簡(jiǎn)介：GUIDESEXFURTHERENHANCEDDOCUMENTSHLERUNNINGOFSPEEDOBVIOUSLYSPEEDUPPROGRAMGRADUALLYSPECIFICATIONCONFERENCESERVICECHIEFRECEPTIONOFQUALITYLEVELHASHASNEWOFIMPROVELOGISTICSSUPPTCAPABILITYFURTHERSTRENGTHENEDDOCUMENTMANAGEMENTCONFIDENTIALCONFIDENTIALITYDUTYLETTERSOTHERITEMSHAVEBEENSIGNIFICANTLYIMPROVED4OFFICECONSTRUCTIONINCREASEDATALLLEVELSCITYGOVERNMENTOFFICESADHERETOSTRENGTHENIMPROVETHECONSTRUCTIONOFTHESYSTEMASABREAKTHROUGHHASDEVELOPEDASERIESOFCODEOFCONDUCTCONTINUOUSIMPROVEMENTOFOPERATIONALMECHANISMSOUNDTHEIMPLEMENTATIONOFTHERULESREGULATIONSADHERETOTHESYSTEMOFMANAGINGPEOPLEACCDINGTOTHERULESTHEWKGRADUALLYINTOTHEBITOFINSTITUTIONALIZATIONSTARDIZATIONFOCUSONSTRENGTHENINGIDEOLOGICALPOLITICALCONSTRUCTIONOFTHECONTINGENTOFCADRESACTIVELYCARRIEDOUTVARIOUSBUSINESSTRAININGKNOWLEDGEOFTHEOFFICETEAMSTRUCTUREHASBEENOPTIMIZEDTOBROADENTHERANGEOFKNOWLEDGEOPERATIONALCAPACITYGROWSNURTUREDAPOLITICALFIRMSHARPPROFESSIONALINNOVATIVESTAFFCREATEDSOLIDARITYSTRIVINGFTHETOPPRAGMATICDEDICATIONGOODIMAGEHOWEVERWITHTHESTATECOUNCILTHEPROVINCIALGOVERNMENTOFTHENATIONALTHEPROVINCESSECRETARYGENERALMEETINGOFGOVERNMENTOFFICESUNDERTHENEWSITUATIONTHEFUNCTIONSPRIITIESCOMPAREDTOTHEREQUIREMENTSOFOURGAPISSTILLVERYBIGMAINISDAILYINTHEPASSIVEMEETOFMEACTIVERESEARCHOFLESSSERVICEALSOHASNOTTIMELYNOTINPLACEOFPROBLEMWKINTHEMEETYUTRADITIONALOFPROGRAMOFOFWKWAYDEVELOPINNOVATIONSPIRITSERVICEINNOVATIONCAPACITYNOTSTRONGSUPERVISIONINFMATIONWKPROMOTEDDECISIONIMPLEMENTATIONOFCONTACTENOUGHCLOSEFEEDBACKSITUATIONNOTACTIVERESEARCHRESOURCESOFUSINGENOUGHFULLRESEARCHRESULTSOFINTODEGREENOTHIGHSOMESECTDOCUMENTSRUNNINGNOTSPECIFICATIONMUNICIPALGOVERNMENTOFFICEONTHECOUNTYDISTRICTMUNICIPALGOVERNMENTSECTOFFICEWKOFGUIDEENOUGHNOREALFMINTERACTIONCLOSECOLLABATIONPROMOTETHEIMPLEMENTATIONOFTHEWKTHESEPROBLEMSWEMUSTEFFECTIVELYBEADDRESSEDINTHEFUTUREWKSECONDSERVETHEOVERALLSITUATIONCARRYOUTTHEIRDUTIESIMPROVEQUALITYSTRIVETOCREATEANEWSITUATIONOFSYSTEMOFGOVERNMENTOFFICESINTHECITYSINCELASTSEASONMEETINGTHESECRETARYGENERALOFTHESTATECOUNCILTHEPROVINCIALGOVERNMENTHASHELDAGOVERNMENTSYSTEMFROMAGLOBALSTRATEGICHEIGHTSCIENTIFICALLYANALYZEDTHENEWSITUATIONTHENEWTASKSONTHESYSTEMOFGOVERNMENTOFFICESBRINGNEWSITUATIONSNEWPROBLEMSNEWCHALLENGESPROFOUNDLYEXPOUNDEDTHEWKOFGOVERNMENTDEPARTMENTSATALLLEVELSINTHENEWERASHOULDBEPUTINTHESITUATIONTOUNDERSTTOGRASPTODEPLOYATANYTIMEUNDERANYCIRCUMSTANCESSHOULDALWAYSFOCUSONTHEBIGPICTUREFIRMLYGRASPTHEOVERALLSITUATIONINCREASINGINTHEOVERALLIMPLEMENTINGINEARNESTTHEWKOFSPONTANEITYINITIATIVESECONDLYWESHOULDSTRENGTHENTHETEAMAUNITISATEAMINVARIOUSSECTIONSOFTHEUNITINSIDEISALSOASMALLTEAMAUNITWITHATEAMSPIRITFMEDATEAMRESPONSIBILITYCOHESIONCOMPETITIVENESSYOUWANTTOMAKEAUNITADEPARTMENTWKIMPROVEMENTMUSTBEMELTINGINSIDEAFEELINGOFSOLIDARITYMUTUALHELPFACOMMONGOALDETERMINEDTOACHIEVETHESPIRITCULTIVATINGASTRONGCOLLECTIVESPIRITTEAMRESPONSIBILITYSENSEOFHONTHEREFEWENEEDTOSTARTIMPROVINGOFFICEWKENHANCETHEEFFICIENCYOFOFFICEWKSTRIVETOBUILDACONCERTEDFAULTINACCDANCEWITHTHEREQUIREMENTSOFMODERNMANAGEMENTSCIENCEESTABLISHINGSTRICTRESPONSIBILITYSYSTEMOFMANAGEMENTBYOBJECTIVESAWKWHOISINGEWHOISINGEWHOISRESPONSIBLEWHATRIGHTDOTHESEPEOPLEHAVEWHATRESPONSIBILITYHASTOTRUTHFULLYCLEARLYUNDERSTOODDEPARTMENTSATALLLEVELSSHOULDSTRICTLYIMPLEMENTTHECHECKINTHEOFFICEOFPARTYCOMMITTEEEVALUATIONSIGNIFICANTACCOUNTABILITYREWARDINCENTIVESYSTEMPAYCLOSEATTENTIONTODUTYCASHMAKINGUNITYRIGHTSRESPONSIBILITIESTOINSPIREEACHOFCADRESSPIRITMALESUPERCOURAGEINVESTEEINSISTSISADEEPTOPICISAREALPROBLEMISABIGISSUETODAYIJUSTCOMBINEDTHISYEARTHECITYSCOMMUNISTPARTYCOMMITTEEOFFICEHADSOMEROUGHTALKUNDERSTINGWEMUSTSTRENGTHENRESEARCHEXCHANGESINTHISREGARDINTHEFUTUREINVESTEEINTHENEWYEARWEMUSTHOLDHIGHTHEBANNEROFDENGXIAOPINGTHEYTHE“THREEREPRESENTS“THEYTHEGREATBANNEROFUNDERTHECRECTLEADERSHIPOFTHECPCADHERETOTHEPEOPLEIENTEDINSISTONTRUTHADHEREFIRSTTOEXCELLENCEEFFTSTODOOFFICEWKTOANEWLEVELSPEECHATTHECONFERENCEONTHESYSTEMOFGOVERNMENTOFFICESINTHECITYAROUNDTHEDEVELOPMENTOFSERVICEFUNCTIONTOCREATEANEWSITUATIONINTHEWKOFTHEOFFICEOFTHECITYSSYSTEMOFGOVERNMENTSPEECHATTHECONFERENCEONTHESYSTEMOFGOVERNMENTOFFICESINTHECITYTHISSYSTEMOFGOVERNMENTOFFICESWKINGINTHECITYSMAINTASKISTOSTUDYGOVERNMENTSYSTEMSOFADMINISTRATIVESUPERVISIONADMINISTRATIVEINFMATIONADMINISTRATIVERECEPTIONINFMATIONTECHNOLOGYISSUESFTHEMEETINGTHECITYMAYMAHASMADEIMPTANTINSTRUCTIONSTHEMUNICIPALGOVERNMENTOFFICEFULLYPREPAREDBREWINGCOMBINEDWITHPRACTICALWKTODEVELOPTHENOTICEONFURTHERSTRENGTHENINGTHESUPERVISIONWKTHEXXCHIEFINFMATIONINTERIMMEASURESF2005THECITYSSYSTEMOFGOVERNMENTADMINISTRATIONINFMATIZATIONCONSTRUCTIONTASKSTATEMENTOTHERDOCUMENTSBEFETHEGENERALASSEMBLYGANIZATIONOFCOUNTIESDISTRICTSOFTHESCENETOOBSERVETHEGOVERNMENTOFFICEACHIEVETHEPURPOSEOFEXCHANGESOFWKTHOUGHTTODAYTHETANGMAYALSOATTENDEDTHEMEETINGDELIVEREDANIMPTANTSPEECHINTHESTHOPEGOODGRASPOFIMPLEMENTATIONNEXTIWOULDLIKETOMAKEAFEWREMARKSAAROUNDCENTERLOOKSATDEVELOPMENTSTRENGTHENEDSERVICECITYGOVERNMENTSYSTEMOFFICEWKRENDERINGATMOSPHEREINRECENTYEARSCITYGOVERNMENTSYSTEMOFFICETOSTEADFASTNESSEXPLICITLYPUTFWARDTHE“SURROUNDINGSITUATIONPAYATTENTIONTOIMPLEMENTATION“ISTHECEOFGOVERNMENTOFFICESREQUIRINGGOVERNMENTDEPARTMENTSATALLLEVELSCANNOTBE“GRAMOPHONE““MAILROOM““THEMESSENGER“ISNOTCONFINEDTOPAPERCOMMUNICATIONSYINGLAISONGWANGUPLOADISSUEMUSTTOHASSTRONGLYOFIMPLEMENTATIONCONSCIOUSNESSTHISISGOVERNMENTOFFICESECTFIRSTBITOFTASKTOFIRSTISDUTYBOUNDINSISTEDREPTEDTRUTHTOLDTRUTHOUTCONFESSDOFACTSPRAGMATICEFFECTPUTWKOFTOPOINTSREALPUTTORESEARCHSOLUTIONREFMDEVELOPMENTSTABLEINTHEOFMAJPROBLEMSHANGPUTTORESEARCHSOLUTIONMASSESPRODUCTIONLIFEINTHEOFURGENTPROBLEMSHANGPUTTORESEARCHSOLUTIONWKINTHEEXISTSOFHIGHLIGHTPROBLEMSHANGPUTANENDTOTOCONFERENCEIMPLEMENTCONFERENCETOFILEIMPLEMENTATIONFILENEVERCANMAKESSUPERIOFDECISIONDEPLOYMENTINA“IMPLEMENTATION“LOSTINTHESOUNDSYSTEMOFFICEOFTHEGOVERNMENTSECTMUSTTAKETHELEADINPARTYGOVERNMENTPOLICIESTHEDEPLOYMENTCARRYOUTSPECIFICTARGETSINTHEIMPLEMENTATIONEFFTSFEXAMPLEONTHEIMPLEMENTATIONONTHEIMPLEMENTATIONOFAPERFMANCECITYGOVERNMENTSYSTEMOFFICETOSERIOUSLYIMPLEMENTIMPLEMENTATIONNATIONALPROVINCEGOVERNMENTSYSTEMSECRETARYGENERALOFFICEDIRECTCONFERENCESPIRITACCDINGTOAROUNDOVERALLGRASPIMPLEMENTATIONTHISAGENERALREQUIREMENTSINSISTEDREFMINNOVATIONFURTHERCHANGEMANAGEMENTCONCEPTMANAGEMENTFUNCTIONSMANAGEMENTSYSTEMMANAGEMENTMETHODINSISTEDQUALITYFIRSTENSUREFLEDFGRASSROOTSFMASSESPROVIDESQUALITYEFFICIENTSERVICEINSISTEDSTRICTLYRULEPOLITICALEFFTSCONSTRUCTIONASUPPTPOLITICALFIRMBUSINESSMASTERSERVICEPOLITICALCLEANSTYLEEXCELLENTOFOFFICETEAMCONCRETEWKMUSTDEALWITH“THREERELATIONSHIPS“ONEISTOHLEWELLTHERELATIONSHIPBETWEENPASSIVEADAPTATIONACTIVESERVICEOFFICESERVICEFUNCTIONSTOTHEPASSIVEASPECTOFITSWKWHICHREQUIRESUSTOHOSTLEADWHENACTIONMUSTBESTRICTLYINACCDANCEWITHTHEINTENTIONSREQUIREMENTSFLEADERSHIPWKWITHINTHELIMITSOFDELEGATEDAUTHITYNOTOFFSIDEPARTICIPATIONINTHEINTERVENTIONNOTDECISIONMAKINGCODINATIONISNOTCONTEMPLATEDMEANWHILEOFFICEWKMUSTBECOMEMECONSCIOUSGIVEFULLPLAYTOTHEINITIATIVEWKTOSOMEFESEEABLEBEPROACTIVEPREPAREDTHINKINGAHEADPROVIDINGINFMATIONACTIVELEADERSHIPREFLECTTHESITUATIONAHEADOFGOODRESEARCHREFERENCEPOINTINKEYPLACESTOPROMOTEOVERALLEFFICIENCYSECONDTOHLETHERELATIONSHIPBETWEENADMINISTRATIVESERVICESTRANSACTIONSERVICESADMINISTRATIVESERVICESSERVICESOFFICESERVICESCOMPLEMENTTHETWOASPECTSOFTHEJOBADMINISTRATIVESERVICESISTHECESERVICEISGUARANTEEDNOTETHATCOMBINESBOTHADHERETOGOVERNMENTSERVICEASTHEMAINLINETHECHIEFTURNSAROUNDTHEOVERALLSITUATIONTURNSAROUNDTHEDISTRICTONONEHWILLATTACHTHREEAREPRESENTATIVE“IMPTANTTHOUGHTFGUIDEEFFTSADAPTEDNEWSITUATIONNEWTASKNEWREQUIREMENTSTIGHTLYAROUNDCITYREFMDEVELOPMENTOFOVERALLFURTHERCHANGEFUNCTIONSSTRENGTHENEDSERVICEDETERMINEDTOINNOVATIONGOVERNMENTSYSTEMOFFICEOVERALLWKOFQUALITYLEVELHASHASNEWOFIMPROVEFCITYECONOMICSOCIALDEVELOPMENTMADEHASDUEOFCONTRIBUTION1STAFFASSISTANTFFURTHERSTRENGTHENINGAROUNDTHEFOCUSOFLEADERSHIPSERVICESACTIVELYCARRYOUTRESEARCHSTUDIESFALLLEVELSOFGOVERNMENTONTHEEVENTGRABGLOBALPROPOSEDANUMBEROFSOLUTIONSWITHAHIGHERREFERENCEVALUERECOMMENDATIONSPROVIDEABASISFIMPROVINGGOVERNMENTLEADERSHIPABOUTDEVELOPMENTADJUSTMENTOFINTERESTDIFFICULTYPEOPLETHEFOCUSOFTHEPROBLEMGIVEFULLPLAYTOTHEOFFICESTHATAREINTERLINKEDDREDGEABOUTCONTACTCODINATIONOFFUNCTIONSINDERTOREDUCECONFLICTTOAVOIDOMISSIONSFMAJOINTFCEPROMOTINGTHEGOVERNMENTTOPLAYANACTIVEROLEINTHEWKASAWHOLEWKINGAROUNDGOVERNMENTCENTERIMPLEMENTATIONSUPERVISIONINTENSIFIEDBROADENEDIMPROVEDEFFICIENCYDOCHECKTHEFRUITFRUITASSISTINGTHEGOVERNMENTINIMPLEMENTATIONOFTHEASSISTANTROLETOPLAYAPOWERFULIMPETUSTOTHEREALIZATIONOFTHEOBJECTIVESOFTHEGOVERNMENT2THESERVICEAREASTOFURTHEREXPTHEFULLIMPLEMENTATIONOFTHEOPENGOVERNMENTPILOTPROJECTSTRENGTHENINGCARRIERCONSTRUCTIONINNOVATIVEFMSOFPUBLICDEEPENINGPUBLICCONTENTEXTENDSTHEOPENRANGEREGULATEPUBLICPROCEDURESESTABLISHMENTOFACITYCOUNTYTOWNSHIPVILLAGELEVELADMINISTRATIONSYSTEMTOMEETTHEPEOPLESRIGHTTOKNOWCREATESCONDITIONSFTHEEFFECTIVEEXERCISEOFSUPERVISIONDEVELOPMENTISSUEDTHEXXMATTERSOFSIGNIFICANTPUBLICPOLICYIMPLEMENTATIONMEASURESSUCHASTHEQUESTIONOFHEARING6SYSTEMOPENGOVERNMENTCONTINUESTOPROMOTEINDEPTHESTABLISHEDOPENEDTHECITYCOUNTYLONGPUBLICPHONESSOLVINGANUMBEROFCONCERNPEOPLESIMMEDIATEINTERESTSPRODUCEHOTSPOTSDIFFICULTPROBLEMSINLIFEBYALLSECTSOFTHECOMMUNITYALIKEUNIVERSALCHIEFWASBUILTSTARTINGATTHECITYCOUNTYLEVELSHALLMASSESSERVETHECOMMUNITYFTHEGOVERNMENTTOPLAYABETTERWINDOWSTIEWITHTHESYSTEMOFGOVERNMENTOFFICEFHUBCONNECTINGTHECOUNTYDISTRICTTHEDEPARTMENTSOFMUNICIPALGOVERNMENTWEBSITESOFFICEDECISIONMAKINGSERVICESYSTEMHASBEENBUILTINTHECITYGOVERNMENTOFFICELOCALAREAWKESTABLISHEDSIGNIFICANTLYACCELERATETHEPACEOFOFFICEAUTOMATIONINFMATIONWK3IMPROVEDQUALITYPRODUCTIVITYWITHNEWWKCITYLEVELSGOVERNMENTOFFICEPUTPURSUITQUALITYEFFICIENCYASMEASUREOFFICEOVERALLWKLEVELOFIMPTANTSTARDPENDULUMINHIGHLIGHTLOCATIONAROUNDSERVICEOVERALLPAYCLOSEATTENTIONTOTHEIMPLEMENTATIONTHISCENTRALRIGHTPROCESSINGINHERITEDINNOVATIONFULLFOCUSONSHANGSERVICEONXIASERVICEOFRELATIONSHIPBOLDINNOVATIONFOCUSEDONEFFECTIVENESSPRESENTATIONOFPOLICYSEXTARGETED2013年分子生物學(xué)（分子遺傳學(xué)）碩士生復(fù)習(xí)題1闡述你對(duì)基因概念的理解和詮釋?；蚴蔷幋a蛋白質(zhì)或RNA等具有特定功能產(chǎn)物的遺傳信息的基本單位，是染色體或基因組的一段DNA序列（對(duì)以RNA作為遺傳信息載體的ＲＮＡ病毒而言則是ＲＮＡ），包活編碼序列（外顯子）、編碼區(qū)前后對(duì)于基因表達(dá)具有調(diào)控功能的序列和單個(gè)編碼序列間的間隔序列（內(nèi)含子）。基因是生物體傳遞和表達(dá)遺傳信息的基本單位，基因通過(guò)復(fù)制把遺傳信息傳遞給下一代，使后代出現(xiàn)與親代相似的性狀。１）染色體水平上的基因概念孟德?tīng)柕耐愣闺s交試驗(yàn)總結(jié)出生物的遺傳性狀是由遺傳因子控制的，肯定遺傳的物質(zhì)性

簡(jiǎn)介：一、判斷題一、判斷題1、原核細(xì)胞和真核細(xì)胞的差別之一是前者無(wú)染色體結(jié)構(gòu)，后者有染色體結(jié)構(gòu)。（√）2、基因組是指某一種生物所具有的全部基因的總稱(chēng)。（）3、真核生物基因的大小通常是外顯子的數(shù)目和長(zhǎng)度決定的。（）4、在所有的真核生物中，內(nèi)含子的長(zhǎng)度和序列是高度保守的。（）5、酵母的基因普遍要比人的基因小，因此，酵母基因組編碼的蛋白質(zhì)普遍要比人基因組編碼的蛋白質(zhì)要小。（）6、在自由的四種核苷酸混合溶液中，任何堿基之間都可以形成氫鍵而發(fā)生配對(duì)。7、PCR只能擴(kuò)增雙鏈DNA，不能擴(kuò)增單鏈DNA。（）8、富含GC的DNA雙螺旋比富含AT的DNA雙螺旋穩(wěn)定的主要原因是GC堿基對(duì)比AT堿基對(duì)多一個(gè)氫鍵。（√）9、用氯化銫梯度超離心純化質(zhì)粒DNA時(shí)，蛋白質(zhì)在離心管的最上部，RNA懸浮在中間，而DNA沉在底部。（）10、MRNA的剪接總是產(chǎn)生套索結(jié)構(gòu)。（）11、岡崎片段只由DNA組成。（）12、端粒酶帶有自己的DNA模板。（）13、細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制既需要DNA聚合酶，也需要RNA聚合酶。（）14、同源重組和位點(diǎn)特異性重組都形成HOLLIDAY中間體結(jié)構(gòu)。（√）15、與TRNA相連的氨基酸本身在決定何種氨基酸參入到正在延伸的肽鏈上不起任何作用。（√）16、轉(zhuǎn)座重組既可以導(dǎo)致基因的失活，也可以導(dǎo)致基因的激活。（√）17、只有用相同的限制性酶獲得的DNA片段末端才能用DNA連接酶連接起來(lái)。18、在一個(gè)基因的編碼區(qū)內(nèi)發(fā)生的核苷酸的插入或缺失總是導(dǎo)致移碼突變。19、PCR和末端終止法測(cè)序都需要RNA引物。（）1、有關(guān)蛋白質(zhì)組不正確的敘述是（C）A、翻譯后加工可導(dǎo)致同一個(gè)翻譯產(chǎn)物形成幾種不同的蛋白質(zhì)B、蛋白質(zhì)之間的相互作用可形成組織特異性蛋白質(zhì)復(fù)合物C、環(huán)境因素對(duì)一個(gè)細(xì)胞的蛋白質(zhì)組無(wú)影響D、一個(gè)病態(tài)細(xì)胞的蛋白質(zhì)組可能與一個(gè)健康細(xì)胞的蛋白質(zhì)組有所不同2、下列哪項(xiàng)不是原核生物DNA復(fù)制是所必需的CA單鏈結(jié)合蛋白BDNA聚合酶ⅢCDNA聚合酶ⅡDDNAG蛋白EATP3、噬菌體基因組DNA上的堿基發(fā)生糖基化和甲基化修飾的主要功能是（B）A、促進(jìn)基因組DNA整合到宿主基因組上B、保護(hù)病毒DNA不受到限制性酶的水解C、有利于核酸正確的排列D、穩(wěn)定DNA，防止突變4、雙螺旋DNA具有的典型特征包括（C）A、沿著一條鏈?zhǔn)谴鬁希硗庖粭l鏈?zhǔn)切螧、堿基對(duì)的排列與螺旋軸平行C、嘌呤堿基和嘧啶堿基的數(shù)目相同D、螺旋的方向總是右手5、在許多不同物種中，具有高度保守的序列一般是（D）A、假基因B、特定的間隔序列C、不重要的蛋白質(zhì)的基因D、非常重要的蛋白質(zhì)的基因6、原核生物DNA復(fù)制不需要（D）A、DNA聚合酶ⅠB、DNA解鏈酶C、DNA連接酶D、端粒酶7、大腸桿菌染色體DNA復(fù)制所需要的DNA聚合酶有（D）A、DNA聚合酶ⅠB、DNA聚合酶ⅡC、DNA聚合酶ⅢD、DNA聚合酶Ⅰ和Ⅲ8、DNA連接酶需要被連接的兩個(gè)DNA片段分別具有（A）A、3’OH和5’B、5’OH和3’○P○PC、3’OH和5’OHD、5’和3’○P○P9、端粒酶是一種（C）A、依賴(lài)于DNA的DNA聚合酶B、依賴(lài)于DNA的RNA聚合酶C、依賴(lài)于RNA的DNA聚合酶D、依賴(lài)于RNA的RNA聚合酶10、細(xì)胞內(nèi)的突變主要發(fā)生在（A）

簡(jiǎn)介：第一章第一章緒論緒論11簡(jiǎn)述孟德?tīng)枴⒛柛臀稚热藢?duì)分子生物學(xué)發(fā)展的主要貢獻(xiàn)。簡(jiǎn)述孟德?tīng)?、摩爾根和沃森等人?duì)分子生物學(xué)發(fā)展的主要貢獻(xiàn)。答孟德?tīng)柕膶?duì)分子生物學(xué)的發(fā)展的主要貢獻(xiàn)在于他通過(guò)豌豆實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)了遺傳規(guī)律、分離規(guī)律及自由組合規(guī)律；摩爾根的主要貢獻(xiàn)在于發(fā)現(xiàn)染色體的遺傳機(jī)制，創(chuàng)立染色體遺傳理論，成為現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)生物學(xué)奠基人；沃森和克里克在1953年提出DAN反向雙平行雙螺旋模型。22寫(xiě)出寫(xiě)出DNADNA和RNARNA的英文全稱(chēng)。的英文全稱(chēng)。答脫氧核糖核酸（DNADEOXYRIBONUCLEICACID），核糖核酸（RNARIBONUCLEICACID）33試述“有其父必有其子”的生物學(xué)本質(zhì)。試述“有其父必有其子”的生物學(xué)本質(zhì)。答其生物學(xué)本質(zhì)是基因遺傳。子代的性質(zhì)由遺傳所得的基因決定，而基因由于遺傳的作用，其基因的一半來(lái)自于父方，一般來(lái)自于母方。44早期主要有哪些實(shí)驗(yàn)證實(shí)早期主要有哪些實(shí)驗(yàn)證實(shí)DNADNA是遺傳物質(zhì)寫(xiě)出這些實(shí)驗(yàn)的主要步驟。是遺傳物質(zhì)寫(xiě)出這些實(shí)驗(yàn)的主要步驟。答一，肺炎雙球菌感染實(shí)驗(yàn)，1，R型菌落粗糙，菌體無(wú)多糖莢膜，無(wú)毒，注入小鼠體內(nèi)后，小鼠不死亡。2，S型菌落光滑，菌體有多糖莢膜，有毒，注入到小鼠體內(nèi)可以使小鼠患病死亡。3，用加熱的方法殺死S型細(xì)菌后注入到小鼠體內(nèi)，小鼠不死亡；二，噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)1，噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)過(guò)程吸附→侵入→復(fù)制→組裝→釋放。2，DNA中P的含量多，蛋白質(zhì)中P的含量少；蛋白質(zhì)中有S而DNA中沒(méi)有S，所以用放射性同位素35S標(biāo)記一部分噬菌體的蛋白質(zhì)，用放射性同位素32P標(biāo)記另一部分噬菌體的DNA。用35P標(biāo)記蛋白質(zhì)的噬菌體侵染后，細(xì)菌體內(nèi)無(wú)放射性，即表明噬菌體的蛋白質(zhì)沒(méi)有進(jìn)入細(xì)菌內(nèi)部；而用32P標(biāo)記DNA的噬菌體侵染細(xì)菌后，細(xì)菌體內(nèi)有放射性，即表明噬菌體的DNA進(jìn)入了細(xì)菌體內(nèi)。三，煙草TMV的重建實(shí)驗(yàn)1957年，F(xiàn)RAENKELCONRAT等人，將兩個(gè)不同的TMV株系（S株系和HR株系）的蛋白質(zhì)和RNA分別提取出來(lái)，然后相互對(duì)換，將S株系的蛋白質(zhì)和HR株系的RNA，或反過(guò)來(lái)將HR株系的蛋白質(zhì)和S株系的RNA放在一起，重建形成兩種雜種病毒，去感染煙草葉片。55請(qǐng)定義請(qǐng)定義DNADNA重組技術(shù)和基因工程技術(shù)。重組技術(shù)和基因工程技術(shù)。答DNA重組技術(shù)目的是將不同的DNA片段（如某個(gè)基因或基因的一部分）按照人們的設(shè)計(jì)定向連接起來(lái)，然后在特定的受體細(xì)胞中與載體同時(shí)復(fù)制并得到表達(dá)，產(chǎn)生影響受體細(xì)胞的新的遺傳性狀?；蚬こ碳夹g(shù)是除了包含DNA重組技術(shù)外還包括其他可能是生物細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)得到改造的體系，基因工程是指技術(shù)重組DNA技術(shù)的產(chǎn)業(yè)化設(shè)計(jì)與應(yīng)用，包括上游技術(shù)和下游技術(shù)兩大組成部分。上游技術(shù)指的是基因重組、克隆和表達(dá)的設(shè)計(jì)與構(gòu)建（即重組DNA技術(shù)）；而下游技術(shù)則涉及到基因工程菌或細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)以及基因產(chǎn)物的分離純化過(guò)程。66寫(xiě)出分子生物學(xué)的主要研究?jī)?nèi)容。寫(xiě)出分子生物學(xué)的主要研究?jī)?nèi)容。答1，DNA重組技術(shù)；2，基因表達(dá)調(diào)控研究；3，生物大分子的結(jié)構(gòu)功能研究結(jié)構(gòu)分子生物學(xué)；4，基因組、功能基因組與生物信息學(xué)研究。第二章第二章染色體與染色體與DNADNA11染色體具有哪些作為遺傳物質(zhì)的特征染色體具有哪些作為遺傳物質(zhì)的特征3有重疊基因重疊基因，即同一段DNA能攜帶兩種不同蛋白質(zhì)信息。主要有以下幾種情況①一個(gè)基因完全在另一個(gè)基因里面②部分重疊③兩個(gè)基因只有一個(gè)堿基對(duì)是重疊的66簡(jiǎn)述簡(jiǎn)述DNADNA雙螺旋結(jié)構(gòu)及其在現(xiàn)代分子生物學(xué)發(fā)展中的意義雙螺旋結(jié)構(gòu)及其在現(xiàn)代分子生物學(xué)發(fā)展中的意義DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)分為右手螺旋ADNA、BDNA和左手螺旋ZDNA。DNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)是指兩條都核苷酸鏈反向平行盤(pán)繞所生成的雙螺旋結(jié)構(gòu)。右手螺旋是由兩條反向平行的多核苷酸鏈圍繞同一中心軸構(gòu)成的。多核苷酸的方向是由核苷酸間的磷酸二酯鍵的走向決定的一條由5’到3’另一條由3’到5’。兩鏈上的堿基以氫鍵相連，嘌呤和嘧啶堿基對(duì)層疊與雙螺旋內(nèi)側(cè)，順著螺旋軸心從上向下看，可見(jiàn)堿基平面與縱軸平面垂直且螺旋的軸心方向穿過(guò)氫鍵的中點(diǎn)。核苷酸的磷酸集團(tuán)與脫氧核糖在外側(cè)，通過(guò)磷酸二酯鍵相連接而構(gòu)成DNA分子的骨架。DNA轉(zhuǎn)錄時(shí)其鏈板間與有它轉(zhuǎn)錄所得的RNA鏈間形成ADNA這對(duì)基因表達(dá)有重要意義左手螺旋是右手螺旋的一個(gè)補(bǔ)充。ZDNA調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄模型中，在鄰近調(diào)控系統(tǒng)中，與調(diào)節(jié)區(qū)相鄰的轉(zhuǎn)錄區(qū)被ZDNA抑制，只有ZDNA轉(zhuǎn)變?yōu)锽DNA后，轉(zhuǎn)錄才得以活化，而在遠(yuǎn)距離調(diào)控系統(tǒng)中，ZDNA可以通過(guò)改變負(fù)超螺旋水平，決定聚合酶能否與模板鏈相結(jié)合而調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄起始活性。7DNA復(fù)制通常采取哪些方式復(fù)制通常采取哪些方式1線性DNA雙鏈的復(fù)制將線性復(fù)制子轉(zhuǎn)變?yōu)榄h(huán)狀或多聚分子在DNA末端形成發(fā)夾式結(jié)構(gòu)使分子沒(méi)有游離末端在某種蛋白質(zhì)的介入下，在真正的末端啟動(dòng)復(fù)制2環(huán)狀DNA雙鏈的復(fù)制Θ型滾環(huán)型D環(huán)型8簡(jiǎn)述原核生物簡(jiǎn)述原核生物DNA的復(fù)制特點(diǎn)。的復(fù)制特點(diǎn)。（1）復(fù)制的起始1，DNA雙螺旋的解旋DNA在復(fù)制時(shí)，其雙鏈?zhǔn)紫冉忾_(kāi)，形成復(fù)制叉，這是一個(gè)有多種蛋白質(zhì)和酶參與的復(fù)雜過(guò)程。2DNA復(fù)制的引發(fā)RNA引物的合成前導(dǎo)鏈DNA雙鏈解開(kāi)為單鏈后，由引發(fā)酶（RNA聚合酶，PRIMASE）在5’→3’DNA模板上合成一段RNA引物，再由DNA聚合酶從RNA引物3’端開(kāi)始合成新的DNA鏈。然后以此為起點(diǎn)，進(jìn)入DNA復(fù)制的延伸。后隨鏈后隨鏈的引發(fā)過(guò)程由引發(fā)體（PRIMOSOME）來(lái)完成。引發(fā)體由6種蛋白組成的引發(fā)前體（PREPRIMOSOME）和引發(fā)酶（PRIMASE）組成。引發(fā)體催化生成滯后鏈的RNA引物短鏈，再由DNA聚合酶III作用合成后續(xù)DNA，直至遇到下一個(gè)引物或?qū)槠螢橹?。在滯后鏈上所合成的RNA引物非常短，一般只有35個(gè)核苷酸。而且，在同一種生物體細(xì)胞中這些引物都具有相似的序列。（3）復(fù)制的延伸岡崎片段與半不連續(xù)復(fù)制在原核生物中，DNA新生鏈的合成主要由DNA聚合酶III所催化。當(dāng)岡崎片段形成后，DNA聚合酶I通過(guò)其5→3外切酶活性切除岡崎片段上的RNA引物，同時(shí)，利用后一個(gè)岡崎片段作為引物由5→3合成DNA。最后兩個(gè)岡崎片段由DNA連接酶將其接起來(lái)，形成完整的DNA滯后鏈。（4）復(fù)制的終止DNA復(fù)制的終止依賴(lài)與TUS蛋白（TERMINUSUTILIZATIONSUBSTANCE，36KD）和DNA鏈上特殊的重復(fù)序列TER（約22BP）。TUSTER復(fù)合體將阻止DNA解鏈，等反方向的復(fù)制叉到達(dá)后停止復(fù)制，然后兩條鏈解開(kāi)。最后，釋放子鏈DNA，依靠拓?fù)涿笇⒊菪Y(jié)構(gòu)引入DNA分子。

簡(jiǎn)介：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院研究生院研究生課程選課名單20172018學(xué)年秋季學(xué)期課程編號(hào)4015課程名稱(chēng)分子生物學(xué)學(xué)分30學(xué)時(shí)54任課教師閆艷春選課人數(shù)280序號(hào)學(xué)號(hào)姓名學(xué)生類(lèi)別所在培養(yǎng)單位所在專(zhuān)業(yè)考勤182101162064張一豪碩士棉花所生物化學(xué)與分子生物學(xué)282101162168馬曉蘭碩士作物科學(xué)所作物遺傳育種382101169020朱峰博士植保所農(nóng)藥學(xué)482101172013于心蕊碩士飼料所微生物學(xué)582101172020郝夏暉碩士油料所微生物學(xué)682101172021王亞惠碩士麻類(lèi)所微生物學(xué)782101172022劉思慧碩士水稻所微生物學(xué)882101172023譚瓊碩士沼氣所微生物學(xué)982101172026牟永瑩碩士作物科學(xué)所生物化學(xué)與分子生物學(xué)1082101172030李靜碩士作物科學(xué)所生物化學(xué)與分子生物學(xué)1182101172032石添添碩士作物科學(xué)所生物化學(xué)與分子生物學(xué)1282101172033孫宏達(dá)碩士作物科學(xué)所生物化學(xué)與分子生物學(xué)1382101172034王昕碩士作物科學(xué)所生物化學(xué)與分子生物學(xué)1482101172036楊靜碩士作物科學(xué)所生物化學(xué)與分子生物學(xué)1582101172040張冰玉碩士飼料所生物化學(xué)與分子生物學(xué)1682101172049蒲偉軍碩士生物所生物化學(xué)與分子生物學(xué)1782101172061劉淑君碩士農(nóng)產(chǎn)品加工所生物化學(xué)與分子生物學(xué)1882101172063楊蘭碩士農(nóng)產(chǎn)品加工所生物化學(xué)與分子生物學(xué)1982101172064刁陽(yáng)陽(yáng)碩士棉花所生物化學(xué)與分子生物學(xué)2082101172065胡偉碩士棉花所生物化學(xué)與分子生物學(xué)2182101172066鐘雪碩士油料所生物化學(xué)與分子生物學(xué)2282101172067曾錚碩士麻類(lèi)所生物化學(xué)與分子生物學(xué)2382101172070李澤宇碩士深圳基因組所生物化學(xué)與分子生5582101172184鄭瀟瀟碩士油料所作物遺傳育種5682101172185黃賀碩士油料所作物遺傳育種5782101172186李建國(guó)碩士油料所作物遺傳育種5882101172190曹妮碩士水稻所作物遺傳育種5982101172191鄧陳威碩士水稻所作物遺傳育種6082101172192董楠楠碩士水稻所作物遺傳育種6182101172193王月影碩士水稻所作物遺傳育種6282101172194張淼碩士水稻所作物遺傳育種6382101172198何斌彬碩士煙草所作物遺傳育種6482101172199劉志文碩士煙草所作物遺傳育種6582101172202楊蕾碩士作物科學(xué)所作物種質(zhì)資源學(xué)6682101172203王恒碩士棉花所作物種質(zhì)資源學(xué)6782101172205溫小霞碩士水稻所作物種質(zhì)資源學(xué)6882101172206任俊碩士水稻所作物種質(zhì)資源學(xué)6982101172211魏曉碩士油料所農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量與食物安全7082101172215趙雪碩士煙草所農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量與食物安全7182101172220左湘熙碩士特產(chǎn)所藥用植物資源學(xué)7282101172221李慎昌碩士鄭州果樹(shù)所果樹(shù)學(xué)7382101172222王莎碩士鄭州果樹(shù)所果樹(shù)學(xué)7482101172223白曉雪碩士特產(chǎn)所果樹(shù)學(xué)7582101172224謝蘇燕碩士特產(chǎn)所果樹(shù)學(xué)7682101172225卞書(shū)迅碩士果樹(shù)所果樹(shù)學(xué)7782101172226張佳碩士果樹(shù)所果樹(shù)學(xué)7882101172227王鵬碩士蔬菜花卉所蔬菜學(xué)7982101172228武亞紅碩士蔬菜花卉所蔬菜學(xué)8082101172229蔡和序碩士蔬菜花卉所蔬菜學(xué)8182101172231侯乾碩士蔬菜花卉所蔬菜學(xué)8282101172232胡志程碩士蔬菜花卉所蔬菜學(xué)8382101172233李宏博碩士蔬菜花卉所蔬菜學(xué)8482101172234劉雨佳碩士蔬菜花卉所蔬菜學(xué)8582101172235牛雨萌碩士蔬菜花卉所蔬菜學(xué)8682101172236申琪碩士蔬菜花卉所蔬菜學(xué)8782101172237宋佳碩士蔬菜花卉所蔬菜學(xué)8882101172239吳怡璠碩士蔬菜花卉所蔬菜學(xué)8982101172241閆龍祥碩士蔬菜花卉所蔬菜學(xué)9082101172243鄭佳儀碩士蔬菜花卉所蔬菜學(xué)

簡(jiǎn)介：素材聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)PCR（生物學(xué)的聚合酶鏈反應(yīng)）一般指聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)是一種用于放大擴(kuò)增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)，它可看作是生物體外的特殊DNA復(fù)制，PCR的最大特點(diǎn)，是能將微量的DNA大幅增加。由1983年美國(guó)MULLIS首先提出設(shè)想，1985年由其發(fā)明了聚合酶鏈反應(yīng)，即簡(jiǎn)易DNA擴(kuò)增法，意味著PCR技術(shù)的真正誕生。到如今2013年，PCR已發(fā)展到第三代技術(shù)。1973年，臺(tái)籍科學(xué)家錢(qián)嘉韻，發(fā)現(xiàn)了穩(wěn)定的TAQDNA聚合酶，為PCR技術(shù)發(fā)展也做出了基礎(chǔ)性貢獻(xiàn)。PCR聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）是利用DNA在體外攝氏95高溫時(shí)變性會(huì)變成單鏈，低溫（經(jīng)常是60C左右）時(shí)引物與單鏈按堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則結(jié)合，再調(diào)溫度至DNA聚合酶最適反應(yīng)溫度（72C左右），DNA聚合酶沿著磷酸到五碳糖53的方向合成互補(bǔ)鏈?；诰酆厦钢圃斓腜CR儀實(shí)際就是一個(gè)溫控設(shè)備，能在變性溫度，復(fù)性溫度，延伸溫度之間很好地進(jìn)行控制。真核生物的啟動(dòng)子真核生物的啟動(dòng)子由于真核生物中有三種不同的RNA聚合酶，因此也有三種不同的啟動(dòng)子，其中以啟動(dòng)子Ⅱ最為復(fù)雜，它和原核的啟動(dòng)子有很多不同（1）有多種元件TATA框，GC框，CATT框，OCT等；（2）結(jié)構(gòu)不恒定。有的有多種框盒如組蛋白H2B；有的只有TATA框和GC框，如SV40早期轉(zhuǎn)錄蛋白，（3）它們的位置、序列、距離和方向都不完全相同，（4）有的有遠(yuǎn)距離的調(diào)控元件存在，如增強(qiáng)子；（5）這些元件常常起到控制轉(zhuǎn)錄效率和選擇起始位點(diǎn)的作用；（6）不直接和RNAPOL結(jié)合。轉(zhuǎn)錄時(shí)先和其它轉(zhuǎn)錄激活因子相結(jié)合，再和聚合酶結(jié)合。一Ⅱ類(lèi)基因的啟動(dòng)子和調(diào)控區(qū)Ⅱ類(lèi)基因的啟動(dòng)子由核心元件和上游元件組成。核心元件包括TATA框和轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)附近的啟始子（INITIAT，INR）。亞克?。ㄓ⒄Z(yǔ)SUBCLONING）是一種分子生物學(xué)技術(shù)。亞克隆SUBCLONE分為細(xì)胞克隆和分子克隆。該技術(shù)旨在將目的基因?qū)肽繕?biāo)載體中，以進(jìn)行進(jìn)一步研究。值得注意的是，亞克隆和分子克?。∕OLECULARCLONING）不是同一概念。在細(xì)胞克隆中，對(duì)培養(yǎng)的細(xì)胞來(lái)說(shuō)，從原有的克隆中，再篩選出具有某種特性的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，就是亞克隆。在分子克隆中，從大片段的克隆中選取特定小片段再克隆。亞克隆就是初步克隆的外源片段往往較長(zhǎng)，含有許多目的基因片段以外的DNA片段，將目的基因所對(duì)應(yīng)的一小段DNA找出來(lái)。對(duì)已經(jīng)獲得的目的DNA片段進(jìn)行重新克隆，其目的在于對(duì)目的DNA進(jìn)行進(jìn)一步分析，或者進(jìn)行重組改造等。亞克隆的基本過(guò)程包括1目的DNA片段和載體的制備；2目的DNA片段和載體的連接；3連接產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化；4重組子篩選。亞克隆技術(shù)限制性?xún)?nèi)切酶是一類(lèi)能識(shí)別雙鏈DNA分子中特異核苷酸序列的DNA水解酶，該類(lèi)酶是體外剪切基因片段的重要工具。首先，使用限制酶將目的基因切下。切下來(lái)的目的基因需經(jīng)過(guò)純化（常用手法是凝膠作用機(jī)理編輯促卵泡激素的目標(biāo)細(xì)胞表面表達(dá)有促卵泡激素受體，屬于G蛋白偶聯(lián)受體家族。促卵泡激素與其受體蛋白的結(jié)合將導(dǎo)致后者的構(gòu)象變化。作為跨細(xì)胞膜的膜蛋白，促卵泡激素受體胞外的變構(gòu)將引發(fā)胞內(nèi)的變構(gòu)，改變其與G蛋白的結(jié)合狀態(tài)，并通過(guò)其它蛋白的參與，進(jìn)一步誘發(fā)環(huán)磷酸腺苷等第二信使的生成，將信號(hào)傳至細(xì)胞核內(nèi)，實(shí)現(xiàn)對(duì)蛋白表達(dá)和細(xì)胞發(fā)育進(jìn)程的調(diào)節(jié)。相關(guān)疾病編輯促卵泡激素水平在兒童期較低，而在女性的更年期之后則很高。高促卵泡激素水平編輯促卵泡激素的高水平預(yù)示著性腺引發(fā)的限制性反饋負(fù)反饋缺失，導(dǎo)致腦垂體不斷合成促卵泡激素。這在女性接近或處于更年期時(shí)屬于正常現(xiàn)象，但對(duì)于處于生育年齡的女性則是不正常的，可能是以下疾病的信號(hào)過(guò)早絕經(jīng)也稱(chēng)為卵巢早衰性腺障礙或TURNER綜合征閹割斯外爾綜合征先天腎上腺增生的某些病例睪丸失效低促卵泡激素水平編輯促卵泡激素分泌水平的降低將導(dǎo)致性腺功能的缺失。在男性精子數(shù)量不足的病癥中尤為典型。在女性中表現(xiàn)為生育周期的停止，具體相關(guān)的疾病有多卵囊巢綜合征，可能的體征有肥胖，多毛，不育等等；考曼綜合征下丘腦抑制癥垂體機(jī)能減退癥泌乳激素過(guò)多癥性腺功能低下癥正在接受性腺抑制治療使用促性腺激素釋放激素結(jié)抗劑使用促性腺激素釋放激素促進(jìn)劑（負(fù)調(diào)節(jié)）醫(yī)療應(yīng)用編輯促卵泡激素可在絕經(jīng)期女性的尿液中提取得到，也可以通過(guò)基因工程的方法重組表達(dá)得到。臨床用于對(duì)不育癥患者的治療，用以刺激卵泡的發(fā)育成熟，同時(shí)也用于體外人工受精和體內(nèi)人工受精的相關(guān)治療中。促卵泡激素受體FSHR基因位于人的2號(hào)染色體上P21區(qū)，長(zhǎng)約2080個(gè)核苷酸調(diào)控序列（英語(yǔ)REGULATYSEQUENCE，又譯調(diào)節(jié)序列）是DNA中一段包含啟動(dòng)子、增強(qiáng)子，以及其他可與調(diào)節(jié)蛋白，如轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合的位置。這些序列調(diào)控了基因的表現(xiàn)，進(jìn)而影響蛋白質(zhì)的生產(chǎn)。除此之外，MRNA也有調(diào)控序列，可與RNA結(jié)合蛋白或其他RNA結(jié)合DNASEI，即DEOXYRIBONUCLEASEI，脫氧核糖核酸酶I，是一種可以消化單鏈或雙鏈DNA產(chǎn)生單脫氧核苷酸或單鏈或雙鏈的寡脫氧核苷酸的核酸內(nèi)切酶。DNASEI水解單鏈或雙鏈DNA后的產(chǎn)物，5端為磷酸基團(tuán)，3端為羥基。DNASEI活性依賴(lài)于鈣離子，并能被鎂離子或二價(jià)錳離子激活。鎂離子存在條件下，DNASEI可隨機(jī)剪切雙鏈DNA的任意位點(diǎn)；二價(jià)錳離子存在條件下，DNASEI可在同一

