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    • 簡(jiǎn)介:植物營(yíng)養(yǎng)學(xué)與現(xiàn)代生物技術(shù),徐芳森,植物營(yíng)養(yǎng)學(xué)研究植物營(yíng)養(yǎng)原理與施肥的科學(xué)。,植物營(yíng)養(yǎng)原理研究植物對(duì)營(yíng)養(yǎng)元素的吸收、運(yùn)轉(zhuǎn)、分配和利用,以及植物體與環(huán)境之間營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和能量轉(zhuǎn)化過程及其調(diào)控的科學(xué)。,植物必需營(yíng)養(yǎng)元素(定義,分類,種類)有益元素每個(gè)必需營(yíng)養(yǎng)元素的吸收(代謝與同化)、體內(nèi)含量、分配、營(yíng)養(yǎng)功能、缺乏(或中毒)癥狀(診斷),每個(gè)必需營(yíng)養(yǎng)元素所對(duì)應(yīng)的肥料(種類、性質(zhì)和施用技術(shù)等)N,P,K肥料三要素微肥單質(zhì)肥料與復(fù)合肥料有機(jī)與無機(jī)肥含CL肥料與含SO42肥料施肥與環(huán)境配方施肥,尤李比西18031873,LIEBIG1840“ORGANICCHEMISTRYINITSAPPLICATIONTOAGRICULTUREANDPHYSIOLOGY”,MACROELEMENTC,H,O,N,P,K,CA,MG,SMICROELEMENTFE,MN,CU,ZN,B,MO,CL,,,,,,CO2,UPTAKEANDDISTRIBUTIONOFBORONATFLOWERINGSTAGEΜGBINEFFIBEFFIBBBBOLDESTLEAF110217277701370YOUNGESTLEAF002401502450586MAINSTEM1055287223732668FLOWER123567346785BUD1841148196700TOTAL3285893745637821,,,,,,,ENZYMOLOGY,ISOTOPETRACETECHNIQUE,SOILSCIENCE,AGRONOMY,TRADITIONALUNDERSTANDINGONPLANTNUTRITION,,,,PLANTNUTRITION,PLANTPHYSIOLOGY,SOILSCIENCE,CROPPLANT,SOIL,FERTILIZER,,,,,PLANTNUTRIOLOGY,MODERNDISCIPLINEOFPLANTNUTRITION,GENOMICSPROTEOMICSMETABOMICSPLANTNUTRIOMICSIONOMICS,,,,SIGNAL,SIGNAL,TRANSDUCTION,TRANSDUCTION,,REC,REC,,PLANT,PLANT,NUTRIOMICS,NUTRIOMICS,,,SIGNAL,SIGNAL,TRANSDUCTION,TRANSDUCTION,,REC,REC,,PLANT,PLANT,NUTRIOMICS,NUTRIOMICS,MüLLERANDKERSTEN,2003,NRT1FAMILYOFNITRATETRANSPORTERS,,,TWOFAMILIESOFNITRATETRANSPORTERGENESHAVEBEENIDENTIFIEDTODATETHENRT1ANDNRT2FAMILIES,CHL1PARTICIPATESINBOTHLOWANDHIGHAFFINITYUPTAKE,N,NRT2FAMILYOFNITRATETRANSPORTERS,THENRT2FAMILYOFGENESENCODENITRATEINDUCIBLE,HIGHAFFINITYNITRATETRANSPORTERS,AMT1FAMILYOFNH4TRANSPORTERS,MODELFORTHEFEEDBACKREGULATIONOFTHEATAMT11GENEBYNMETABOLITES,,AMODELFORSECONDARYPITRANSPORTACROSSTHEPLASMAMEMBRANE,P,,,,THESENINEPHT1GENESARELOCATEDONCHROMOSOMES1,2,3,AND5,RESPECTIVELYTHEDIAGRAMDEPICTSINTRONSTHINLINESANDEXONSBLACKBOXES,PHYLOGENETICANALYSISOFARABIDOPSISPHOSPHATETRANSPORTERPROTEINSEQUENCES,,,,,,,CITRATE,ACETATE,,,,,,PHOSPHATE,FEPHOSPHATE,,ATP,ADPPI,HATPASE,H,H,H,PHOSPHATEHCOTRANSPORT,CITRATE,ACETATE,,,,PHOSPHATE,FEACETATE,,H,H,,FECITRATE,FE3REDUCTASE,FE2,FE2CHANNEL,,,,,CITRATE,,FE2,CYTOSOL,SOIL,THEFIRSTHIGHAFFINITYKTRANSPORTER,HKT1,WASCLONEDBYCOMPLEMENTATIONOFYEASTTRK1TRK2KTRANSPORTMUTANTWITHACDNALIBRARY,AMASSOF59KDAANDCONTAIN12MEMBRANESPANNINGDOMAINS,EXPRESSIONOFHKT1INXENOPUSOOCYTESGAVERISETOLARGEINWARDCURRENTSINTHEPRESENTOFK,K,克隆到的編碼K轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的植物基因,H/CA2反向轉(zhuǎn)運(yùn)子主要功能是維持細(xì)胞原生質(zhì)膜保持較低的CA2濃度。,CA,CA通道主要通過與3磷酸肌醇(IP3)或ADP核糖作用維持細(xì)胞原生質(zhì)膜的CA2濃度。,,植物中廣泛的代謝和發(fā)育信號(hào)都可以引發(fā)胞質(zhì)中游離CA2的提高。,游離CA2提高的直接作用目標(biāo)包括離子通道,轉(zhuǎn)運(yùn)子,還包括鈣調(diào)蛋白、含有鈣調(diào)蛋白域的蛋白激酶等。,OVERVIEWOFSULFURUPTAKE,REDUCTION,ANDTRANSPORTINPLANTS,APS5腺苷酰硫酸PAPS3‘-磷酸腺苷-5磷酰硫酸,S,MODELOFAPLANTSTRANSPORTERWITH12REGIONSSPANNINGTHEPLASMAMEMBRANE,B,AT1G15460AT1G74810AT2G47160AT3G06450AT3G62270AT4G32510AT5G25430,雙子葉植物和非禾本科單子葉植物鐵吸收模式圖,FE,,從擬南芥中分離到根三價(jià)鐵還原酶基因FRO2。它負(fù)責(zé)電子跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)的黃色細(xì)胞色素超家族中的一員。,擬南芥中分離到鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白IRT1。,IRT1,WT,IRT1WT,抗鹽性一般是多基因控制的,具有數(shù)量遺傳性狀的復(fù)雜性,呈“多因一效”的模式。,NUMBEROFGENESINDUCEDAORREPRESSEDBINLOWPICOMPARISONOFSHORTTERMDIAMONDS,3,6,12H,MEDIUMTERMSQUARES,1,2D,ANDLONGTERMCIRCLES,5ΜMEXPERIMENTSJULIEETAL,PNAS,2005,1021193411939,INVARIOUSMETABOLICPATHWAYSIONTRANSPORT,SIGNALTRANSDUCTION,TRANSCRIPTIONALREGULATION,ANDOTHERPROCESSESRELATEDTOGROWTHANDDEVELOPMENT,轉(zhuǎn)基因植株和對(duì)照的田間表現(xiàn)。A至D,盆載,E水培,F(xiàn)、G和H分別為低氮低磷和正常營(yíng)養(yǎng)條件下田間的結(jié)果A0毫克磷每公斤土,B和D30毫克磷每公斤土,C200毫克磷每公斤土,FROMLIAN2005,植酸酶基因表達(dá)盒,(FROMCHEN2005),WTPLANTSINTHEPRESENCEOF5MMNACLTRANSGENICPLANTSINTHEPRESENCEOF5MMNACLDWTPLANTSGROWNINTHEPRESENCEOF200MMNACLETRANSGENICPLANTSINTHEPRESENCEOF200MMNACL,2001,19765768NATUREBIOTECHNOLOGY,FOCUSONGENESTHATCONTROLUPTAKEANDACCUMULATIONOFSOLUTES,INCLUDINGCA,K,MG,PPLANTMACRONUTRIENTS,CO,CU,FE,LI,B,MN,MO,NI,SE,ZNMICRONUTRIENTSOFSIGNIFICANCETOPLANTANDHUMANHEALTHAS,CD,NAANDPBELEMENTSCAUSINGAGRICULTURALORENVIRONMENTALPROBLEMS,PLANTIONOMICS,DAVIDESALTPLANTPHYSIOLOGY,2004,THANKS,
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      上傳時(shí)間:2024-01-06
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簡(jiǎn)介:1現(xiàn)代分子生物學(xué)課后習(xí)題及答案(共現(xiàn)代分子生物學(xué)課后習(xí)題及答案(共1010章)章)第一章第一章緒論緒論11你對(duì)現(xiàn)代分子生物學(xué)的含義和包括的研究范圍是怎么理解的你對(duì)現(xiàn)代分子生物學(xué)的含義和包括的研究范圍是怎么理解的22分子生物學(xué)研究?jī)?nèi)容有哪些方面分子生物學(xué)研究?jī)?nèi)容有哪些方面33分子生物學(xué)發(fā)展前景如何分子生物學(xué)發(fā)展前景如何44人類基因組計(jì)劃完成的社會(huì)意義和科學(xué)意義是什么人類基因組計(jì)劃完成的社會(huì)意義和科學(xué)意義是什么答案答案11分子生物學(xué)是從分子水平研究生命本質(zhì)的一門新興邊緣學(xué)科,它以核酸和蛋白質(zhì)等生物大分子生物學(xué)是從分子水平研究生命本質(zhì)的一門新興邊緣學(xué)科,它以核酸和蛋白質(zhì)等生物大分子的結(jié)構(gòu)及其在遺傳信息和細(xì)胞信息傳遞中的作用為研究對(duì)象,是當(dāng)前生命科學(xué)中發(fā)展最分子的結(jié)構(gòu)及其在遺傳信息和細(xì)胞信息傳遞中的作用為研究對(duì)象,是當(dāng)前生命科學(xué)中發(fā)展最快并正在與其它學(xué)科廣泛交叉與滲透的重要前沿領(lǐng)域。狹義偏重于核酸的分子生物學(xué),主快并正在與其它學(xué)科廣泛交叉與滲透的重要前沿領(lǐng)域。狹義偏重于核酸的分子生物學(xué),主要研究基因或要研究基因或DNADNA的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、達(dá)和調(diào)節(jié)控制等過程,其中也涉及與這些過程有關(guān)的達(dá)和調(diào)節(jié)控制等過程,其中也涉及與這些過程有關(guān)的蛋白質(zhì)和酶的結(jié)構(gòu)與功能的研究。分子生物學(xué)的發(fā)展為人類認(rèn)識(shí)生命現(xiàn)象帶來了前所未有的蛋白質(zhì)和酶的結(jié)構(gòu)與功能的研究。分子生物學(xué)的發(fā)展為人類認(rèn)識(shí)生命現(xiàn)象帶來了前所未有的機(jī)會(huì),也為人類利用和改造生物創(chuàng)造了極為廣闊的前景。所謂在分子水平上研究生命的本質(zhì)機(jī)會(huì),也為人類利用和改造生物創(chuàng)造了極為廣闊的前景。所謂在分子水平上研究生命的本質(zhì)主要是指對(duì)遺傳、主要是指對(duì)遺傳、生殖、生長(zhǎng)和發(fā)育等生命基本特征的分子機(jī)理的闡明,從而為利用和改生殖、生長(zhǎng)和發(fā)育等生命基本特征的分子機(jī)理的闡明,從而為利用和改造生物奠定理論基礎(chǔ)和提供新的手段。這里的分子水平指的是那些攜帶遺傳信息的核酸和在造生物奠定理論基礎(chǔ)和提供新的手段。這里的分子水平指的是那些攜帶遺傳信息的核酸和在遺傳信息傳遞及細(xì)胞內(nèi)、細(xì)胞間通訊過程中發(fā)揮著重要作用的蛋白質(zhì)等生物大分子。這些生遺傳信息傳遞及細(xì)胞內(nèi)、細(xì)胞間通訊過程中發(fā)揮著重要作用的蛋白質(zhì)等生物大分子。這些生物大分子均具有較大的分子量,由簡(jiǎn)單的小分子核苷酸或氨基酸排列組合以蘊(yùn)藏各種信息,物大分子均具有較大的分子量,由簡(jiǎn)單的小分子核苷酸或氨基酸排列組合以蘊(yùn)藏各種信息,并且具有復(fù)雜的空間結(jié)構(gòu)以形成精確的相互作用系統(tǒng),由此構(gòu)成生物的多樣化和生物個(gè)體精并且具有復(fù)雜的空間結(jié)構(gòu)以形成精確的相互作用系統(tǒng),由此構(gòu)成生物的多樣化和生物個(gè)體精確的生長(zhǎng)發(fā)育和代謝調(diào)節(jié)控制系統(tǒng)。闡明這些復(fù)雜的結(jié)構(gòu)及結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系是分子生物學(xué)確的生長(zhǎng)發(fā)育和代謝調(diào)節(jié)控制系統(tǒng)。闡明這些復(fù)雜的結(jié)構(gòu)及結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系是分子生物學(xué)的主要任務(wù)。的主要任務(wù)。22分子生物學(xué)主要包含以下三部分研究?jī)?nèi)容分子生物學(xué)主要包含以下三部分研究?jī)?nèi)容AA核酸的分子生物學(xué),核酸的分子生物學(xué)研究核酸的分子生物學(xué),核酸的分子生物學(xué)研究核酸的結(jié)構(gòu)及其功能。由于核酸的主要作用是攜帶和傳遞遺傳信息,因此分子遺傳學(xué)核酸的結(jié)構(gòu)及其功能。由于核酸的主要作用是攜帶和傳遞遺傳信息,因此分子遺傳學(xué)(MOLECULARGEICSMOLECULARGEICS)是其主要組成部分。由于)是其主要組成部分。由于5050年代以來的迅速發(fā)展,該領(lǐng)域已形成了比年代以來的迅速發(fā)展,該領(lǐng)域已形成了比較完整的理論體系和研究技術(shù),是目前分子生物學(xué)內(nèi)容最豐富的一個(gè)領(lǐng)域。研究?jī)?nèi)容包括核較完整的理論體系和研究技術(shù),是目前分子生物學(xué)內(nèi)容最豐富的一個(gè)領(lǐng)域。研究?jī)?nèi)容包括核酸基因組的結(jié)構(gòu)、遺傳信息的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄與翻譯,核酸存儲(chǔ)的信息修復(fù)與突變,基因基因組的結(jié)構(gòu)、遺傳信息的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄與翻譯,核酸存儲(chǔ)的信息修復(fù)與突變,基因達(dá)調(diào)控和基因工程技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用等。遺傳信息傳遞的中心法則(調(diào)控和基因工程技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用等。遺傳信息傳遞的中心法則(CENTRALDOGMACENTRALDOGMA)是其理論)是其理論體系的核心。體系的核心。BB蛋白質(zhì)的分子生物學(xué)蛋白質(zhì)的分子生物學(xué)研究執(zhí)行各種生命功能的主要大分子──蛋白蛋白質(zhì)的分子生物學(xué)蛋白質(zhì)的分子生物學(xué)研究執(zhí)行各種生命功能的主要大分子──蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能。盡管人類對(duì)蛋白質(zhì)的研究比對(duì)核酸研究的歷史要長(zhǎng)得多,但由于其研究難質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能。盡管人類對(duì)蛋白質(zhì)的研究比對(duì)核酸研究的歷史要長(zhǎng)得多,但由于其研究難度較大,與核酸分子生物學(xué)相比發(fā)展較慢。