簡(jiǎn)介：中科院研究生院碩士研究生入學(xué)考試中科院研究生院碩士研究生入學(xué)考試生物化學(xué)與分子生物學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)考試大綱考試大綱一、一、考試內(nèi)容考試內(nèi)容1蛋白質(zhì)化學(xué)蛋白質(zhì)化學(xué)考試內(nèi)容考試內(nèi)容蛋白質(zhì)的化學(xué)組成，20種氨基酸的簡(jiǎn)寫符號(hào)氨基酸的理化性質(zhì)及化學(xué)反應(yīng)蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)（一級(jí)、二級(jí)、高級(jí)結(jié)構(gòu)的概念及形式）蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)測(cè)定的一般步驟蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)及分離純化和純度鑒定的方法蛋白質(zhì)的變性作用蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系考試要求考試要求了解氨基酸、肽的分類掌握氨基酸與蛋白質(zhì)的物理性質(zhì)和化學(xué)性質(zhì)了解蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)的測(cè)定方法（目前關(guān)于蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)測(cè)定的新方法和新思路很多，而教科書和教學(xué)中涉及的可能不夠廣泛，建議只讓學(xué)生了解即可）理解氨基酸的通式與結(jié)構(gòu)理解蛋白質(zhì)二級(jí)和三級(jí)結(jié)構(gòu)的類型及特點(diǎn)，四級(jí)結(jié)構(gòu)的概念及亞基掌握肽鍵的特點(diǎn)掌握蛋白質(zhì)的變性作用掌握蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系22核酸化學(xué)核酸化學(xué)考試內(nèi)容考試內(nèi)容核酸的基本化學(xué)組成及分類核苷酸的結(jié)構(gòu)DNA和RNA一級(jí)結(jié)構(gòu)的概念和二級(jí)結(jié)構(gòu)要特點(diǎn)；DNA的三級(jí)結(jié)構(gòu)RNA的分類及各類RNA的生物學(xué)功能核酸的主要理化特性核酸的研究方法考試要求考試要求全面了解核酸的組成、結(jié)構(gòu)、結(jié)構(gòu)單位以及掌握核酸的性質(zhì)考試要求考試要求了解酶的概念掌握酶活性調(diào)節(jié)的因素、酶的作用機(jī)制了解酶的分離提純基本方法熟悉酶的國(guó)際分類（第一、二級(jí)分類）了解特殊酶，如溶菌酶、絲氨酸蛋白酶催化反應(yīng)機(jī)制掌握酶活力概念、米氏方程以及酶活力的測(cè)定方法了解抗體酶、核酶的基本概念掌握固定化酶的方法和應(yīng)用66維生素和輔酶維生素和輔酶考試內(nèi)容考試內(nèi)容維生素的分類及性質(zhì)各種維生素的活性形式、生理功能考試要求考試要求了解水溶性維生素的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、生理功能和缺乏病了解脂溶性維生素的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和功能77激素激素考試內(nèi)容考試內(nèi)容激素的分類激素的化學(xué)本質(zhì)；激素的合成與分泌常見(jiàn)激素的結(jié)構(gòu)和功能（甲狀腺素、腎上腺素、胰島素、胰高血糖素）激素作用機(jī)理考試要求考試要求了解激素的類型、特點(diǎn)理解激素的化學(xué)本質(zhì)和作用機(jī)制了解常見(jiàn)激素的結(jié)構(gòu)和功能理解第二信使學(xué)說(shuō)8新陳代謝和生物能學(xué)新陳代謝和生物能學(xué)考試內(nèi)容考試內(nèi)容新陳代謝的概念、類型及其特點(diǎn)ATP與高能磷酸化合物ATP的生物學(xué)功能電子傳遞過(guò)程與ATP的生成呼吸鏈的組分、呼吸鏈中傳遞體的排列順序

簡(jiǎn)介：1名詞解釋1基因GENE是一段攜帶功能產(chǎn)物（多肽，蛋白質(zhì)，TRNA和RRNA和某些小分子RNA）信息的DNA片段，是控制某種性狀的的遺傳單位。2基因組GENOME泛指一個(gè)有生命體、病毒或細(xì)胞器的全部遺傳物質(zhì)；在真核生物，基因組是指一套染色體（單倍體）DNA。3、端粒以線性染色體形式存在的真核基因組DNA末端都有一種特殊的結(jié)構(gòu)叫端粒。該結(jié)構(gòu)是一段DNA序列和蛋白質(zhì)形成的一種復(fù)合體，僅在真核細(xì)胞染色體末端存在。4、操縱子是指數(shù)個(gè)功能上相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因串聯(lián)在一起，構(gòu)成信息區(qū)，連同其上游的調(diào)控區(qū)（包括啟動(dòng)子和操縱基因）以及下游的轉(zhuǎn)錄終止信號(hào)所構(gòu)成的基因表達(dá)單位，所轉(zhuǎn)錄的RNA為多順?lè)醋印?、順式作用元件是指那些與結(jié)構(gòu)基因表達(dá)調(diào)控相關(guān)、能夠被基因調(diào)控蛋白特異性識(shí)別和結(jié)合的特異DNA序列。包括啟動(dòng)子、上游啟動(dòng)子元件、增強(qiáng)子、加尾信號(hào)和一些反應(yīng)元件等。6、反式作用因子是指真核細(xì)胞內(nèi)含有的大量可以通過(guò)直接或間接結(jié)合順式作用元件而調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄活性的蛋白質(zhì)因子。在反式作用因子中，可直接或間接結(jié)合RNA聚合酶的，稱為轉(zhuǎn)錄因子。轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子結(jié)構(gòu)DNA結(jié)合域酸性活域TF轉(zhuǎn)錄激活域脯氨酸富含域谷氨酰胺富含域蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)結(jié)合域（二聚化結(jié)構(gòu)域）7、啟動(dòng)子是RNA聚合酶特異性識(shí)別和結(jié)合的DNA序列。8、增強(qiáng)子位于真核基因中遠(yuǎn)離轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)，能明顯增強(qiáng)啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄效率的特殊DNA序列。它可位于被增強(qiáng)的轉(zhuǎn)錄基因的上游或下游，也可相距靶基因較遠(yuǎn)。9、基因表達(dá)是指生物基因組中結(jié)構(gòu)基因所攜帶的遺傳信息經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)錄、翻譯等一系列過(guò)程，合成特定的蛋白質(zhì)，進(jìn)而發(fā)揮其特定的生物學(xué)功能和生物學(xué)效應(yīng)的全過(guò)程。10、信息分子調(diào)節(jié)細(xì)胞生命活動(dòng)的化學(xué)物質(zhì)。其中由細(xì)胞分泌的調(diào)節(jié)靶細(xì)胞生命活動(dòng)的化學(xué)物質(zhì)稱為細(xì)胞間信息分子；而在細(xì)胞內(nèi)傳遞信息調(diào)控信號(hào)的化學(xué)物質(zhì)稱為細(xì)胞內(nèi)信息分子。11、受體是存在于靶細(xì)胞膜上或細(xì)胞內(nèi)能特異識(shí)別生物活性分子并與之結(jié)合，進(jìn)而發(fā)生生物學(xué)效應(yīng)的的特殊蛋白質(zhì)。12、分子克隆在體外對(duì)DNA分子按照即定目的和方案進(jìn)行人工重組，將重組分子導(dǎo)入合適宿主，使其在宿主中擴(kuò)增和繁殖，以獲得該DNA分子的大量拷貝。13、蛋白激酶是指能夠?qū)⒘姿峒瘓F(tuán)從磷酸供體分子轉(zhuǎn)移到底物蛋白的氨基酸受體上的一大類酶。14、蛋白磷酸酶是具有催化已經(jīng)磷酸化的蛋白質(zhì)分子發(fā)生去磷酸化反應(yīng)的一類酶分子，與蛋白激酶相對(duì)應(yīng)存在，共同構(gòu)成了磷酸化和去磷酸化這一重要的蛋白質(zhì)活性的開(kāi)關(guān)系統(tǒng)。15、基因工程有目的的通過(guò)分子克隆技術(shù)，人為的操作改造基因，改變生物遺傳性狀的系列過(guò)程。16、載體能在連接酶的作用下和外源DNA片段連接并運(yùn)送DNA分子進(jìn)入受體細(xì)胞的DNA分子。17、轉(zhuǎn)化指質(zhì)粒DNA或以它為載體構(gòu)建的重組DNA導(dǎo)入細(xì)菌的過(guò)程。18、感染以噬菌體、粘性質(zhì)粒和真核細(xì)胞病毒為載體的重組DNA分子，在體外經(jīng)過(guò)包裝成具有感染能力的病毒或噬菌體顆粒，才能感染適當(dāng)?shù)募?xì)胞，并在細(xì)胞內(nèi)擴(kuò)增。19、轉(zhuǎn)導(dǎo)指以噬菌體為載體，在細(xì)菌之間轉(zhuǎn)移DNA的過(guò)程，有時(shí)也指在真核細(xì)胞之間通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)移和獲得細(xì)胞DNA的過(guò)程。20、轉(zhuǎn)染指病毒或以它為載體構(gòu)建的重組子導(dǎo)入真核細(xì)胞的過(guò)程。21、DNA變性在物理或化學(xué)因素的作用下，導(dǎo)致兩條DNA鏈之間的氫鍵斷裂，而核酸分子中的所有共價(jià)鍵則不受影響。22、DNA復(fù)性當(dāng)促使變性的因素解除后，兩條DNA鏈又可以通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合形成DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)。