簡(jiǎn)介：分子生物學(xué)復(fù)習(xí)提綱一名詞解釋一名詞解釋?zhuān)?）I原核生物基因質(zhì)粒的復(fù)制起始位點(diǎn)，是四個(gè)高度保守的19BP組成的正向重復(fù)序列，只有I能被宿主細(xì)胞復(fù)制蛋白質(zhì)識(shí)別的質(zhì)粒才能在該種細(xì)胞中復(fù)制。ARS自主復(fù)制序列，是真核生物DNA復(fù)制的起點(diǎn)，包括數(shù)個(gè)復(fù)制起始必須的保守區(qū)。不同的ARS序列的共同特征是一個(gè)被稱(chēng)為A區(qū)的11BP的保守序列。（2）PROMOTER啟動(dòng)子，與基因表達(dá)啟動(dòng)有關(guān)的順式作用元件，是結(jié)構(gòu)基因的重要成分，它是位于轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)5’端上游區(qū)大約100200BP以?xún)?nèi)的具有獨(dú)立功能的DNA序列，能活化RNA聚合酶，使之與模板ＤＮＡ準(zhǔn)確地相結(jié)合并具有轉(zhuǎn)錄起始的特異性。（3）INDEPENDENTTERMINATION不依賴(lài)因子的終止，指在不依賴(lài)因子的終止反應(yīng)中，沒(méi)有任何其他因子的參與，核心酶也能在某些位點(diǎn)終止轉(zhuǎn)錄。（強(qiáng)終止子）（4）SDSEQUENCEＳＤ序列（核糖體小亞基識(shí)別位點(diǎn)），存在于原核生物起始密碼ＡＵＧ上游７～１２個(gè)核苷酸處的一種４～７個(gè)核苷酸的保守片段，它與１６ＳＲＲＮＡ３’端反向互補(bǔ)，所以可以將MRNA的AUG起始密碼子置于核糖體的適當(dāng)位置以便起始翻譯作用。KOZAKSEQUENCE存在于真核生物MRNA的一段序列，核糖體能夠識(shí)別MRNA上的這段序列，并把它作為翻譯起始位點(diǎn)。（5）OPERAT操縱基因，與一個(gè)或者一組結(jié)構(gòu)基因相鄰近，并且能夠與一些特異的阻遏蛋白相互作用，從而控制鄰近的結(jié)構(gòu)基因表達(dá)的基因。OPERON操縱子，是指原核生物中由一個(gè)或多個(gè)相關(guān)基因以及轉(zhuǎn)錄翻譯調(diào)控元件組成的基因表達(dá)單元。包括操縱基因、結(jié)構(gòu)基因、啟動(dòng)基因。（6）ENHANCER增強(qiáng)子，能強(qiáng)化轉(zhuǎn)錄起始的序列的為增強(qiáng)子或強(qiáng)化子SILENCER沉默子，可降低基因啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄活性的一段DNA順式元件。與增強(qiáng)子作用相反。（7）CISACTINGELEMENT順式作用元件，存在于基因旁側(cè)序列中能影響基因表達(dá)的序列，包括啟動(dòng)子、增強(qiáng)子、調(diào)控序列和可誘導(dǎo)元件，本身不編碼任何蛋白質(zhì)，僅僅提供一個(gè)作用位點(diǎn)，與反式作用因子相互作用參與基因表達(dá)調(diào)控。TRANSACTINGFACT反式作用因子，是指直接或間接地識(shí)別或結(jié)合在各類(lèi)順式作用元件核心序列上參與調(diào)控靶基因轉(zhuǎn)錄效率的蛋白質(zhì)。具有三個(gè)功能結(jié)構(gòu)域，即DNA結(jié)合域、轉(zhuǎn)錄結(jié)合域、結(jié)合其他結(jié)合蛋白的結(jié)構(gòu)域。（8）OPENREADINGFRAMEF開(kāi)放式閱讀框架，是指一組連續(xù)的含有三聯(lián)密碼子的能夠被翻譯成為多肽鏈的DNA序列。它由起始密碼子開(kāi)始，到終止密碼子結(jié)束。（9）GENE基因，產(chǎn)生一條多肽鏈或功能RNA所需的全部核苷酸序列。（能轉(zhuǎn)④反義RNA，與MRNA互補(bǔ)的RNA分子，從而抑制MRNA的翻譯，參與基因表達(dá)的調(diào)控。⑤SNRNA，小核RNA，是真核生物轉(zhuǎn)錄后加工過(guò)程中RNA剪接體的主要成分。上述各種RNA分子均為轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物，MRNA最后翻譯為蛋白質(zhì)，而RRNA、TRNA及SNRNA等并不攜帶翻譯為蛋白質(zhì)的信息，其終產(chǎn)物就是RNA。⑥GRNA，引導(dǎo)RNA，真核生物中參與RNA編輯的具有與MRNA互補(bǔ)序列的RNA。2DNA半保留和半不連續(xù)復(fù)制半保留和半不連續(xù)復(fù)制答①DNA半保留復(fù)制是DNA在進(jìn)行復(fù)制的時(shí)候鏈間氫鍵斷裂，雙鏈解旋分開(kāi)，每條鏈作為模板在其上合成互補(bǔ)鏈，經(jīng)過(guò)一系列酶的作用生成兩個(gè)新的DNA分子。子代DNA分子其中的一條鏈來(lái)自親代DNA，另一條鏈?zhǔn)切潞铣傻?，這種方式稱(chēng)半保留復(fù)制。②半不連續(xù)復(fù)制是由于DNA雙螺旋的兩股單鏈?zhǔn)欠聪蚱叫?，一條鏈的走向?yàn)?→3另一條鏈為3→5DNA的兩條鏈都能作為模板以邊解鏈邊復(fù)制方式，同時(shí)合成兩條新的互補(bǔ)鏈。但是，所有已知DNA聚合酶的合成方向都是5’→3’，所以在復(fù)制是，一條鏈的合成方向和復(fù)制叉前進(jìn)方向相同，可以連續(xù)復(fù)制，稱(chēng)為前導(dǎo)鏈；另一條鏈的合成方向與復(fù)制叉前進(jìn)方向相反，不能順著解鏈方向連續(xù)復(fù)制，必須待模板鏈解開(kāi)至足夠長(zhǎng)度，然后從5‘→3’生成引物并復(fù)制子鏈。延長(zhǎng)過(guò)程中，形成岡崎片段，要等待下一段有足夠長(zhǎng)度的模板，再次生成引物而延長(zhǎng)，然后連接起來(lái)，這條鏈稱(chēng)滯后鏈。因此就把前導(dǎo)鏈連續(xù)復(fù)制，隨從鏈不連續(xù)復(fù)制的復(fù)制方式稱(chēng)為半不連續(xù)復(fù)制。3端粒酶的工作原理端粒酶的工作原理答原核生物的染色體是環(huán)狀的，其5最末端崗崎片段的RNA引物被降解后可借助另半圈DNA鏈向前延伸來(lái)填補(bǔ)。但真核生物線性DNA在復(fù)制后，不能填補(bǔ)5末端的空缺，從而會(huì)使5末端序列因此而縮短。真核生物通過(guò)形成端粒結(jié)構(gòu)來(lái)解決此問(wèn)題，復(fù)制使端粒5末端縮短，而端粒酶可外加重復(fù)單位到5末端上，結(jié)果便是維持端粒一定的長(zhǎng)度。端粒酶是一種含有RNA鏈的逆轉(zhuǎn)錄酶，它以所含的RNA引物為模板來(lái)合成DNA端粒結(jié)構(gòu)。端粒酶可結(jié)合到端粒的3末端上，RNA引物的5末端識(shí)別DNA的3末端堿基并相互配對(duì)，以RNA鏈為模板使DNA鏈延伸，合成一個(gè)重復(fù)單位（TTTAGGG）后，酶再向前移動(dòng)一個(gè)單位。合成結(jié)束后，端粒的3單鏈末端折回作為引物，合成其互補(bǔ)鏈。4原核原核DNA復(fù)制過(guò)程中遺傳信息的保真機(jī)制復(fù)制過(guò)程中遺傳信息的保真機(jī)制答①DNA聚合酶IIIΕ亞基具有3到5核酸外切酶的活性，在聚合過(guò)程中其有校

簡(jiǎn)介：第二章染色體與DNA1、染色體包括DNA和蛋白質(zhì)兩大部分2、由于細(xì)胞內(nèi)的DNA主要在染色體上，所以說(shuō)遺傳物質(zhì)的主要載體是染色體3、下列哪一項(xiàng)對(duì)于DNA作為遺傳物質(zhì)是不重要的（B）ADNA分子雙鏈且序列互補(bǔ)BDNA分子的長(zhǎng)度可以非常長(zhǎng)可以長(zhǎng)到將整個(gè)基因組的信息都包含在一條DNA分子上CDNA可以與RNA形成堿基互補(bǔ)DDNA聚合酶有35的校讀功能4、下列有關(guān)C值的敘述正確的是（C）A生物的進(jìn)化程度越高其C值就越大BC值與有機(jī)體的形態(tài)學(xué)復(fù)雜性成反比C每一個(gè)生物門(mén)中的C值與有機(jī)體的形態(tài)學(xué)復(fù)雜性大致成比例DC值與有機(jī)體的形態(tài)學(xué)復(fù)雜性成正比5、人是最高等生物其基因組堿基對(duì)數(shù)目29109是動(dòng)物界最大的（）6以下DNA只寫(xiě)出一條鏈的序列中解鏈溫度最高的是（C）ATTCAAGAGACTT4個(gè)GC對(duì)BTCACAGTACGTC6個(gè)GC對(duì)CGGACCTCTCAGG8個(gè)GC對(duì)DCGTAGAGAGTCC7個(gè)GC對(duì)7、一個(gè)復(fù)制子是（C）A細(xì)胞分離期間復(fù)制產(chǎn)物被分離之后的DNA片段B復(fù)制的DNA片段和在此過(guò)程中所需的酶和蛋白C任何自發(fā)復(fù)制的DNA序列它與復(fù)制起始點(diǎn)相連D復(fù)制起點(diǎn)和復(fù)制叉之間的DNA片段8、真核生物復(fù)制子有下列特征它們（B）A復(fù)制元的大小都是一樣的B幾個(gè)相鄰的復(fù)制元可形成復(fù)制元簇C不同復(fù)制元簇在復(fù)制起始的時(shí)間上是同步的D復(fù)制時(shí)間比原核生物短9、下列有關(guān)岡崎片段的描述中正確的是（A）A岡崎片段出現(xiàn)在DNA復(fù)制過(guò)程的滯后鏈中B岡崎片段的發(fā)現(xiàn)能證明DNA復(fù)制是以半保留復(fù)制方式進(jìn)行的C岡崎片段只在原核生物DNA復(fù)制中出現(xiàn)D岡崎片段只在真核生物DNA復(fù)制中出現(xiàn)10、原核生物DNA復(fù)制過(guò)程中岡崎片段合成的方向與復(fù)制叉移動(dòng)的方向相同（）11、聚合反應(yīng)的特點(diǎn)1以單鏈DNA為模板2以DNTP為原料3引物提供3OH4聚合方向?yàn)?→312、大腸桿菌DNA聚合酶I的作用不包括（D）A53外切酶活性B35外切酶活性C53DNA聚合酶活性D35DNA聚合酶活性13、真核細(xì)胞的DNA聚合酶和原核細(xì)胞的DNA聚合酶一樣都具有核酸外切酶活性（）ADNAHELICASE的生物學(xué)功能是（C）A緩解DNA復(fù)制時(shí)產(chǎn)生的TWISTINGPROBLEMB防止DNA的過(guò)度超螺旋C解開(kāi)雙螺旋DNA雙鏈的配對(duì)D促進(jìn)引物酶的結(jié)合14、DNA復(fù)制過(guò)程滯后鏈的引發(fā)是由引發(fā)體來(lái)完成的15、真核生物復(fù)制起始點(diǎn)的特征包括（B）A、富含GC區(qū)B、富含AT區(qū)C、ZDNAD、無(wú)明顯特征A模板鏈B編碼鏈C互補(bǔ)鏈D隨從鏈10、RNA聚合酶是通過(guò)氫鍵互補(bǔ)的方式識(shí)別啟動(dòng)子的11、RNA的位點(diǎn)特異性脫氨基作用和引導(dǎo)RNA指導(dǎo)的尿嘧啶插入或刪除是（RNA編輯）的兩種機(jī)制。12、下列哪一種反應(yīng)不屬于轉(zhuǎn)錄后修飾（）A腺苷酸聚合BEXON剪除C5′端加帽子D內(nèi)含子剪除E甲基化13關(guān)于啟動(dòng)子的描述哪一項(xiàng)是正確的CAMRNA開(kāi)始被翻譯的那段DNA序列B開(kāi)始轉(zhuǎn)錄生成MRNA的那段DNA順序CRNA聚合酶最初與DNA結(jié)合的那段DNA順序D開(kāi)始生成的MRNA順序E調(diào)節(jié)基因結(jié)合的部位14MRNA的轉(zhuǎn)錄后加工不包括EA5端加入7甲基鳥(niǎo)苷三磷酸B3端加POLYAC切除內(nèi)含子連接外顯子D堿基修飾E加CCA尾15原核細(xì)胞RNA聚合酶由以下亞基組成BAΑΑΒΒˊBΑΑΒΒΣCΑΑΒDΑΑΒEΑΒΒ16原核RNA聚合酶Σ亞基EA是核心酶的一部分B與抗生素利福平相結(jié)合C被Α鵝膏蕈堿所抑制D大多存在于轉(zhuǎn)錄的開(kāi)始E特異性識(shí)別啟動(dòng)子位點(diǎn)17下列有關(guān)真核生物初級(jí)轉(zhuǎn)錄物的論述是正確的，但除外EA通常比有功能的RNA長(zhǎng)B許多核苷酸序列不存在于有功能的RNA中C全部不含有修飾的堿基D可能含有一個(gè)以上的RNA信息E含有TATA盒子187RNA聚合酶I的功能是CA轉(zhuǎn)錄TRNA和5SRRNAB轉(zhuǎn)錄蛋白質(zhì)基因和部分SNRNA基因C只轉(zhuǎn)錄RRNA基因D轉(zhuǎn)錄多種基因RRNA都是由RNA聚合酶I轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的。（）19有關(guān)RNA轉(zhuǎn)錄合成的敘述，其中錯(cuò)誤的是AA轉(zhuǎn)錄過(guò)程RNA聚合酶需要引物B轉(zhuǎn)錄時(shí)只有一股DNA作為合成RNA的模板CRNA鏈的生長(zhǎng)方向是53D所有真核生物RNA聚合酶都不能特異性地識(shí)別PROMOTER20真核生物PREMRNASPLICING過(guò)程中，下列不正確的是DA供體端的G堿基與分支點(diǎn)的A堿基形成25磷酸二酯鍵BU1SNRNA與INTRON5序列形成堿基配對(duì)C剪接后INTRON形成一個(gè)套索結(jié)構(gòu)D任何情況下，所有的INTRON都會(huì)被剪切掉21以下有關(guān)大腸桿菌轉(zhuǎn)錄的敘述，正確的是BA35區(qū)和10區(qū)序列間的間隔序列是保守的B35區(qū)和10區(qū)序列的距離對(duì)于轉(zhuǎn)錄效率非常重要C轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)后的序列對(duì)于轉(zhuǎn)錄效率不重要D10區(qū)序列通常正好位于轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游10BP處22以DNA為模板，RNA聚合酶作用時(shí)，不需要ANTPBDNTPCATPDMG2MN223關(guān)于外顯子與內(nèi)含子的敘述，正確的是DA外顯子是不表達(dá)成蛋白的序列B內(nèi)含子在基因表達(dá)過(guò)程中不被轉(zhuǎn)錄C內(nèi)含子在基因組中沒(méi)有任何功能D真核生物的外顯子往往被內(nèi)含子隔開(kāi)