近年來雖然在認(rèn)識(shí)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)及其與功能關(guān)系度較大,與核酸分子生物學(xué)相比發(fā)展較慢。近年來雖然在認(rèn)識(shí)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)及其與功能關(guān)系方面取得了一些進(jìn)展,但是對(duì)其基本規(guī)律的認(rèn)識(shí)尚缺乏突破性的進(jìn)展。方面取得了一些進(jìn)展,但是對(duì)其基本規(guī)律的認(rèn)識(shí)尚缺乏突破性的進(jìn)展。332121世紀(jì)是生命科學(xué)世紀(jì),生物經(jīng)濟(jì)時(shí)代,分子生物學(xué)將取得突飛猛進(jìn)的發(fā)展,結(jié)構(gòu)基因世紀(jì)是生命科學(xué)世紀(jì),生物經(jīng)濟(jì)時(shí)代,分子生物學(xué)將取得突飛猛進(jìn)的發(fā)展,結(jié)構(gòu)基因組學(xué)、功能基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、生物信息學(xué)、信號(hào)跨膜轉(zhuǎn)導(dǎo)成為新的熱門領(lǐng)域,將在農(nóng)組學(xué)、功能基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、生物信息學(xué)、信號(hào)跨膜轉(zhuǎn)導(dǎo)成為新的熱門領(lǐng)域,將在農(nóng)業(yè)、工業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域帶來新的變革。業(yè)、工業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域帶來新的變革。44社會(huì)意義社會(huì)意義人類基因組計(jì)劃與曼哈頓原子計(jì)劃、阿波羅登月計(jì)劃并稱為人類科學(xué)史上的三大工程,具有人類基因組計(jì)劃與曼哈頓原子計(jì)劃、阿波羅登月計(jì)劃并稱為人類科學(xué)史上的三大工程,具有重大科學(xué)意義、經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。重大科學(xué)意義、經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。1)極大地促進(jìn)生命科學(xué)領(lǐng)域一系列基礎(chǔ)研究的發(fā)展,闡明基因的結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系、生命的極大地促進(jìn)生命科學(xué)領(lǐng)域一系列基礎(chǔ)研究的發(fā)展,闡明基因的結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系、生命的起源和進(jìn)化、細(xì)胞發(fā)育、生產(chǎn)、分化的分子機(jī)理,疾病發(fā)生的機(jī)理等,為人類自身疾病的診起源和進(jìn)化、細(xì)胞發(fā)育、生產(chǎn)、分化的分子機(jī)理,疾病發(fā)生的機(jī)理等,為人類自身疾病的診斷和治療提供依據(jù),為醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)帶來翻天覆地的變化;斷和治療提供依據(jù),為醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)帶來翻天覆地的變化;2)促進(jìn)生命科學(xué)與信息科學(xué)、材料科學(xué)和與高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)相結(jié)合,刺激相關(guān)學(xué)科與技術(shù)領(lǐng)促進(jìn)生命科學(xué)與信息科學(xué)、材料科學(xué)和與高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)相結(jié)合,刺激相關(guān)學(xué)科與技術(shù)領(lǐng)域的發(fā)展,帶動(dòng)起一批新興的高技術(shù)產(chǎn)業(yè);域的發(fā)展,帶動(dòng)起一批新興的高技術(shù)產(chǎn)業(yè);3)基因組研究中發(fā)展起來的技術(shù)、數(shù)據(jù)庫(kù)及生物學(xué)資源,還將推動(dòng)對(duì)農(nóng)業(yè)、畜牧業(yè)(轉(zhuǎn)基基因組研究中發(fā)展起來的技術(shù)、數(shù)據(jù)庫(kù)及生物學(xué)資源,還將推動(dòng)對(duì)農(nóng)業(yè)、畜牧業(yè)(轉(zhuǎn)基因動(dòng)、植物)因動(dòng)、植物)、能源、環(huán)境等相關(guān)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展,改變?nèi)祟惿鐣?huì)生產(chǎn)、生活和環(huán)境的面貌,把、能源、環(huán)境等相關(guān)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展,改變?nèi)祟惿鐣?huì)生產(chǎn)、生活和環(huán)境的面貌,把人類帶入更佳的生存狀態(tài)。人類帶入更佳的生存狀態(tài)??茖W(xué)意義科學(xué)意義1)確定人類基因組中約確定人類基因組中約5萬個(gè)編碼基因的序列基因在基因組中的物理位置,研究基因的產(chǎn)萬個(gè)編碼基因的序列基因在基因組中的物理位置,研究基因的產(chǎn)3B依賴于依賴于AUAU含量,因?yàn)樾纬傻臍滏I越少則發(fā)生堿基配對(duì)所需的能量也越少含量,因?yàn)樾纬傻臍滏I越少則發(fā)生堿基配對(duì)所需的能量也越少C僅僅當(dāng)兩配對(duì)區(qū)段中所有的堿基均互補(bǔ)時(shí)才會(huì)發(fā)生僅僅當(dāng)兩配對(duì)區(qū)段中所有的堿基均互補(bǔ)時(shí)才會(huì)發(fā)生D同樣包括有像同樣包括有像GUGU這樣的不規(guī)則堿基配對(duì)這樣的不規(guī)則堿基配對(duì)E允許存在幾個(gè)只有提供過量的自由能才能形成堿基對(duì)的堿基允許存在幾個(gè)只有提供過量的自由能才能形成堿基對(duì)的堿基6DNADNA分子中的超螺旋(分子中的超螺旋()。A僅發(fā)生于環(huán)狀僅發(fā)生于環(huán)狀DNADNA中。如果雙螺旋在圍繞其自身的軸纏繞后(即增加纏繞數(shù))才閉合,中。如果雙螺旋在圍繞其自身的軸纏繞后(即增加纏繞數(shù))才閉合,則雙螺旋在扭轉(zhuǎn)力的作用下,處于靜止則雙螺旋在扭轉(zhuǎn)力的作用下,處于靜止B在在性和環(huán)狀性和環(huán)狀DNADNA中均有發(fā)生。纏繞數(shù)的增加可被堿基配對(duì)的改變和氫鍵的增加所抑中均有發(fā)生。纏繞數(shù)的增加可被堿基配對(duì)的改變和氫鍵的增加所抑制C可在一個(gè)閉合的可在一個(gè)閉合的DNADNA分子中形成一個(gè)左手雙螺旋。負(fù)超螺旋是分子中形成一個(gè)左手雙螺旋。負(fù)超螺旋是DNADNA修飾的前提,為酶修飾的前提,為酶接觸接觸DNADNA提供了條件提供了條件D是真核生物是真核生物DNADNA有比分裂過程中固縮的原因有比分裂過程中固縮的原因E是雙螺旋中一條鏈繞另一條鏈的旋轉(zhuǎn)數(shù)和雙螺旋軸的回轉(zhuǎn)數(shù)的總和是雙螺旋中一條鏈繞另一條鏈的旋轉(zhuǎn)數(shù)和雙螺旋軸的回轉(zhuǎn)數(shù)的總和7DNADNA在10NM10NM纖絲中壓縮多少倍(纖絲中壓縮多少倍()A6倍B1010倍C4040倍D240240倍E10001000倍8下列哪一條適用于同源染色單體(下列哪一條適用于同源染色單體()A有共同的著絲粒有共同的著絲粒C有絲分列后期彼此分開有絲分列后期彼此分開B遺傳一致性遺傳一致性D兩者都按照同樣的順序,分布著相同的基因,但可具有不同的等位基因兩者都按照同樣的順序,分布著相同的基因,但可具有不同的等位基因E以上描述中,有不止一種特性適用同源染色單體以上描述中,有不止一種特性適用同源染色單體9DNADNA在30NM30NM纖絲中壓縮多少倍(纖絲中壓縮多少倍()A6倍B1010倍C4040倍D240240倍E10001000倍1010DNADNA在染色體的常染色質(zhì)區(qū)壓縮多少倍(在染色體的常染色質(zhì)區(qū)壓縮多少倍(E)A6倍B1010倍C4040倍D240240倍E10001000倍1111DNADNA在中期染色體中壓縮多少倍(在中期染色體中壓縮多少倍(F)A6倍B1010倍C4040倍D240240倍E1000010000倍1212分裂間期的早期,分裂間期的早期,DNADNA處于(處于()狀態(tài)。)狀態(tài)。A單體連續(xù)的單體連續(xù)的性雙螺旋分子性雙螺旋分子B半保留半保留復(fù)制的雙螺旋結(jié)構(gòu)復(fù)制的雙螺旋結(jié)構(gòu)C保留復(fù)制的雙螺旋結(jié)構(gòu)保留復(fù)制的雙螺旋結(jié)構(gòu)D單鏈單鏈DNADNAE以上都不正確以上都不正確1313分裂間期分裂間期S期,期,DNADNA處于(處于()狀態(tài)。)狀態(tài)。A單體連續(xù)的單體連續(xù)的性雙螺旋分子性雙螺旋分子B半保留復(fù)半保留復(fù)制的雙螺旋結(jié)構(gòu)制的雙螺旋結(jié)構(gòu)C保留復(fù)制的雙螺旋結(jié)構(gòu)保留復(fù)制的雙螺旋結(jié)構(gòu)D單鏈單鏈DNADNAE以上都不正確以上都不正確三、判斷題三、判斷題1在高鹽和低溫條件下由在高鹽和低溫條件下由DNADNA單鏈雜交形成的雙螺旋單鏈雜交形成的雙螺旋現(xiàn)出幾乎完全的互補(bǔ)性,這一過程可現(xiàn)出幾乎完全的互補(bǔ)性,這一過程可看作是一個(gè)復(fù)性(退火)反應(yīng)??醋魇且粋€(gè)復(fù)性(退火)反應(yīng)。()()2單個(gè)核苷酸通過磷酸二酯鍵連接到單個(gè)核苷酸通過磷酸二酯鍵連接到DNADNA骨架上。骨架上。3DNADNA分子整體都具有強(qiáng)的負(fù)電性,因此沒有極性。分子整體都具有強(qiáng)的負(fù)電性,因此沒有極性。()4在核酸雙螺旋(如在核酸雙螺旋(如DNADNA)中形成發(fā)夾環(huán)結(jié)構(gòu)的頻率比單鏈分子低。發(fā)夾結(jié)構(gòu)的產(chǎn)生需要回)中形成發(fā)夾環(huán)結(jié)構(gòu)的頻率比單鏈分子低。發(fā)夾結(jié)構(gòu)的產(chǎn)生需要回文序列使雙鏈形成對(duì)稱的發(fā)夾,呈十字結(jié)構(gòu)。文序列使雙鏈形成對(duì)稱的發(fā)夾,呈十字結(jié)構(gòu)。5病毒的遺傳因子可包括病毒的遺傳因子可包括13001300個(gè)基因。與生命有機(jī)體不同,病毒的遺傳因子可能是個(gè)基因。與生命有機(jī)體不同,病毒的遺傳因子可能是DNADNA或RNARNA,(但不可能同時(shí)兼有)因此(但不可能同時(shí)兼有)因此DNADNA不是完全通用的遺傳物質(zhì)。不是完全通用的遺傳物質(zhì)。6一段長(zhǎng)度一段長(zhǎng)度100BP100BP的DNADNA,具有,具有41004100種可能的序列組合形式。種可能的序列組合形式。7CT012128CT01212與基因組大小相關(guān)。與基因組大小相關(guān)。
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    • 簡(jiǎn)介:分子生物學(xué)讀書筆記分子生物學(xué)讀書筆記第1篇化學(xué)和遺傳學(xué)化學(xué)和遺傳學(xué)第1章孟德爾學(xué)派的世界觀孟德爾學(xué)派的世界觀知識(shí)點(diǎn)知識(shí)點(diǎn)1孟德爾定律是什么孟德爾定律是什么答顯性和隱性基因都是獨(dú)立傳遞的,并且在性細(xì)胞形成過程中能夠獨(dú)立分離。這個(gè)獨(dú)立分離規(guī)律(PRINCIPLEOFINDEPENDENTSEGREGATION)經(jīng)常被稱為孟德爾第一定律?;虼嬖?,并且每一對(duì)基因在性細(xì)胞發(fā)育過程中,都可以獨(dú)立地傳遞到配子中。這一獨(dú)立分配律(PRINCIPLEOFINDEPENDENTASSTMENT)經(jīng)常被稱為孟德爾第二定律。第2章核酸承載遺傳信息核酸承載遺傳信息知識(shí)點(diǎn)知識(shí)點(diǎn)1中心法則中心法則答1956年,CRICK提出將遺傳信息的傳遞途徑稱為中心法則(CENTRALDOGMA)。轉(zhuǎn)錄翻譯復(fù)制DNARNA蛋白質(zhì)其中,箭頭表示遺傳信息的傳遞方向。環(huán)繞DNA的箭頭代表DNA是自我復(fù)制的模板。DNA與RNA之間的箭頭表示RNA的合成(轉(zhuǎn)錄,TRANION)是以DNA為模板的。相應(yīng)地,蛋白質(zhì)的合成(翻譯,TRANSLATION)是以RNA為模板的。更為重要的是,最后兩個(gè)箭頭表示的過程,只能單方向存在,也就是說,不能由蛋白質(zhì)模板合成RNA。也難以想象由RNA模板合成DNA。蛋白質(zhì)不能作為RNA的模板已經(jīng)經(jīng)受了時(shí)間的驗(yàn)證,然而,正如我們將在第11章中要提到的,有時(shí)RNA鏈確實(shí)可以作為互補(bǔ)的DNA的模板。這種與正常信息流的方向相反的事例,與大量的以DNA為模板合成的RNA分子相比,是非常少見的。所以,大約50年前提出的中心法則在今天看來仍然是基本正確的。第3章弱化學(xué)作用的重要性弱化學(xué)作用的重要性知識(shí)點(diǎn)知識(shí)點(diǎn)1弱化學(xué)鍵主要有弱化學(xué)鍵主要有4種答范德華力疏水鍵氫鍵及離子鍵。2弱化學(xué)鍵的作用弱化學(xué)鍵的作用答介導(dǎo)了到分子內(nèi)間的相互作用,決定了分子的形狀及功能。2雙螺旋的兩條鏈序列互補(bǔ)雙螺旋的兩條鏈序列互補(bǔ)答腺嘌呤(A)和胸腺嘧啶(T)配對(duì),鳥嘌呤(G)和胞嘧啶(C)配對(duì)的結(jié)果是使兩條相互纏繞的鏈上的堿基序列呈互補(bǔ)關(guān)系并賦予DNA自我編碼的特性。3堿基會(huì)從雙螺旋中翻轉(zhuǎn)出來堿基會(huì)從雙螺旋中翻轉(zhuǎn)出來答有時(shí)單個(gè)的堿基會(huì)從雙螺旋中突出,這種值得注意的現(xiàn)象叫做堿基翻出(BASEFLIPPING)。4DNA雙鏈可以分開(變性)和復(fù)性雙鏈可以分開(變性)和復(fù)性答當(dāng)DNA溶液溫度高于生理溫度(接近100℃)或者PH較高時(shí),互補(bǔ)的兩條鏈就可分開,這個(gè)過程稱為變性(DENATURATION)。DNA雙鏈完全分開的變性過程是可逆的,當(dāng)變性DNA的熱溶液緩慢降溫,DNA的互補(bǔ)鏈又可重新聚合,形成規(guī)則的雙螺旋。由于變性的DNA分子具有復(fù)性的能力,因此來源不同的兩條DNA分子鏈通過緩慢降溫也可形成人工雜交分子。在第20章里,兩條單鏈核酸形成雜交分子的能力被稱為雜交(HYBRIDIZTION)。這是分子生物學(xué)中幾項(xiàng)不可缺少的技術(shù)的基礎(chǔ)。例如,SOUTHERN印跡雜交(第20章)和DNA芯片分析(第18章,框181)。由于雙螺旋DNA的光吸收比單鏈DNA少40。當(dāng)DNA溶液溫度升高到接近水的沸點(diǎn)時(shí),光吸收值(ABSBANCE)在260NM處明顯增加,這種現(xiàn)象稱為增色效應(yīng)(HYPERCHROMICITY);而減色效應(yīng)則是因?yàn)殡p螺旋DNA中的堿基堆積降低了對(duì)紫外線的吸收能力。吸光度增加到最大值一半時(shí)的溫度叫做DNA的熔點(diǎn)(MELTINGPOINT)。5連環(huán)數(shù)由扭轉(zhuǎn)數(shù)和纏繞數(shù)共同決定連環(huán)數(shù)由扭轉(zhuǎn)數(shù)和纏繞數(shù)共同決定答連環(huán)數(shù)(連環(huán)數(shù)(LINKINGNUMBER)是指要使兩條鏈完全分開時(shí),一條鏈必須穿過另一條鏈的)是指要使兩條鏈完全分開時(shí),一條鏈必須穿過另一條鏈的次數(shù)(用次數(shù)(用LK表示)表示)。連環(huán)數(shù)是扭轉(zhuǎn)數(shù)(TWISTNUMBER,用TW)和纏繞數(shù)(WRITHENUMBER,用WR表示)這兩個(gè)幾何數(shù)的總和。扭轉(zhuǎn)數(shù)僅僅是一條鏈旋繞另一條鏈的螺旋數(shù),即一條鏈完全纏繞另一條鏈的次數(shù)。