23、退火指將溫度降至引物的TM值左右或以下，引物與DNA摸板互補(bǔ)區(qū)域結(jié)合形成雜交鏈。24、筑巢PCR先用一對(duì)外側(cè)引物擴(kuò)增含目的基因的大片段，再用內(nèi)側(cè)引物以大片段為摸板擴(kuò)增獲取目的基因?？梢蕴岣逷CR的效率和特異性。25、原位PCR以組織固定處理細(xì)胞內(nèi)的DNA或RNA作為靶序列，進(jìn)行PCR反應(yīng)的過(guò)程。26、定量PCR基因表達(dá)涉及的轉(zhuǎn)錄水平的研究常需要對(duì)MRNA進(jìn)行定量測(cè)定，對(duì)此采用的PCR技術(shù)就叫定量PCR。350、順?lè)醋樱–ISTRON）在反式構(gòu)型中不能互補(bǔ)的各突變型所占有的那部分DNA片斷（見(jiàn)互補(bǔ)測(cè)驗(yàn)）。51、結(jié)構(gòu)域是指超二級(jí)結(jié)構(gòu)在空間上進(jìn)一步聚集形成的緊密穩(wěn)定的在蛋白質(zhì)分子上明顯可分的類似球狀的結(jié)構(gòu)。52、分子生物學(xué)（MOLECULARBIOLOGY）是在分子水平上研究生命現(xiàn)象、生命本質(zhì)、生命活動(dòng)及其規(guī)律的學(xué)科。53、醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)從分子水平上研究人體在正常和疾病狀態(tài)下的生命活動(dòng)及其規(guī)律，從分子水平開(kāi)展人類疾病的預(yù)防、診斷和治療研究的一門科學(xué)。53、抑癌基因是指存在于正常細(xì)胞內(nèi)的一大類可抑制細(xì)胞生長(zhǎng)并具有潛在抑癌作用的基因，當(dāng)這類基因在發(fā)生突變、缺失或失活時(shí)可引起細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化而導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。54、基因文庫(kù)（GENELIBRARY，GENEBANK）利用限制性內(nèi)切酶將基因組DNA切成片段，每一DNA片段都與一個(gè)載體分子拼接成重組DNA。將所有的重組DNA分子都引入到宿主細(xì)胞并進(jìn)行擴(kuò)增，得到分子克隆的混合體，這樣一個(gè)混合體稱為基因文庫(kù)。55、CDNA文庫(kù)將CDNA的混合體與載體進(jìn)行連接，使每一個(gè)CDNA分子都與一個(gè)載體分子拼接成重組DNA。將所有的重組DNA分子都引入宿主細(xì)胞并進(jìn)行擴(kuò)增，得到分子克隆的混合體，這樣一個(gè)混合體就稱為CDNA文庫(kù)。56、表達(dá)載體（EXPRESSINGVECT）是用來(lái)在受體細(xì)胞中表達(dá)（轉(zhuǎn)錄和翻譯）外源基因的載體。這類載體除具有克隆載體所具備的性質(zhì)以外，還帶有表達(dá)構(gòu)件轉(zhuǎn)錄和翻譯所必需的DNA序列。真核細(xì)胞病毒做載體；原核細(xì)胞質(zhì)粒、噬菌體做載體57、重組DNA技術(shù)采用載體基因與某目的基因在體外重組的方法克隆DNA的技術(shù)，稱為重組DNA技術(shù)。過(guò)程包括目的基因的獲取、基因載體的選擇與構(gòu)建、目的基因與載體的拼接、重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞、篩選并無(wú)性繁殖含重組體分子的受體細(xì)胞以及陽(yáng)性克隆的表達(dá)。58C值佯謬這種生物體的進(jìn)化程度與基因組大小之間不完全成比例的現(xiàn)象稱為C值佯謬（CVALUEPARADOX）；59基因家族GENEFAMILY概念指核苷酸序列或編碼產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)具有一定同源性的一些基因。60基因組學(xué)GENOMICS發(fā)展和應(yīng)用基因作圖、DNA測(cè)序、基因定位等新技術(shù)以及計(jì)算機(jī)程序，分析生命體（包括人類）全部基因組結(jié)構(gòu)及功能。61分子伴侶是細(xì)胞一類保守蛋白質(zhì)，可識(shí)別肽鏈的非天然構(gòu)象，促進(jìn)各功能域和整體蛋白質(zhì)的正確折疊。62信號(hào)肽各種新生分泌蛋白的N端有保守的氨基酸序列稱信號(hào)肽。63細(xì)胞凋亡（APOPTOSIS有樹(shù)葉凋零之意或程序化細(xì)胞死亡（PROGRAMMEDCELLDEATHPCD是指多細(xì)胞有機(jī)體在正常生理或病理情況下，發(fā)生的一種由多基因控制的主動(dòng)死亡過(guò)程。64凋亡小體指凋亡的最后階段，由胞質(zhì)分割形成大小不等，含有細(xì)胞質(zhì)膜、細(xì)胞器及核碎片的膜包被小體。65DNA片段化（主）凋亡細(xì)胞DNA經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳呈特征性梯狀條帶圖譜66死亡受體DEATHRECEPTSDR指細(xì)胞表面存在的一類能結(jié)合凋亡剌激分子，并將信號(hào)傳遞至胞內(nèi)引起細(xì)胞凋亡的受體67“死亡結(jié)構(gòu)域”概念是凋亡信號(hào)受體共有的、存在于胞內(nèi)的轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞凋亡所必需的一段高度同源的AA序列。68周期蛋白框各類周期蛋白均含有一段約100個(gè)氨基酸的保守序列，稱為周期蛋白框，介導(dǎo)周期蛋白與CDK結(jié)合。69檢驗(yàn)點(diǎn)意指當(dāng)DNA受到損傷時(shí)復(fù)制不完全或紡錘體形成不正常，周期將被阻斷。70蛋白質(zhì)組的含義一個(gè)基因組、一種生物或一種細(xì)胞組織所表達(dá)的全套蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)組學(xué)就是從整體的角度，分析細(xì)胞內(nèi)動(dòng)態(tài)變化的蛋白質(zhì)組成成份、表達(dá)水平與修飾狀態(tài)，了解蛋白質(zhì)之間的相互作用與聯(lián)系，揭示蛋白質(zhì)功能與細(xì)胞生命活動(dòng)規(guī)律的一個(gè)新的研究領(lǐng)域71酵母雙雜交系統(tǒng)是在真核模式生物酵母中進(jìn)行的，研究活細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)相互作用，對(duì)蛋白質(zhì)之間微弱的、瞬間的作用也能通過(guò)報(bào)告基因的表達(dá)產(chǎn)物敏感地檢測(cè)得到。它是一種具有很高靈敏度的研究蛋白質(zhì)之間關(guān)系的技術(shù)。72報(bào)道株經(jīng)改造的、含報(bào)告基因的重組質(zhì)粒的宿主細(xì)胞。73克隆CLONE來(lái)自于同一始祖的一群相同分子、細(xì)菌、細(xì)胞或動(dòng)物（常被成為副本或拷貝）。74克隆化CLONING獲取大量單一拷貝的過(guò)程，也稱無(wú)性繁殖75DNA克隆應(yīng)用酶學(xué)的方法，在體外將各種來(lái)源的遺傳物質(zhì)（同源的或異源的、原核的或真核的、天然的或人工的DNA）與載體DNA接合成一具有自我復(fù)制能力的DNA分子。繼而通過(guò)轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞，篩選出含有目的基因的轉(zhuǎn)化子細(xì)胞。再進(jìn)行擴(kuò)增提取獲得大量同一DNA分子，又稱基因克隆GENECLONING或分子克隆MOLECULARCLOING。76載體（VECT）能攜帶外源基因進(jìn)入受體細(xì)胞并在其中進(jìn)行擴(kuò)增或誘導(dǎo)外源基因表達(dá)的工具。77質(zhì)粒細(xì)菌染色質(zhì)以外的雙鏈環(huán)狀DNA，能自我復(fù)制和表達(dá)其攜帶的遺傳信息。78限制性核酸內(nèi)切酶由細(xì)菌自己產(chǎn)生的一種能識(shí)別和切割DNA內(nèi)部特定序列的一類核酸酶79基因組文庫(kù)GENOMICLIBRARY，G文庫(kù)用基因克隆的方法保存宿主細(xì)胞中的DNA重組分子中的集合所有重組子所含的插入片段的總和代表某種生物基因組全部核苷酸序列。

簡(jiǎn)介：實(shí)例分析分子生物學(xué)技術(shù)的應(yīng)用,以INTERLEUKIN24為例,二、基因功能研究1MRNA水平和蛋白質(zhì)水平表達(dá)譜2體外生物學(xué)活性細(xì)胞模型，調(diào)節(jié)表達(dá)水平細(xì)胞活力、細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期、抑瘤活性、等等3體內(nèi)生物學(xué)活性抑瘤活性、成血管活性、等等,內(nèi)容,一、基因的基本信息發(fā)現(xiàn)、序列、染色體定位、表達(dá)調(diào)控、同源性分子、修飾、降解、細(xì)胞內(nèi)定位、空間結(jié)構(gòu)等等,三、作用機(jī)制信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑和相互作用分子四、應(yīng)用,235DOCUMENTS,IF597757227650306938435521341525648,ONCOGENE1995,1124772486CANCERBIOLTHER20032S23–S37,MDA5，MDA6P21，MDA7/IL24，MDA9/SYNTENIN,,SUBTRACTIONHYBRIDIZATION,一、MDA7/IL24,PAULBFISHERCOLUMBIAUNI,1發(fā)現(xiàn),雜交產(chǎn)物的克隆、篩選和測(cè)序,除去雜交體、過(guò)量探針、鹽和小片段,CANCERBIOLTHER20032S23–S37,2提交序列,NCBI/GENBANK,,,3染色體定位,DATABASEANALYSIS,CYTOGROWTHFACTORREV2003,1435–51,IL10FAMILY,MOLMED200174271282,4與IL24同源的分子,一致的保守的相似的,CYTOKINEGROWTHFACTORREV20031435–51IMMUNOLOGY2005114216670,NCBIBLAST,KEGG,5基因的表達(dá)調(diào)控,JCELLPHYSIOL200018513646,基因組文庫(kù),IL24CDNA探針,PCR,測(cè)序,啟動(dòng)子GCG啟動(dòng)子搜索轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)引物延伸和作圖,轉(zhuǎn)錄水平,啟動(dòng)子序列,JCELLPHYSIOL200018513646,AP1PKCACTIVATEDTFC/EBPGROWTHARRESTANDTERMINALDIFFERENTIATIONASSOCIATEDTF,,轉(zhuǎn)錄起始前復(fù)合物真核生物RNA聚合酶不與DNA分子直接結(jié)合，而需依靠眾多的轉(zhuǎn)錄因子。