簡(jiǎn)介：基因編輯技術(shù)的研究進(jìn)展基因編輯技術(shù)的研究進(jìn)展摘要基因組編輯是建立在基因靶向修飾的基礎(chǔ)上，對(duì)生物基因組進(jìn)行改造的一項(xiàng)新技術(shù)。通過(guò)利用人工核酸酶ZFN、TALEN和細(xì)菌獲得性免疫系統(tǒng)CRISPR，可在靶位點(diǎn)制造DNA雙鏈切口進(jìn)而誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)源性修復(fù)機(jī)制，通過(guò)同源重組修復(fù)或非同源末端連接途徑實(shí)現(xiàn)基因敲除、替換和糾正。對(duì)目前3個(gè)主要的基因編輯技術(shù)的應(yīng)用和發(fā)展作一綜述。關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞基因編輯；鋅指核酸酶；TALEN；CRISPRCAS9ABSTRACTGENOMEEDITINGISBUILTONTHEBASISOFGENETARGETEDMODIFICATIONOFTHEGENOMEOFANEWBIOTECHNOLOGYTRANSFMATIONTHROUGHTHEUSEOFARTIFICIALNUCLEASESZFNTALENACQUIREDIMMUNESYSTEMSBACTERIALCRISPRCANBEMANUFACTUREDATTHETARGETPOINTTHENINDUCEDDNADOUBLESTRINCISIONENDOGENOUSREPAIRMECHANISMSWITHINTHECELLCONNECTEDWAYTOACHIEVEGENEKNOCKOUTBYHOMOLOGOUSRECOMBINATIONNONHOMOLOGOUSENDREPAIRINADDITIONTHEREPLACEMENTCRECTIONAPPLICATIONDEVELOPMENTOFTHECURRENTTHREEMAJGENEEDITINGTECHNIQUESAREREVIEWEDKEYWDSGENEEDITINGZINCFINGERNUCLEASETALENCRISPRCAS9引言21世紀(jì)以來(lái)，科學(xué)家一直在尋求更加精確的方法對(duì)特定的基因進(jìn)行敲除或者靶向修飾。20世紀(jì)80年代，研究者們可以利用同源重組的方法來(lái)對(duì)特定的基因進(jìn)行靶向修飾，但由于自然重組的過(guò)程非常罕見(jiàn)，所以，這種方法效率非常低，只能達(dá)到106。之后的研究發(fā)現(xiàn)，真核細(xì)胞的染色體發(fā)生雙鏈斷裂時(shí)，細(xì)胞會(huì)通過(guò)DNA同源重組或者非同源末端連接機(jī)制修復(fù)雙鏈斷裂1，在修復(fù)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)高幾率的基因缺失、插入和改變。所以，利用各種方法在染色體上的特定位點(diǎn)進(jìn)行精確切割誘發(fā)DNA損傷修復(fù)，使得對(duì)真核生物進(jìn)行精確的基因操作成為可能，以此實(shí)現(xiàn)特定細(xì)胞組織的遺傳操作7。2011年，人工核酸酶介導(dǎo)的基因組編輯技術(shù)被NATUREMETHODS雜志評(píng)選為年度最受關(guān)注的技術(shù)成果。這3種酶包括有3個(gè)主要的類(lèi)型鋅指核酸酶ZINCFINGERNUCLEASESZFN、轉(zhuǎn)錄激活因子樣效應(yīng)物核酸酶TRANIONACTIVATLIKEEFFECTNUCLEASESTALEN，以及歸巢核酸內(nèi)切酶MEGANUCLEASE5。本文主要通過(guò)這三種物質(zhì)來(lái)介紹基因編輯技術(shù)的進(jìn)展。1基因組定點(diǎn)編輯技術(shù)的初現(xiàn)鋅指核酸酶ZINCFINGERNUCLEASES11鋅指核酸酶的結(jié)構(gòu)及作用原理鋅指核酸酶的結(jié)構(gòu)及作用原理鋅指ZINCFINGERZF是一種常見(jiàn)的DNA結(jié)合蛋白結(jié)構(gòu)基元，每個(gè)鋅指可直接特異識(shí)別DNA雙螺旋中3個(gè)連續(xù)的核苷酸。人工串聯(lián)36個(gè)識(shí)別不同靶位點(diǎn)序列的重組鋅指結(jié)構(gòu)，能夠與靶序列特異性結(jié)合1。將多個(gè)鋅指串聯(lián)形成的ZFP結(jié)構(gòu)域與IIS型限制性?xún)?nèi)切酶FOKI的切割結(jié)構(gòu)域相連接，就可構(gòu)建成鋅指核酸酶ZFN，實(shí)現(xiàn)對(duì)靶序列的切割。增加串連鋅指的數(shù)目可識(shí)別更長(zhǎng)的靶序列同時(shí)也就增加了DNA靶向修飾的特異性8。由于FOKI需要二聚化來(lái)切割DNA，所以，設(shè)計(jì)好的兩個(gè)互補(bǔ)的ZFN分子同時(shí)與靶位點(diǎn)結(jié)合，當(dāng)兩個(gè)互補(bǔ)的ZFN分子間相距恰當(dāng)?shù)木嚯x時(shí)68BP，F(xiàn)OKI結(jié)構(gòu)域?qū)⒍刍⑶懈頓NA，從而可特異性地在基因組特定位點(diǎn)切斷DNA形成“雙鏈斷裂缺口”。雙鏈斷裂可以啟動(dòng)細(xì)胞內(nèi)的DNA損傷修復(fù)機(jī)制，一方面細(xì)胞通過(guò)錯(cuò)配率很高的“非同源重組末端連接”機(jī)制修復(fù)雙鏈斷裂，從而在ZFN靶位點(diǎn)40。目前，TALEN也像ZFN一樣，被應(yīng)用到了不同種的細(xì)胞及生物的基因組編輯中。至今為止，研究者們已經(jīng)應(yīng)用TALENS對(duì)果蠅、蛔蟲(chóng)、斑馬魚(yú)、青蛙、大鼠和豬等模式生物7進(jìn)行了基因組定點(diǎn)編輯11。而使用TALEN技術(shù)對(duì)牛、蟋蟀和家蠶等非模式生物進(jìn)行內(nèi)源基因的定點(diǎn)修飾也有報(bào)道。在目前的研究中，大多數(shù)研究者都使用一對(duì)TALENS對(duì)目標(biāo)基因進(jìn)行敲除，也有一些報(bào)道同時(shí)使用了兩對(duì)TALEN對(duì)同一條染色體上的兩個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行敲除，使基因組缺失更大的片段。同樣的，也已經(jīng)有研究者利用TALEN和同源片段的引入實(shí)現(xiàn)了在斑馬魚(yú)和人的基因組中進(jìn)行定點(diǎn)插入10。在各種遺傳疾病的治療方面，TALEN技術(shù)的高精確性使得對(duì)這些錯(cuò)誤基因的修飾比ZFN更具潛力。MUSSOLINO等利用TALEN和ZFN兩個(gè)技術(shù)對(duì)人胚肺293細(xì)胞的CCR5及CCR2位點(diǎn)中19BP的靶序列成功進(jìn)行了定點(diǎn)敲除，且TALEN的脫靶切割幾率比ZFN要低得多。SUN等利用設(shè)計(jì)的一對(duì)TALEN和同源性序列成功地對(duì)缺陷型Β珠蛋白基因進(jìn)行了更改，使其恢復(fù)到正常序列。23TALEN的優(yōu)勢(shì)和局限的優(yōu)勢(shì)和局限相比ZFN技術(shù)，TALEN使用了TALE分子代替ZF作為人工核酸酶的識(shí)別結(jié)構(gòu)域，極好地解決了ZF對(duì)于DNA序列識(shí)別特異性低的問(wèn)題。TALE蛋白與DNA堿基是一一對(duì)應(yīng)的，并且對(duì)堿基的識(shí)別只由2個(gè)氨基酸殘基決定，這相對(duì)于ZFN的設(shè)計(jì)要簡(jiǎn)單得多。但是在構(gòu)建過(guò)程中，TALE分子的模塊組裝和篩選過(guò)程比較繁雜，需要大量的測(cè)序工作，對(duì)于普通實(shí)驗(yàn)室的可操作性較低，而商業(yè)化公司構(gòu)建也需要花費(fèi)上千美元，使用成本較高；并且，TALEN的蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量要比ZFN大得多，過(guò)大的蛋白質(zhì)分子往往會(huì)增加分子操作的難度，去除TALEN分子的不必要結(jié)構(gòu)或者縮短識(shí)別序列的長(zhǎng)度能一定程度地減輕影響，但是卻有可能造成識(shí)別特異性降低而導(dǎo)致脫靶切割，引起細(xì)胞毒性。3基因組編輯技術(shù)的新方向CRISPRCAS931CRISPRCAS9系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)及作用原理系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)及作用原理TALEN對(duì)于靶序列識(shí)別的精確性使得該技術(shù)在近3年來(lái)得以飛速發(fā)展，但是其構(gòu)建復(fù)雜，并且較大的相對(duì)分子質(zhì)量在某些情況下使用困難也制約了其應(yīng)用前景。自2002年以來(lái)，CRISPR一直以其奇特的結(jié)構(gòu)與特殊的功能吸引著各國(guó)科學(xué)家們的共同關(guān)注。它的結(jié)構(gòu)非常穩(wěn)定，長(zhǎng)度約2550BP的重復(fù)序列REPEATS被間區(qū)序列SPACERS間隔。2005年，CAS系統(tǒng)CRISPRASSOCIATEDSEQUENCESSYSTEMCASS被發(fā)現(xiàn)在原核生物中表現(xiàn)出某種獲得性免疫功能2，能使宿主獲得抵抗噬菌體、質(zhì)粒等外來(lái)DNA入侵的免疫能力。CRISPRCAS系統(tǒng)的作用機(jī)制大體可分為3個(gè)不同階段在噬菌體侵入的起始階段，CAS蛋白復(fù)合物靶向裂解噬菌體基因組中短的原型間隔序列，這些原型間隔序列整合到宿主基因組中CRISPR位點(diǎn)的5′端；然后這些短的摻入的間隔序列被轉(zhuǎn)錄成CRRNAS；當(dāng)宿主再被噬菌體感染時(shí)，CRRNAS作為模板通過(guò)CAS復(fù)合物靶向降解噬菌體DNA。CRISPR系統(tǒng)大致分為3類(lèi)，其中I型及III型CRISPR系統(tǒng)由復(fù)雜的CAS復(fù)合物介導(dǎo)DNA或RNA的降解，而在產(chǎn)膿鏈球菌STREPTOCOCCUSPYOGENES中發(fā)現(xiàn)的II型CRISPR系統(tǒng)組分較為簡(jiǎn)單，只需要CAS9和兩個(gè)非編碼RNA，3個(gè)組分即可介導(dǎo)外源DNA片段的靶向降解，所以目前針對(duì)CRISPRCAS9研究較多。在CRISPRCAS9系統(tǒng)中，外源的DNA進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，細(xì)菌的RNASEIII催化CRRNA的成熟，成熟的CRRNA通過(guò)堿基配對(duì)與TRACRRNA結(jié)合，形成雙鏈RNA構(gòu)3。這一CRRNATRACRRNA二元復(fù)合體指導(dǎo)CAS9蛋白在CRRNA引導(dǎo)序列靶標(biāo)的特定位點(diǎn)剪切雙鏈DNA，在與CRRNA引導(dǎo)序列互補(bǔ)的位點(diǎn)，CAS9蛋白的HNH核酸酶結(jié)構(gòu)域剪切互補(bǔ)鏈，而CAS9RUVCI結(jié)構(gòu)域剪切非互補(bǔ)鏈。32CRISPRCAS9系統(tǒng)在基因組編輯中的應(yīng)用系統(tǒng)在基因組編輯中的應(yīng)用利用CRISPRCAS9系統(tǒng)對(duì)DNA分子的靶向切割特性，使其可以被用于定向的基因修飾。2012年，來(lái)自加州大學(xué)伯克利分校的DOUDNA研究小組首先利用人工設(shè)計(jì)的CRRNAS序列，使用產(chǎn)膿鏈球菌的CRISPRCAS9系統(tǒng)對(duì)體外的DNA靶序列進(jìn)行了精確切割，并且把CRRNATRACRRNA二元復(fù)合體改造為單

簡(jiǎn)介：L11NUCLEICACIDISTHEGEICMATERIALTOEXPLAINVIAFOUREXAMPLES1DNA是細(xì)菌的遺傳物質(zhì)細(xì)菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)為DNA是遺傳物質(zhì)提供了首要證據(jù)。從第一個(gè)菌株抽提DNA，然后加入到第二個(gè)菌株中，能使遺傳特性從一個(gè)細(xì)菌菌株傳遞到另一個(gè)菌株。肺炎球菌屬能引起肺炎導(dǎo)致老鼠死亡，其莢膜多糖有S型和R型兩種，S型肺炎球菌能與活的S型菌一樣，能同時(shí)殺死老鼠，這說(shuō)明其中存在一種轉(zhuǎn)化物質(zhì)，這種轉(zhuǎn)化物質(zhì)純化后發(fā)現(xiàn)是DNA，所以DNA是細(xì)菌的遺傳物質(zhì)。2DNA是病毒的遺傳物質(zhì)噬菌體感染大腸桿菌的實(shí)驗(yàn)證明DNA是病毒的遺傳物質(zhì)。當(dāng)細(xì)菌的DNA和蛋白質(zhì)組分被標(biāo)記上不同的放射性同位素32P及35S時(shí)，實(shí)驗(yàn)后發(fā)現(xiàn)僅有DNA被傳遞到感染細(xì)菌所產(chǎn)生的子代噬菌體中，這就很好的證明了DNA是病毒的遺傳物質(zhì)。3DNA也是動(dòng)物細(xì)胞的遺傳物質(zhì)當(dāng)DNA加入到某種在培養(yǎng)基中培養(yǎng)的真核單細(xì)胞生物群落中，核酸就會(huì)進(jìn)入到細(xì)胞中去，其中有一部分就會(huì)合成出一些新的蛋白質(zhì)。例如胸腺嘧啶核苷激酶（TK）的合成實(shí)驗(yàn)，DNA被導(dǎo)入受體細(xì)胞中后，便成為受體細(xì)胞的一部分，與其他部分按相同的方式遺傳，導(dǎo)入DNA的表達(dá)將使細(xì)胞產(chǎn)生一些新的特性，初期這些實(shí)驗(yàn)僅僅在那些培養(yǎng)基中培養(yǎng)的單細(xì)胞中獲得了成功。現(xiàn)在人們已經(jīng)成功的通過(guò)顯微注射技術(shù)將DNA導(dǎo)入老鼠的受精卵并使之成為其遺傳物質(zhì)的一個(gè)穩(wěn)定的組成部分。這些實(shí)驗(yàn)直接說(shuō)明DNA不僅是真核生物的遺傳物質(zhì)，而且能夠在不同物種間相互轉(zhuǎn)移并保持功能活性。4有一些病毒如煙草花葉病毒（TMV）等就使用另一種核酸核糖核酸（RNA）作為遺傳物質(zhì)，其化學(xué)組成結(jié)構(gòu)與DNA只是略有不同。煙草TMV重建實(shí)驗(yàn)很好的說(shuō)明了RNA在生命體中起著相同的作用。由此可見(jiàn)，遺傳物質(zhì)的本質(zhì)就是核酸。實(shí)際上，除了一些RNA病毒外，其余生物的遺傳物質(zhì)都是DNA。213即一個(gè)核苷酸中五碳糖第3個(gè)C原子所連接的羥基端，它可與另一分子核苷酸的5′磷酸基形成3′5′磷酸二酯鍵。25即一個(gè)核苷酸中五碳糖第5個(gè)C原子所連接的磷酸端，它可與另一分子核苷酸的5′磷酸基形成3′5′磷酸二酯鍵。31A腺嘌呤（ADENINE）2C胞嘧啶（CYTOSINE）3T胸腺嘧啶（THYMINE）4G鳥(niǎo)嘌呤（GUANINE），4MELTINGTEMPERATUREDNA的熔解溫度。是指通過(guò)加熱由雙鏈變?yōu)閱捂溸@一系列溫度的位于中部的那一點(diǎn)。5SPONTANEOUSMUTATIONS自發(fā)突變。凡自然界中發(fā)生的突變，不管其產(chǎn)生原因是由于DNA復(fù)制發(fā)生錯(cuò)誤還是環(huán)境的損傷，都統(tǒng)稱(chēng)為自發(fā)突變。水性球狀蛋白。PRPSC被感染腦組織中的產(chǎn)物，不能被蛋白酶水解。4SCRAPIE羊瘙癢病羊瘙癢病羊瘙癢病是由蛋白質(zhì)組成的感染劑。5ALLELE等位基因。是指位于染色體同一位置分別控制兩種不同性狀的基因。如基因型AA，A和A就互為等位基因。6HOWTOASSIGNMUTATIONSTOGENESVIATHECISTRANSTESTGIVEANEXAMPLE通過(guò)順?lè)丛囼?yàn)如何將突變分配給基因（舉一例）互補(bǔ)實(shí)驗(yàn)可以用來(lái)決定兩個(gè)突變是否存在于相同基因或不同基因中，該實(shí)驗(yàn)包括構(gòu)建包含兩種突變的雜合子。互補(bǔ)實(shí)驗(yàn)對(duì)照組中，如果兩個(gè)突變位于同一條基因中，可看到在反式和順式配置中，存在著不同的表型。反式配置是突變型的，因?yàn)槊恳粭l等位基因都有（不同的）突變；但順式配置是野生型的，因?yàn)橐粭l等位基因有兩個(gè)突變，而另一條等位基因就沒(méi)有突變。實(shí)驗(yàn)組中，如果兩個(gè)突變位于不同的基因中，我們總能看到野生型，因?yàn)槊織l基因總有一條野生型和一條突變型等位基因，且配置是不相關(guān)的。因而，不能互補(bǔ)意味著兩個(gè)突變是處于同一遺傳單位內(nèi)，不能互相補(bǔ)償?shù)耐蛔儽徽J(rèn)為組成了一部分相同的互補(bǔ)群。另一種用來(lái)描述由互補(bǔ)試驗(yàn)定義的遺傳單位是順?lè)醋?，它等同于基因。這也很好的解釋了基因的互補(bǔ)性。7GAINOFFUNCTIONMUTATION功能獲得型突變。該突變蛋白質(zhì)獲得新的活性或功能，這種性質(zhì)是顯性的。NULLMUTATION無(wú)效突變。該突變使基因的活性完全消失，因?yàn)樵摶蛞驯粍h除。LOSSOFFUNCTIONMUTATION功能喪失型突變。即該突變使某一基因失活，這種性質(zhì)是隱性的。LEAKYMUTANTS遺漏突變。突變后基因仍存在部分功能，因?yàn)橥蛔兒蟮牡鞍踪|(zhì)存在部分活性錯(cuò)義突變，或者因?yàn)楫a(chǎn)生了少量的野生型蛋白質(zhì)無(wú)義突變。此突變不影響表型，功能并不是必需的。8EACHALLELEHASADIFFERENTPHENOTYPEWHYILLUSTRATEBYEXAMPLE為什么每個(gè)等位基因都有一種不同的表型（請(qǐng)例證）基因座可有許多不同的突變等位基因，復(fù)等位基因的存在可允許雜合子發(fā)生任何形式的等位基因組合。如果每一種變化都產(chǎn)生一個(gè)隱性突變，并且它會(huì)阻止活性蛋白質(zhì)的產(chǎn)生，那么一條基因內(nèi)就會(huì)有很多這樣的突變。多種可改變蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的氨基酸替換均能有效地減弱它的功能。同一條基因的變異體稱(chēng)為復(fù)等位基因，它們的存在使突變體之間能夠形成雜合子，這些復(fù)等位基因之間的關(guān)系有各種形式。除了最簡(jiǎn)單的情況外，通常一系列等位基因往往具有不同的表型。例如，黑腹果蠅的W基因座上有一系列的等位基因所表現(xiàn)的從紅眼一直到白眼的多種眼色，其顏色從深到淺均有。在黑腹果蠅控制眼色的W基因座的雜合子中，紅色（野生型）相對(duì)于其他基因來(lái)說(shuō)是顯性的，它們有很多不同的突變等位基因，盡管一些突變基因并未產(chǎn)生眼睛顏