在三維空間里雙螺旋的長(zhǎng)軸經(jīng)常重復(fù)地自我交叉,這稱為纏繞數(shù)。6細(xì)胞中細(xì)胞中DNA呈負(fù)超螺旋的意義呈負(fù)超螺旋的意義答負(fù)超螺旋含有自由能,可以為打開雙鏈提供能量,使DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄這樣的解離雙鏈的過程得以順利完成。因?yàn)長(zhǎng)KTWWR,負(fù)超螺旋可以讓雙螺旋扭轉(zhuǎn)數(shù)減少,負(fù)超螺旋區(qū)域因而有局部解旋傾向。因此,與松弛態(tài)DNA相比負(fù)超螺旋DNA更易于解鏈。7拓?fù)洚悩?gòu)酶有拓?fù)洚悩?gòu)酶有2種基本類型種基本類型答拓?fù)洚悩?gòu)酶(拓?fù)洚悩?gòu)酶(TOPOISOMERASE)可以催化)可以催化DNA產(chǎn)生瞬時(shí)單鏈或雙鏈的斷裂而改變連環(huán)產(chǎn)生瞬時(shí)單鏈或雙鏈的斷裂而改變連環(huán)數(shù)。數(shù)。拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ通過兩步改變DNA連環(huán)數(shù)。它們?cè)贒NA上產(chǎn)生一瞬時(shí)的雙鏈缺口,并在缺口閉合以前使一小段未被切割的雙螺旋DNA穿過這一缺口。拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ依靠ATP水解提供的能量來催化這一反應(yīng)。相反,拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ一步就可以改變DNA的連環(huán)數(shù),其作用是使DNA暫時(shí)產(chǎn)生單鏈切口,讓未被切割的另一單鏈在切口接合之前穿過這一切口。與拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ相比,拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ不需要ATP。原核生物還擁有一種特殊的拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ,通稱為促旋酶,它引入而不是去除負(fù)超螺旋。8RNA的結(jié)構(gòu)與功能的結(jié)構(gòu)與功能答RNA與DNA的3個(gè)不同之處第一,RNA骨架含有核糖,而不是2’脫氧核糖,也就是說在核糖的C2’的位置上帶有一個(gè)羥基。第二,RNA中尿嘧啶(URACIL)取代了胸腺嘧啶,尿嘧啶有著和胸腺嘧啶相同的單環(huán)
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    • 簡(jiǎn)介:中科院中科院1996生化與分子生化與分子一、是非題10分。每題答對(duì)得1分,打錯(cuò)到扣半分,不答者倒扣。1、米氏常數(shù)(KM)是與反應(yīng)系統(tǒng)的酶濃度無關(guān)的一個(gè)常數(shù)。2、與肌紅蛋白不同,血紅蛋白由四個(gè)亞基組成,因此提高了它與氧的結(jié)合能力,從而增加了輸氧的功能。3、維生素D和甲狀腺激素的受體都在靶細(xì)胞核內(nèi)。4、凝膠過濾法可用于測(cè)定蛋白的分子量,分子量小的蛋白質(zhì)先從柱上流出,分子量大的后流出。5、兩條單獨(dú)肽鏈經(jīng)鏈間二硫交聯(lián),組成蛋白質(zhì)分子,這兩條肽鏈?zhǔn)窃摰鞍椎膬蓚€(gè)亞基。6、哺乳動(dòng)物無氧下不能存活,因?yàn)槠咸烟墙徒獠荒芎铣葾TP。7、體細(xì)胞(雙倍體)DNA含量約為生殖細(xì)胞DNA含量的兩倍。8、真核生物的基因不組成操縱子,不形成多順子MRNA。9、光合作用的總反應(yīng)中,H2O中的氧參入到葡萄糖中去。10、真核細(xì)胞和原核細(xì)胞核糖體中的RNA的數(shù)目和種類是相同的。二、選擇題20分。答錯(cuò)不倒扣分。1、從血紅蛋白規(guī)水解得到的氨基酸的手性光學(xué)性質(zhì)A都是L型的;B。都是左旋的;C。并非都是L型的;D。有D型的也有L型的。2、生物膜的厚度在A100NM左右B10NM左右C1NM左右3、真核生物中經(jīng)RNA聚合酶Ⅲ催化轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物是AMRNABHNRNACRRNA和5SRNADTRNA和5SRNA4、消化系統(tǒng)的水解酶,大多是以非活性的酶原形式合成出來的,但也有例外,如A核糖核酸酶B羥肽酶C胃蛋白酶5、在染色體中DNA的構(gòu)型主要是AA型BB型CC型DZ型6、超過濾于凝膠過濾A是兩種性質(zhì)不同,用處不同的蛋白質(zhì)制備方法B是一種性質(zhì),但表現(xiàn)方法不同的蛋白質(zhì)制備方法C是同一種方法的兩種名詞7、研究蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)常用氧化法打開二硫鍵,所用的化學(xué)試劑是A亞硝酸B過氯酸C硫酸D過甲酸8、雄激素對(duì)物質(zhì)代謝最顯著的一項(xiàng)重要作用是A促進(jìn)肝臟糖原分解B增加脂肪貯存C加強(qiáng)蛋白質(zhì)的同化作用D。鉀、鈣、磷等物質(zhì)的吸收9、核苷酸從頭合成中,嘧啶環(huán)的1位氮原子來自A天冬氨酸B賴氨酸C谷氨酰胺D甘氨酸10、羧肽酶C專門水解C端倒數(shù)第二位是哪個(gè)氨基酸形成的肽鏈A精氨酸B賴氨酸C脯氨酸11、將RNA轉(zhuǎn)移到硝基纖維素膜上的技術(shù)叫ASOUTHERNBLOTTINGBNTHERNBLOTTINGCWESTERNBLOTTINGDEASTERNBLOTTING12、甘氨酸的解離常數(shù)分別為K1234和K2960,它的等電點(diǎn)(PI)是A726B597C714D107713、對(duì)一個(gè)克隆的DNA片段做物理圖譜分析,需要用A核酸外切酶B限制性內(nèi)切酶CDNA連接酶D脫氧核糖核酸酶14、原核生物基因上游的TATA盒一般處于什么區(qū)A10B35C200D1K15、通常使用什么測(cè)定多肽鏈的氨基末端ACNBRB丹磺酰氯C6NHCLD胰蛋白酶16、蛋白質(zhì)的變形伴隨著結(jié)構(gòu)上的變化是A肽鍵的斷裂B丹基酸殘基的化學(xué)修飾C一些側(cè)鏈基團(tuán)的暴露D二硫鍵的折開17、生物膜主要成分是脂質(zhì)蛋白質(zhì),其主要通過什么相連接A氫鍵B離子鍵C疏水作用D共價(jià)鍵18、粗糙型內(nèi)質(zhì)網(wǎng)系的主要功能是A糖類的合成B脂類的合成C分泌性蛋白質(zhì)的合成D必需氨基酸的合成19、脂肪酸的合成中,每次肽鏈的延長(zhǎng)都需要什么參加A乙酰輔酶AB草酰乙酸C丙二酸單酰輔酶AD甲硫氨酸20、PPGPP在下列情況下被合成A細(xì)菌缺乏氮源時(shí)B細(xì)菌缺乏碳源時(shí)C細(xì)菌在環(huán)境溫度太高時(shí)D細(xì)菌在環(huán)境溫度太低時(shí)三、填空題(6題共40空格,共40分)1、按勞取酬MICHAELIS公式,當(dāng)V分別為09VMAX和01VMAX時(shí),它們相應(yīng)的底物濃度的比值S09S01應(yīng)為。2、染色質(zhì)中的DNA主要是以與結(jié)合成復(fù)合體的形式存在,并形成串珠狀的結(jié)構(gòu)。3、一個(gè)有效的自殺性抑制必須具備⑴⑵⑶。4、核酸中的嘌呤環(huán)有四個(gè)氮原子,生物合成時(shí)分別來自、和。酸,產(chǎn)物為溶血磷脂、脂肪酸、甘油磷脂含膽堿;磷脂酶C作用于磷脂C3的磷脂酰鍵,產(chǎn)物為甘油二酯和磷酸含氮堿;磷脂酶D作用于磷酸與含氮堿之間的酯鍵,產(chǎn)物是磷脂酸和含氮堿。3、酶作用的專一性學(xué)說的基本要點(diǎn)是,酶分子中存在有一個(gè)識(shí)別底物的結(jié)合位點(diǎn),同時(shí)酶分子還存在著一個(gè)可以誘導(dǎo)底物結(jié)構(gòu)發(fā)生變化的反映變化的催化位點(diǎn)。包括沒作用的專一性學(xué)說在內(nèi)的機(jī)體重的任何一種分子鍵的相互作用都是生物界和生物分子長(zhǎng)期進(jìn)化的結(jié)果。主要有①鎖鑰學(xué)說②誘導(dǎo)契合學(xué)會(huì)說酶受底物誘導(dǎo)而變形③張力學(xué)說底物變性以時(shí)應(yīng)酶4、⑴轉(zhuǎn)錄酶,即DNA指導(dǎo)下的RNA合成酶,催化的反映MATPNGTPPCTPQUTPRNAMNPQPPI⑵逆轉(zhuǎn)錄酶即RNA指導(dǎo)下的DNA合成酶,此酶有三種活性,主要催化MDATPNDGTPPDCTPQDUTPDNAMNPQPPI逆轉(zhuǎn)錄酶的另外兩個(gè)活性是水解和新合成DNA雜交中作為逆轉(zhuǎn)錄模板的RNA,以及指導(dǎo)有新合成的DNA復(fù)制DNA。5、DNA復(fù)制開始處的幾個(gè)核苷酸最容易出錯(cuò),用RNA引用即使出現(xiàn)差錯(cuò)最后也要被DNA聚合酶Ⅰ切除,提高了DNA復(fù)制的準(zhǔn)確性;DNA聚合酶本身具有校對(duì)作用,可以將不正確插入的核苷酸切除掉,重新加上正確的核苷酸。這樣對(duì)每個(gè)核苷酸的摻入就有兩次機(jī)會(huì)。首先按堿基配對(duì)原則,錯(cuò)誤核苷酸插入的幾率為104105,然后DNA聚合酶本身的校對(duì)作用又可以是錯(cuò)誤核苷酸摻入的幾率為1081010。另外,DNA合成起始時(shí),岡崎片段合成開始時(shí)都有RNA。由于RNA最終也要被切除掉,這樣就提高了DNA復(fù)制的準(zhǔn)確性。中科院中科院1997生化與分子生化與分子一、是非題。12分。每題答對(duì)得1分,打錯(cuò)到扣半分,不答者倒扣。答“是”寫“”,答“非”寫“”。1、因?yàn)榻z氨酸,蘇氨酸,酪氨酸都是蛋白質(zhì)磷酸化的位點(diǎn),因此所有蛋白質(zhì)激酶均能使蛋白質(zhì)中這三種氨基酸殘基磷酸化。2、蛋白質(zhì)的變形作用的實(shí)質(zhì)就是蛋白質(zhì)分子中所有的鍵均被破環(huán)引起天然構(gòu)象的解體。3、蛋白質(zhì)分子中的結(jié)構(gòu)域(DOMAIN)、亞基(SUBUNIT)、紋基(MOTIF)都是相同的概念。4、水是不能通透紙雙層膜的。5、蛋白激酶屬于磷酸轉(zhuǎn)移酶類,催化磷酸根共價(jià)轉(zhuǎn)移到蛋白質(zhì)分子上的反應(yīng)。6、具有正協(xié)同效應(yīng)的酶,其HILL系數(shù)總是大于1的。7、MRNA的編碼區(qū)不含有修飾核苷酸。8、核糖上被甲基化的胞嘧啶核苷被表示為CM。9、攜帶同一種氨基酸的不同TRNA稱為TRNA的等受體,它們之間的差異在于反密碼。10、植物能利用氨或硝銨為氮源合成氨基酸,但不能利用空氣中的氮。11、逆轉(zhuǎn)錄酶僅具有RNA指導(dǎo)的DNA聚合酶的活性。12、氨基酸的碳骨架進(jìn)行氧化分解時(shí),先要形成能夠進(jìn)入三羧酸循環(huán)的化合物。二、選擇題20分。答錯(cuò)不倒扣分。1、在凝血過程中發(fā)揮作用的許多凝血因子的生物合成依賴于下述哪一種維生素A維生素KB維生素EC維生素CD維生素A2、目前已經(jīng)知道某種金屬離子在細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)使細(xì)胞供能時(shí)起十分重要作用,它是ANABKCCA2DMG23、鐮刀狀細(xì)胞血病是最早被認(rèn)識(shí)的一種分子病,它是由于血紅蛋白的兩條B鏈中的兩個(gè)谷氨酸分別為下屬的氨基酸所代替A丙氨酸B纈氨酸C絲氨酸D蘇氨酸4、1996年P(guān)。C。DOHERTY和R。M。ZINKERNAGEL因?yàn)橄铝心囊活I(lǐng)域研究的重要貢獻(xiàn)而獲諾貝爾醫(yī)學(xué)和生理學(xué)費(fèi)A發(fā)育生物學(xué)B免疫學(xué)C分子病毒學(xué)D結(jié)構(gòu)生活生物學(xué)5、形成穩(wěn)定的肽鏈空間結(jié)構(gòu),非常重要的一點(diǎn)是肽鍵中的四個(gè)原子以及和相鄰的兩個(gè)碳原子處于A不斷擾動(dòng)狀態(tài)B可以相對(duì)自由旋轉(zhuǎn)C同一平面D雖不同外界環(huán)境而變化的狀態(tài)6、三羧酸循環(huán)中,下列哪一個(gè)酶不是調(diào)控酶A檸檬酸合成酶B異檸檬酸脫氫酶C蘋果酸脫氫酶D酮戊二酸脫氫酶7、以下酶中哪一個(gè)是屬于黃素核苷酸與酶蛋白以共價(jià)鍵相連的ANADH脫氫酶B甘油磷酸脫氫酶C膽堿脫氫酶D琥珀酸脫氫酶8、在酶的雙倒數(shù)作圖中,只改變斜率不改變橫軸截矩的抑制劑屬于A非競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑B競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑C反競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑9、A提高反應(yīng)的活化能B降低反應(yīng)的活化能C促使正向反應(yīng)速度提高10、端粒酶(TOLERMERASE)是屬于A限制性內(nèi)切酶BDNA聚合酶CRNA聚合酶
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    • 簡(jiǎn)介:第2章可移動(dòng)的遺傳因子可移動(dòng)的遺傳因子1轉(zhuǎn)座子是誰最早從什么物種中發(fā)現(xiàn)的轉(zhuǎn)座子是誰最早從什么物種中發(fā)現(xiàn)的麥克林托克(BARBARAMCCLINTOCK)玉米2掌握轉(zhuǎn)座子的概念和分布。掌握轉(zhuǎn)座子的概念和分布。概念概念細(xì)胞內(nèi)的可移動(dòng)遺傳因子指可以在同一細(xì)胞中基因組內(nèi)或一個(gè)細(xì)胞的基因組從一個(gè)位點(diǎn)移動(dòng)到另一位點(diǎn)的DNA片斷。廣義的概念,凡是細(xì)胞內(nèi)可以移動(dòng)的因子,都叫轉(zhuǎn)座子分布分布病毒、真核生物、原核生物(質(zhì)?;蚪M)3掌握轉(zhuǎn)座子的分類和各類的特點(diǎn)掌握轉(zhuǎn)座子的分類和各類的特點(diǎn)。非復(fù)制型轉(zhuǎn)座非復(fù)制型轉(zhuǎn)座轉(zhuǎn)座時(shí),轉(zhuǎn)座子DNA作為一個(gè)整體,從原來的供體位置被切割下來,然后轉(zhuǎn)移到染色體的另外一個(gè)位置。復(fù)制型轉(zhuǎn)座復(fù)制型轉(zhuǎn)座轉(zhuǎn)座時(shí),原來的轉(zhuǎn)座子DNA不從原來的位置被切割下來,而是在轉(zhuǎn)座的過程中原來的轉(zhuǎn)座子DNA得到復(fù)制,并轉(zhuǎn)移到染色體的另外的地方。原來的拷貝“原件”沒有發(fā)生位移。逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子將轉(zhuǎn)座的片段轉(zhuǎn)錄成RNA,再通過逆轉(zhuǎn)錄酶將RNA反轉(zhuǎn)錄成CDNA,插入寄主染色體中。4所有轉(zhuǎn)座子都具有的結(jié)構(gòu)特征和共同特點(diǎn)是什么所有轉(zhuǎn)座子都具有的結(jié)構(gòu)特征和共同特點(diǎn)是什么轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)座子都具有的結(jié)構(gòu)特征結(jié)構(gòu)特征都有一個(gè)保守序列、一個(gè)或多個(gè)開放閱讀框,兩側(cè)是反向末端重復(fù)序列(反向重復(fù)序列為轉(zhuǎn)座子所必須,是轉(zhuǎn)座酶識(shí)別的底物)共同特點(diǎn)共同特點(diǎn)1兩端具有末端反向重復(fù)序列2轉(zhuǎn)座后靶位點(diǎn)重復(fù)是正向重復(fù)3編碼一些與轉(zhuǎn)座有關(guān)的蛋白4可以在基因組中移動(dòng)5最簡(jiǎn)單的轉(zhuǎn)座子的結(jié)構(gòu)特征。最簡(jiǎn)單的轉(zhuǎn)座子的結(jié)構(gòu)特征。最簡(jiǎn)單的轉(zhuǎn)座子最簡(jiǎn)單的轉(zhuǎn)座子不含有任何的宿主基因,常被稱為插入序列(插入序列(ISIS),這種插入序列是細(xì)菌染色體或質(zhì)粒DNA的正常組成部分。ISIS的結(jié)構(gòu)特征的結(jié)構(gòu)特征DNA的兩個(gè)末端是反向重復(fù)序列(又稱倒置重復(fù)序列),中間是一個(gè)閱讀框,編碼一個(gè)與轉(zhuǎn)座有關(guān)的轉(zhuǎn)座酶基因。除此之外,IS序列中沒有其他的基因。6什么是復(fù)合轉(zhuǎn)座子。什么是復(fù)合轉(zhuǎn)座子。