,轉(zhuǎn)錄前起始復(fù)合物,拼板理論一個(gè)真核生物基因的轉(zhuǎn)錄需要3至5個(gè)轉(zhuǎn)錄因子。轉(zhuǎn)錄因子之間互相結(jié)合，生成有活性和專一性的復(fù)合物，再與RNA聚合酶搭配而有針對(duì)性地結(jié)合、轉(zhuǎn)錄相應(yīng)的基因。,RNA聚合酶保護(hù)法,LUCIFERASEASSAYSYSTEM,JCELLPHYSIOL200018513646,NDEINHEI是啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄活性的重要區(qū)域，C/EBPB和CJUN/AP1提高轉(zhuǎn)錄活性。,重要區(qū)域,NUCLEARLYSATES,ARROW1C/EBPBARROW2AP1,JCELLPHYSIOL200018513646,EMSA,C/EBPB和CJUN/AP1結(jié)合在MDA7/IL24啟動(dòng)子上。,CELLLYSATES,,,IFNΒ和MEZ單獨(dú)或聯(lián)合處理不能顯著改變啟動(dòng)子活性,LUCIFERASEASSAYSYSTEM,ONCOGENE2000191013628,3’UTR的ARE調(diào)節(jié)該基因在終末分化過(guò)程中的MRNA水平,AREAURICHELEMENTS,LUCIFERASEASSAYSYSTEM,ONCOGENE2000191013628,7分泌蛋白,MOLTHER20049335567,OVEREXPRESSION,WB,,ADIL24CELLLYSATE,ADIL24SUPERNATANT,分泌作用的抑制劑,MOLTHER20049335567,WB,CYTOKINEGROWTHFACTORREV20031435–51,PNGASEFENDOGLYCANASEFENDOO內(nèi)O糖苷酶,6翻譯后修飾,OVEREXPRESSION,WB,JBIOLCHEM2002277973417,MDA7/IL24蛋白可被糖基化修飾,MOLTHER20049335567,GLYCOPEPTIDASEF,LSN,7細(xì)胞內(nèi)定位,MOLTHER20049335567,IFC,MOLTHER20049335567,,QUANTITATIVERECEPTORBINDINGANALYSIS,JBIOLCHEM2002277973417,,,,IL20R2,IL20R1/IL20R2,IL22R1/IL20R2結(jié)合AP的活性高。,8受體,JBIOLCHEM2002277973417,CELLSURFACESTAININGASSAY,RTPCR,EXPDERMAT200615991–1004,CANCERBIOLTHER20032S23–S37,RTPCR,PCNC,CYTOKINE20084116–23,FACS,IFC,IL22R1/IL20R2IL20R1/IL20R2,IMMUNOLOGY2005114216670,CYTOGROWTHFACTORREV2003,1435–51,3前列腺4睪丸5卵巢6小腸7結(jié)腸,1MRNA表達(dá)譜分布在人的免疫系統(tǒng),NB,二、基因功能的研究,ONCOGENE2001207051–7063,CYTOGROFACREV20031435–51,?UNTREATEDIFNΒMEZ,24H,NB,ONCOGENE2001207051–7063,REALTIMERTPCR,在黑色素瘤惡性發(fā)展過(guò)程中，MDA7/IL24的MRNA表達(dá)水平逐漸降低，直至完全喪失。,PHARMACOLTHER20061113596628,KAPLANMEIERSURVIVALANALYSIS,CANCERCELLINTER20101029,2蛋白水平,IHC,CYTOKINE20084116–23,類風(fēng)濕關(guān)節(jié)滑膜,NC,SUBLININGMONONUCLEARCELLS,ENDOTHELIALCELLSOFBLOODVESSELS,CYTOKINE20084116–23,ELISA,免疫系統(tǒng)脾、胸腺、外周血白細(xì)胞特定細(xì)胞黑色素細(xì)胞、痣、早期黑色素瘤細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、皮膚成纖維細(xì)胞、皮膚傷口邊緣和基底類成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞腫瘤細(xì)胞50多種，無(wú)內(nèi)源性MDA7/IL24蛋白表達(dá)。,分布局限性,基因在靶細(xì)胞中的過(guò)表達(dá),ADENOVIRUS,JCELLPHYSIOL2007210254959,CAR檢測(cè)COXSACKIEADENOVIRUSRECEPTORS,FACS,WB,,,人正常卵巢上皮細(xì)胞,卵巢癌細(xì)胞,靶細(xì)胞中重組蛋白的檢測(cè),WB,卵巢癌細(xì)胞,MOLCANCER20076111,CANCERIMMUNOLIMMUNOTHER200756205–215,,7D,3細(xì)胞活力,CRYSTALVIOLETSTAINING,CANCERGENETHER20061311101122,TRAIL腫瘤壞死因子相關(guān)的凋亡誘導(dǎo)配體,MOLMED200174271282,TRYPANBLUEEXCLUSIONASSAY,CANCERIMMUNOLIMMUNOTHER200756205–215,TRYPANBLUEEXCLUSIONASSAY,,ADMDA7能夠降低腫瘤細(xì)胞的活力。,特異性抑制多種腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng),4體外抑瘤活性細(xì)胞增殖,CANCERGENETHER20061311101122,MTT,3HTHYMIDINEASSAY,MOLMED200174271282,,,CANCERRES2006661681828191,COLONYFORMATION,缺失信號(hào)肽的突變體SPMDA7具有抗瘤活性,CANCERRES2004642988–2993,WB,MTT,MATRIGELINVASIONASSAY,COLONYFORMATION,C8161,C8161,CANCERRES2004642988–2993,XENOGRAFTTUMORSINNUDEMICE,5體內(nèi)抑瘤活性,,SW620,CANCERGENETHER20061311101122,CANCERBIOLTHER20032S23–S37,,SW620,CANCERGENETHER20061311101122,XENOGRAFTTUMORSINNUDEMICE,IHC,NOAB1,IL24,CANCERGENETHER2006131011–1022,SUBCUTANEOUSSW620TUMORS,抗瘤活性源自MDA7/IL24蛋白的表達(dá),MOLCANCER20076111,MDAH2774TUMORBEARINGANIMAL,PHARMACOLTHER20061113596628,特異性抑制多種腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng),MDAMB453,CANCERIMMUNOLIMMUNOTHER200756205–215,HUVEC,ONCOGENE20022129455866,5細(xì)胞周期分析,FACS,使腫瘤細(xì)胞G2/M期阻滯,CANCERIMMUNOLIMMUNOTHER200756205–215,WB,6細(xì)胞凋亡,CANCERGENETHER20061311101122,FACSANALYSIS,PISTAINING,,ANNEXINVSTAINING,MOLMED200174271–282,,FO1CELLSSB203580P38MARK的抑制劑,DNALADDER,PNAS20029910054–10059,TUNEL,PBS,IL24,CANCERGENETHER2006131011–1022,SUBCUTANEOUSSW620TUMORS,H1299TUMORBEARINGANIMAL,ONCOGENE2002214558–4566,IHC,TUNEL,PCR,RTPCR,IHC,TUNEL,TUNEL,MCF7,MOLMED200174271282,CANCERIMMUNOLIMMUNOTHER200756205–215,CASPASE3ANALYSIS,MDAMB453,人正常卵巢上皮細(xì)胞,卵巢癌細(xì)胞,CASPASE3、CASPASE8和PARP被切割,MOLCANCER20076111,腺病毒感染結(jié)直腸癌細(xì)胞48H后,CANCERGENETHER20061311101122,,,,肺癌細(xì)胞,JCELLPHYSIOL2007210254959,具有劑量依賴效應(yīng),ZVADFMKCASPASE的廣譜抑制劑,CANCERGENETHER20061311101122,,,保護(hù)細(xì)胞免受凋亡,與BCL2家族基因相關(guān),CANCERGENETHER20061311101122,刺激特定細(xì)胞凋亡,參與CASPASE9活化和自切割,腺病毒感染結(jié)直腸癌細(xì)胞48H,HUVECADMDA7,HUVECADMDA7MATRIGEL,ONCOGENE20022129455866,TUBEFORMATION,7抗血管形成作用,抑制內(nèi)皮細(xì)胞形成管狀結(jié)構(gòu),ONCOGENE20022129455866,血管內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)志物表達(dá)降低,H1299TUMORBEARINGANIMALS,1P38MAPK途徑,三、作用機(jī)制,MOLCANCER20076111,WB,PKRDOUBLESTRANDEDRNAACTIVATEDPROTEINKINASE,,PNAS20029915100549,SBP38MARK抑制劑P38DNP38負(fù)顯性突變體,黑色素瘤細(xì)胞FO1,,,,,PNAS20029915100549,NB，WB,GADD生長(zhǎng)阻滯和DNA損傷誘導(dǎo)的基因,,,,,NB，WB,3D,PNAS20029915100549,ANTISENSE,MTT,PNAS20029915100549,ADVECWHITEBARSADMDA7BLACKBARS,P38MAPK途徑和GADD家族成員的關(guān)系,PNAS20029915100549,2PI3K信號(hào)途徑,MOLTHER20038220719,H1299/ADMDA72400CDNA,MICROARRAY,MOLTHER20038220719,WB,H1299,TRYPANBLUEEXCLUSIONASSAY,MOLTHER20038220719,,,BIOTECHNIQUES2002SUPPL30–39,3選擇性誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡具有多種機(jī)制,CANCERRES2004642988–2993,CANCERRES200363238138–8144,MDA7蛋白誘導(dǎo)前列腺癌細(xì)胞凋亡的可能機(jī)制,CANCERRES200565221012810138,四、臨床應(yīng)用研究,CANCERRES200565221012810138,CYCLE1DAY30,Ⅰ期臨床試驗(yàn)證明MDA7/IL24使用安全、有臨床療效。,INGN241重組腺病毒INTROGEN公司,Ⅰ期28例Ⅱ期進(jìn)行中,INGN241ADMDA7TREATMENTOFAMELANOMAMETASTASISINARIGHTSUPRACLAVICULARLYMPHNODE,MOLTHER2005；11,149–159,2ADMDA7/IL24與化療藥物聯(lián)合使用,抗體4D5,TRASTUZUMAB,HERCEPTIN,HER2HUMANEPIDERMALGROWTHFACTORRECEPTOR2,HER2轉(zhuǎn)移乳腺癌,30HER2有效,CANCERGENETHER2006131095868,CANCERGENETHER2006131095868,FACS,CANCERGENETHER2006131095868,TRYPANBLUEEXCLUSIONSTAINING,LADLUC,CANCERGENETHER2006131095868,ADMDA7/IL24HERCEPTIN,,CANCERGENETHER2006131095868,HERCEPTIN1AND2MG/ML,TRYPANBLUEEXCLUSIONSTAINING,MCF7,MDAMB453,MDAMB453,CANCERGENETHER2006131095868,與HERCEPTIN聯(lián)合使用，抗瘤效果更好，并擴(kuò)大抗瘤譜。,CANCERGENETHER2006131095868,MCF7HER18HER2OVEREXPRESSING,EGFREPIDERMALGROWTHFACTORRECEPTOR,EGFRWILDTYPE,ADMDA7＋GEF,JCELLPHYSIOL2007210254959,,,MTT,GE?TINIBANORALLYACTIVESELECTIVEREVERSIBLEINHIBITOROFTHEEGFRTYROSINEKINASE,JCELLPHYSIOL2007210254959,與GEFITINIB聯(lián)合使用，抗瘤效果提高。,JCELLPHYSIOL2007210254959,SMDA7/IL24,1抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞成管能力,CANCERRES20036316510513,3基因工程重組MDA7/IL24蛋白藥物,CANCERRES20036316510513,CANCERRES20036316510513,CANCERBIOLTHER20032S23–S37,裸鼠,CANCERRES20036316510513MOLTHER200511572433,MDAMB4543,CANCERIMMUNOLIMMUNOTHER200756220515,具有體內(nèi)抑瘤活性,CANCERRES20036316510513,SMDA7/IL24的抗瘤活性與其受體相關(guān),CANCERIMMUNOLIMMUNOTHER200756220515,SMDA7/IL24能夠抑制多種腫瘤細(xì)胞增殖，并誘導(dǎo)凋亡,CANCERIMMUNOLIMMUNOTHER200756220515,小結(jié),思考題,在日常生活中，你遇到哪些感興趣而又不知道答案的生命科學(xué)相關(guān)問(wèn)題請(qǐng)用假說(shuō)演繹法對(duì)其中的一個(gè)問(wèn)題進(jìn)行分析和探討。你如何理解研究思路和實(shí)驗(yàn)技術(shù)之間的關(guān)系你認(rèn)為在公共實(shí)驗(yàn)室做實(shí)驗(yàn)應(yīng)該注意哪些問(wèn)題請(qǐng)從正、反兩方面說(shuō)明。在進(jìn)行PCR實(shí)驗(yàn)之前，你應(yīng)該做哪些準(zhǔn)備工作請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)將MDA7基因CDS插入到真核表達(dá)載體PSECTAG2A中的上下游引物。,FIG1,7FIG2是PCR結(jié)果，每個(gè)泳道的模板不同，你如何改進(jìn)PCR條件使得AE樣品能得到特異性好的目的條帶,6你如何評(píng)價(jià)PCR電泳結(jié)果FIG1為什么如有問(wèn)題如何解決,FIG1,8你用熱激法將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化到細(xì)菌中，LBAMP平板沒(méi)有克隆，請(qǐng)分析可能的原因。9WESTERNBLOT實(shí)驗(yàn)中的影響因素有哪些如果你得到的是沒(méi)有任何條帶的白板，你準(zhǔn)備怎么辦10一位同學(xué)未能將PCR產(chǎn)物連入表達(dá)載體，請(qǐng)分析可能是哪些環(huán)節(jié)出問(wèn)題,11實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有的試劑如下1MTRISHCL，1MKCL，TRITONX100，305MGCL2MW203；已知1反應(yīng)BUFFER中各試劑的濃度分別是10MMTRISHCL,50MMKCL,1TRITONX100,15MMMGCL2?，F(xiàn)在要配5ML的10反應(yīng)BUFFER，如何用現(xiàn)有試劑配制請(qǐng)列出計(jì)算過(guò)程。,12對(duì)于一個(gè)分子生物學(xué)的關(guān)鍵詞/術(shù)語(yǔ)，你有哪些想法13就這次課的內(nèi)容，你認(rèn)為還可以從哪些角度進(jìn)行MDA7/IL24的研究請(qǐng)說(shuō)明你的理由。14如果你做某個(gè)實(shí)驗(yàn)，三次都未得到你想要的結(jié)果，你準(zhǔn)備下一步怎么辦15我們實(shí)驗(yàn)課用過(guò)哪些儀器設(shè)備使用時(shí)最需要注意的分別是什么16請(qǐng)從講課內(nèi)容、時(shí)間安排和授課方式上，談?wù)勀銓?duì)“生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)”這門課程的建議。,謝謝,

簡(jiǎn)介：第一章第一章1簡(jiǎn)述孟德?tīng)?、摩爾根和沃森等人?duì)分子生物學(xué)發(fā)展的主要貢獻(xiàn)簡(jiǎn)述孟德?tīng)?、摩爾根和沃森等人?duì)分子生物學(xué)發(fā)展的主要貢獻(xiàn)答孟德?tīng)柕膶?duì)分子生物學(xué)的發(fā)展的主要貢獻(xiàn)在于他通過(guò)豌豆實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)了遺傳規(guī)律、分離規(guī)律及自由組合規(guī)律；摩爾根的主要貢獻(xiàn)在于發(fā)現(xiàn)染色體的遺傳機(jī)制，創(chuàng)立染色體遺傳理論，成為現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)生物學(xué)奠基人；沃森和克里克在1953年提出DAN反向雙平行雙螺旋模型。2寫出寫出DNARNA的英文全稱的英文全稱答脫氧核糖核酸（DNADEOXYRIBONUCLEICACID），核糖核酸（RNARIBONUCLEICACID）3試述試述“有其父必有其子有其父必有其子”的生物學(xué)本質(zhì)的生物學(xué)本質(zhì)答其生物學(xué)本質(zhì)是基因遺傳。子代的性質(zhì)由遺傳所得的基因決定，而基因由于遺傳的作用，其基因的一半來(lái)自于父方，一般來(lái)自于母方。4早期主要有哪些實(shí)驗(yàn)證實(shí)早期主要有哪些實(shí)驗(yàn)證實(shí)DNA是遺傳物質(zhì)寫出這些實(shí)驗(yàn)的主要步驟是遺傳物質(zhì)寫出這些實(shí)驗(yàn)的主要步驟答一，肺炎雙球菌感染實(shí)驗(yàn)，1，R型菌落粗糙，菌體無(wú)多糖莢膜，無(wú)毒，注入小鼠體內(nèi)后，小鼠不死亡。2，S型菌落光滑，菌體有多糖莢膜，有毒，注入到小鼠體內(nèi)可以使小鼠患病死亡。3，用加熱的方法殺死S型細(xì)菌后注入到小鼠體內(nèi)，小鼠不死亡；二，噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)1，噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)過(guò)程吸附→侵入→復(fù)制→組裝→釋放。