簡(jiǎn)介：現(xiàn)代分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)手冊(cè)現(xiàn)代分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)手冊(cè)工具酶工具酶基因工程在人工可以控制條件下，將基因剪切或重新組合，再導(dǎo)入另一生物體內(nèi)，使這些基因在其中表達(dá)并遺傳下去的一門(mén)技術(shù)。核心對(duì)基因進(jìn)行人工切割、連接和重新組合，構(gòu)建重組DNA。工具酶在基因工程的重組DNA過(guò)程中，所需要用到的酶的統(tǒng)稱(chēng)。一、限制性?xún)?nèi)切酶（限制性?xún)?nèi)切酶（RESTRICTIONENDONUCLEASE）主要功能對(duì)外源性的雙鏈DNA進(jìn)行切割、水解，不允許外源性DNA存在于細(xì)菌自身細(xì)胞內(nèi)。（這種酶能對(duì)在自身細(xì)胞內(nèi)存在的DNA種類(lèi)給予限制限制性?xún)?nèi)切酶）限制修飾系統(tǒng)合成限制性?xún)?nèi)切酶的細(xì)胞，其自身的DNA不受酶的切割，這是因?yàn)榧?xì)菌細(xì)胞還會(huì)合成一種修飾酶，可以對(duì)自身DNA進(jìn)行修飾，即改變DNA原來(lái)具有的可以被限制性?xún)?nèi)切酶識(shí)別的核酸順序結(jié)構(gòu)，從而不被限制性?xún)?nèi)切酶識(shí)別及切割、水解。保護(hù)自身遺傳物質(zhì)穩(wěn)定的機(jī)制。限制性?xún)?nèi)切酶從原核生物中發(fā)現(xiàn)的，約600種，可識(shí)別108種不同的特定DNA順序。以?xún)?nèi)切方式水解核酸鏈中的磷酸二酯鍵，產(chǎn)生DNA片段的5’端為P，3’端為OH。命名獲得該酶的細(xì)菌屬名的第一個(gè)字母（大寫(xiě)）該菌種名的前兩個(gè)字母小寫(xiě)株系的字母（小寫(xiě)）或數(shù)字羅馬數(shù)字（同一株菌種不同內(nèi)切酶的編號(hào)）例細(xì)菌屬名細(xì)菌種名菌株名稱(chēng)限制酶名稱(chēng)ARTHROBACTERLUTEUSALUIESCHERICHIACOLIRY13ECIBACILLUSAMYLOLIQUEFACIENSHHAMHIHAEMOPHILUSINFLUENZAERDHINDIII（一）三種常用內(nèi)切酶（一）三種常用內(nèi)切酶1I型限制性?xún)?nèi)切酶型限制性?xún)?nèi)切酶同時(shí)兼有切割DNA的功能和修飾酶的修飾功能。在酶的識(shí)別位點(diǎn)上，若DNA兩條鏈菌沒(méi)有發(fā)生甲基化，則行使內(nèi)切酶的功能，對(duì)DNA進(jìn)行切割，同時(shí)轉(zhuǎn)變成ATP酶。若DNA雙鏈中有一條鏈已發(fā)生甲基化，則此類(lèi)酶顯示修飾酶的作用，對(duì)另一條DNA進(jìn)行甲基化修飾，然后在行切割功能。（實(shí)際上，有內(nèi)切酶、修飾酶、ATP酶及解旋酶四種功能）I型限制性?xún)?nèi)切酶在DNA鏈上的識(shí)別位點(diǎn)和切割位點(diǎn)不一致，也不固定。沒(méi)有時(shí)間應(yīng)用價(jià)值?！綝NA甲基化DNA化學(xué)修飾的一種形式，能在不改變DNA序列的前提下，改變遺傳表現(xiàn)（外遺傳機(jī)制）。多發(fā)生于CPG二核苷序列上（在甲基轉(zhuǎn)移酶的催化下，DNA的CG兩個(gè)核苷酸中的胞嘧啶被選擇性添加甲基，形成5甲基胞嘧啶）。甲基化位點(diǎn)可隨DNA的復(fù)制而遺傳（DNA復(fù)制后，甲基化酶用選擇專(zhuān)一性不同而產(chǎn)生相同黏性末端的兩種酶切割兩條不同的DNA片段，可使重組后的DNA片段不再被原來(lái)的酶所切割。如SALI酶切割后產(chǎn)生的黏性末端，XHOI酶切割后產(chǎn)生的黏性末端，兩者經(jīng)連接酶連接產(chǎn)生的序列，既不被SALI酶切割，也不被XHOI酶切割。②在同一位置上切割DNA雙鏈，產(chǎn)生平頭末端。如（二）其他類(lèi)型內(nèi)切酶（二）其他類(lèi)型內(nèi)切酶1同工酶（BOSCHIZOMER）來(lái)源不同的兩種II型內(nèi)切酶，它們識(shí)別核苷酸順序及切割位點(diǎn)都相同，差別只在于當(dāng)識(shí)別核苷酸序列中有甲基化的核苷酸時(shí)，一種內(nèi)切酶可以切割，而另一種不能。如HPAII和MSPI識(shí)別順序都是5’CCGG3’，若其中有5甲基胞嘧啶，則只有MSP酶可切割（GGMCC）。2SUBSET酶識(shí)別順序及切割位點(diǎn)相互有關(guān)的酶，互稱(chēng)SUBSET酶。如SAMI酶所識(shí)別的6個(gè)核苷酸順序中含有HPAII酶識(shí)別的4個(gè)核苷酸順序。所以這兩個(gè)酶可以相互代替使用，它們所切割的DNA片段可以相互連接。3可變酶（特殊的）識(shí)別核苷酸順序一般都大于6個(gè)，但其中一個(gè)或幾個(gè)核苷酸時(shí)可以變化的。4遠(yuǎn)距離切割酶識(shí)別核苷酸順序的位置與切割的位點(diǎn)不一致，一般切割位點(diǎn)與指標(biāo)核苷酸順序的位置之間有10個(gè)左右核苷酸的距離。與I型內(nèi)切酶相似，不過(guò)I型內(nèi)切酶識(shí)別位點(diǎn)與切割位點(diǎn)的距離更遠(yuǎn)一些。（三）甲基化酶（不屬于內(nèi)切酶）（三）甲基化酶（不屬于內(nèi)切酶）使識(shí)別順序中的某個(gè)核苷酸發(fā)生甲基化，保護(hù)DNA不被限制性?xún)?nèi)切酶切開(kāi)。M5C（5甲基胞嘧啶）大多數(shù)以M5CPG的形式存在，即CPG島中的C最容易是甲基化的底物，而甲基化又與受之調(diào)控的基因的表達(dá)程度有關(guān)。因此，研究CPG島的甲基化是研究基因調(diào)控的一個(gè)重要方向。當(dāng)甲基化酶和限制性?xún)?nèi)切酶共同使用時(shí)，常常可以使有多個(gè)識(shí)別位點(diǎn)的內(nèi)切酶只對(duì)其中一個(gè)識(shí)別位點(diǎn)有切割效果，其他位點(diǎn)因被甲基化酶修飾而不能被切割。如限制性?xún)?nèi)切酶AVAⅠ的識(shí)別順序是

簡(jiǎn)介：一名詞解釋1C值及C值反常反應(yīng)所謂C值，通常是指一種生物單倍體基因組DNA的總量。真核細(xì)胞基因的最大特點(diǎn)是它含有大量的重復(fù)序列，而且功能DNA序列大多被不編碼蛋白質(zhì)的非功能DNA所隔開(kāi)，這就是C值反?，F(xiàn)象。2半保留復(fù)制DNA生物合成時(shí)，母鏈DNA解開(kāi)分為兩股單鏈，各自為模板按堿基互補(bǔ)規(guī)律，合成與模板互補(bǔ)的子鏈。子代細(xì)胞的DNA，一股從親本完全接受過(guò)來(lái)，另一股則完全從新合成。兩個(gè)子細(xì)胞的DNA堿基序列一致。3復(fù)制叉復(fù)制中的DNA分子，末復(fù)制的部分是秦代雙螺旋，而復(fù)制好的部分是分開(kāi)的，由兩個(gè)子代雙螺旋組成，復(fù)制正在進(jìn)行的部分呈丫狀叫做復(fù)制叉。4岡崎片段在DNA復(fù)制過(guò)程中，后滯鏈的合成先按5’3’合成若干不連續(xù)的小片段，然后再連接成完整的鏈。這些小片段最早由岡崎發(fā)現(xiàn)。5單鏈DNA結(jié)合蛋白結(jié)合單鏈DNA的蛋白，在復(fù)制中維持模板處于單鏈狀態(tài)并保護(hù)單鏈完整。6半不連續(xù)復(fù)制前導(dǎo)鏈連續(xù)復(fù)制而隨從鏈不連續(xù)復(fù)制，就是復(fù)制的半不連續(xù)性。7引發(fā)體復(fù)制的起始含有解螺旋酶DNAC蛋白引物酶和DNA復(fù)制起始區(qū)域的復(fù)合結(jié)構(gòu)稱(chēng)為引發(fā)體。8DNA損傷在復(fù)制過(guò)程中發(fā)生的DNA突變體稱(chēng)為DNA損傷。9AP位點(diǎn)能識(shí)別受損核酸位點(diǎn)的糖苷水解酶，它能特異性切除受損核苷酸上的NB糖苷鍵，在DNA鏈上形成去嘌呤或去嘧啶的位點(diǎn)，統(tǒng)稱(chēng)為AP位點(diǎn)。10轉(zhuǎn)座子是存在于染色體DNA上可自主復(fù)制和位移的基本單位。11端粒酶在真核生物復(fù)制終止后，催化染色體端粒延伸的酶。由端粒酶RNA端粒酶協(xié)同蛋白，端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶等幾部分組成。12基因突變基因結(jié)構(gòu)改變而引起的遺傳信息的改變，從分子水平上來(lái)看，突變就是DNA堿基序列的改變。13錯(cuò)義突變由于堿基對(duì)的取代，使原來(lái)可以翻譯某種氨基酸的密碼子變成了另外一種氨基酸密碼子的突變。14無(wú)義突變?cè)诘鞍踪|(zhì)的結(jié)構(gòu)基因中，一個(gè)核苷酸的改變可能使代表某個(gè)氨基酸的密碼子變成終止密碼子，使蛋白質(zhì)合成提前終止，合成無(wú)功能的或無(wú)意義的多肽，這種突變稱(chēng)為無(wú)義突變。15中心法則通過(guò)DNA的復(fù)制把遺傳信息由親代傳遞給子代，遺傳信息由DNA傳遞到RNA，最后翻譯成特異的蛋白質(zhì)RNA還以逆轉(zhuǎn)錄的方式將遺傳信息體傳遞給DNA分子。這種遺傳信息的流向稱(chēng)為中心法則。16切除修復(fù)在一系列酶的作用下，將DNA分子中受損傷部分切除，以互補(bǔ)鏈為模板合成出空缺的部分，使DNA恢復(fù)正常結(jié)構(gòu)的過(guò)稱(chēng)。17重組修復(fù)DNA在有損傷的情況下也可以復(fù)制，復(fù)制時(shí)子代鏈躍過(guò)損傷部位并留下缺口，通過(guò)分子間重組，從完整的另一條母鏈上將相應(yīng)的核苷酸序列片段移至子鏈缺口處，然后用合成的多核苷酸的序列補(bǔ)上母鏈的空缺，此過(guò)程稱(chēng)重組修復(fù)。34抗終止因子能夠在特定位點(diǎn)組織轉(zhuǎn)錄終止的異類(lèi)蛋白質(zhì)。他們能與RNA聚合酶結(jié)合，幫主RNA聚合酶越過(guò)具有莖環(huán)結(jié)構(gòu)的終止子繼續(xù)轉(zhuǎn)錄目標(biāo)RNA。35順?lè)醋舆z傳學(xué)上將編碼一個(gè)多肽鏈的遺傳單位，稱(chēng)為順?lè)醋印Ｕ婧薓RNA只編碼一種蛋白質(zhì)，為單順?lè)醋印?6翻譯以MRNA為模板，氨酰TRNA為原料直接供體，在多種蛋白質(zhì)因子和酶的參與下，在核糖體上將MRNA分子上的核苷酸順序表達(dá)為有特定氨基酸順序的蛋白質(zhì)的過(guò)程。37密碼子MRNA中堿基順序與蛋白質(zhì)中氨基酸順序的對(duì)應(yīng)關(guān)系是通過(guò)密碼實(shí)現(xiàn)的，MRNA中每3個(gè)相鄰的堿基決定一個(gè)氨基酸，這三個(gè)相鄰的堿基稱(chēng)為一個(gè)密碼子。38擺動(dòng)假說(shuō)CRICK為解釋反密碼子中某些稀有成分的配對(duì)以及許多氨基酸有2個(gè)以上的密碼子的問(wèn)題而提出的假說(shuō)。39肽基轉(zhuǎn)移酶是蛋白質(zhì)合成過(guò)程中的一種酶，它能催化正在延伸的多肽鏈與下一個(gè)氨基酸之間形成肽鏈。40氨酰TRNA合成酶是一類(lèi)催化氨基酸和TRNA相結(jié)合的特異性酶。41同工TRNA指幾個(gè)代表想通氨基酸，能夠被一個(gè)特殊的氨酰TRNA合成酶識(shí)別的TRNA。42SD序列早在1974年，SHINE就發(fā)現(xiàn)，幾種細(xì)菌小亞基RRNA3’末端順序?yàn)?’ACCUCCUA3’，它可以和MRNA中離AUG順序5’側(cè)約913個(gè)堿基處有一段富含嘌呤堿基AGGA或GAGG互補(bǔ)，后來(lái)稱(chēng)此區(qū)域?yàn)镾D。43多核糖體MRNA同時(shí)與若干個(gè)核糖體結(jié)合形成的念珠轉(zhuǎn)結(jié)構(gòu)，稱(chēng)為多核糖體。44核定位序列蛋白質(zhì)中的一種常見(jiàn)的結(jié)構(gòu)域，通常為一短的氨基酸序列，它能與核載體相互作用，將蛋白質(zhì)運(yùn)進(jìn)細(xì)胞核內(nèi)。45操縱子原核細(xì)胞的數(shù)個(gè)功能相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因和其上游的調(diào)控序列組成操控子。46基因打靶是指通過(guò)DNA定點(diǎn)同源重組，改變基因組中的某一特定基因，從而在生物活體內(nèi)研究此基因的功能。47信號(hào)肽常指新和成多肽鏈中用于指導(dǎo)蛋白質(zhì)跨膜轉(zhuǎn)移的N末端的氨基酸序列，至少含有一個(gè)帶正電荷的氨基酸，中部有一高度疏水區(qū)以通過(guò)細(xì)胞膜。48啟動(dòng)子與基因表達(dá)序列啟動(dòng)相關(guān)的順勢(shì)作用元件，是結(jié)構(gòu)基因的重要成分。它是一段位于轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)5’端上游區(qū)大約100200BP以?xún)?nèi)的具有獨(dú)立功能的DNA序列，能活化RNA聚合酶，使之與模板DNA準(zhǔn)確地相結(jié)合并具有轉(zhuǎn)錄起始的特異性。49增強(qiáng)子位于真核基因中遠(yuǎn)離轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)，能明顯增強(qiáng)啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄效率的特殊DNA序列。它可位于被增強(qiáng)的轉(zhuǎn)錄基因的上游或下游，也可相距靶基因較遠(yuǎn)。50弱化子在操縱區(qū)與結(jié)構(gòu)基因之間的一段可以終止轉(zhuǎn)錄作用的核苷酸序列。51順式作用元件是指那些與結(jié)構(gòu)基因表達(dá)調(diào)控相關(guān)，能夠被基因調(diào)控蛋白特異性識(shí)別