復(fù)合轉(zhuǎn)座子的概念復(fù)合轉(zhuǎn)座子的概念是一類比較復(fù)雜的轉(zhuǎn)座子帶有一些抗藥性基因或其他宿主基因,其兩端多數(shù)是高度同源的或相同的IS序列(反向重復(fù)區(qū))(少數(shù)是正向重復(fù)序列)。反向重復(fù)長(zhǎng)度是38BP,產(chǎn)生的靶位點(diǎn)是5BP的正向重復(fù)。1010玉米中的最常見的轉(zhuǎn)座子系統(tǒng)是什么玉米中的最常見的轉(zhuǎn)座子系統(tǒng)是什么ACDSACDS系統(tǒng)系統(tǒng)(激活(激活解離系統(tǒng))解離系統(tǒng))激活因子激活因子ACAC和解離因子和解離因子DSDS屬于同一家族控制因子屬于同一家族控制因子ACAC是自主因子是自主因子,編碼有活性的轉(zhuǎn)座酶,能發(fā)生自主轉(zhuǎn)座DSDS是非自主因子是非自主因子,與ACAC同源,只是不同程度缺失了中間序列,失去轉(zhuǎn)座酶的功能,但是同源,只是不同程度缺失了中間序列,失去轉(zhuǎn)座酶的功能,但是兩末端兩末端IRIR(反向重復(fù)序列)存在并且完整(反向重復(fù)序列)存在并且完整。它本身不能轉(zhuǎn)座,但有AC存在時(shí)通過反式轉(zhuǎn)座酶激活而轉(zhuǎn)移到新的位置。真核生物轉(zhuǎn)座因子通常以非復(fù)制方式轉(zhuǎn)座真核生物轉(zhuǎn)座因子通常以非復(fù)制方式轉(zhuǎn)座,而且總是只轉(zhuǎn)移到鄰近的位置。玉米的玉米的DSDS因子插入新靶位點(diǎn)之后,原來位置上即失去因子插入新靶位點(diǎn)之后,原來位置上即失去DSDS因子。結(jié)果因子。結(jié)果可造成染色體斷裂或重排,由此引起顯性基因丟失,隱性基因得以表達(dá)??稍斐扇旧w斷裂或重排,由此引起顯性基因丟失,隱性基因得以表達(dá)。(EG紫白玉米粒)1111什么是逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子什么是逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子是指基因組中的雙鏈DNA,可以在基因組內(nèi)發(fā)生轉(zhuǎn)座而移動(dòng)。(但與DNA轉(zhuǎn)座子不同,逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)座時(shí)先將自身的DNA序列轉(zhuǎn)錄成RNA,然后再反轉(zhuǎn)錄成DNA,插入宿主基因組中。)逆轉(zhuǎn)座子一般分為2類病毒類超家族和非病毒類超家族1212逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座與復(fù)制轉(zhuǎn)座有什么異同逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座與復(fù)制轉(zhuǎn)座有什么異同異逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)座時(shí)先將自身的DNA序列轉(zhuǎn)錄成RNA,然后再反轉(zhuǎn)錄成DNA,插入宿主基因組中同逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子在插入位點(diǎn)兩側(cè)在插入位點(diǎn)兩側(cè)也有正向重復(fù)序列正向重復(fù)序列,這是所有轉(zhuǎn)座子的共同特征這是所有轉(zhuǎn)座子的共同特征PS轉(zhuǎn)座有兩種方式復(fù)制轉(zhuǎn)座和非復(fù)制轉(zhuǎn)座在非復(fù)制型轉(zhuǎn)座中只有轉(zhuǎn)座酶參與。在復(fù)制型轉(zhuǎn)座中,轉(zhuǎn)座酶(TRANSPOSASE)作用于原來的“原件”,而解離酶RESOLVASE作用于復(fù)制的轉(zhuǎn)座子。復(fù)制轉(zhuǎn)座的基本過程也稱為對(duì)稱模型,轉(zhuǎn)座發(fā)生開始時(shí),由轉(zhuǎn)座酶在轉(zhuǎn)座子兩端交錯(cuò)切開產(chǎn)生2個(gè)單鏈切口NICK,同時(shí)在受體分子的位點(diǎn)處也被交錯(cuò)切開產(chǎn)生2個(gè)切口,這樣一共有4個(gè)切口,它們交錯(cuò)連接,形成復(fù)合物,稱為共整合體COINTEGRATE,其中包含有2個(gè)類似復(fù)制叉的結(jié)構(gòu)隨后它們分別進(jìn)行復(fù)制,填補(bǔ)空隙,最后復(fù)合物分開形成2個(gè)獨(dú)立的分子。這些步驟由解離酶完成。在這個(gè)過程中,轉(zhuǎn)座子的序列被復(fù)制一次,轉(zhuǎn)移到受體分子上,完成轉(zhuǎn)座。1313什么是質(zhì)粒什么叫什么是質(zhì)粒什么叫R質(zhì)粒質(zhì)粒(見笑笑打印第一頁(yè)背面)(見笑笑打印第一頁(yè)背面)1414掌握一些概念低拷貝質(zhì)粒和高拷貝質(zhì)粒,嚴(yán)緊型復(fù)制控制掌握一些概念低拷貝質(zhì)粒和高拷貝質(zhì)粒,嚴(yán)緊型復(fù)制控制”的質(zhì)粒和的質(zhì)粒和“松弛型復(fù)制控制,質(zhì)粒的不相容性,結(jié)合型質(zhì)粒,自主轉(zhuǎn)移質(zhì)粒,非結(jié)合型質(zhì)弛型復(fù)制控制,質(zhì)粒的不相容性,結(jié)合型質(zhì)粒,自主轉(zhuǎn)移質(zhì)粒,非結(jié)合型質(zhì)粒,粒,2ΜM2ΜM質(zhì)粒(見笑笑打印第一頁(yè)背面)質(zhì)粒(見笑笑打印第一頁(yè)背面)
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    • 簡(jiǎn)介:注意注意每人答案務(wù)必不能完全一樣每人答案務(wù)必不能完全一樣4試述酵母雙雜交系統(tǒng)的原理、構(gòu)建及基本用途。試述酵母雙雜交系統(tǒng)的原理、構(gòu)建及基本用途。1212分第一種答酵母雙雜交系統(tǒng)酵母雙雜交系統(tǒng)是一項(xiàng)專門用來研究蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)相互作用的技術(shù),它首先由FIELDSS和SONGOK于1989年提出。這項(xiàng)新技術(shù)在驗(yàn)證已知蛋白質(zhì)之間的相互作用或篩選與特定靶蛋白呈特異性作用的候選蛋白的研究中已經(jīng)得到了廣泛的應(yīng)用。其可行性和有效性已被證實(shí),并被推廣到了諸如信號(hào)傳導(dǎo)、細(xì)胞周期調(diào)控、腫瘤基因表達(dá)等多個(gè)研究領(lǐng)域,受到越來越多的重視。酵母雙雜交系統(tǒng)的原理酵母雙雜交系統(tǒng)的原理酵母雙雜交系統(tǒng)技術(shù)使用蛋白質(zhì)的兩種具有特別功能的結(jié)構(gòu)域一種是與DNA結(jié)合的結(jié)合結(jié)構(gòu)域(簡(jiǎn)稱BD),另一種是激活DNA轉(zhuǎn)錄的激活結(jié)構(gòu)域(簡(jiǎn)稱AD)。研究表明,這兩種結(jié)構(gòu)域并不需要一定在同一個(gè)蛋白質(zhì)上才起作用。事實(shí)上,一個(gè)含有BD的蛋白質(zhì)在與另一個(gè)含有AD的蛋白質(zhì)結(jié)合以后就可以激活轉(zhuǎn)錄,該原理構(gòu)成了酵母雙雜交技術(shù)的基礎(chǔ)。在雙雜交系統(tǒng)中,兩種融合蛋白被表達(dá)一種是目標(biāo)蛋白X,它有時(shí)被形象地稱為誘餌蛋白。X在它的N端與BD融合在一起;另一種是潛在的能夠與X結(jié)合的目標(biāo)蛋白Y。Y與AD融合在一起。如果X與Y相互作用,那么XY的結(jié)合就形成一種完整的活性轉(zhuǎn)錄激活物。如此形成的轉(zhuǎn)錄激活物能夠驅(qū)動(dòng)一個(gè)容易檢測(cè)的報(bào)告基因的表達(dá)。于是,報(bào)告基因的表達(dá)量可以用來作為測(cè)定X與Y相互作用的尺度。酵母雙雜交系統(tǒng)的建立酵母雙雜交系統(tǒng)的建立1選擇載體2將“誘餌”蛋白X的基因和目標(biāo)蛋白Y的基因分別插入到BD載體和AD載體之中,以形成BDX和ADY融合蛋白3轉(zhuǎn)染使用特定的手段將重組后的BDX載體和ADY載體轉(zhuǎn)染到特定的營(yíng)養(yǎng)缺陷型酵母宿主細(xì)胞;4篩選利用雙營(yíng)養(yǎng)缺陷型的恢復(fù)篩選出同時(shí)含有BD載體和AD載體的細(xì)胞;5活性檢測(cè)。應(yīng)用1發(fā)現(xiàn)新的蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)的新功能發(fā)現(xiàn)新的蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)的新功能2在細(xì)胞體內(nèi)研究抗原和抗體的相互作用在細(xì)胞體內(nèi)研究抗原和抗體的相互作用3篩選藥物作用位點(diǎn)及藥物對(duì)蛋白相互作用影響篩選藥物作用位點(diǎn)及藥物對(duì)蛋白相互作用影響4建立基因組蛋白建立基因組蛋白連鎖圖鎖圖特點(diǎn)與意義(1)表達(dá)具有組織特異性和階段特異性。即在不同組織中表達(dá)有不同類型的MIRNA在生物發(fā)育的不同階段里有不同的MIRNA表達(dá)。(2)(2)MIRNA具有高度保守性,即各種MIRNA都能在其他種系中找到同源體。(2)(3)與靶MRNA3’UTR結(jié)合,序列特異性的在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控基因的翻譯表達(dá)。一些偏大的MIRNA27NT可能參與了基因組的重組裝。(2)(4)MIRNA獨(dú)有的特征其5’端第一個(gè)堿基對(duì)U有強(qiáng)烈的傾向性,而對(duì)G卻有抗性,但第二到第四個(gè)堿基缺乏U,一般來講,除第四個(gè)堿基外,其他位置堿基通常都缺乏C。(2)(5)MIRNA執(zhí)行一定的生物學(xué)功能在生長(zhǎng)發(fā)育、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、免疫調(diào)節(jié)、細(xì)胞周期、細(xì)胞的分化、增殖和凋亡以及腫瘤發(fā)生等方面發(fā)揮著重要作用。(2)1、RNARNA干擾的發(fā)現(xiàn)和原理干擾的發(fā)現(xiàn)和原理RNA干擾是指通過雙鏈RNA使目的MRNA降解,從而特異性地抑制目的蛋白表達(dá)的現(xiàn)象。RNA干擾是普遍存在于真菌、植物、果蠅等各類真核生物之中的現(xiàn)象,類似于一種古老的免疫機(jī)制。1990年,NAPOLI教授在研究矮牽?;ú闋柾驎r(shí)發(fā)現(xiàn)了基因共抑制現(xiàn)象(COSUPPRESSION)1。她在體外構(gòu)建了控制矮牽?;ɑㄉ幕虿闋柾蚱?,連上花椰菜花葉病毒的35S啟動(dòng)子,連入農(nóng)桿菌的TDNA質(zhì)粒,在矮牽?;ㄖ羞^度表達(dá)。她原先預(yù)期,查爾酮的過度表達(dá)能加深牽?;ɑㄉ淖仙?,但是結(jié)果卻導(dǎo)致了矮牽?;ㄗ哟ㄉ耐噬?,內(nèi)源性的查爾酮遭到沉默。NAPOLI教授把這一現(xiàn)象稱之為內(nèi)源性基因共抑制現(xiàn)象。1998年,REWJHAMILTON教授研究了番茄ACC氧化酶基因的基因共抑制現(xiàn)象。他利用放射性標(biāo)記法和放線菌酮處理法分析轉(zhuǎn)錄后ACC氧化酶基因的MRNA和成熟MRNA。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,外源重組基因片段能成功轉(zhuǎn)錄,但是MRNA成功轉(zhuǎn)錄出后,因?yàn)槟撤N原因發(fā)生了轉(zhuǎn)錄后基因沉默(POSTTRANIONALGENESILENCINGPTGS)2。因此,REWJHAMILTON認(rèn)為內(nèi)源性基因共抑制現(xiàn)象屬于轉(zhuǎn)錄后的基因沉默現(xiàn)象。1998年,F(xiàn)IRE和MELLO課題組接手了GUO教授研究的秀麗新小桿線蟲發(fā)育過程中的一個(gè)關(guān)鍵基因PAR13的課題。他們以秀麗新小桿線蟲為模型,發(fā)現(xiàn)在GUO的課題中,引發(fā)線蟲PAR1基因沉默的是小片段的雙鏈RNA4,而不是正義單鏈RNA或負(fù)義單鏈RNA。他們之后又研究了秀麗新小桿線蟲的UNC22基因,進(jìn)一步闡述了雙鏈RNA在基因沉默中的作用,并創(chuàng)造性地使用了“RNA干擾”這個(gè)名詞。他們的研究成果激起了其他科學(xué)家研究RNA干擾現(xiàn)象的濃厚興趣,由于他們的發(fā)現(xiàn)揭示了分子生物學(xué)中一個(gè)全新的,具有普遍性的機(jī)制,REWFIRECRAIGCMELLO兩位科學(xué)家因此在2006年獲得諾貝爾獎(jiǎng)
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    • 簡(jiǎn)介:2010年高等分子生物學(xué)高等分子生物學(xué)第1頁(yè),共頁(yè),共8頁(yè)高級(jí)分子生物學(xué)高級(jí)分子生物學(xué)1試述利用基因工程的技術(shù)調(diào)控基因表達(dá)的主要方法試述利用基因工程的技術(shù)調(diào)控基因表達(dá)的主要方法原位雜交技術(shù)原位雜交技術(shù)原位雜交INSITUHYBRIDIZATIONISH是用標(biāo)記的核酸探針,經(jīng)放射自顯影或非放射檢測(cè)體系,在組織、細(xì)胞、間期核及染色體上對(duì)核酸進(jìn)行定位和相對(duì)定量研究的一種手段。通??梢苑譃閮纱箢?、RNA原位雜交用放射性或非放射性如地高辛、生物素等標(biāo)記的特異性探針與被固定的組織切片反應(yīng),若細(xì)胞中存在與探針互補(bǔ)的MRNA分子,兩者雜交產(chǎn)生雙鏈RNA,就可以通過檢測(cè)放射性標(biāo)記或經(jīng)酶促免疫顯色,對(duì)該基因的表達(dá)產(chǎn)物在細(xì)胞水平上作出定性定量分析;2、熒光原位雜交FLUESCENCEINSITUHYBRIDIZATIONFISH首先對(duì)于寡核苷酸探針做特殊修飾和標(biāo)記,然后用原位雜交法與靶染色體或DNA上特定的序列結(jié)合,再通過與熒光素分子相偶聯(lián)的單克隆抗體來確定該DNA序列在染色體的位置。定點(diǎn)突變技術(shù)定點(diǎn)突變技術(shù)定點(diǎn)突變是重組DNA進(jìn)化的基礎(chǔ),該方法通過改變基因特定位點(diǎn)核苷酸序列來改變所編碼的氨基酸序列,常用于研究某個(gè)氨基酸殘基對(duì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)、催化活性以及結(jié)合配體能力的影響,也可用于改造DNA調(diào)控元件特征序列、修飾表達(dá)載體、引入新的酶切位點(diǎn)等。RNAI技術(shù)技術(shù)RNA干擾RNAINTERFERENCERNAI技術(shù)利用雙鏈小RNA高效、特異性降解細(xì)胞內(nèi)同源MRNA,從而阻斷體內(nèi)靶基因表達(dá),使細(xì)胞出現(xiàn)靶基因缺失的表型。其過程一般為1、在DICER的參與下,細(xì)胞中的雙鏈RNA首先被降解形成2125個(gè)核苷酸的小片段雙鏈RNASIRNA;2、SIRNA中的反義鏈指導(dǎo)合成一種被稱為RNA誘導(dǎo)的沉默復(fù)合體RISC的核蛋白體;3、RISC再介導(dǎo)切割目的MRNA分子中與SIRNA反義鏈互補(bǔ)的區(qū)域,從而實(shí)現(xiàn)干擾基因表達(dá)的功能。2論述原核生物和真核生物基因表達(dá)調(diào)控的異同論述原核生物和真核生物基因表達(dá)調(diào)控的異同答答1、真核生物基因組大染色體數(shù)量多且結(jié)構(gòu)復(fù)雜存在基因家族和斷裂基因;原核生物基因組小染色體數(shù)量少結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單有重疊基因和操縱子結(jié)構(gòu),基因表達(dá)調(diào)控可以在復(fù)制、擴(kuò)增、基因激活、轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)錄后、翻譯和翻譯后等多級(jí)水平上進(jìn)行但轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控是主要的。真核生物基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制發(fā)生在染色體活化、基因轉(zhuǎn)錄激活、轉(zhuǎn)錄后加工、翻譯及翻譯后加工等多水平的調(diào)節(jié),事件也復(fù)雜的多。