2，DNA中P的含量多，蛋白質(zhì)中P的含量少；蛋白質(zhì)中有S而DNA中沒(méi)有S，所以用放射性同位素35S標(biāo)記一部分噬菌體的蛋白質(zhì)，用放射性同位素32P標(biāo)記另一部分噬菌體的DNA。用35P標(biāo)記蛋白質(zhì)的噬菌體侵染后，細(xì)菌體內(nèi)無(wú)放射性，即表明噬菌體的蛋白質(zhì)沒(méi)有進(jìn)入細(xì)菌內(nèi)部；而用32P標(biāo)記DNA的噬菌體侵染細(xì)菌后，細(xì)菌體內(nèi)有放射性，即表明噬菌體的DNA進(jìn)入了細(xì)菌體內(nèi)。三，煙草TMV的重建實(shí)驗(yàn)1957年，F(xiàn)RAENKELCONRAT等人，將兩個(gè)不同的TMV株系（S株系和HR株系）的蛋白質(zhì)和RNA分別提取出來(lái)，然后相互對(duì)換，將S株系的蛋白質(zhì)和HR株系的RNA，或反過(guò)來(lái)將HR株系的蛋白質(zhì)和S株系的RNA放在一起，重建形成兩種雜種病毒，去感染煙草葉片。5請(qǐng)定義請(qǐng)定義DNA重組技術(shù)和基因工程技術(shù)重組技術(shù)和基因工程技術(shù)答DNA重組技術(shù)目的是將不同的DNA片段（如某個(gè)基因或基因的一部分）按照人們的設(shè)計(jì)定向連接起來(lái)，然后在特定的受體細(xì)胞中與載體同時(shí)復(fù)制并得到表達(dá)，產(chǎn)生影響受體細(xì)胞的新的遺傳性狀。基因工程技術(shù)是除了包含DNA重組技術(shù)外還包括其他可能是生物細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)得到改造的體系，基因工程是指技術(shù)重組DNA技術(shù)的產(chǎn)業(yè)化設(shè)計(jì)與應(yīng)用，包括上游技術(shù)和下游技術(shù)兩大組成部分。上游技術(shù)指的是基因重組、克隆和表達(dá)的設(shè)計(jì)與構(gòu)建（即重組DNA技術(shù)）；而下游技術(shù)則涉及到基因工程菌或細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)以及基因產(chǎn)物的分離純化過(guò)程。6寫出分子生物學(xué)的主要研究?jī)?nèi)容。寫出分子生物學(xué)的主要研究?jī)?nèi)容。答1，DNA重組技術(shù)；2，基因表達(dá)調(diào)控研究；3，生物大分子的結(jié)構(gòu)功能研究，結(jié)構(gòu)分子生物學(xué)；4，基因組、功能基因組與生物信息學(xué)研究。7分子生物學(xué)的定義分子生物學(xué)的定義答廣義的分子生物學(xué)蛋白質(zhì)及核酸等生物大分子結(jié)構(gòu)和功能的研究都屬于分子生物學(xué)的范疇，即從分子水平闡明生命現(xiàn)象和生物學(xué)規(guī)律狹義的分子生物學(xué)偏重于核酸（基因）的分子生物學(xué)，主要研究基因或DNA的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、表達(dá)和調(diào)控等過(guò)程，當(dāng)然也涉及與這些過(guò)程相關(guān)的蛋白質(zhì)和酶的結(jié)構(gòu)與功能的研究1111，什么是轉(zhuǎn)座子可以分為哪些種類，什么是轉(zhuǎn)座子可以分為哪些種類答轉(zhuǎn)座子是存在于染色體DNA上可自主復(fù)制和移位的基本單位。轉(zhuǎn)座子可分為兩大類插入序列和復(fù)合型轉(zhuǎn)座子。1212，請(qǐng)說(shuō)說(shuō)插入序列與復(fù)合型轉(zhuǎn)座子之間的異同。，請(qǐng)說(shuō)說(shuō)插入序列與復(fù)合型轉(zhuǎn)座子之間的異同。答插入序列是最簡(jiǎn)單的轉(zhuǎn)座子，它不含有任何宿主基因，它們是細(xì)菌染色體或質(zhì)粒DNA的正常組成部分，一般插入序列都是很小的DNA片段，末端帶有倒置重復(fù)序列；復(fù)合型轉(zhuǎn)座子是一類帶有某些抗藥性基因的轉(zhuǎn)座子，其兩翼往往帶有兩個(gè)或者相同高度同源的IS序列，一旦形成復(fù)合轉(zhuǎn)座子，IS序列就不能移動(dòng)，因?yàn)樗麄兊墓δ鼙恍揎椓?，只能作為?fù)合體移動(dòng)。第三章第三章1，什么是編碼鏈?zhǔn)裁词悄０骀?，什么是編碼鏈?zhǔn)裁词悄０骀湸鹋cMRNA序列相同的那條DNA鏈稱為編碼鏈（或有意義鏈）；另一條根據(jù)堿基互補(bǔ)原則指導(dǎo)MRNA合成DNA鏈稱為模版鏈（或反義鏈）。2，簡(jiǎn)述，簡(jiǎn)述RNARNA轉(zhuǎn)錄的概念及其基本過(guò)程。轉(zhuǎn)錄的概念及其基本過(guò)程。答RNA轉(zhuǎn)錄以DNA中的一條單鏈為模板，游離堿基為原料，在DNA依賴的RNA聚合酶催化下合成RNA鏈的過(guò)程?；具^(guò)程模版識(shí)別轉(zhuǎn)錄開(kāi)始轉(zhuǎn)錄延伸轉(zhuǎn)錄終止。3，大腸桿菌的，大腸桿菌的RNARNA聚合酶有哪些組成成分各個(gè)亞基的作用如何聚合酶有哪些組成成分各個(gè)亞基的作用如何答大腸桿菌的RNA聚合酶由2個(gè)Α亞基、一個(gè)Β亞基、一個(gè)Β’亞基和一個(gè)Ω亞基組成的核心酶，加上一個(gè)Σ亞基后則成為聚合酶全酶。Α亞基肯能與核心酶的組裝及啟動(dòng)子的識(shí)別有關(guān)，并參與RNA聚合酶和部分調(diào)節(jié)因子的相互作用；Β亞基和Β’亞基組成了聚合酶的催化中心，Β亞基能與模版DNA、新生RNA鏈及核苷酸底物相結(jié)合。4，什么是封閉復(fù)合物、開(kāi)放復(fù)合物以及三元復(fù)合物，什么是封閉復(fù)合物、開(kāi)放復(fù)合物以及三元復(fù)合物答模版的識(shí)別階段，聚合酶與啟動(dòng)子可逆性結(jié)合形成封閉性復(fù)合物；封閉性復(fù)合物形成后，此時(shí)，DNA鏈仍然處于雙鏈狀態(tài)，伴隨著DNA構(gòu)象的重大變化，封閉性復(fù)合物轉(zhuǎn)化為開(kāi)放復(fù)合物；開(kāi)放復(fù)合物與最初的兩個(gè)NTP相結(jié)合并在這兩個(gè)核苷酸之間形成磷酸二脂鍵后即轉(zhuǎn)變成包括RNA聚合酶、DNA和新生RNA的三元復(fù)合物。5，簡(jiǎn)述，簡(jiǎn)述Σ因子的作用。因子的作用。答1，Σ因子的作用是負(fù)責(zé)模版鏈的選擇和轉(zhuǎn)錄的起始，它是酶的別構(gòu)效應(yīng)物，使酶專一性識(shí)別模版上的啟動(dòng)子；2，Σ因子可以極大的提高RNA聚合酶對(duì)啟動(dòng)子區(qū)DNA序列的親和力；3，Σ因子還能使RNA聚合酶與模版DNA上非特異性位點(diǎn)結(jié)合常數(shù)降低。6，什么是，什么是PRIBNOWPRIBNOWBOXBOX它的保守序列是什么它的保守序列是什么答PRIBNOWBOX是原核生物中中央大約位于轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游10BP處的TATA區(qū)，所以又稱作10區(qū)。它的保守序列是TATAAT。7，什么是上升突變什么是下降突變，什么是上升突變什么是下降突變答上升突變細(xì)菌中常見(jiàn)的啟動(dòng)自突變之一，突變導(dǎo)致PRIBNOW區(qū)共同序列的同一性增加；下降突變細(xì)菌中常見(jiàn)的啟動(dòng)子突變之一，突變導(dǎo)致結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄水平大大降低，如PRIBNOW區(qū)從TATAAT變成AATAAT。8，簡(jiǎn)述原核生物和真核生物，簡(jiǎn)述原核生物和真核生物MRNAMRNA的區(qū)別。的區(qū)別。答1，原核生物MRNA常以多順?lè)醋拥男问酱嬖?。真核生物MRNA一般以單順?lè)醋拥男问酱嬖冢?，原核生物MRNA的轉(zhuǎn)錄與翻譯一般是偶聯(lián)的，真核生物轉(zhuǎn)錄的MRNA前體則需經(jīng)轉(zhuǎn)錄后加工，加工為成熟的MRNA與蛋白質(zhì)結(jié)合生成信息體后才開(kāi)始工作；3，原核生物MRNA半壽期很短，一般為幾分鐘，最長(zhǎng)只有數(shù)小時(shí)。真核生物MRNA的半壽期較長(zhǎng)，如胚胎中的MRNA可達(dá)數(shù)日；4，原核與真核生物MRNA的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)也不同，原核生物的MRNA的5’端無(wú)

簡(jiǎn)介：第一章第一章基因的結(jié)構(gòu)與功能基因的結(jié)構(gòu)與功能自測(cè)題自測(cè)題（一）（一）選擇題選擇題A型題型題1關(guān)于基因的說(shuō)法錯(cuò)誤的是A基因是貯存遺傳信息的單位B基因的一級(jí)結(jié)構(gòu)信息存在于堿基序列中C為蛋白質(zhì)編碼的結(jié)構(gòu)基因中不包含翻譯調(diào)控序列D基因的基本結(jié)構(gòu)單位是一磷酸核苷E基因中存在調(diào)控轉(zhuǎn)錄和翻譯的序列2基因是指A有功能的DNA片段B有功能的RNA片段C蛋白質(zhì)的編碼序列及翻譯調(diào)控序列DRNA的編碼序列及轉(zhuǎn)錄調(diào)控序列E以上都不對(duì)3結(jié)構(gòu)基因的編碼產(chǎn)物不包括ASNRNAC內(nèi)含子不轉(zhuǎn)錄D斷裂基因E外顯子數(shù)目＝內(nèi)含子數(shù)目－17關(guān)于外顯子說(shuō)法正確的是A外顯子的數(shù)量是描述基因結(jié)構(gòu)的重要特征B外顯子轉(zhuǎn)錄后的序列出現(xiàn)在HNRNA中C外顯子轉(zhuǎn)錄后的序列出現(xiàn)在成熟MRNAD外顯子的遺傳信息可以轉(zhuǎn)換為蛋白質(zhì)的序列信息E以上都對(duì)8斷裂基因的敘述正確的是A結(jié)構(gòu)基因中的DNA序列是斷裂的B外顯子與內(nèi)含子的劃分不是絕對(duì)的C轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物無(wú)需剪接加工D全部結(jié)構(gòu)基因序列均保留在成熟的MRNA分子中E原核和真核生物基因的共同結(jié)構(gòu)特點(diǎn)9原核生物的基因不包括A內(nèi)含子B操縱子C啟動(dòng)子

