋白的粘附特性，對乳酸桿菌表層粘附蛋白作篩選及鑒定，運(yùn)用質(zhì)譜分析、分段表達(dá)克隆及WESTERNBLOT找到粘附蛋白整合膜蛋白IMP，其粘附域位置是IMP的第二段氨基酸序列的455755；2、通過抗體封閉，在同EPEC的競爭黏附實(shí)驗(yàn)中進(jìn)一步證實(shí)該段黏附蛋白對黏附有重要作用；2、堿性磷酸酶染色驗(yàn)證了腸道上皮樣細(xì)胞CACO2具有明顯的細(xì)胞極性。免疫膠體金及電鏡觀察證實(shí)相鄰上皮細(xì)胞間的頂端存在緊密連接結(jié)構(gòu)；3、EPEC感染可使相鄰CACO2細(xì)胞間TJ結(jié)構(gòu)遭到破壞，TJ相關(guān)蛋白CLAUDIN1蛋白，OCCLUDIN蛋白，JAM1蛋白，ZO1蛋白的表達(dá)亦減少，細(xì)胞骨架受損，然而腸上皮細(xì)胞ERK的磷酸化水平隨緊密連接蛋白水平的降低而升高；而乳酸桿菌和表層粘附蛋白處理后可以減輕EPEC引起的TJ結(jié)構(gòu)及相關(guān)蛋白的破壞，ERK的磷酸化水平卻降低明顯；4、EPEC感染CACO2細(xì)胞后，單層細(xì)胞的TER值降低和甘露醇的透過率隨時間延長而升高；而經(jīng)乳酸桿菌和表層粘附蛋白處理后，TER值恢復(fù)且甘露醇的透過率降低。結(jié)論植物乳酸桿菌CGMCCNO1258表層黏附蛋白為整合膜蛋白，且該蛋白的粘附區(qū)域位于其第二段氨基酸序列中。乳酸桿菌依賴于粘附蛋白可以同EPEC競爭粘附腸上皮細(xì)胞CACO2，進(jìn)而可以抑制EPEC的感染后引起的腸道單層上皮完整性、細(xì)胞間緊密連接結(jié)構(gòu)和細(xì)胞內(nèi)骨架的破壞，其具體調(diào)控機(jī)制和ERK途徑密切相關(guān)。