2、真核生物基因表達(dá)以正調(diào)控為主,基因的轉(zhuǎn)錄與染色質(zhì)的結(jié)構(gòu)變化相關(guān)真核基因轉(zhuǎn)錄發(fā)生在細(xì)胞核線粒體基因的轉(zhuǎn)錄在線粒體內(nèi)需對(duì)內(nèi)含子精確剪接加工,翻譯則多在胞漿兩個(gè)過程是分開的?;虮磉_(dá)調(diào)控的環(huán)節(jié)比原核生物更多。原核生物中營(yíng)養(yǎng)條件和環(huán)境因素對(duì)基因表達(dá)調(diào)控起舉足輕重的作用,MRNA在形成過程中與核糖體混合在一起,即轉(zhuǎn)錄和翻譯過程相耦聯(lián)。3簡(jiǎn)述簡(jiǎn)述Α互補(bǔ)篩選(藍(lán)白斑篩選)互補(bǔ)篩選(藍(lán)白斑篩選)適用于含有半乳糖苷酶基因(LACZ)的載體,如PUC系列等,其原理是載體含有LACZ的調(diào)控序列和N端146個(gè)氨基酸的編碼信息。在這個(gè)編碼區(qū)中插入了一個(gè)多克隆位點(diǎn)。當(dāng)這種載體進(jìn)入可編碼Β半乳糖苷酶C端部分序列的宿主細(xì)胞后(質(zhì)粒和宿主細(xì)胞編碼的片段各自都沒有酶活性),它們可以融為一體,形成具有酶學(xué)活性的蛋白質(zhì),這種現(xiàn)象叫Α互補(bǔ)。由Α互補(bǔ)而產(chǎn)生的LAC細(xì)菌在呈色底2010年高等分子生物學(xué)高等分子生物學(xué)第3頁(yè),共頁(yè),共8頁(yè)O基因結(jié)合的阻遏蛋白,使操縱子受阻遏而處于轉(zhuǎn)錄失活狀態(tài)。在P上游還有一個(gè)分解(代謝)物基因激活蛋白CAP結(jié)合位點(diǎn)。由P序列、O序列和CAP結(jié)合位點(diǎn)共同構(gòu)成LAC操縱子的調(diào)控區(qū),三個(gè)酶的編碼基因由同一調(diào)控區(qū)調(diào)節(jié),實(shí)現(xiàn)基因產(chǎn)物的協(xié)調(diào)表達(dá)。調(diào)節(jié)機(jī)制分阻遏蛋白的負(fù)調(diào)控與CAP的正調(diào)控兩種機(jī)制,互相協(xié)調(diào)、互相制約。1、阻遏蛋白的負(fù)調(diào)節(jié)在沒有乳糖存在時(shí),I基因表達(dá)的乳糖阻遏蛋白與O序列結(jié)合,阻斷轉(zhuǎn)錄啟動(dòng);當(dāng)有乳糖存在時(shí),經(jīng)透酶催化、轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)入細(xì)胞,再經(jīng)原先存在于細(xì)胞中的少數(shù)Β半乳糖苷酶催化,轉(zhuǎn)變?yōu)閯e乳糖,與阻遏蛋白結(jié)合,導(dǎo)致阻遏蛋白與O序列解離、發(fā)生轉(zhuǎn)錄,使Β半乳糖苷酶分子急劇增加。2、CAP的正調(diào)節(jié)當(dāng)沒有葡萄糖及CAMP濃度較高時(shí),CAMP與CAP結(jié)合,這時(shí)CAP結(jié)合在乳糖啟動(dòng)序列附近的CAP位點(diǎn),可刺激RNA轉(zhuǎn)錄活性;當(dāng)葡萄糖存在時(shí),CAMP濃度降低,CAMP與CAP結(jié)合受阻,因此乳糖操縱子表達(dá)下降。8試說明真核細(xì)胞與原核細(xì)胞在基因轉(zhuǎn)錄,翻譯及試說明真核細(xì)胞與原核細(xì)胞在基因轉(zhuǎn)錄,翻譯及DNA的空間結(jié)構(gòu)方面存在的主要差異,表現(xiàn)在哪些的空間結(jié)構(gòu)方面存在的主要差異,表現(xiàn)在哪些方面方面比較原核、真核基因組異同比較原核、真核基因組異同(1)染色體方面原核生物為環(huán)狀DNA分子,且DNA裸露或結(jié)合少量蛋白質(zhì),只有一個(gè)基因連鎖群;真核生物為線性雙鏈DNA分子,且DNA同組蛋白和非組蛋白結(jié)合,有2個(gè)以上基因連鎖群。(2)染色體遺傳物質(zhì)原核生物為質(zhì)粒,真核生物為細(xì)胞器基因組。(3)轉(zhuǎn)錄單元原核生物為多順反子,真核生物為單順反子,基因家族。(4)DNA序列原核生物無或很少有重復(fù)序列,真核生物有重復(fù)序列。(5)基因表達(dá)原核生物RNA和蛋白質(zhì)在同一區(qū)間合成,有重疊基因;真核生物RNA在核中合成和加工,蛋白質(zhì)在細(xì)胞中合成,有斷裂基因。比較原核、真核生物的轉(zhuǎn)錄過程異同比較原核、真核生物的轉(zhuǎn)錄過程異同答原核生物①起始過程需RNA聚合酶核心酶,由Σ亞基辨認(rèn)起始點(diǎn)(35BP區(qū))。在這一區(qū)段酶與模板的結(jié)合松弛,酶移向10區(qū)并跨入轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)。②延長(zhǎng)過程的核苷酸聚合僅需核心酶催化。③終止分依賴Ρ因子的和不依賴Ρ因子的轉(zhuǎn)錄終止。真核生物①轉(zhuǎn)錄起始前的25BP區(qū)段有啟動(dòng)子的核心序列TATABOX。此外DNA分子上還具有其他可影響轉(zhuǎn)錄的順式作用元件,以及能辨認(rèn)和結(jié)合轉(zhuǎn)錄上游區(qū)段的反式作用因子。真核生物RNA聚合酶不與DNA分子直接結(jié)合,而需依靠眾多的轉(zhuǎn)錄因子。②真核生物的轉(zhuǎn)錄延長(zhǎng)過程與原核生物大致相似。③真核生物MRNA有POLYA尾結(jié)構(gòu),是轉(zhuǎn)錄后才加進(jìn)去的。轉(zhuǎn)錄不是在POLYA位置上終止,而是超過數(shù)百甚至上千核苷酸后才停頓。比較原核、真核生物的翻譯異同比較原核、真核生物的翻譯異同1、原核生物與真核生物核蛋白體的組成不同。2、真核生物肽鏈合成起始過程與原核生物相似但更復(fù)雜。真核生物有不同的翻譯起始成分,起始因子
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    • 簡(jiǎn)介:11、生物大分子種類、生物大分子種類蛋白質(zhì)、糖類、脂類、核酸12、生物大分子的相互作用力、生物大分子的相互作用力(主要是非共價(jià)作用力,即次級(jí)鍵,包括氫鍵、范德華引力、疏水作用力、鹽鍵等)21、MIRNA又稱微小RNA,是指植物和動(dòng)物細(xì)胞中自然產(chǎn)生的一類長(zhǎng)度為1825BP的小分子RNA。31、順反子、順反子(遺傳學(xué)上的最小單位)是一段核苷酸序列,能編碼一條完整的多肽鏈,這種多肽鏈既可以是一種生物活性的蛋白質(zhì),也可與其他多肽聚合而形成復(fù)雜的蛋白質(zhì)。順反子中最小交換單位(交換子)和最小突變單位(突變子)都是DNA分子中的一個(gè)核苷酸對(duì)。32、在不連續(xù)基因中有編碼功能的區(qū)段稱為外顯子外顯子(EXON),無編碼功能的區(qū)段稱為內(nèi)含子(內(nèi)含子(INTRON)。33、F可讀框,是指從起始密碼子起到終止密碼子為止的一段連續(xù)的密碼子區(qū)域,或在DNA序列測(cè)定中由計(jì)算機(jī)系統(tǒng)辨別認(rèn)出的可能的編碼區(qū)域41、8參與參與DNA復(fù)制有關(guān)的酶和蛋白質(zhì)復(fù)制有關(guān)的酶和蛋白質(zhì)(1)、DNAA識(shí)別起始序列,在起始特異性位置解開雙鏈、(2)、DNAB解開DNA雙鏈、(3)、DNAC幫助DNAB結(jié)合于起點(diǎn)、(4)、HU類組蛋白,DNA結(jié)合蛋白,促進(jìn)起始(5)、DNAG引物合成酶合成RNA引物的2條單鏈在同一部位斷裂,斷裂的游離末端彼此交換形成異源雙鏈,然后2條雜合單鏈彼此連接形成HOLLIDAY連接體。是用來解釋同源重組現(xiàn)象。64、轉(zhuǎn)座子(轉(zhuǎn)座子(TRANSPOSON)是在基因組中可以移動(dòng)的一段DNA序列。類型插入序列(插入序列(IONSEQUENCE,IS,簡(jiǎn)稱簡(jiǎn)稱IS因子)因子),最簡(jiǎn)單的轉(zhuǎn)座子;復(fù)合轉(zhuǎn)座子復(fù)合轉(zhuǎn)座子,這類轉(zhuǎn)座子中除了有轉(zhuǎn)座酶基因外,還帶有藥物抗性基因(或其相關(guān)基因),因結(jié)構(gòu)較大而復(fù)雜。65、復(fù)合型轉(zhuǎn)座子與、復(fù)合型轉(zhuǎn)座子與IS元件異同元件異同復(fù)合型轉(zhuǎn)座子特點(diǎn)復(fù)合型轉(zhuǎn)座子特點(diǎn)(1)末端有反向重復(fù)序列,為轉(zhuǎn)座酶所必須(2)中間有F作為標(biāo)記基因(3)轉(zhuǎn)座后,把位點(diǎn)大都成為正向重復(fù)序列。異同點(diǎn)異同點(diǎn)IS元件較小,含一個(gè)轉(zhuǎn)座酶基因,編碼與轉(zhuǎn)座有關(guān)的蛋白質(zhì);兩側(cè)為短的末端反向重復(fù)序列。復(fù)合型轉(zhuǎn)座子較大而復(fù)雜;含一個(gè)轉(zhuǎn)座酶基因,基因末端為反向重復(fù)序列;中間含有標(biāo)記基因、轉(zhuǎn)為后,靶位點(diǎn)成正向重復(fù)序列。71、原核RNA轉(zhuǎn)錄的一般過程。72、簡(jiǎn)述真核與原核生物基因轉(zhuǎn)錄的差異(1)原核只有一種RNA聚合酶,真核有三種(2)啟動(dòng)子結(jié)構(gòu)不同,真核有三種不同的啟動(dòng)子和相關(guān)元件(3)真核RNAPOL高度分工,核內(nèi)三種RNA聚合酶分別轉(zhuǎn)錄不同類
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    • 簡(jiǎn)介:碩士研究生分子生物學(xué)復(fù)習(xí)(碩士研究生分子生物學(xué)復(fù)習(xí)(JUJU)一、名詞解釋1基因(GENE)是指核酸分子中貯存遺傳信息的遺傳單位,是指貯存有功能的蛋白質(zhì)多肽鏈或RNA序列信息及表達(dá)這些信息所必需的全部核苷酸序列。2基因組(GENOME)是指細(xì)胞或生物體中,一套完整單倍體的遺傳物質(zhì)的總和。基因組的結(jié)構(gòu)主要指不同的基因功能區(qū)域在核酸分子中的分布和排列情況,基因組的功能是儲(chǔ)存和表達(dá)遺傳信息。3基因家族(GENEFAMILY)是指核苷酸序列或編碼產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)具有一定程度同源性的一組基因。同一個(gè)家族的基因成員是由同一祖先基因進(jìn)化而來。4假基因(PSEUDOGENE)在多基因家族中,某些成員并不能表達(dá)出有功能的產(chǎn)物,這些基因稱為假基因,用Ψ表示。假基因與有功能的基因同源,原來也可能是有功能的基因,由于缺失、倒位或點(diǎn)突變等原因失去活性,成為無功能的基因,它們或者不能轉(zhuǎn)錄,或者轉(zhuǎn)錄后生成無功能的異常多肽。5質(zhì)粒(PLAS)是存在于細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)中的一類獨(dú)立于染色體的遺傳成分,它是由環(huán)形雙鏈DNA組成的復(fù)制子。質(zhì)粒DNA分子可以持續(xù)穩(wěn)定的處于染色體外的游離狀態(tài),但在一定條件下又會(huì)可逆的整合到宿主染色體上,隨染色體的復(fù)制而復(fù)制,并通過細(xì)胞分裂傳遞到后代。6基因超家族(GENESUPERFAMILY)是指一組由多基因家族及單基因組成的更大的基因家族。它們的結(jié)構(gòu)有程度不等的同源性,可能是由于基因擴(kuò)增后又經(jīng)過結(jié)構(gòu)上的輕微改變,因此它們可能都起源于相同的祖先基因。但是它們的功能并不一定相同,這一點(diǎn)正是與多基因家族的差別。這些基因在進(jìn)化上也有親緣關(guān)系,但親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。如免疫球蛋白超家族。7衛(wèi)星DNA(SATELLITEDNA)為非編碼區(qū)串聯(lián)重復(fù)序列。通常存在于內(nèi)含子和間隔DNA內(nèi)。重復(fù)次數(shù)從數(shù)次至數(shù)百次,甚至幾十萬次,串聯(lián)重復(fù)單位從最短的2BP起,長(zhǎng)短不等。這類重復(fù)順序組成衛(wèi)星DNA的基礎(chǔ)??煞譃槿惔螅。⑿l(wèi)星DNA。8基因多態(tài)性是指由于等位基因間在特定位點(diǎn)上DNA序列存在差異造成的,一般發(fā)生在基因序列中不編碼蛋白質(zhì)的區(qū)域和沒有重要調(diào)節(jié)功能的區(qū)域。9操縱子(OPERAT)是阻遏蛋白識(shí)別與結(jié)合的一小段DNA序列,轉(zhuǎn)錄過程存在阻遏調(diào)控機(jī)制的基因中均含有這樣的序列。操縱子緊接在啟動(dòng)子下游,通常與啟動(dòng)子有部分重疊。10順式作用元件(CISACTINGELEMENTS)是指那些與結(jié)構(gòu)基因表達(dá)調(diào)控相關(guān)、能夠被基因調(diào)控蛋白特異性識(shí)別和結(jié)合的DNA序列。原核生物中主要是啟動(dòng)子、阻遏蛋白結(jié)合位點(diǎn)、正調(diào)控蛋白結(jié)合位點(diǎn)、增強(qiáng)子等。真核生物中包括啟動(dòng)子、上游啟動(dòng)子元件、增強(qiáng)子、加尾信號(hào)和一些反應(yīng)元件等。11反式作用因子(TRANSACTINGELEMENTS)在真核生物中,基因特異性轉(zhuǎn)錄因子稱為反式作用因子,這些因子通常是通過與增強(qiáng)子或上游啟動(dòng)元件結(jié)合而發(fā)揮作用。反式作用因子通過與通用轉(zhuǎn)錄因子及RNA聚合酶相互作用而刺激轉(zhuǎn)錄,這些相互作用促進(jìn)前起始復(fù)合物的形成。12增強(qiáng)子(ENHANCER)是一種較短的DNA序列,能夠被反式作用因子識(shí)別與結(jié)合。反式作用因子與增強(qiáng)子元件結(jié)合后能夠調(diào)控(通常為增強(qiáng))臨近基因的轉(zhuǎn)錄。增強(qiáng)子序列通常是數(shù)個(gè)形成一簇,位于轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)上游100300BP處,但在基因之外或某些內(nèi)含子中也有增強(qiáng)子序列。13啟動(dòng)子(PROMOTER)是RNA聚合酶特異性識(shí)別和結(jié)合的DNA序列。啟動(dòng)子具互補(bǔ)的機(jī)制結(jié)合到MRNA上,抑制其轉(zhuǎn)錄或直接導(dǎo)致其降解,從而抑制基因表達(dá)。有高等生物基因組編碼,在物種進(jìn)化中相當(dāng)保守。MIRNAS的表達(dá)具組織特異性和時(shí)序性,在細(xì)胞生長(zhǎng)和發(fā)育過程的調(diào)節(jié)中起多種作用22反義RNA(ANTISENSERNA)其堿基序列正好與MRNA互補(bǔ),從而可與MRNA配對(duì)結(jié)合形成雙鏈,抑制MRNA作為模板進(jìn)行翻譯。23轉(zhuǎn)染(TRANSFECTION)指真核細(xì)胞主動(dòng)攝取或被動(dòng)導(dǎo)入外源DNA片段而獲得新的表型的過程。24轉(zhuǎn)化(TRANSFMATION)是指將質(zhì)?;蚱渌庠碊NA導(dǎo)入處于感受態(tài)的宿主細(xì)胞,并使之獲得新的表型的過程。轉(zhuǎn)化現(xiàn)象在自然界普遍存在,是常見的基因轉(zhuǎn)移方式之一。25基因表達(dá)是指生物基因組中結(jié)構(gòu)基因所攜帶的遺傳信息經(jīng)過轉(zhuǎn)錄、翻譯等一系列過程,合成特定的蛋白質(zhì),進(jìn)而發(fā)揮其特定的生物學(xué)功能和效應(yīng)的全過程。但并非所有基因表達(dá)過程都產(chǎn)生蛋白質(zhì),RRNA、TRNA編碼基因轉(zhuǎn)錄生成RNA的過程也屬于基因表達(dá)。26限制性核酸內(nèi)切酶(RESTRICTIONENDONUCLEASE)是一類能識(shí)別雙鏈DNA分子中特定核苷酸序列,并在識(shí)別序列內(nèi)或附近特異切割雙鏈DNA的核酸內(nèi)切酶。27基因組學(xué)(GENOMICS)指對(duì)所有基因進(jìn)行基因組作圖(包括遺傳圖譜、物理圖譜、轉(zhuǎn)錄圖譜),核酸序列分析,基因定位和基因功能分析的一門科學(xué)。包括結(jié)構(gòu)基因組學(xué)、功能基因組學(xué)、比較基因組學(xué)。