簡(jiǎn)介：1廣石化分子生物學(xué)試題及答案一、名詞解釋1CDNACDNA與CCCDNACCCDNACDNA是由MRNA通過(guò)反轉(zhuǎn)錄酶合成的雙鏈DNA；CCCDNA是游離于染色體之外的質(zhì)粒雙鏈閉合環(huán)形DNA。2標(biāo)準(zhǔn)折疊單位標(biāo)準(zhǔn)折疊單位蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)單元?。菪cΒ－折疊通過(guò)各種連接多肽可以組成特殊幾何排列的結(jié)構(gòu)塊，此種確定的折疊類型通常稱為超二級(jí)結(jié)構(gòu)。幾乎所有的三級(jí)結(jié)構(gòu)都可以用這些折疊類型，乃至他們的組合型來(lái)予以描述，因此又將其稱為標(biāo)準(zhǔn)折疊單位。3CAPCAP環(huán)腺苷酸（CAMP）受體蛋白CRP（CAMPRECEPTPROTEIN），CAMP與CRP結(jié)合后所形成的復(fù)合物稱激活蛋白CAP（CAMPACTIVATEDPROTEIN）4回文序列回文序列DNA片段上的一段所具有的反向互補(bǔ)序列，常是限制性酶切位點(diǎn)。5MICRNAMICRNA互補(bǔ)干擾RNA或稱反義RNA，與MRNA序列互補(bǔ)，可抑制MRNA的翻譯。6核酶核酶具有催化活性的RNA，在RNA的剪接加工過(guò)程中起到自我催化的作用。7模體模體蛋白質(zhì)分子空間結(jié)構(gòu)中存在著某些立體形狀和拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)頗為類似的局部區(qū)域8信號(hào)肽信號(hào)肽在蛋白質(zhì)合成過(guò)程中N端有1536個(gè)氨基酸殘基的肽段，引導(dǎo)蛋白質(zhì)的跨膜。9弱化子弱化子在操縱區(qū)與結(jié)構(gòu)基因之間的一段可以終止轉(zhuǎn)錄作用的核苷酸序列。10魔斑魔斑當(dāng)細(xì)菌生長(zhǎng)過(guò)程中，遇到氨基酸全面缺乏時(shí)，細(xì)菌將會(huì)產(chǎn)生一個(gè)應(yīng)急反應(yīng)，停止全部基因的表達(dá)。產(chǎn)生這一應(yīng)急反應(yīng)的信號(hào)是鳥苷四磷酸PPGPP和鳥苷五磷酸（PPPGPP）。PPGPP與PPPGPP的作用不只是一個(gè)或幾個(gè)操縱子，而33原核生物中有三種起始因子分別是（IF1IF1）、（IF2IF2）和（IF3IF3）。4蛋白質(zhì)的跨膜需要（信號(hào)肽信號(hào)肽）的引導(dǎo)，蛋白伴侶的作用是（輔助肽鏈折疊成天然構(gòu)象的蛋白質(zhì)）。5啟動(dòng)子中的元件通常可以分為兩種（核心啟動(dòng)子元件核心啟動(dòng)子元件）和（上游啟動(dòng)子上游啟動(dòng)子元件元件）。6分子生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容主要包含（結(jié)構(gòu)分子生物學(xué)結(jié)構(gòu)分子生物學(xué)）、（基因表達(dá)與調(diào)控基因表達(dá)與調(diào)控）、（DNADNA重組技術(shù)重組技術(shù)）三部分。7證明DNA是遺傳物質(zhì)的兩個(gè)關(guān)鍵性實(shí)驗(yàn)是（肺炎球菌感染小鼠肺炎球菌感染小鼠）、（T2T2噬菌體感染大腸桿菌菌體感染大腸桿菌）這兩個(gè)實(shí)驗(yàn)中主要的論點(diǎn)證據(jù)是（生物體吸收的外源生物體吸收的外源DNADNA改變了其遺傳潛能改變了其遺傳潛能）。8HNRNA與MRNA之間的差別主要有兩點(diǎn)（HNRNAHNRNA在轉(zhuǎn)變?yōu)樵谵D(zhuǎn)變?yōu)镸RNAMRNA的過(guò)程中的過(guò)程中經(jīng)過(guò)剪接經(jīng)過(guò)剪接，）、（MRNAMRNA的5′5′末端被加上一個(gè)末端被加上一個(gè)M7PGPPPM7PGPPP帽子，在帽子，在MRNA3′MRNA3′末端多了一個(gè)多聚腺末端多了一個(gè)多聚腺苷酸苷酸POLYAPOLYA尾巴尾巴）。9蛋白質(zhì)多亞基形式的優(yōu)點(diǎn)是（亞基對(duì)亞基對(duì)DNADNA的利用來(lái)說(shuō)是一種經(jīng)濟(jì)的方法的利用來(lái)說(shuō)是一種經(jīng)濟(jì)的方法）、（可以減少蛋白質(zhì)合成過(guò)程中隨機(jī)的錯(cuò)誤對(duì)蛋白質(zhì)活性的影響可以減少蛋白質(zhì)合成過(guò)程中隨機(jī)的錯(cuò)誤對(duì)蛋白質(zhì)活性的影響）、（活性能夠非活性能夠非常有效和迅速地被打開(kāi)和被關(guān)閉常有效和迅速地被打開(kāi)和被關(guān)閉）。10蛋白質(zhì)折疊機(jī)制首先成核理論的主要內(nèi)容包括（成核成核）、（結(jié)構(gòu)充實(shí)結(jié)構(gòu)充實(shí)）、（最后重排最后重排）。11半乳糖對(duì)細(xì)菌有雙重作用；一方面（可以作為碳源供細(xì)胞生長(zhǎng)可以作為碳源供細(xì)胞生長(zhǎng)）；另一方面（它又是細(xì)胞壁的成分它又是細(xì)胞壁的成分）。所以需要一個(gè)不依賴于CAMPCRP的啟動(dòng)子S2進(jìn)行本底水平的永久型合成；同時(shí)需要一個(gè)依賴于CAMPCRP的啟動(dòng)子S1對(duì)高水平合成進(jìn)行調(diào)節(jié)。有G時(shí)轉(zhuǎn)錄從（S2S2）開(kāi)始，無(wú)G時(shí)轉(zhuǎn)錄從（S1S1）開(kāi)始。12DNA重組技術(shù)也稱為（基因克隆基因克?。┗颍ǚ肿涌寺》肿涌寺。?。最終目的是（把一個(gè)把一個(gè)

簡(jiǎn)介：1醫(yī)學(xué)細(xì)胞與分子生物學(xué)習(xí)題庫(kù)標(biāo)準(zhǔn)答案醫(yī)學(xué)細(xì)胞與分子生物學(xué)習(xí)題庫(kù)標(biāo)準(zhǔn)答案一、名詞解釋一、名詞解釋1高度重復(fù)基因在真核生物細(xì)胞基因組中重復(fù)出現(xiàn)可達(dá)106次以上的DNA序列，稱為高度重復(fù)序列基因或高度重復(fù)序列DNA。2斷裂基因真核生物大部分基因含有內(nèi)含子，基因是不連續(xù)的，故稱斷裂基因。3基因組細(xì)胞或生物體的整套單倍體遺傳物質(zhì)，稱為基因組?；蚪M的大小用全部DNA的堿基對(duì)總數(shù)表示。4基因是核酸分子中遺傳信息的基本單位，是指RNA序列信息及表達(dá)這些信息所必需的全部核苷酸序列?，F(xiàn)代分子生物學(xué)的基因概念是合成有功能的蛋白質(zhì)或RNA所必需的全部DNA序列（除部分病毒RNA），即一個(gè)基因不僅包括編碼蛋白質(zhì)或RNA的核酸序列，還應(yīng)包括為保證轉(zhuǎn)錄所必需的調(diào)控序列。5微衛(wèi)星DNA6基因文庫(kù)是指含有某種生物體（或組織、細(xì)胞）全部基因的隨機(jī)片段的重組DNA克隆群體。7內(nèi)含子真核生物DNA分子中插入外顯子之間的非編碼序列。8外顯子真核生物DNA分子中編碼蛋白質(zhì)的序列。9基因表達(dá)的調(diào)控機(jī)體的各種細(xì)胞中含有相同的遺傳信息相同的結(jié)構(gòu)基因，但并非在所有細(xì)胞中同時(shí)表達(dá)，而必須根據(jù)機(jī)體的不同發(fā)育階段、不同的組織細(xì)胞及不同的功能狀態(tài)，選擇性、程序性地表達(dá)特定數(shù)量的特定基因，這就叫基因表達(dá)的調(diào)控。10衛(wèi)星DNA是出現(xiàn)在非編碼區(qū)的串聯(lián)重復(fù)序列。11基因表達(dá)是指原核生物和真核生物基因組中特定的結(jié)構(gòu)基因所攜帶的遺傳信息，經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)錄、翻譯等一系列過(guò)程，合成具有特定的生物學(xué)功能的各種蛋白質(zhì)。表現(xiàn)出特定的生物學(xué)效應(yīng)的全過(guò)程。12增強(qiáng)子指位于啟動(dòng)子上游或下游并通過(guò)啟動(dòng)子增強(qiáng)鄰近基因轉(zhuǎn)錄效率的DNA順序，增強(qiáng)子本身不具備啟動(dòng)子活性。13順式作用元件指某些能影響基因表達(dá)但不編碼蛋白質(zhì)和RNA的DNA序列，按照功能分為啟動(dòng)子、增強(qiáng)子、終止子、沉默子和衰減子等。3重組體的過(guò)程，其產(chǎn)物常常稱為重組子。重組體是由兩種不同來(lái)源的DNA組合而成，所以又稱為異源嵌合DNA。28轉(zhuǎn)化29感受態(tài)細(xì)胞30銜接物31溶原生長(zhǎng)32探針是指帶有放射性同位素、生物素或其他活性物質(zhì)標(biāo)記的某種特定的DNA或RNA片段，用于核酸雜交技術(shù)以檢測(cè)待測(cè)樣品中的靶序列。33核酸雜交來(lái)源不同的兩條單鏈核酸分子通過(guò)堿基互補(bǔ)可形成異源雙螺旋，稱為核酸分子雜交。34陽(yáng)性克隆是指目的DNA轉(zhuǎn)化入宿主細(xì)胞的克隆。35陰性克隆36PCRPCR是一種體外擴(kuò)增特異DNA片段的技術(shù)其原理類似于DNA的體內(nèi)擴(kuò)增。它包括高溫變性、低溫退火、中溫延伸三個(gè)基本步驟。37固相雜交結(jié)合于某種固相上的待測(cè)樣品，與溶解在雜交液中的探針進(jìn)行雜交，稱為固相雜交。38液相雜交39預(yù)雜交為減少探針與廣泛存在的非互補(bǔ)核酸的非特異性結(jié)合，在雜交前可用封閉物將這些非特異性位點(diǎn)封閉。這一在雜交前的處理過(guò)程，稱為預(yù)雜交。40印跡雜交41雜交嚴(yán)格度42解鏈溫度43增色效應(yīng)DNA變性后，DNA溶液的紫外吸收作用增強(qiáng)的效應(yīng)，可以作為DNA變性的指標(biāo)。44C值每種真核生物的單倍體基因組中的全部DNA量稱為C值。45假陽(yáng)性克隆46C值悖理C值與生物進(jìn)化復(fù)雜性不相對(duì)應(yīng)的現(xiàn)象，稱為C值悖理。47基因簇48轉(zhuǎn)基因49基因家族真核細(xì)胞的基因組中有許多來(lái)源相同、結(jié)構(gòu)相似、功能相關(guān)的基