簡(jiǎn)介：命題方式集體佛山科學(xué)技術(shù)學(xué)院醫(yī)學(xué)院20082009學(xué)年第一學(xué)期醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)課程期末考試試題A卷專(zhuān)業(yè)、班級(jí)護(hù)理學(xué)本科07級(jí)姓名學(xué)號(hào)題號(hào)一二三四五六總成績(jī)得分一、最佳選擇題（一、最佳選擇題（A型選擇題）型選擇題）（每題（每題1分，共分，共20分）分）1下列哪種突變可引起讀碼框移A、轉(zhuǎn)換或顛換B、顛換C、連續(xù)缺失3個(gè)堿基D、缺失、缺失1個(gè)堿基個(gè)堿基E、插入3個(gè)或3的倍數(shù)個(gè)核苷酸2一種生物單倍體所具有的全部基因稱(chēng)為A、信息庫(kù)B、基因庫(kù)C、基因組、基因組D、基因頻率E、基因數(shù)據(jù)庫(kù)3質(zhì)粒的主要成分是A、多糖B、蛋白質(zhì)C、氨基酸衍生物D、DNA分子E、脂類(lèi)4原核生物基因的特點(diǎn)是A、編碼區(qū)不連續(xù)B、多順?lè)醋?、多順?lè)醋覴NARNAC、斷裂基因D、內(nèi)含子豐富E、重復(fù)序列豐富5外顯子的特點(diǎn)通常是A、不編碼蛋白質(zhì)B、編碼蛋白質(zhì)、編碼蛋白質(zhì)C、只轉(zhuǎn)錄不翻譯D、不轉(zhuǎn)錄也不翻譯E、調(diào)節(jié)基因表達(dá)6人類(lèi)基因組計(jì)劃（HGP）正式啟動(dòng)在哪年A、1990B、1989C、1953D、2001E、1958712轉(zhuǎn)基因動(dòng)物是指A、把某基因轉(zhuǎn)入動(dòng)物的某組織細(xì)胞B、把某基因從一個(gè)動(dòng)物轉(zhuǎn)移到另一個(gè)動(dòng)物C、把致病基因從動(dòng)物體內(nèi)轉(zhuǎn)走D、某基因轉(zhuǎn)入動(dòng)物的受精卵中E、把某基因整合入動(dòng)物的受精卵中，再導(dǎo)入子宮，從而發(fā)育成新個(gè)體把某基因整合入動(dòng)物的受精卵中，再導(dǎo)入子宮，從而發(fā)育成新個(gè)體8在已知序列的情況下獲得目的DNA最常用的是A、篩選CDNA文庫(kù)B、篩選基因組文庫(kù)C、化學(xué)合成法D、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)E、DNA合成儀合成9人類(lèi)基因組平均大小是A、1000BPB、40000BPC、2106D、15109BPE、310109BPBP共4頁(yè)第1頁(yè)二、配伍選擇題（二、配伍選擇題（B型選擇題）型選擇題）（每題（每題1分，共分，共10分）分）A基因矯正B基因替代C基因置換D反義核酸技術(shù)E基因敲除1對(duì)致病基因的異常堿基進(jìn)行糾正，保留正常部分的技術(shù)方法是A2目前基因治療中最常用的方式是B3用正常的基因原位替換病變細(xì)胞內(nèi)的致病基因的技術(shù)方法是CASOUTHERNBIOTTINGBNTHERNBIOTTINGCWESTERNBIOTTINGDGENOMICPCRE原位雜交4分析某組織細(xì)胞中蛋白質(zhì)的表達(dá)水平時(shí)，采用C5分析基因組DNA的分子雜交方法A6用來(lái)鑒定RNA的技術(shù)BA、限制性核酸內(nèi)切酶B、DNA連接酶C、RNA聚合酶D、反轉(zhuǎn)錄酶E、TAQDNA聚合酶7CDNA第一鏈合成時(shí)需要用的酶D8目的基因與載體形成重組DNA需要用的酶BA質(zhì)粒B逆轉(zhuǎn)錄病毒C腺病毒D腺相關(guān)病毒E單純皰疹病毒9目前基因治療最常用的載體B10基因工程中最常用載體A三、三、填空題（每空填空題（每空1分，共分，共1010分）分）1人類(lèi)基因組計(jì)劃的內(nèi)容包括遺傳圖譜、物理圖譜_、轉(zhuǎn)錄圖譜等4張圖。2科學(xué)家感興趣的外源基因又稱(chēng)目的基因，其來(lái)源有幾種途徑化學(xué)合成，_CDNA文庫(kù)_，基因組DNA文庫(kù)及PCR技術(shù)。3原核生物的結(jié)構(gòu)基因是__連續(xù)的_的，沒(méi)有間隔序列，真核生物的結(jié)構(gòu)基因是_間斷的的。4PCR反應(yīng)體系由模板、_引物、DNTP、_TAQ酶_、緩沖液、滅菌水和石蠟油組成。5雙鏈DNA分子作為模板的那條單鏈稱(chēng)為_(kāi)模板鏈有義鏈_鏈，不作為模板的另一條單鏈稱(chēng)為_(kāi)編碼鏈反義鏈_鏈。四、名詞解釋?zhuān)款}四、名詞解釋?zhuān)款}3分，共分，共2424分）分）1、基因是遺傳的基本單位，編碼一條多肽鏈或RNA的一段特定核苷酸序列。2、斷裂基因又稱(chēng)不連續(xù)基因，在DNA分子上基因的編碼序列是由不編碼序列所隔開(kāi)的基因。3、外顯子即編碼序列，出現(xiàn)在成熟MRNA分子中的DNA序列。4、蛋白質(zhì)組指由一個(gè)基因組，或一個(gè)細(xì)胞、組織或個(gè)體表達(dá)的所有蛋白質(zhì)的集合。5、穿梭質(zhì)粒既能在真核細(xì)胞中轉(zhuǎn)化繁殖又能在原核細(xì)胞中轉(zhuǎn)化繁殖的載體。6、分子雜交分子雜交是不同來(lái)源的單鏈核酸通過(guò)堿基互補(bǔ)形成雜合雙鏈的過(guò)程。7、基因診斷就是利用分子生物學(xué)技術(shù)，從DNARNA水平檢測(cè)基因的存在、分析基因結(jié)構(gòu)變異和表達(dá)狀態(tài)，從而對(duì)疾病作出診斷的方法和過(guò)程。8、基因打靶是指通過(guò)DNA定點(diǎn)同源重組，改變基因組中的某一特定基因，從而在生物活體內(nèi)研究此基因的功能或表達(dá)基因產(chǎn)物。

簡(jiǎn)介：中科院2006年攻讀碩士學(xué)位研究生入學(xué)試題生物化學(xué)及分子生物學(xué)一、是非題20題，共30分1、蛋白質(zhì)變性的實(shí)質(zhì)是非共價(jià)鍵斷裂，天然構(gòu)象解體，但共價(jià)鍵未發(fā)生斷裂。2、有些抗生素是多肽或其衍生物。3、“自殺性底物”是指在親和標(biāo)記中使用共價(jià)修飾劑。4、糖原磷酸化酶只催化14糖苷鍵的磷酸解。5、到目前為止發(fā)現(xiàn)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白G蛋白都是三種亞基構(gòu)成的。6、紅外光譜可以研究蛋白質(zhì)溶液的構(gòu)象。7、丙氨酸具有光學(xué)活性。8、線粒體內(nèi)膜固有蛋白大多是線粒體編碼的。9、轉(zhuǎn)錄因子ⅢA能與5SRNA以及5SRNA基因調(diào)控區(qū)結(jié)合因而5SRNA能對(duì)自身的合成進(jìn)行負(fù)反饋調(diào)節(jié)。10、酶催化的反應(yīng)速度總是隨著底物濃度的升高而加快。11、線粒體呼吸鏈復(fù)合物Ⅱ的三維結(jié)構(gòu)已被我國(guó)科學(xué)家解析。這個(gè)復(fù)合物催化琥珀酸脫氫輔酶Q還原酶的同時(shí)產(chǎn)生跨膜質(zhì)子移位。12、去垢劑是一類(lèi)既有親水部分又有疏水部分的分子。13、質(zhì)量性狀是由單個(gè)基因支配，而數(shù)量性狀是由多個(gè)基因決定的。14、生物體的遺傳性狀完全是由基因序列決定的。15、腦細(xì)胞有CD4表面受體，所以HIV病毒也能感染腦細(xì)胞。16、線粒體基因采用的密碼子與細(xì)胞的密碼子有不同。17、原核生物的MRNA翻譯起始區(qū)有一個(gè)SD序列，它與23SRNA的3’端結(jié)合而起始翻譯。18、葡萄糖6磷酸酯酶是高爾基體的標(biāo)志酶。19、孟德?tīng)栠z傳定律和摩爾根遺傳定律分別反應(yīng)了位于不同染色體和相同染色體上的基因ANTHERNBLOTBWESTERNBLOTCSOUTHERNBLOTDEASTERNBLOT9、引起雙倒數(shù)作圖斜率與縱軸截距都改變的可逆抑制劑可以被判斷為A競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑B非競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑C混合性抑制劑D非競(jìng)爭(zhēng)性或混合性抑制劑10、酶促合成ⅡETRNA的反應(yīng)經(jīng)過(guò)ⅡE–AMP中間體ⅡEATP→ⅡE–AMPPPI，ⅡE–AMPTRNA→ⅡE–TRNAAMP。若以此反應(yīng)從32P標(biāo)記的PPI合成32P標(biāo)記的ATP，除了AATRNA合成酶外還需要AATP、32PPIBTRNA、ATP、32PPICⅡE、ATP、32PPIDⅡE、AMP、32PPI11、兩株高矮不同的親本進(jìn)行雜交，子一代的株高比高的親本還要高，決定株高的基因是A顯性基因B隱性基因C共顯性基因D數(shù)量性狀基因12、用于氨基酸分析的雙向紙層析屬于A交換層析B親和層析C分配層析D薄層層析13、SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳用來(lái)測(cè)定蛋白質(zhì)（酶）的表觀分子量的依據(jù)是A電泳遷移率與蛋白質(zhì)的電荷性質(zhì)（等電點(diǎn)）相關(guān)B電泳遷移率與蛋白質(zhì)的分子構(gòu)象相關(guān)C電泳遷移率與蛋白質(zhì)分子量的對(duì)數(shù)值線性相關(guān)D電泳遷移率與蛋白質(zhì)分子量相關(guān)14、酶的純化過(guò)程中最需要關(guān)注的指標(biāo)是A總蛋白量變化和總活力變化B蛋白質(zhì)濃度變化和比活力變化C比活力變化和總活力變化D總活力變化和蛋白質(zhì)濃度變化15、鈉鉀ATP酶催化鈉離子與鉀離子跨膜傳送，每水解一分子ATP有A2個(gè)NA由細(xì)胞內(nèi)到細(xì)胞外，2個(gè)K由細(xì)胞外道細(xì)胞內(nèi)B2個(gè)K由細(xì)胞內(nèi)到細(xì)胞外，2個(gè)NA由細(xì)胞外道細(xì)胞內(nèi)C3個(gè)NA由細(xì)胞內(nèi)到細(xì)胞外，2個(gè)K由細(xì)胞外道細(xì)胞內(nèi)

簡(jiǎn)介：醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)習(xí)題集（參考答案）第二章基因與基因組一、名詞解釋1基因GENE是核酸中儲(chǔ)存有功能的蛋白質(zhì)多肽鏈或RNA序列信息及表達(dá)這些信息所必需的全部核苷酸序列。2斷裂基因SPLITGENE真核生物基因在編碼區(qū)內(nèi)含有非編碼的插入序列，結(jié)構(gòu)基因不連續(xù)，稱(chēng)為斷裂基因。3結(jié)構(gòu)基因STRUCTURALGENE基因中用于編碼RNA或蛋白質(zhì)的DNA序列為結(jié)構(gòu)基因。4非結(jié)構(gòu)基因NONSTRUCTURALGENE結(jié)構(gòu)基因兩側(cè)一段不編碼的DNA片段，含有基因調(diào)控序列。5內(nèi)含子INTRON真核生物結(jié)構(gòu)基因內(nèi)非編碼的插入序列。6外顯子EXON真核生物基因內(nèi)的編碼序列。7基因間DNAINTERGENICDNA基因之間不具有編碼功能及調(diào)控作用的序列。8GTAG法則GTAGLAW真核生物基因的內(nèi)含子5′端大多數(shù)是以GT開(kāi)始，3′端大多數(shù)是以AG結(jié)束，構(gòu)成RNA剪接的識(shí)別信號(hào)。9啟動(dòng)子PROMOTERRNA聚合酶特異識(shí)別結(jié)合和啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄的DNA序列。10上游啟動(dòng)子元件UPSTREAMPROMOTERELEMENTTATA合上游的一些特定的DNA序列，反式作用因子，可與這些元件結(jié)合，調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄的效率。11反應(yīng)元件RESPONSEELEMENT與被激活的信息分子受體結(jié)合，并能調(diào)控基因表達(dá)的特異DNA序列。12POLYA加尾信號(hào)POLYASIGNAL結(jié)構(gòu)基因末端保守的AATAAA順序及下游GT或T富含區(qū)，被多聚腺苷酸化特異因子識(shí)別，在MRNA3′端加約200個(gè)A。13基因組GENOME細(xì)胞或生物體一套完整單倍體的遺傳物質(zhì)的總稱(chēng)。14操縱子OPERON多個(gè)功能相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因成簇串聯(lián)排列，與上游共同的調(diào)控區(qū)和下游轉(zhuǎn)錄終止信號(hào)組成的基因表達(dá)單位。15單順?lè)醋覯ONOCISTRON一個(gè)結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄生成一個(gè)MRNA分子。16多順?lè)醋覲OLYCISTRON原核生物的一個(gè)MRNA分子帶有幾個(gè)結(jié)構(gòu)基因的遺傳信息，17轉(zhuǎn)座因子TRANSPOSABLEELEMENT能夠在一個(gè)DNA分子內(nèi)部或兩個(gè)DNA分子之間移動(dòng)的DNA片段。18轉(zhuǎn)座子TRANSPOSON轉(zhuǎn)座因子的一種類(lèi)型，大小通常為220KB，常帶有抗性基因等其它基因。19基因家族GENEFAMILY是指一組有類(lèi)似功能，核苷酸序列又有同源性的基因。20基因超家族GENESUPERFAMILY由多基因家族及單基因組成，成員間有不同程度的同源，但它們的功能不一定相同。21假基因PSEUDOGENE基因家族中與有功能的基因相似，不表達(dá)有功能的基因產(chǎn)物。22自私DNASELFISHDNA在哺乳動(dòng)物和人類(lèi)基因組中的沒(méi)有特定功能的非編碼序列。23反向重復(fù)INVERTEDREPEAT兩個(gè)相同序列的互補(bǔ)拷貝在同一DNA鏈上反向排列。24串聯(lián)重復(fù)TEMREPEAT具有相同核心序列的高度重復(fù)序列，在基因組中成串排列。25衛(wèi)星DNASATELLITEDNA通過(guò)CSCL密度梯度離心后，在主帶DNA之外的DNA，為具有相同核心序列的高度重復(fù)的串聯(lián)重復(fù)序列。26大衛(wèi)星DNAMACROSATELLITEDNA衛(wèi)星DNA中重復(fù)單位為510BP的DNA序列，在群體中多態(tài)性不顯著。27小衛(wèi)星DNAMINISATELLITEDNA衛(wèi)星DNA中重復(fù)單位為924BP的DNA序列，呈高度多態(tài)性。28微衛(wèi)星DNAMICROSATELLITEDNA衛(wèi)星DNA中重復(fù)單位為26BP的DNA序列，常見(jiàn)為ACN和TGN，高度多態(tài)性，可作遺傳標(biāo)記。29可變數(shù)目串聯(lián)重復(fù)VARIABLENUMBEROFTEMREPEAT衛(wèi)星DNA中重復(fù)單位為924BP的DNA序列，重復(fù)次數(shù)變化很大。30短串聯(lián)重復(fù)SHTTEMREPEAT衛(wèi)星DNA中重復(fù)單位為26BP的DNA序列，常見(jiàn)為ACN和TGN，重復(fù)次數(shù)1060次，總長(zhǎng)度小于150BP，高度多態(tài)性，可作遺傳標(biāo)記。31基因組學(xué)GENOMICS闡明基因組結(jié)構(gòu)、結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系以及基因與基因之間相互作用的一門(mén)科學(xué)。32物理圖譜PHYSICALMAP確定染色體上諸如限制性?xún)?nèi)切核酸酶識(shí)別位點(diǎn)，或序列標(biāo)志位點(diǎn)等的位置圖。33遺傳圖譜GEICMAP確定標(biāo)志位點(diǎn)在一條染色體上的線性排列順序。標(biāo)志位點(diǎn)間