28蛋白質(zhì)組學(xué)(PROTEOMICS)是對(duì)不同時(shí)間和空間發(fā)揮功能的特定蛋白群體的研究,它是指從整體角度分析細(xì)胞內(nèi)動(dòng)態(tài)變化的蛋白質(zhì)組成分、表達(dá)水平與修飾狀態(tài),了解蛋白質(zhì)之間的相互作用與聯(lián)系,揭示蛋白質(zhì)功能與細(xì)胞生命活動(dòng)規(guī)律的一個(gè)新的研究領(lǐng)域。蛋白質(zhì)組學(xué)的研究技術(shù)體系包括樣品制備,雙向聚丙烯酰胺凝膠電泳,蛋白質(zhì)的染色,凝膠圖像分析,蛋白質(zhì)分析,蛋白質(zhì)組數(shù)據(jù)庫(kù)等。/是指對(duì)在一定時(shí)間內(nèi)或某一特定環(huán)境條件下,細(xì)胞、組織或有機(jī)體內(nèi)所表達(dá)的所有蛋白質(zhì)(即蛋白質(zhì)組)進(jìn)行系統(tǒng)的、總的研究的一門學(xué)科。(旨在闡明生物體全部蛋白質(zhì)的表達(dá)模式和功能模式,內(nèi)容包括鑒定蛋白質(zhì)表達(dá)、存在方式、結(jié)構(gòu)、功能的互相作用方式等,它不同于傳統(tǒng)的蛋白質(zhì)學(xué)科,是在生物體或其細(xì)胞的整體蛋白質(zhì)水平上進(jìn)行的,從一個(gè)機(jī)體或一個(gè)細(xì)胞的蛋白質(zhì)整體活動(dòng)來揭示生命規(guī)律。包括表達(dá)蛋白質(zhì)組學(xué)和細(xì)胞圖形(功能)蛋白質(zhì)組學(xué)。)29順反子(CISTRON)編碼單條多肽鏈的一個(gè)遺傳功能單位,即轉(zhuǎn)錄單位。有單順反子和多順反子。/即是由結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄出的、并作為模板與核蛋白體結(jié)合、指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成的一類RNA分子。在真核細(xì)胞中一種MRNA分子只能翻譯出一種蛋白質(zhì),為單順反子。在原核細(xì)胞中一種MRNA分子可翻譯出多種蛋白質(zhì),為多順反子。二、問答題1真核生物基因組結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。P351)結(jié)構(gòu)基因)結(jié)構(gòu)基因真核生物的結(jié)構(gòu)基因是不連續(xù)的,編碼氨基酸的序列被非編碼序列打斷,因而被成為斷裂基因。編碼序列之間的序列稱為內(nèi)含子,被隔開的編碼序列稱為外顯子。2)順式調(diào)控元件)順式調(diào)控元件是指那些與結(jié)構(gòu)基因表達(dá)調(diào)控相關(guān)、能夠被基因調(diào)控蛋白特異性識(shí)別和結(jié)合的DNA序列。包括啟動(dòng)子、上游啟動(dòng)子元件、增強(qiáng)子、加尾信號(hào)和一些反應(yīng)元件等。3)基因家族)基因家族是指核苷酸序列或編碼產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)具有一定程度同源性的一組基因。同一個(gè)家族
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    • 簡(jiǎn)介:第一章第一章蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能1、蛋白質(zhì)的基本組成單位和平均含氮量。蛋白質(zhì)的基本組成單位和平均含氮量。基本組成單位為氨基酸。組成蛋白質(zhì)的元素主要有C、H、O、N和S。有些蛋白質(zhì)還含有少量的P、FE、CU、MN、ZN、SE、I等。各種蛋白質(zhì)的含氮量很接近,平均為16%2、2020種氨基酸的結(jié)構(gòu)及三字母英文縮寫。種氨基酸的結(jié)構(gòu)及三字母英文縮寫。(P9P9)含羥基的氨基酸SER、TYR、THR,其易被磷酸化。含硫的氨基酸半胱氨酸(SH)、胱氨酸、蛋氨酸(SCH3,又叫甲硫氨酸)。芳香族氨基酸TYR、TRP、PHE天冬酰胺、谷氨酰胺酰胺基團(tuán)CONH2脯氨酸屬于亞氨基酸(NH)酸性氨基酸ASP、GLU堿性氨基酸ARG、LYS、HIS3、氨基酸的理化性質(zhì)。氨基酸的理化性質(zhì)。①氨基酸具有兩性解離的性質(zhì)等電點(diǎn)(ISOELECTRICPOINTPI)在某一PH的溶液中,氨基酸解離成陽(yáng)離子和陰離子的趨勢(shì)及程度相等,成為兼性離子,呈電中性。此時(shí)溶液的PH值稱為該氨基酸的等電點(diǎn)。②含共軛雙鍵的氨基酸具有紫外線吸收性質(zhì)測(cè)定蛋白質(zhì)溶液280NM的光吸收值是分析溶液中蛋白質(zhì)含量的快速簡(jiǎn)便的方法。③氨基酸與茚三酮反應(yīng)生成藍(lán)紫色化合物,最大吸收峰在570NM處。4、蛋白質(zhì)一級(jí)、二級(jí)、三級(jí)和四級(jí)結(jié)構(gòu)的概念及維系其穩(wěn)定的化學(xué)鍵。蛋白質(zhì)一級(jí)、二級(jí)、三級(jí)和四級(jí)結(jié)構(gòu)的概念及維系其穩(wěn)定的化學(xué)鍵。①氨基酸的排列順序決定蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)(PRIMARYSTRUCTUREOFPROTEIN)指蛋白質(zhì)多肽鏈從N端至C端的氨基酸殘基排列順序即氨基酸的線性序列。在基因編碼的蛋白質(zhì)中,這種序列是由MRNA中的核苷酸序列決定的。一級(jí)結(jié)構(gòu)主要的化學(xué)鍵肽鍵②多肽鏈的局部主鏈構(gòu)象為蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)SECONDARYSTRUCTUREOFPROTEIN蛋白質(zhì)分子中某一段肽鏈的局部空間結(jié)構(gòu)即該段肽鏈主鏈骨架原子的相對(duì)空間位置,不涉及氨基酸殘基側(cè)鏈的構(gòu)象。維系二級(jí)結(jié)構(gòu)的化學(xué)鍵氫鍵③三級(jí)結(jié)構(gòu)是指整條肽鏈中全部氨基酸殘基的相對(duì)空間位置,即肽鏈中所有原子在三維空間的排布位置。主要的化學(xué)鍵次級(jí)鍵。疏水作用、離子鍵、氫鍵、VANDERWAALS力。④含有二條以上多肽鏈的蛋白質(zhì)才可能具有四級(jí)結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)分子中各亞基的空間排布及亞基接觸部位的布局和相互作用,稱為蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu)。亞基之間的結(jié)合力主要是氫鍵和離子鍵非共價(jià)鍵5、肽單元和蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)的主要類型。肽單元和蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)的主要類型。肽單元參與肽鍵的6個(gè)原子CΑ1、C、O、N、H、CΑ2位于同一平面,此同一平面上的6個(gè)原子構(gòu)成了所謂的肽單元(PEPTIDEUNIT)。這一平面又被稱為肽平面PEPTIDEPLANE或酰胺平面AEPLANE。肽單元是肽鏈折疊盤曲的基本單位。二級(jí)結(jié)構(gòu)的類型Α螺旋、Β折疊、Β轉(zhuǎn)角、無規(guī)卷曲6、蛋白質(zhì)超二級(jí)結(jié)構(gòu)、模體、結(jié)構(gòu)域、亞基、蛋白質(zhì)等電點(diǎn)的概念。蛋白質(zhì)超二級(jí)結(jié)構(gòu)、模體、結(jié)構(gòu)域、亞基、蛋白質(zhì)等電點(diǎn)的概念。超二級(jí)結(jié)構(gòu)超二級(jí)結(jié)構(gòu)在許多蛋白質(zhì)分子中,可發(fā)現(xiàn)二個(gè)或三個(gè)具有二級(jí)結(jié)構(gòu)的肽段,在空間上相互接近,形成一個(gè)有規(guī)則的二級(jí)結(jié)構(gòu)組合,被稱為超二級(jí)結(jié)構(gòu)。模體模體是蛋白質(zhì)分子中具有特定空間構(gòu)象和特定功能的結(jié)構(gòu)成分,其中一類就是具有特殊功能的超二級(jí)結(jié)構(gòu)。一個(gè)模體總有其特征性的氨基酸序列,并發(fā)揮特殊的功能。結(jié)構(gòu)域結(jié)構(gòu)域分子量較大的蛋白質(zhì)常可折疊成多個(gè)結(jié)構(gòu)較為緊密且穩(wěn)定的區(qū)域,并各行其功度等)作用下,DNA雙鏈的互補(bǔ)堿基對(duì)之間的氫鍵斷裂,解開成兩條單鏈的現(xiàn)象。DNA變性的本質(zhì)是雙鏈間氫鍵的斷裂,只改變其二級(jí)結(jié)構(gòu),不改變其核苷酸排列順序。在去除變性因素,并在適當(dāng)條件下,變性DNA的兩條互補(bǔ)單鏈可恢復(fù)天然的雙螺旋構(gòu)象,這一現(xiàn)象稱為復(fù)性RENATURATION。101010、、DNADNADNA的增色效應(yīng)和解鏈溫度的概念的增色效應(yīng)和解鏈溫度的概念的增色效應(yīng)和解鏈溫度的概念的增色效應(yīng)和解鏈溫度的概念增色效應(yīng)(HYPERCHROMICEFFECT)在DNA解鏈過程中,由于有更多的共軛雙鍵得以暴露,DNA在260NM處的吸光度隨之增加。。在解鏈過程中,紫外吸光度的變化ΔA260達(dá)到最大變化值的一半時(shí)所對(duì)應(yīng)的溫度稱為DNA的解鏈溫度(融解溫度),又稱TM。其大小與GC含量成正比。熟悉熟悉DNADNA的超螺旋結(jié)構(gòu)(的超螺旋結(jié)構(gòu)(P43P43。核酸的分子雜交。核酸的分子雜交P53P53。第三章第三章酶1、酶、酶酶是由活細(xì)胞產(chǎn)生的、對(duì)其底物具有高度特異性和高度催化效能的蛋白質(zhì)是機(jī)體內(nèi)催化代謝反應(yīng)最主要的催化劑。2、單純酶、單純酶有些酶其分子結(jié)構(gòu)僅由氨基酸殘基組成,沒有輔助因子。這類酶稱為單純酶(SIMPLEENZYME)。3、結(jié)合酶、結(jié)合酶結(jié)合酶(CONJUGATEDENZYME)是除了在其組成中含有由氨基酸組成的蛋白質(zhì)部分外,還含有非蛋白質(zhì)部分。酶的分子組成,酶蛋白和輔因子的作用。4、必需基團(tuán)、必需基團(tuán)必需基團(tuán)ESSENTIALGROUP酶分子氨基酸殘基側(cè)鏈的化學(xué)基團(tuán)中,一些與酶活性密切相關(guān)的化學(xué)基團(tuán)。5、酶活性中心的概念、酶活性中心的概念酶的活性中心或活性部位(ACTIVESITE)是酶分子中能與底物特異地結(jié)合并催化底物轉(zhuǎn)變?yōu)楫a(chǎn)物的具有特定三維結(jié)構(gòu)的區(qū)域。6、同工酶的概念、同工酶的概念同工酶ISOENZYMEAISUENZAIM是指催化相同的化學(xué)反應(yīng),但酶蛋白的分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)乃至免疫學(xué)性質(zhì)不同的一組酶。7、酶促反應(yīng)的特點(diǎn)、酶促反應(yīng)的特點(diǎn)1、酶促反應(yīng)具有極高的效率2、酶促反應(yīng)具有高度的特異性3、酶促反應(yīng)具有可調(diào)節(jié)性4、酶促反應(yīng)高度的不穩(wěn)定性8、酶促反應(yīng)特異性的類型酶促反應(yīng)特異性的類型絕對(duì)特異性ABSOLUTESPECIFICITY只能作用于特定結(jié)構(gòu)的底物,進(jìn)行一種專一的反應(yīng),生成一種特定結(jié)構(gòu)的產(chǎn)物。相對(duì)特異性RELATIVESPECIFICITY作用于一類化合物或一種化學(xué)鍵。9、影響酶促反應(yīng)速度的因素、影響酶促反應(yīng)速度的因素酶濃度、底物濃度、PH、溫度、抑制劑、激活劑等。10、米氏方程及、米氏方程及KM的意義的意義VVMAXSKMSS底物濃度V不同S時(shí)的反應(yīng)速度VMAX最大反應(yīng)速度MAXIMUMVELOCITYKM米氏常數(shù)MICHAELISCONSTANT1KM值等于酶促反應(yīng)速率為最大反應(yīng)速率一半時(shí)的底物濃度2KM值是酶的特征性常數(shù)3KM在一定條件下可表示酶對(duì)底物的親和力KM越大,表示酶對(duì)底物的親和力越??;KM越小,表示酶對(duì)底物的親和力越大。4VMAX是酶被底物完全飽和時(shí)的反應(yīng)速率11、不可逆抑制作用、不可逆抑制作用抑制劑以共價(jià)鍵與酶活性中心的必需基團(tuán)相結(jié)合,使酶失活。12、可逆性抑制作用、可逆性抑制作用①競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用抑制劑與底物的結(jié)構(gòu)相似,能與底物競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合酶的活性中心,從而阻礙酶底物復(fù)合物的形成,使酶活性受到抑制,稱為競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用。抑制程度取決于抑制劑與酶的相對(duì)親和力和與底物濃度的相對(duì)比例。②非競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用有些抑制劑與酶活性中心外的必需基團(tuán)相結(jié)合,不影響酶與底物的結(jié)合,酶和底物的結(jié)合也不影響酶與抑制劑的結(jié)合。底物和抑制劑之間無競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系。但酶底物抑制劑復(fù)合物ESI不能進(jìn)一步釋放出產(chǎn)物。這種抑制作用稱作非競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用。③反競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用抑制劑僅與酶和底物形成的中間產(chǎn)物ES結(jié)合,使中間產(chǎn)物ES的量下降。這樣,既
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    • 簡(jiǎn)介:生化名解生化名解1、肽單元(、肽單元(PEPTIDEPEPTIDEUNITUNIT)參與肽鍵的參與肽鍵的6個(gè)原子個(gè)原子CA1CA1、C、O、N、H、CA2CA2位于同一平面于同一平面CA1CA1和CA2CA2在平面上所處的位置為反式構(gòu)型,此同一平面上的在平面上所處的位置為反式構(gòu)型,此同一平面上的6個(gè)原子構(gòu)成了肽單元,它是蛋白質(zhì)分子構(gòu)象的結(jié)構(gòu)單元。原子構(gòu)成了肽單元,它是蛋白質(zhì)分子構(gòu)象的結(jié)構(gòu)單元。CACA是兩個(gè)肽平面的連接是兩個(gè)肽平面的連接點(diǎn),兩個(gè)肽平面可經(jīng)點(diǎn),兩個(gè)肽平面可經(jīng)CACA的單鍵進(jìn)行旋轉(zhuǎn),的單鍵進(jìn)行旋轉(zhuǎn),NCACA、CACAC是單鍵,可自由旋是單鍵,可自由旋轉(zhuǎn)。轉(zhuǎn)。2、結(jié)構(gòu)域(、結(jié)構(gòu)域(DOMAINDOMAIN)分子量大的蛋白質(zhì)三級(jí)結(jié)構(gòu)??煞指畛煞肿恿看蟮牡鞍踪|(zhì)三級(jí)結(jié)構(gòu)??煞指畛?個(gè)和數(shù)個(gè)球狀個(gè)和數(shù)個(gè)球狀或纖維狀的區(qū)域,折疊得較為緊密,具有獨(dú)立的生物學(xué)功能,大多數(shù)結(jié)構(gòu)域含或纖維狀的區(qū)域,折疊得較為緊密,具有獨(dú)立的生物學(xué)功能,大多數(shù)結(jié)構(gòu)域含有序列上連續(xù)的有序列上連續(xù)的100100200200個(gè)氨基酸殘基,若用限制性蛋白酶水解,含多個(gè)結(jié)構(gòu)個(gè)氨基酸殘基,若用限制性蛋白酶水解,含多個(gè)結(jié)構(gòu)域的蛋白質(zhì)常分成數(shù)個(gè)結(jié)構(gòu)域,但各結(jié)構(gòu)域的構(gòu)象基本不變。域的蛋白質(zhì)常分成數(shù)個(gè)結(jié)構(gòu)域,但各結(jié)構(gòu)域的構(gòu)象基本不變。3、模體(、模體(MOTIFMOTIF在許多蛋白質(zhì)分子中,二個(gè)或三個(gè)具有二級(jí)結(jié)構(gòu)的肽段,在在許多蛋白質(zhì)分子中,二個(gè)或三個(gè)具有二級(jí)結(jié)構(gòu)的肽段,在空間上相互接近,形成一個(gè)特殊的空間構(gòu)象。