簡(jiǎn)介：貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)中心分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)室須知?dú)g迎您進(jìn)入本實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行研究工作，請(qǐng)您務(wù)必先仔細(xì)閱讀進(jìn)室須知1進(jìn)入該室的研究人員必須認(rèn)真閱讀實(shí)驗(yàn)中心及本室各項(xiàng)規(guī)章制度，初次實(shí)驗(yàn)者須有專人指導(dǎo)和帶領(lǐng)。2本實(shí)驗(yàn)室主要是向每一位研究者（或研究生）提供與實(shí)驗(yàn)相關(guān)的、共享的操作平臺(tái)。3本實(shí)驗(yàn)室包括核酸提取分析室、電泳室、儀器室、凈化室、材料消毒室、組培室。4我們將對(duì)初進(jìn)實(shí)驗(yàn)室者或?qū)δ词褂眠^(guò)的相關(guān)儀器進(jìn)行使用指導(dǎo)，以保證您的實(shí)驗(yàn)?zāi)茼樌M(jìn)行，并同時(shí)保證實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備不被損壞。5本實(shí)驗(yàn)室將向您提供所有正常運(yùn)行的設(shè)備儀器，提供所有儀器的中文操作規(guī)程以方便您使用，請(qǐng)您嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行操作，保證實(shí)驗(yàn)設(shè)備安全正常運(yùn)轉(zhuǎn)。6本實(shí)驗(yàn)室不向您提供實(shí)驗(yàn)者實(shí)驗(yàn)所需的試劑、耗材，需要您自購(gòu)、自備、自管。為了您使用方便，我們?yōu)槟峁┕褡咏栌?，以便您保管好個(gè)人實(shí)驗(yàn)物品。7本實(shí)驗(yàn)室不對(duì)您的課題具體安排負(fù)責(zé)，也不對(duì)您的實(shí)驗(yàn)結(jié)果承擔(dān)責(zé)任。8為了保證實(shí)驗(yàn)室的正常運(yùn)行，您離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室時(shí)請(qǐng)退還本室借用物品，遺失者將按管理制度作賠償。9進(jìn)室后請(qǐng)您嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室的管理制度和注意事項(xiàng)，嚴(yán)格按照操作程序進(jìn)行操作，并按登記本要求進(jìn)行登記，如實(shí)填寫儀器工作狀態(tài)，發(fā)現(xiàn)異常立即匯報(bào)，保證實(shí)驗(yàn)室正常、安全、有效地運(yùn)行。謝謝您的合作祝您實(shí)驗(yàn)順利實(shí)驗(yàn)者簽字聯(lián)系電話導(dǎo)師簽字聯(lián)系電話郵箱年月日補(bǔ)充說(shuō)明備注在讀研究生需導(dǎo)師簽字。

簡(jiǎn)介：第一章概念基因基因指貯存有功能的蛋白質(zhì)多肽鏈或RNA序列及表達(dá)這些信息所需的全部核苷酸序列，由核酸的一些特定堿基序列構(gòu)成的表達(dá)遺傳信息的功能單位。結(jié)構(gòu)基因結(jié)構(gòu)基因基因中編碼RNA或蛋白質(zhì)的DNA序列。能參與代謝活動(dòng)或維持組織結(jié)構(gòu)。調(diào)節(jié)基因調(diào)節(jié)基因基因中編碼RNA或蛋白質(zhì)的DNA序列。調(diào)控其他基因的表達(dá)?；蚪M基因組C值矛盾值矛盾C值是一種生物基因組恒定的DNA含量，反映基因組大小，真核生物基因組的大小并非都與其進(jìn)化程度呈正相關(guān)的現(xiàn)象為C值矛盾。RFLP（限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性）（限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性）同一物種不同個(gè)體基因組存在DNA多態(tài)性，且約10％多態(tài)性位點(diǎn)導(dǎo)致限制性酶切位點(diǎn)的形成或消失，因而所含限制性酶切位點(diǎn)的數(shù)目和分布不同，其限制性片段的種類和長(zhǎng)度也不同。SNP（單核苷酸多態(tài)性）（單核苷酸多態(tài)性）指在基因組水平上由單個(gè)核苷酸變異產(chǎn)生的DNA多態(tài)性。真核細(xì)胞和原核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)的差異（斷裂基因）真核細(xì)胞基因組特點(diǎn)如非編碼序列占絕大部分、重復(fù)序列、基因家族真核細(xì)胞基因組特點(diǎn)如非編碼序列占絕大部分、重復(fù)序列、基因家族染色體DNA是線性分子，含復(fù)制起點(diǎn)、著絲粒DNA、端粒等功能元件；細(xì)胞核DNA形成染色體結(jié)構(gòu)，染色體數(shù)目一定，體細(xì)胞一般是二倍體；基因組序列中僅有不到10％是編碼序列；基因在基因組中散在分布；基因組序列中包含高度重復(fù)序列、中度重復(fù)序列等大量重復(fù)序列；蛋白質(zhì)的編碼序列大都屬于單一序列；存在各種基因家族；含大量轉(zhuǎn)座元件。原核細(xì)胞基因組特點(diǎn)如編碼序列占絕大部分、類核、質(zhì)粒原核細(xì)胞基因組特點(diǎn)如編碼序列占絕大部分、類核、質(zhì)粒基因組DNA通常為單一閉環(huán)雙鏈分子，只有一個(gè)復(fù)制起點(diǎn)；基因組序列的50％是編碼序列；非編碼序列主要是一些調(diào)控序列；所含基因的數(shù)目比病毒多，并且多形成操縱子結(jié)合。病毒基因組特點(diǎn)如重疊基因病毒基因組特點(diǎn)如重疊基因所含核酸的種類與結(jié)構(gòu)、分子數(shù)不同；基因組較小，為單倍體并且所含基因?yàn)閱慰截?；基因組序列基本上都是編碼序列；基因的連續(xù)性不同；相關(guān)基因串聯(lián)成一個(gè)轉(zhuǎn)錄單位。第五章概念基因表達(dá)基因表達(dá)是由基因指導(dǎo)合成功能產(chǎn)物RNA和蛋白質(zhì)的過(guò)程，體現(xiàn)了DNA與蛋白質(zhì)、基因型與表型、遺傳與代謝的關(guān)系。管家基因管家基因編碼細(xì)胞基本組分的基因和細(xì)胞基本代謝相關(guān)基因。順式作用元件順式作用元件是基因序列的一部分，是RNA聚合酶或調(diào)節(jié)蛋白的結(jié)合位點(diǎn)，包括啟動(dòng)子、終止子，原核生物的操縱基因和激活蛋白結(jié)合位點(diǎn)、真核生物的增強(qiáng)子和沉默子等。反式作用因子反式作用元件即調(diào)節(jié)基因，通過(guò)編碼產(chǎn)物調(diào)控基因表達(dá)，其編碼產(chǎn)物為反式作用因子。正調(diào)節(jié)正調(diào)節(jié)指調(diào)節(jié)蛋白與調(diào)控序列結(jié)合促進(jìn)基因表達(dá)。負(fù)調(diào)節(jié)負(fù)調(diào)節(jié)指調(diào)節(jié)蛋白與調(diào)控序列結(jié)合阻遏基因表達(dá)。增強(qiáng)子增強(qiáng)子是真核生物促進(jìn)轉(zhuǎn)錄的一類調(diào)控序列，與啟動(dòng)子可以相鄰、重疊或包含，通過(guò)結(jié)合調(diào)節(jié)蛋白、改變?nèi)旧|(zhì)構(gòu)象而促進(jìn)一種或一組基因的轉(zhuǎn)錄。印跡基因印跡基因來(lái)自父母的本源基因，一方表達(dá)一方不表達(dá)。原核生物基因表達(dá)調(diào)控的特點(diǎn)原核生物基因表達(dá)調(diào)控的特點(diǎn)①既有正調(diào)節(jié)，又有負(fù)調(diào)節(jié)②調(diào)節(jié)蛋白都是DNA結(jié)合蛋白③存在衰減調(diào)控機(jī)制④存在應(yīng)急應(yīng)答調(diào)控機(jī)制操縱子的基本結(jié)構(gòu)操縱子的基本結(jié)構(gòu)一個(gè)啟動(dòng)子、一個(gè)操縱基因及其所控制的一組功能相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因等組成。乳糖操縱子的兩種調(diào)控模式乳糖操縱子的兩種調(diào)控模式P118試劑的作用試劑的作用蛋白酶K（水解由脂肪族氨基酸、芳香族氨基酸的羧基形成的肽鍵，使DNA游離）、EDTA（使細(xì)菌懸?。DS（去污劑裂解細(xì)胞、使蛋白質(zhì)變性）、巰基乙醇（快速裂解細(xì)胞，解離和蛋白，釋放RNA）、溴化乙錠（染色、解旋DNA）、上樣緩沖液（監(jiān)測(cè)電泳進(jìn)程，增加樣本密度）、DDNTP（DNA測(cè)序）核酸純度判定比值核酸純度判定比值①純度較高的DNA≈18如果18可能含有RNA或DNA部分降解OD260OD280OD260OD280如果20可能有RNA降解OD260OD280核酸電泳用于構(gòu)型分析核酸電泳用于構(gòu)型分析①閉環(huán)DNA②快環(huán)DNA③線性DNADNA測(cè)序方法類型測(cè)序方法類型①鏈終止發(fā)②化學(xué)降解發(fā)③DNA測(cè)序自動(dòng)化第八章概念雜交雜交不同來(lái)源單鏈核酸的退火。探針探針是用于指示特定物質(zhì)的性質(zhì)或狀態(tài)的一類標(biāo)記分子。印跡印跡是指將核酸和蛋白質(zhì)等樣品用類似于吸墨跡的方法從凝膠等電泳或?qū)游鼋橘|(zhì)中轉(zhuǎn)移到合適的印跡膜上，樣品在印跡膜上的相對(duì)位置與在凝膠中時(shí)一樣。