簡(jiǎn)介：第一章緒論分子生物學(xué)分子生物學(xué)的基本含義P8分子生物學(xué)是研究核酸、蛋白質(zhì)等所有生物大分子的形態(tài)、結(jié)構(gòu)特征及其重要性、規(guī)律性和相互關(guān)系的科學(xué)，是人類(lèi)從分子水平上真正揭開(kāi)生物世界的奧秘，由被動(dòng)地適應(yīng)自然界轉(zhuǎn)向主動(dòng)地改造和重組自然界的基礎(chǔ)學(xué)科。分子生物學(xué)與其它學(xué)科的關(guān)系分子生物學(xué)是由生物化學(xué)、生物物理學(xué)、遺傳學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)、以至信息科學(xué)等多學(xué)科相互滲透、綜合融會(huì)而產(chǎn)生并發(fā)展起來(lái)的，凝聚了不同學(xué)科專(zhuān)長(zhǎng)的科學(xué)家的共同努力。它雖產(chǎn)生于上述各個(gè)學(xué)科，但已形成它獨(dú)特的理論體系和研究手段，成為一個(gè)獨(dú)立的學(xué)科。生物化學(xué)與分子生物學(xué)關(guān)系最為密切生物化學(xué)是從化學(xué)角度研究生命現(xiàn)象的科學(xué)，它著重研究生物體內(nèi)各種生物分子的結(jié)構(gòu)、轉(zhuǎn)變與新陳代謝。傳統(tǒng)生物化學(xué)的中心內(nèi)容是代謝，包括糖、脂類(lèi)、氨基酸、核苷酸、以及能量代謝等與生理功能的聯(lián)系。分子生物學(xué)則著重闡明生命的本質(zhì)主要研究生物大分子核酸與蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能、生命信息的傳遞和調(diào)控。細(xì)胞生物學(xué)與分子生物學(xué)關(guān)系也十分密切傳統(tǒng)的細(xì)胞生物學(xué)主要研究細(xì)胞和亞細(xì)胞器的形態(tài)、結(jié)構(gòu)與功能。探討組成細(xì)胞的分子結(jié)構(gòu)比單純觀察大體結(jié)構(gòu)能更加深入認(rèn)識(shí)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)與功能，因此現(xiàn)代細(xì)胞生物學(xué)的發(fā)展越來(lái)越多地應(yīng)用分子生物學(xué)的理論和方法。分子生物學(xué)則是從研究各個(gè)生物大分子的結(jié)構(gòu)入手，但各個(gè)分子不能孤立發(fā)揮作用，生命絕非組成成分的隨意加和或混合，分子生物學(xué)還需要進(jìn)一步研究各生物分子間的高層次組織和相互作用，尤其是細(xì)胞整體反應(yīng)的分子機(jī)理，這在某種程度上是向細(xì)胞生物學(xué)的靠攏。第一章序論1859年發(fā)表了物種起源，用事實(shí)證明“物競(jìng)天擇，適者生存”的進(jìn)化論思想。指出物種的變異是由于大自然的環(huán)境和生物群體的生存競(jìng)爭(zhēng)造成的，徹底否定了“創(chuàng)世說(shuō)”。達(dá)爾文第一個(gè)認(rèn)識(shí)到生物世界的不連續(xù)性。意義達(dá)爾文關(guān)于生物進(jìn)化的學(xué)說(shuō)及其唯物主義的物種起源理論，是生物科學(xué)史上最偉大的創(chuàng)舉之一，具有不可磨滅的貢獻(xiàn)。細(xì)胞學(xué)說(shuō)建立及其意義德國(guó)植物學(xué)家施萊登和動(dòng)物學(xué)家施旺共同提出一切植物、動(dòng)物都是由細(xì)胞組成的，細(xì)胞是一切動(dòng)植物的基本單位。經(jīng)典遺傳學(xué)兩條基本規(guī)律統(tǒng)一律當(dāng)兩種不同植物雜交時(shí)，它們的下一代可能與親本之一完全相同；分離規(guī)律將不同植物品種雜交后的F1代種子再進(jìn)行雜交或自交時(shí)，下一代就會(huì)按照一定的比例分離，因而具有不同的形式。1865年發(fā)表植物雜交試驗(yàn)，直到1900年才被人們重新發(fā)現(xiàn)。孟德?tīng)柋还J(rèn)為經(jīng)典遺傳學(xué)的奠基人?，F(xiàn)代遺傳學(xué)MGAN及其助手第一次將代表某一特性的基因同染色體聯(lián)系起來(lái)，使科學(xué)界普遍認(rèn)識(shí)了染色體的重要性并接受了孟德?tīng)柕倪z傳學(xué)原理。MGAN特別指出種質(zhì)必須由某些獨(dú)立的要素組成，我們把這些要素稱(chēng)為遺傳因子或基因。第二節(jié)分子生物學(xué)發(fā)展簡(jiǎn)史準(zhǔn)備和醞釀階段（19世紀(jì)后期到20世紀(jì)50年代初）對(duì)生命本質(zhì)的認(rèn)識(shí)上的兩點(diǎn)重大突破1確定了蛋白質(zhì)是生命的主要基礎(chǔ)物質(zhì)2確定了生物遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ)是DNA現(xiàn)代分子生物學(xué)的建立和發(fā)展階段（20世紀(jì)50年代初到70年代初）這一階段以1953年WATSON和CRICK提出的DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型作為現(xiàn)代分子生物學(xué)誕生的里程碑開(kāi)創(chuàng)了分子遺傳學(xué)基本理論建立和發(fā)展的黃金時(shí)代。在此期間的主要進(jìn)展包括遺傳信息傳遞中心法則的建立對(duì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的進(jìn)一步認(rèn)識(shí)DNA雙螺旋發(fā)現(xiàn)的意義確立了核酸作為信息分子的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)；提出了堿基配對(duì)是核酸復(fù)制、遺傳信息傳遞的基本方式；從而最后確定了核酸是遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ)，為認(rèn)識(shí)核酸與蛋白質(zhì)的關(guān)系及其在生命中的作用打下了最重要的基礎(chǔ)。CRICK于1954年所提出的中心法則（CENTRALDOGMA）初步認(rèn)識(shí)生命本質(zhì)并開(kāi)始改造生命的深入發(fā)展階段（20世紀(jì)70年代后至今）基因工程技術(shù)的出現(xiàn)作為標(biāo)志。其間的重大成就包括重組DNA技術(shù)的建立和發(fā)展基因組研究的發(fā)展單克隆抗體及基因工程抗體的建立和發(fā)展基因表達(dá)調(diào)控機(jī)理細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)理研究成為新的前沿領(lǐng)域第三節(jié)分子生物學(xué)的主要研究?jī)?nèi)容一DNA重組技術(shù)（RECOMBINANTDNATECHNOLOGY）定義又稱(chēng)為基因工程，根據(jù)分子生物學(xué)和遺傳學(xué)的原理，將一種生物的遺傳物質(zhì)DNA轉(zhuǎn)移到另一生物體中，使后者獲得新的遺傳性狀或表達(dá)出所需要的產(chǎn)物。DNA重組技術(shù)的應(yīng)用利用微生物基因工程生產(chǎn)重組基因工程藥物、轉(zhuǎn)基因植物和動(dòng)物體細(xì)胞克隆、基因表達(dá)與調(diào)控的基礎(chǔ)研究。二生物大分子的結(jié)構(gòu)功能研究三基因組、功能基因組與生物信息學(xué)的研究基因組、蛋白質(zhì)組與生物信息學(xué)基因組GENOME細(xì)胞或生物體一條完整單體的全部染色體遺傳物質(zhì)的總和。人類(lèi)基因組計(jì)劃（HUMANGENOMEPROJECTHGP）測(cè)定出人基因組全部DNA3109鹼基對(duì)的序列、確定人類(lèi)約510萬(wàn)個(gè)基因的一級(jí)結(jié)構(gòu)?；蚪M、蛋白質(zhì)組與生物信息學(xué)蛋白組計(jì)劃（PROTEOMEPROJECT）又稱(chēng)為后基因組計(jì)劃或功能基因組計(jì)劃，用于揭示并闡明細(xì)胞、組織乃至整個(gè)生物個(gè)體全部蛋白質(zhì)及其功能。生物信息學(xué)（BIOINFMATICS）是在生命科學(xué)的研究中，2、存在轉(zhuǎn)錄單元多順?lè)醋覯RNA3、有重疊基因SANGER1977在NATURE上發(fā)表了ΦX174DNA的全部核苷酸序列，正式發(fā)現(xiàn)了重疊基因。第二節(jié)DNA的結(jié)構(gòu)一、DNA的一級(jí)結(jié)構(gòu)所謂DNA的一級(jí)結(jié)構(gòu)，就是指4種核苷酸的連接及其排列順序，表示了該DNA分子的化學(xué)構(gòu)成?；咎攸c(diǎn)①DNA分子是由兩條互相平行的脫氧核苷酸長(zhǎng)鏈盤(pán)繞而成的。②DNA分子中的脫氧核糖和磷酸交替連接，排在外側(cè)，構(gòu)成基本骨架，堿基排列在內(nèi)側(cè)。③兩條鏈上的堿基通過(guò)氫鍵相結(jié)合，形成堿基對(duì)，它的組成有一定的規(guī)律。這就是嘌呤與嘧啶配對(duì)，而且腺嘌呤（A）只能與胸腺嘧啶（T）配對(duì)，鳥(niǎo)嘌呤（G）只能與胞嘧啶（C）配對(duì)。2、DNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)DNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)是指兩條多核苷酸鏈反向平行盤(pán)繞所生成的雙螺旋結(jié)構(gòu)。通常情況下，DNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)分兩大類(lèi)一類(lèi)是右手螺旋，如ADNA和BDNA；另一類(lèi)是左手螺旋，即ZDNA。3、DNA的高級(jí)結(jié)構(gòu)DNA的高級(jí)結(jié)構(gòu)是指DNA雙螺旋進(jìn)一步扭曲盤(pán)繞所形成的特定空間結(jié)構(gòu)。超螺旋結(jié)構(gòu)是DNA高級(jí)結(jié)構(gòu)的主要形式，可分為正超螺旋與負(fù)超螺旋兩大類(lèi)。DNA分子的超螺旋化可以用一個(gè)數(shù)學(xué)公式來(lái)表示LTW其中L為連接數(shù)（LINKINGNUMBER），是指環(huán)形DNA分子兩條鏈間交叉的次數(shù)。只要不發(fā)生鏈的斷裂，L是個(gè)常量。T為雙螺旋的盤(pán)繞數(shù)（TWISTINGNUMBER），W為超螺旋數(shù)（WRITHINGNUMBER），它們是變量。23DNA的復(fù)制231DNA的半保留復(fù)制機(jī)理232復(fù)制的起點(diǎn)、方向和速度233復(fù)制的幾種主要方式一、DNA的復(fù)制1、DNA的半保留復(fù)制每個(gè)子代分子的一條鏈來(lái)自親代DNA，另一條鏈則是新合成的，所以這種復(fù)制方式被稱(chēng)為DNA的半保留復(fù)制（SEMICONSERVATIVEREPLICATION）。DNA的這種半保留復(fù)制保證了DNA在代謝上的穩(wěn)定性。2、復(fù)制的起點(diǎn)與方向一般把生物體的復(fù)制單位稱(chēng)為復(fù)制子（REPLICON）。一個(gè)復(fù)制子只含一個(gè)復(fù)制起點(diǎn)。多復(fù)制子DNA復(fù)制時(shí)，原核生物一般只有一個(gè)起始位點(diǎn)，而真核生物則有多個(gè)起始位點(diǎn)，因而在復(fù)制時(shí)呈現(xiàn)多復(fù)制泡，也稱(chēng)為多復(fù)制子。DNA的復(fù)制主要是從固定的起始點(diǎn)以雙向等速?gòu)?fù)制方式進(jìn)行的（圖218）。復(fù)制叉以DNA分子上某一特定順序?yàn)槠瘘c(diǎn)，向兩個(gè)方向等速生長(zhǎng)前進(jìn)。拓?fù)洚悩?gòu)酶I拓?fù)洚悩?gòu)酶I解開(kāi)負(fù)超螺旋，并與解鏈酶共同作用，在復(fù)制起點(diǎn)處解開(kāi)雙鏈。參與解鏈的除一組解鏈酶外，還有DNA蛋白等。DNA解鏈酶（DNAHELICASE）DNA解鏈酶能通過(guò)水解ATP獲得能量來(lái)解開(kāi)雙鏈DNA。單鏈結(jié)合蛋白（SSB蛋白）SSB蛋白的作用是保證被解鏈酶解開(kāi)的單鏈在復(fù)制完成前能保持單鏈結(jié)構(gòu)，它以四聚體形式存在于復(fù)制叉處，待單鏈復(fù)制后才掉下，重新循環(huán)。所以，SSB蛋白只保持單鏈的存在，并不能起解鏈的作用。3、DNA的半不連續(xù)復(fù)制與岡崎片段DNA復(fù)制時(shí)，短時(shí)間內(nèi)合成的約1000個(gè)核苷酸左右的小片段，稱(chēng)之為岡崎片段OKAZAKIFRAGMENTDNA復(fù)制過(guò)程中至少有一條鏈?zhǔn)紫群铣奢^短的片段，然后再由連接酶連成大分子DNA?，F(xiàn)在已知一般原核生物的岡崎片段要長(zhǎng)些，真核生物中的要短些。進(jìn)一步研究還證明，這種前導(dǎo)鏈的連續(xù)復(fù)制和滯后鏈的不連續(xù)復(fù)制在生物界是有普遍性的，因而稱(chēng)之為雙螺旋的半不連續(xù)復(fù)制。DNA鏈的延伸DNA復(fù)制體REPLISOME在復(fù)制叉附近，形成了以?xún)商譊NA聚合酶Ⅲ全酶分子、引發(fā)體和解鏈酶構(gòu)成的類(lèi)似核糖體大小的復(fù)合體，稱(chēng)為DNA復(fù)制體。4、滯后鏈的引發(fā)DNA復(fù)制時(shí)，往往先由RNA聚合酶在DNA模板上合成一段RNA引物，再由DNA聚合酶從RNA引物3端開(kāi)始合成新的DNA鏈。滯后鏈的引發(fā)過(guò)程往往由引發(fā)體（PRIMOSOME）來(lái)完成。引發(fā)體由6種蛋白質(zhì)N、N、N、DNAB、C和I共同組成，只有當(dāng)引發(fā)前體（PREPRIMOSOME）把這6種蛋白質(zhì)合在一起并與引發(fā)酶（PRIMASE）進(jìn)一步組裝后形成引發(fā)體，才能發(fā)揮其功效。5、鏈的終止當(dāng)復(fù)制叉前移，遇到20BP重復(fù)性終止子序列（TER）時(shí)，TERTUS復(fù)合物能阻擋復(fù)制叉的繼續(xù)前移，等到相反方向的復(fù)制叉到達(dá)后在DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶IV的作用下使復(fù)制叉解體，釋放子鏈DNA。6、復(fù)制的幾種方式1環(huán)狀DNA雙鏈的復(fù)制環(huán)狀雙鏈DNA的復(fù)制可分為Θ型、滾環(huán)型和D環(huán)型幾種類(lèi)型。AΘ型復(fù)制的起始點(diǎn)涉及到DNA雙鏈的解旋和松開(kāi)，形成兩個(gè)方向相反的復(fù)制叉。前導(dǎo)鏈DNA開(kāi)始復(fù)制前，復(fù)制原點(diǎn)的核酸序列被轉(zhuǎn)錄生成短RNA鏈，作為起始DNA復(fù)制的引物。B滾環(huán)型（ROLLINGCIRCLE）這是單向復(fù)制的特殊方式。如ΦX174的雙鏈環(huán)狀DNA復(fù)制型（RF）就是以這種方式復(fù)制的。DNA的合成由對(duì)正鏈原點(diǎn)的專(zhuān)一性切割開(kāi)始，所形成的自由5‘端被從雙鏈環(huán)中置換出來(lái)并為單鏈DNA結(jié)合蛋白所覆蓋，使其3’OH端在DNA聚合酶的作用下不斷延伸。在這個(gè)過(guò)程中，單鏈尾巴的延伸與雙鏈DNA的繞軸旋轉(zhuǎn)同步。