一個(gè)模序總有其特征性的氨基酸空間上相互接近,形成一個(gè)特殊的空間構(gòu)象。一個(gè)模序總有其特征性的氨基酸序列,并發(fā)揮特殊功能,如鋅指結(jié)構(gòu)。序列,并發(fā)揮特殊功能,如鋅指結(jié)構(gòu)。4、蛋白質(zhì)變性、蛋白質(zhì)變性DENATURATIONDENATURATION在某些物理和化學(xué)因素作用下,其特定的空間在某些物理和化學(xué)因素作用下,其特定的空間構(gòu)象被破壞,也即有序的空間結(jié)構(gòu)變成無序的空間結(jié)構(gòu),從而導(dǎo)致其理化性質(zhì)構(gòu)象被破壞,也即有序的空間結(jié)構(gòu)變成無序的空間結(jié)構(gòu),從而導(dǎo)致其理化性質(zhì)的改變和生物活性的喪失。主要發(fā)生二硫鍵與非共價(jià)鍵的破壞,不涉及一級(jí)結(jié)的改變和生物活性的喪失。主要發(fā)生二硫鍵與非共價(jià)鍵的破壞,不涉及一級(jí)結(jié)構(gòu)中氨基酸序列的改變,變性的蛋白質(zhì)易沉淀,沉淀的蛋白質(zhì)不一定變性。構(gòu)中氨基酸序列的改變,變性的蛋白質(zhì)易沉淀,沉淀的蛋白質(zhì)不一定變性。5、蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)、蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)ISOELECTRICISOELECTRICPOINTPOINTPIPI當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)溶液處于某一當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)溶液處于某一PHPH時(shí),時(shí),蛋白質(zhì)解離成正、負(fù)離子的趨勢(shì)相等,即成為兼性離子,蛋白質(zhì)所帶的正負(fù)電蛋白質(zhì)解離成正、負(fù)離子的趨勢(shì)相等,即成為兼性離子,蛋白質(zhì)所帶的正負(fù)電荷相等,凈電荷為零,此時(shí)溶液的荷相等,凈電荷為零,此時(shí)溶液的PHPH稱為蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)。稱為蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)。6、酶(、酶(ENZYMEENZYME)酶是一類對(duì)其特異底物具有高效催化作用的蛋白質(zhì)或核酸,酶是一類對(duì)其特異底物具有高效催化作用的蛋白質(zhì)或核酸,通過降低反應(yīng)的活化能催化反應(yīng)進(jìn)行。酶的不同形式有單體酶,寡聚酶,多酶通過降低反應(yīng)的活化能催化反應(yīng)進(jìn)行。酶的不同形式有單體酶,寡聚酶,多酶體系和多功能酶,酶的分子組成可分為單純酶和結(jié)合酶。酶不改變反應(yīng)的平體系和多功能酶,酶的分子組成可分為單純酶和結(jié)合酶。酶不改變反應(yīng)的平衡,只是通過降低活化能加快反應(yīng)的速度。(不考)衡,只是通過降低活化能加快反應(yīng)的速度。(不考)7、酶的活性中心、酶的活性中心ACTIVEACTIVECENTERCENTEROFOFENZYMESENZYMES酶分子中與酶活性密切相關(guān)的酶分子中與酶活性密切相關(guān)的基團(tuán)在空間結(jié)構(gòu)上彼此靠近,組成具有特定空間結(jié)構(gòu)的區(qū)域,能與底物特異結(jié)基團(tuán)在空間結(jié)構(gòu)上彼此靠近,組成具有特定空間結(jié)構(gòu)的區(qū)域,能與底物特異結(jié)合并將底物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物。參與酶活性中心的必需基團(tuán)有結(jié)合底物,使底物與酶合并將底物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物。參與酶活性中心的必需基團(tuán)有結(jié)合底物,使底物與酶形成一定構(gòu)象復(fù)合物的結(jié)合基團(tuán)和影響底物中某些化學(xué)鍵穩(wěn)定性,催化底物發(fā)形成一定構(gòu)象復(fù)合物的結(jié)合基團(tuán)和影響底物中某些化學(xué)鍵穩(wěn)定性,催化底物發(fā)生化學(xué)反應(yīng)并將其轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物的催化基團(tuán)?;钚灾行耐膺€有維持酶活性中心應(yīng)生化學(xué)反應(yīng)并將其轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物的催化基團(tuán)?;钚灾行耐膺€有維持酶活性中心應(yīng)有的空間構(gòu)象的必需基團(tuán)。有的空間構(gòu)象的必需基團(tuán)。8、酶的變構(gòu)調(diào)節(jié)、酶的變構(gòu)調(diào)節(jié)ALLOSTERICALLOSTERICREGULATIONREGULATIONOFOFENZYMESENZYMES一些代謝物可與某些一些代謝物可與某些化生成化生成ATPATP(GTPGTP)的過程。)的過程。1515、乳酸循環(huán)(、乳酸循環(huán)(LACTATELACTATECYCLECYCLECICICYCLECYCLE)肌收縮(尤其是供氧不足時(shí)))肌收縮(尤其是供氧不足時(shí))通過糖酵解生成乳酸。肌內(nèi)糖異生活性低,所以乳酸通過細(xì)胞膜彌散進(jìn)入血液通過糖酵解生成乳酸。肌內(nèi)糖異生活性低,所以乳酸通過細(xì)胞膜彌散進(jìn)入血液后,再入肝,在肝內(nèi)異生為葡萄糖。葡萄糖釋入血液后又可被肌攝取,這就構(gòu)后,再入肝,在肝內(nèi)異生為葡萄糖。葡萄糖釋入血液后又可被肌攝取,這就構(gòu)成了一個(gè)循環(huán),此循環(huán)稱為乳酸循環(huán),也稱成了一個(gè)循環(huán),此循環(huán)稱為乳酸循環(huán),也稱CICI循環(huán),生理意義乳酸再利循環(huán),生理意義乳酸再利用,避免了乳酸的損失,防止乳酸的堆積引起酸中毒,間接調(diào)節(jié)血糖。用,避免了乳酸的損失,防止乳酸的堆積引起酸中毒,間接調(diào)節(jié)血糖。1616、脂肪動(dòng)員、脂肪動(dòng)員FATFATMOBILIZATIONMOBILIZATION是指儲(chǔ)存在脂肪細(xì)胞中的脂肪,被脂肪酶逐是指儲(chǔ)存在脂肪細(xì)胞中的脂肪,被脂肪酶逐步水解為步水解為FFAFFA及甘油,并釋放入血以供其他組織氧化利用的過程。在脂肪動(dòng)員及甘油,并釋放入血以供其他組織氧化利用的過程。在脂肪動(dòng)員中,激素敏感性三酰甘油脂肪酶(中,激素敏感性三酰甘油脂肪酶(HSLHSL)是限速酶。)是限速酶。1717、脂肪酸的、脂肪酸的Β氧化(氧化(ΒOXIDATIONOXIDATIONOFOFFATTYFATTYACIDACID)脂酰)脂酰COACOA進(jìn)入線粒體基進(jìn)入線粒體基質(zhì)后,在脂肪酸的質(zhì)后,在脂肪酸的Β氧化多酶復(fù)合體的催化下從脂?;难趸嗝笍?fù)合體的催化下從脂?;摩⑻荚娱_始,進(jìn)碳原子開始,進(jìn)行脫氫、加水、再脫氫、硫解四步連續(xù)反應(yīng),脂?;鶖嗔焉梢环肿右阴P忻摎?、加水、再脫氫、硫解四步連續(xù)反應(yīng),脂?;鶖嗔焉梢环肿右阴OACOA及一分子比原來少兩個(gè)碳原子的脂酰及一分子比原來少兩個(gè)碳原子的脂酰COACOA,此過程即脂肪酸的,此過程即脂肪酸的Β氧化。在胞氧化。在胞液、線粒體中反應(yīng),除腦組織外液、線粒體中反應(yīng),除腦組織外大多數(shù)組織均可進(jìn)行,大多數(shù)組織均可進(jìn)行,其中肝、肌肉最活其中肝、肌肉最活躍。肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶躍。肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶Ⅰ是脂肪酸是脂肪酸Β氧化的限速酶。氧化的限速酶。1818、酮體、酮體KETONEKETONEBODIESBODIES在肝細(xì)胞線粒體中以在肝細(xì)胞線粒體中以Β氧化生成的乙酰氧化生成的乙酰COACOA為原為原料轉(zhuǎn)化成乙酰乙酸、料轉(zhuǎn)化成乙酰乙酸、Β羥丁酸和丙酮,三者統(tǒng)稱為酮體。是脂肪酸在肝中分解羥丁酸和丙酮,三者統(tǒng)稱為酮體。是脂肪酸在肝中分解的正常中間代謝產(chǎn)物,供肝外組織利用,是肝臟輸出能源的一種形式。過量則的正常中間代謝產(chǎn)物,供肝外組織利用,是肝臟輸出能源的一種形式。過量則導(dǎo)致酮癥酸中毒等疾病。導(dǎo)致酮癥酸中毒等疾病。1919、呼吸鏈、呼吸鏈RESPIRATYRESPIRATYCHAINCHAIN在生物氧化過程中,代謝物脫下的成對(duì)氫原在生物氧化過程中,代謝物脫下的成對(duì)氫原子(子(2H2H)通過線粒體上多種酶和輔酶所催化的連鎖反應(yīng)的逐步傳遞,最終與氧)通過線粒體上多種酶和輔酶所催化的連鎖反應(yīng)的逐步傳遞,最終與氧結(jié)合生成水,并偶聯(lián)結(jié)合生成水,并偶聯(lián)ATPATP的生成,這一系列酶和輔酶稱為呼吸鏈,又稱電子傳的生成,這一系列酶和輔酶稱為呼吸鏈,又稱電子傳遞鏈遞鏈ELECTRONELECTRONTRANSFERTRANSFERCHAINCHAIN。2020、氧化磷酸化、氧化磷酸化OXIDATIVEOXIDATIVEPHOSPHYLATIONPHOSPHYLATION是指代謝物脫下的成對(duì)氫原子是指代謝物脫下的成對(duì)氫原子(2H2H)在呼吸鏈電子傳遞過程中偶聯(lián))在呼吸鏈電子傳遞過程中偶聯(lián)ADPADP磷酸化并生成磷酸化并生成ATPATP,最終與氧結(jié)合生,最終與氧結(jié)合生成水,又稱為偶聯(lián)磷酸化。氧化磷酸化是體內(nèi)生成成水,又稱為偶聯(lián)磷酸化。氧化磷酸化是體內(nèi)生成ATPATP的主要方式。的主要方式。2121、氮平衡、氮平衡NITROGENNITROGENBALANCEBALANCE攝入食物的含氮量與排泄物(尿與糞)中含氮攝入食物的含氮量與排泄物(尿與糞)中含氮量之間的關(guān)系,包括氮總平衡、氮正平衡、氮負(fù)平衡三種平衡,可以反映體內(nèi)量之間的關(guān)系,包括氮總平衡、氮正平衡、氮負(fù)平衡三種平衡,可以反映體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝的概況。(不考)蛋白質(zhì)代謝的概況。(不考)2222、氨基酸代謝庫(kù)、氨基酸代謝庫(kù)METABOLICMETABOLICPOOLPOOL食物蛋白經(jīng)消化吸收的氨基酸(外源性氨食物蛋白經(jīng)消化吸收的氨基酸(外源性氨
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簡(jiǎn)介:CENTRALDOGMA中心法則是指遺傳信息從DNA傳遞給RNA,再?gòu)腞NA傳遞給蛋白質(zhì),即完成遺傳信息的轉(zhuǎn)錄和翻譯的過程。也可以從DNA傳遞給DNA,即完成DNA的復(fù)制過程。某些病毒中的RNA自我復(fù)制(如煙草花葉病毒等)和在某些病毒中能以RNA為模板逆轉(zhuǎn)錄成DNA的過程(某些致癌病毒)是對(duì)中心法則的補(bǔ)充。TRANSLATIONALMEDICINE轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)醫(yī)學(xué)研究試圖在基礎(chǔ)研究和臨床治療之間建立更直接的關(guān)系把生物醫(yī)學(xué)的研究成果轉(zhuǎn)化為有前景的新型診斷試驗(yàn)治療及藥物HAPMAP國(guó)際人類基因組單體型圖計(jì)劃HVPHUMANVARIOMEPROJECTTHEGLOBALINITIATIVETOCOLLECTCURATEALLHUMANGEICVARIATIONAFFECTINGHUMANHEALTHITSMISSIONISTOIMPROVEHEALTHOUTCOMESBYFACILITATINGTHEUNIFICATIONOFDATAONHUMANGEICVARIATIONITSIMPACTONHUMANHEALTHREVERSIBLEPHOSPHYLATION可逆磷酸化很多蛋白都通過磷酸化和去磷酸化發(fā)揮功能TRANSLATIONALRESEARCH轉(zhuǎn)化研究轉(zhuǎn)化研究轉(zhuǎn)化研究轉(zhuǎn)化研究轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)或稱為轉(zhuǎn)化研究TRANSLATIONALRESEARCH作為一種新理念旨在推動(dòng)基礎(chǔ)研究成果快速臨床轉(zhuǎn)化用于疾病診斷、預(yù)防和治療之中其核心是在實(shí)驗(yàn)室與臨床之間建立一個(gè)雙向轉(zhuǎn)化通道GEICVARIATION遺傳變異遺傳變異是對(duì)同一基因庫(kù)中生物體之間呈現(xiàn)差別的定量描述。遺傳與變異,是生物界不斷地普遍發(fā)生的現(xiàn)象,也是物種形成和生物進(jìn)化的基礎(chǔ)POLYMPHISMS多態(tài)性多態(tài)性指生物群體內(nèi)存在和等位基因相關(guān)的若干種表現(xiàn)型是單一基因座變異在群體水平的體現(xiàn)HARDY–WEINBERGEQUILIBRIUM哈迪溫伯格平衡在理想狀態(tài)下,各等位基因的頻率和等位基因的基因型頻率在遺傳中是穩(wěn)定不變的,即保持著基因平衡。LINKAGEDISEQUILIBRIUM連鎖不平衡不同座位上等位基因連鎖狀態(tài)的描述指這些等位基因在同一條染色體上出現(xiàn)的頻率大于隨機(jī)組合的預(yù)期值其原因有遺傳漂變突變選擇基因轉(zhuǎn)換群體混合等GEICMARKER遺傳標(biāo)記染色體上的物理位置可被確定遺傳能被跟蹤的DNA片段。標(biāo)記可以是一個(gè)基因或不知道功能的DNA片段。SINGLENUCLEARPOLYMPHISMSSNPS單核苷酸多態(tài)性主要是指在基因組水平上由單個(gè)核苷酸的變異所引起的DNA序列多態(tài)性。HAPLOTYPE單倍型,是單倍體基因型的簡(jiǎn)稱,或作遺傳達(dá)室標(biāo)記在遺傳學(xué)上是指在同一染色體上進(jìn)行共同遺傳的多個(gè)基因座上等位基因的組合;通俗的說法就是若干個(gè)決定同一性狀的緊密連鎖的基因構(gòu)成的基因性。MICROSATELLITE微衛(wèi)星微衛(wèi)星多型性的一種類型??勺鬟z傳達(dá)室標(biāo)記指兩個(gè)或多個(gè)核苷酸重復(fù)排列,且不同的重復(fù)序列相鄰的形式,長(zhǎng)度約2到10個(gè)堿基對(duì),常見于非編碼的內(nèi)含子中分單一型復(fù)合型及間斷型MODELGANISM生物學(xué)家通過對(duì)選定的生物物種進(jìn)行科學(xué)研究,用于揭示某種具有普遍規(guī)律的生命現(xiàn)象,此時(shí),這種被選定的生物物種就是模式生物其特點(diǎn)利于解決研究者關(guān)注的問題可代表生物界某一大類群對(duì)人體環(huán)境無害易獲得并在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)飼養(yǎng)繁殖世代短子代多遺傳達(dá)室背景清楚容易進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作特別是具有遺傳達(dá)室操作特別SYSTEMSGEICS系統(tǒng)遺傳學(xué)眾多的基因和環(huán)境因素能導(dǎo)致表型的改變,系統(tǒng)遺傳學(xué)通過整合系統(tǒng)生物學(xué)的問題和方法來理解這種復(fù)雜的關(guān)系,并通過遺傳學(xué)的知識(shí)來解決基因型和表型在復(fù)雜特性和疾病間的基本問題。CRELOXPSYSTEMCRELOXP系統(tǒng)是源于P1噬茵體的一個(gè)DNA重組體系,由CRE酶和相應(yīng)的LOXP住點(diǎn)組成,它能導(dǎo)致重組發(fā)生在特定的DNA序列處(LOXP住點(diǎn)),該系統(tǒng)可以將外源基因定點(diǎn)整合到染色體上或?qū)⑻囟―NA片段刪除,這種定位重組系統(tǒng)在大容量噬菌體抗體庫(kù),抗體重排,抗體的類型轉(zhuǎn)換和抗體修飾等研究領(lǐng)域發(fā)揮了重要的作用CONVENTIONALCONDITIONALKNOCKOUTMICE傳統(tǒng)的基因敲除小鼠和條件的基因敲除小鼠轉(zhuǎn)基因、基因敲入敲除動(dòng)物技術(shù)已經(jīng)成為現(xiàn)代生命科學(xué)基礎(chǔ)研究和藥物研發(fā)領(lǐng)域不可或缺的重要技術(shù)通過經(jīng)典技術(shù)如DNA原核顯微注射、胚胎干細(xì)胞顯微注射技術(shù)CHIMERAMICE嵌合鼠的獲得是通過ES細(xì)胞途徑得到轉(zhuǎn)基因小鼠的關(guān)鍵環(huán)節(jié)嵌合體是不能遺傳的,轉(zhuǎn)基因鼠是可以遺傳的,一般做轉(zhuǎn)基因或條件性敲除,首先得到的是嵌合體,也就是你轉(zhuǎn)的分子伴侶屬于熱休克蛋白(例如HSP60),它們?cè)诩?xì)胞受熱時(shí)大量合成。熱激可導(dǎo)致蛋白質(zhì)穩(wěn)定性降低,增加錯(cuò)誤折疊的幾率,因此在受到熱刺激時(shí),細(xì)胞中的蛋白質(zhì)需要更多熱休克蛋白的幫助。核定位信號(hào)(核定位信號(hào)(NUCLEARLOCALIZATIONSIGNALNLS)核定位序列NUCLEARLOCALIZATIONSIGNAL蛋白質(zhì)的一個(gè)結(jié)構(gòu)域,通常為一短的氨基酸序列,它能與入核載體相互作用,使蛋白能被運(yùn)進(jìn)細(xì)胞核。泛素(泛素(UBIQUITIN)是一種存在于大多數(shù)真核細(xì)胞中的小蛋白。它的主要功能是標(biāo)記需要分解掉的蛋白質(zhì),使其被水解。當(dāng)附有泛素的蛋白質(zhì)移動(dòng)到桶狀的蛋白酶的時(shí)候,蛋白酶就會(huì)將該蛋白質(zhì)水解。泛素也可以標(biāo)記跨膜蛋白,如受體,將其從細(xì)胞膜上除去。蛋白質(zhì)泛素化(蛋白質(zhì)泛素化(PROTEINUBIQUITINATION)泛素是一類低分量的蛋白質(zhì),泛素化是指泛素分子在一系列酶作用下,對(duì)靶蛋白進(jìn)行特異性修飾的過程。一些特殊的酶將細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)分類從中選出靶蛋白分子。模序(模序(MOTIF)在許多蛋白質(zhì)分子中,可以發(fā)現(xiàn)2到3個(gè)具有二級(jí)結(jié)構(gòu)的肽段,在空間上互相接近,形成一個(gè)具有特殊功能的空間結(jié)構(gòu),稱為蛋白質(zhì)的“模序”。肽平面(肽平面(PEPTIDEPLANE)肽鍵具有一定程度的雙鍵性質(zhì),參與肽鍵的六個(gè)原子C、H、O、N、CΑ1、CΑ2不能自由轉(zhuǎn)動(dòng),位于同一平面,此平不能自由轉(zhuǎn)動(dòng),位于同一平面,此平面就是肽平面面就是肽平面協(xié)同效應(yīng)(協(xié)同效應(yīng)(COOPERATIVITY)在血紅蛋白與氧結(jié)合的過程中,首先一個(gè)氧分子與血紅蛋白四個(gè)亞基中的一個(gè)結(jié)合,與氧結(jié)合之后的珠蛋白結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,造成整個(gè)血紅蛋白結(jié)構(gòu)的變化,這種變化使得第二個(gè)氧分子相比于第一個(gè)氧分子更容易尋找血紅蛋白的另一個(gè)亞基結(jié)合,而它的結(jié)合會(huì)進(jìn)一步促進(jìn)第三個(gè)氧分子的結(jié)合,以此類推直到構(gòu)成血紅蛋白的四個(gè)亞基分別與四個(gè)氧分子結(jié)合。而在組織內(nèi)釋放氧的過程也是這樣,一個(gè)氧分子的離去會(huì)刺激另一個(gè)的離去,直到完全釋放所有的氧分子,這種有趣的現(xiàn)象稱為協(xié)同效應(yīng)。等電點(diǎn)(等電點(diǎn)(ISOELECTRICPOINTPI)蛋白質(zhì)是兩性電解質(zhì),在特定的PH溶液中所帶正電荷數(shù)恰好等于負(fù)電荷數(shù)。此時(shí)蛋白在電場(chǎng)中不再移動(dòng),此溶液的PH稱該蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)。蛋白質(zhì)雙相電泳蛋白質(zhì)雙相電泳(2DIMENSIONELECTROPHESIS)是一種等電聚焦電泳與SDSPAGE相結(jié)合,分辨率更高的蛋白質(zhì)電泳檢測(cè)技術(shù)。雙向電泳后的凝膠經(jīng)染色蛋白呈現(xiàn)二維分布圖,水平方向反映出蛋白在等電點(diǎn)上的差異,而垂直方向反映出它們?cè)诜肿恿可系牟顒e。所以雙向電泳可以將分子量相同而等電點(diǎn)不同的蛋白質(zhì)以及等電點(diǎn)相同而分子量不同的蛋白質(zhì)分開。雙向電泳是快速成長(zhǎng)的蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)中最流行最通用的蛋白質(zhì)分離方法。免疫共沉淀(免疫共沉淀(COIMMUNOPRECIPITATIONCOIP)是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎(chǔ)的用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法。是確定兩種蛋白質(zhì)在完整細(xì)胞內(nèi)生理性相互作用的有效方法熒光共振能量轉(zhuǎn)移(熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)當(dāng)一個(gè)熒光分子(又稱為供體分子)的熒光光譜與另一個(gè)熒光分子(又稱為受體分子)的激發(fā)光譜相重疊時(shí),供體熒光分子的激發(fā)能誘發(fā)受體分子發(fā)出熒光,同時(shí)供體熒光分子自身的熒光強(qiáng)度衰減。核糖體展示(核糖體展示(RIBOSOMEPROFILING)一種利用功能性蛋白相互作用進(jìn)行篩選的新技術(shù),它將正確折疊的蛋白及其MRNA同時(shí)結(jié)合在核糖體上,形成MRNA核糖體蛋白質(zhì)三聚體,使目的蛋白的基因型和表型聯(lián)系起來,可用于抗體及蛋白質(zhì)文庫(kù)選擇、蛋白質(zhì)體外改造等。運(yùn)用此技術(shù)已成功篩選到一些與靶分子特異結(jié)合的高親和力蛋白質(zhì),包括抗體、多肽、酶等,是蛋白質(zhì)篩選的重要工具。染色質(zhì)免疫沉淀(染色質(zhì)免疫沉淀(CHROMATINIMMUNOPRECIPITATION,CHIP)被用來研究細(xì)胞內(nèi)DNA與蛋白質(zhì)相互作用,具體來說就是確定特定蛋白如轉(zhuǎn)錄因子是否結(jié)合特定基因組區(qū)域如啟動(dòng)子或其它DNA結(jié)合位點(diǎn)可能定義順反組。CHIP還被用來確定基因組上與組蛋白修飾相關(guān)的特定位點(diǎn)即組蛋白修飾酶的靶標(biāo)。此方法的簡(jiǎn)要過程是細(xì)胞裂解液里的蛋白和相關(guān)染色質(zhì)暫時(shí)結(jié)合染色質(zhì)DNA蛋白復(fù)合物被剪切,與所研究蛋白相關(guān)的DNA片斷被選擇性免疫沉淀相關(guān)DNA片斷被純化,順序被測(cè)定。一般認(rèn)為這些DNA順序在活體內(nèi)與所研究蛋白結(jié)合。EPIGEICS表觀遺傳學(xué)表觀遺傳學(xué)是一門生物學(xué)學(xué)科究在沒有DNA序列改變的情況下,基因功能可逆、可遺傳的改變。這些改變包括DNA的修
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    • 簡(jiǎn)介:分子生物學(xué)復(fù)習(xí)題分子生物學(xué)復(fù)習(xí)題名詞解釋名詞解釋1TUNNELINGNANOTUBES(通道納米管)在壓力刺激下,不同細(xì)胞間產(chǎn)生的直徑在50200NM之間,用于傳遞信息和交流物質(zhì)細(xì)膜通道。2HIPPOSIGNALINGPATHWAY(HIPPO信號(hào)通路)正常的HIPPO信號(hào)通路通過高度保守的蛋白激酶HPO磷酸化蛋白激酶WTS的核心激酶級(jí)聯(lián)反應(yīng)維持細(xì)胞增殖、促進(jìn)細(xì)胞凋亡、參與壓力應(yīng)答,從而維持組織器官的正常大小。3SD序列(SHINEDALGARNOSEQUENCE)原核生物中MRNA起始密碼子AGU上游8個(gè)堿基處存在的一個(gè)可以與核糖體小亞基16SRRNA3’末端序列互補(bǔ)結(jié)合的序列,使得翻譯起始復(fù)合物準(zhǔn)確定位于翻譯起始部位。4內(nèi)部核糖體進(jìn)入位點(diǎn)序列(INTERNALRIBOSOMEENTRYSITEIRES)它的存在能夠使蛋白質(zhì)翻譯起始不依賴于5’帽結(jié)構(gòu),從而使直接從信使MRNA中間起始翻譯成為可能,一般來講,內(nèi)部核糖體進(jìn)入位點(diǎn)通常位于RNA病毒基因組的5’端非翻譯區(qū),這樣病毒蛋白的翻譯就可以不依賴于5’帽子結(jié)構(gòu),常用構(gòu)建于真核生物雙順反子,第一個(gè)蛋白通???’帽子結(jié)構(gòu)起始翻譯,而第二個(gè)蛋白則依靠IRES起始翻譯。IRES前后的兩個(gè)蛋白的表達(dá)通常是成比例的,因此可以根據(jù)其中一個(gè)報(bào)告基因的表達(dá)情況來反映另外一個(gè)蛋白的表達(dá)情況。5分子伴侶(CHAPERONE)能夠識(shí)別并結(jié)合到不完整折疊或裝配的蛋白質(zhì),幫助這些多肽正確折疊、轉(zhuǎn)運(yùn)或防止他們聚集,其本身不參與最終產(chǎn)物的形成。13WNTWNT是一類分泌型糖蛋白,通過自分泌或旁分泌發(fā)揮作用。WNT信號(hào)途徑能引起胞內(nèi)Β連鎖蛋白(ΒCATENIN)積累,游離的ΒCATENIN可進(jìn)入細(xì)胞核,調(diào)節(jié)基因表達(dá)。14PEPTIDEPLANE肽鍵具有一定程度的雙鍵性質(zhì),參與肽鍵形成的原子不能自由轉(zhuǎn)動(dòng),位于同一平面,此平面就是太平面。15增強(qiáng)子指增加同它連鎖的基因轉(zhuǎn)錄頻率的DNA序列。16CRELOXPSYSTEMCRE是一種來自噬菌體的DNA重組酶,能特異性識(shí)別LOXP位點(diǎn),使兩個(gè)LOXP位點(diǎn)間發(fā)生基因重組,如果兩個(gè)LOXP位點(diǎn)位于一條DNA鏈上,同向發(fā)生剪切,反向發(fā)生翻轉(zhuǎn),如果兩個(gè)LOXP位點(diǎn)分別位于兩條不同的DNA鏈或染色體上,則兩條DNA鏈發(fā)生交換或染色體易位。17MOTIF在蛋白質(zhì)中,基序是蛋白質(zhì)的超二級(jí)結(jié)構(gòu),由2個(gè)或2個(gè)以上具有二級(jí)結(jié)構(gòu)的肽段構(gòu)成,在空間上相互靠近而形成特殊空間構(gòu)象,并發(fā)揮專一功能。如鋅指結(jié)構(gòu)、Α螺旋、Β折疊、亮氨酸拉鏈。18ACTINFILAMENT肌動(dòng)蛋白絲又稱微絲。微絲出現(xiàn)在所有的真核細(xì)胞內(nèi),是細(xì)胞骨架的重要組成,微絲的主鏈蛋白由肌動(dòng)蛋白ACTIN所形成。19轉(zhuǎn)錄因子指能夠結(jié)合在某基因上游特異核苷酸序列上的蛋白質(zhì),可以調(diào)控RNA聚合酶與DNA模板的結(jié)合,調(diào)控其基因的轉(zhuǎn)錄。20KLENOW片段DNA聚合酶I大片段。該片段保留了DNA聚合酶I的5ˊ3ˊ聚合酶和3ˊ5ˊ外切酶活性,但缺少完整酶的5ˊ3ˊ外切酶活性。21COIMMUNOPRECIPITATIONCOIP是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎(chǔ)的用于研究蛋白質(zhì)在完整細(xì)胞內(nèi)生理性相互作用的方法。22XCHROMOSOMEINACTIVATIONX染色體失活是指雌性哺乳類細(xì)胞中兩條X染
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    • 簡(jiǎn)介:常用分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)介紹20110423110129轉(zhuǎn)載▼標(biāo)簽分子生物學(xué)細(xì)胞生物學(xué)常用實(shí)用技術(shù)基本實(shí)驗(yàn)室技術(shù)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教育常用的分子生物學(xué)基本技術(shù)核酸分子雜交技術(shù)由于核酸分子雜交的高度特異性及檢測(cè)方法的靈敏性,它已成為分子生物學(xué)中最常用的基本技術(shù),被廣泛應(yīng)用于基因克隆的篩選,酶切圖譜的制作,基因序列的定量和定性分析及基因突變的檢測(cè)等。其基本原理是具有一定同源性的原條核酸單鏈在一定的條件下(適宜的溫室度及離子強(qiáng)度等)可按堿基互補(bǔ)原成雙鏈。雜交的雙方是待測(cè)核酸序列及探針(PROBE)待測(cè)核酸序列可以是克隆的基因征段,也可以是未克隆化的基因組DNA和細(xì)胞總RNA。核酸探針是指用放射性核素、生物素或其他活性物質(zhì)標(biāo)記的,能與特定的核酸序列發(fā)生特異性互補(bǔ)的已知DNA或RNA片段。根據(jù)其來源和性質(zhì)可分為CDNA探針、基因組探針、寡核苷酸探針、RNA探針等。固相雜交固相雜交(SOLIDPHASEHYBRIDIZATION)是將變性的DNA固定于固體基質(zhì)(硝酸纖維素膜或尼龍濾膜)上,再與探針進(jìn)行雜交,故也稱為膜上印跡雜交。斑步雜交(DOTHYBRIDIZATION)是道先將被測(cè)的DNA或RNA變性后固定在濾膜上然后加入過量的標(biāo)記好的DNA或RNA探針進(jìn)行雜交。該法的特點(diǎn)是操作簡(jiǎn)單,事先不用限制性內(nèi)切酶消化或凝膠電永分離核酸樣品,可在同一張膜上同時(shí)進(jìn)行多個(gè)樣品的檢測(cè);根據(jù)斑點(diǎn)雜并的結(jié)果,可以推算出雜交陽(yáng)性的拷貝數(shù)。該法的缺點(diǎn)是不能鑒定所測(cè)基因的相對(duì)分子質(zhì)量,而且特異性較差,有一定比例的假陽(yáng)性。印跡雜交(BLOTTINGHYBRIDIZATION)是在特殊的固相支持物上原位合成寡核苷酸,使它共價(jià)結(jié)合于支持物表面,與平均長(zhǎng)度為2050NT的混合RNA或CDNA探針進(jìn)行雜交,以提高雜交的特異性和靈敏度。應(yīng)用共聚焦顯微鏡可檢測(cè)跨越三個(gè)數(shù)量級(jí)的雜交信息。適用于低豐度MRNA的檢測(cè),以區(qū)分基因家族不同成員的差異表達(dá)特征,或鑒定同一轉(zhuǎn)錄在不同組織和細(xì)胞中的選擇性剪接。但有工作量較大、成本較高、速度較慢等弱點(diǎn)。液相雜交(SOLUTIONHBRIDIZATION)指使變性的待測(cè)核酸單鏈與放射笥核素標(biāo)記的已知的酸單鏈(探針)在溶液中保溫,使之形成雜交復(fù)合物。反應(yīng)結(jié)束后,用羥磷灰石法或酶解法將未被雜交的單鏈和雜交雙鏈分開,然后結(jié)膈后在雜妝分子中的探針量,就可推算出被測(cè)的核酸量。遞減雜交(SUBTRACTIVEHYBRIDIZATIO)是利用兩種來源一致而功能不同的組織細(xì)胞提取MRNA(或逆轉(zhuǎn)錄成的CDNA)在一定的條件下以過量的驅(qū)動(dòng)MRNA或CDNA與測(cè)試的單鏈CDNA或MRNA進(jìn)行液相雜交,通過羥基磷灰石柱層析篩選除去兩者間同源的雜交體。經(jīng)多輪雜交策選、除去兩者之間相同的基因成分,保留特異表達(dá)的目的基因或工基因片段。以后者篩選CDNA文庫(kù),可獲得特異表達(dá)的目的基因CDNA全長(zhǎng)序列。核酸原位雜交用特定標(biāo)記的已知順序核酸作為探針與細(xì)胞級(jí)或組織切片中核酸進(jìn)行復(fù)性雜交并對(duì)其實(shí)行檢測(cè)的方法,稱為核酸原位雜交(NUCLEICACIDHYBRIDIZATIONINSITU)。用來檢測(cè)DNA在細(xì)胞核或染色休上的分布,與細(xì)胞內(nèi)RNA進(jìn)行雜交以研究該組織細(xì)胞中特定基因表達(dá)水閏;還用于細(xì)胞、組織中有無特異性菌、病毒檢測(cè)的研究。該法的優(yōu)點(diǎn)是特異性高,可精確定位;能在成分復(fù)雜的組織中進(jìn)行單一細(xì)胞的研究而不受同一組織中其他成分的影響;不需要從組織中提取核酸,對(duì)于組織中含量極低的靶序列有極高的敏感性;并可完整地保持組織與細(xì)胞的形態(tài)。因此被廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)
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