DNA印跡和印跡和RNA印跡方法的差別印跡方法的差別①電泳分離DNA片段通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳按長(zhǎng)度分離；為了保持RNA呈單鏈狀態(tài)進(jìn)行電泳，以使RNA按分子大小分離，需要先用變性劑將RNA樣品完全變性，在通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳。②變性DNA用堿液處理電泳凝膠；RNA只能用甲醛、乙二醛、二甲亞砜等變性。蛋白質(zhì)印跡與核酸印跡方法的差別蛋白質(zhì)印跡與核酸印跡方法的差別“探針”不同，是能與目的蛋白特異性結(jié)合的抗體。DNA印跡（印跡（SOUTHERNBLOT）、RNA印跡（印跡（NTHERNBLOTTING）、蛋白質(zhì)印跡（、蛋白質(zhì)印跡（WESTERNBLOT）對(duì)應(yīng)的英文簡(jiǎn)稱第九章基因芯片的原理基因芯片的原理先將大量已知序列的DNA片段作為探針按照一定的陣列高密度固定于基片表面，這樣陣列中的每一個(gè)點(diǎn)實(shí)際上代表了一種特定基因，然后與用熒光素標(biāo)記的待測(cè)核酸進(jìn)行雜交。用專門儀器檢測(cè)芯片上的雜交信號(hào)，經(jīng)過(guò)計(jì)算機(jī)分析處理，獲得待測(cè)核酸的各種信息。第十章PCR反應(yīng)體系反應(yīng)體系組成包括DNA聚合酶、DNA引物、DNTP原料、目的DNA模板和緩沖溶液等。PCR反應(yīng)原理反應(yīng)原理變性、退火、延伸，以上三部的循環(huán)。多重多重PCR、ASPCR、RTPCR、QPCR的應(yīng)用的應(yīng)用基因組DNA擴(kuò)增、基因分離、基因克隆、克隆鑒定、定點(diǎn)誘變、突變鑒定、探針制備、DNA測(cè)序等。

簡(jiǎn)介：1第十四、二十一章第十四、二十一章基因工程、分子生物學(xué)常用技術(shù)段里原理及其應(yīng)用基因工程、分子生物學(xué)常用技術(shù)段里原理及其應(yīng)用復(fù)習(xí)測(cè)試復(fù)習(xí)測(cè)試（一）名詞解釋（一）名詞解釋1DNA重組2基因工程3限制性核酸內(nèi)切酶4基因組DNA文庫(kù)5CDNA文庫(kù)6聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）7載體8轉(zhuǎn)化9感染10核酸分子雜交11SOUTHERN印跡雜交12NTHERN印跡雜交13斑點(diǎn)印跡14原位雜交15DNA芯片16基因診斷17基因治療（二）選擇題（二）選擇題A型題型題1限制性核酸內(nèi)切酶作用特點(diǎn)不包括A在對(duì)稱序列處切開(kāi)DNABDNA兩鏈的切點(diǎn)常不在同一位點(diǎn)C酶切后產(chǎn)生的DNA片段多半具有粘性互補(bǔ)末端DDNA兩鏈的切點(diǎn)常在同一位點(diǎn)E酶辨認(rèn)的堿基一般為4～6個(gè)2限制性核酸內(nèi)切酶A可將單鏈DNA任意切斷B可將雙鏈DNA序列特異切開(kāi)C可將兩個(gè)DNA分子連接起來(lái)D不受DNA甲基化影響E由噬菌體提取而得3CDNA文庫(kù)包括該種生物的A某些蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因B所有基因組C結(jié)構(gòu)基因與不表達(dá)的調(diào)控區(qū)D內(nèi)含子和調(diào)節(jié)區(qū)E內(nèi)含子和外顯子3B噬菌體C經(jīng)改造的逆轉(zhuǎn)錄病毒D人類DNAE酵母質(zhì)粒11常用質(zhì)粒有以下特性A是線形雙鏈DNAB插入片段的容量比Λ噬菌體DNA大C含有抗生素抗性基因D含有同一限制性核酸內(nèi)切酶的多個(gè)切口E不隨細(xì)菌繁殖而進(jìn)行自我復(fù)制12在重組體中切出插入片段最常用的方法是A以重組時(shí)所用限制性核酸內(nèi)切酶將其切出B用其它限制性酶將其切出C用S1核酸酶將其切出D用DNA酶將切出E用多種限制性內(nèi)切酶將其切出13利用PCR擴(kuò)增特異DNA序列主要原理之一是A反應(yīng)體系內(nèi)存在特異DNA片段B反應(yīng)體系內(nèi)存在特異RNA片段C反應(yīng)體系內(nèi)存在特異DNA引物D反應(yīng)體系內(nèi)存在特異RNA引物E反應(yīng)體系內(nèi)存在的TAQDNA聚合酶具有識(shí)別特異DNA序列的作用14表達(dá)人類蛋白質(zhì)的最理想的細(xì)胞體系是A大腸桿菌表達(dá)體系B原核表達(dá)體系C酵母表達(dá)體系D昆蟲表達(dá)體系E哺乳類細(xì)胞表達(dá)體系15限制性核酸內(nèi)切酶切割DNA后產(chǎn)生A3′磷酸基末端和5′羥基末端B5′磷酸基末端和3′羥基末端C3′磷酸基末端和5′磷酸基末端D5′羥基末端和3′羥基末端E3′羥基末端和5′羥基末端及磷酸16下列描述最能確切表達(dá)質(zhì)粒DNA作為克隆載體特性的是A小型環(huán)狀雙鏈DNA分子B攜帶有某些抗生素抗性基因C在細(xì)胞分裂時(shí)恒定地傳給子代細(xì)胞D具有自我復(fù)制功能

簡(jiǎn)介：時(shí)間就是金錢，效率就是生命唯有惜時(shí)才能成功，唯有努力方可成就“生物化學(xué)與分子生物學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)”題庫(kù)第二軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)部第二軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)部生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室編制生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室編制2004年7月時(shí)間就是金錢，效率就是生命唯有惜時(shí)才能成功，唯有努力方可成就C、氨基酸殘基側(cè)鏈處螺旋的外側(cè)D、通過(guò)二硫鍵維持其穩(wěn)定E、螺旋每周含36個(gè)氨基酸殘基7、學(xué)習(xí)“蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能”的理論后，我們認(rèn)識(shí)到概念錯(cuò)誤是（）。A、蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)決定空間結(jié)構(gòu)B、蛋白質(zhì)變性是肽鍵斷裂所致C、四級(jí)結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)必定由二條或二條以上多肽鏈組成D、活性不僅取決于其一級(jí)結(jié)構(gòu)，還依賴于高級(jí)結(jié)構(gòu)的正確E、活性蛋白質(zhì)必須具有三級(jí)或三級(jí)以上結(jié)構(gòu)8、蛋白質(zhì)分子發(fā)生變性的原因是（）。A、分子內(nèi)肽鍵的斷裂B、酶水解部分肽鏈片段C、尿素破壞分子的空間結(jié)構(gòu)D、硫酸銨沉淀蛋白質(zhì)分子E、蛋白質(zhì)分子結(jié)晶析出9、有關(guān)“蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)與功能”的描述，不正確的是（）。A、三級(jí)結(jié)構(gòu)是指整條肽鏈所有原子的相對(duì)空間位置B、蛋白質(zhì)分子中的亞基都是相同的C、肽鍵的自由旋轉(zhuǎn)形成肽鏈的不同空間構(gòu)象D、酶原的激活改變分子的一級(jí)結(jié)構(gòu)E、亞基是四級(jí)結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)分子才具有的組成單位。10、在280NM波長(zhǎng)處有最大吸收峰的氨基酸是A、THR和METB、CYS和ASNC、TRP和TYRD、GLU和PROE、LYS和SER11、維持蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的主要因素是。A、靜電作用力B、氫鍵C、疏水鍵D、范德華作用力E、二硫鍵12、關(guān)于蛋白質(zhì)Β折疊結(jié)構(gòu)的概念，正確的是（）A、其肽平面由C、H、O、N四個(gè)原子組成。B、它只有反平行式結(jié)構(gòu)，沒(méi)有平行式結(jié)構(gòu)C、Α螺旋是右手螺旋，Β折疊是左手螺旋D、主鏈骨架成鋸齒狀形成折疊的片層

簡(jiǎn)介：分子生物學(xué)知識(shí)點(diǎn)總結(jié)1蛋白質(zhì)組PROTEOMEPROTEINSEXPRESSEDBYAGENOME即基因組表達(dá)的全套蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)組學(xué)（PROTEMICS）則是以蛋白質(zhì)組為研究對(duì)象，從整體角度，分析細(xì)胞或組織內(nèi)蛋白質(zhì)構(gòu)成的動(dòng)態(tài)變化和活動(dòng)規(guī)律的科學(xué)。（相互作用網(wǎng)絡(luò)PPI）2表達(dá)蛋白質(zhì)組學(xué)研究的基本流程蛋白樣品的制備及定量總蛋白的雙向凝膠電泳（染色）凝膠分析軟件分析膠內(nèi)酶解（胰肽酶）質(zhì)譜分析（肽質(zhì)量指紋圖譜）數(shù)據(jù)庫(kù)搜索鑒定蛋白性質(zhì)3雙向凝膠電泳相互垂直的兩個(gè)方向上，分別基于蛋白質(zhì)不同的等電點(diǎn)和分子量，先經(jīng)等電聚焦電泳ISOELECTRICFOCUSING，IEF，再經(jīng)變性聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDSPAGE）把復(fù)雜的蛋白質(zhì)成分分離。4比較蛋白質(zhì)組學(xué)通過(guò)比較同一個(gè)體腫瘤細(xì)胞（組織）與正常細(xì)胞（組織）之間蛋白質(zhì)在表達(dá)數(shù)量、表達(dá)位置和修飾狀態(tài)上的差異，發(fā)現(xiàn)與腫瘤發(fā)病或者發(fā)展有關(guān)的分子標(biāo)記，用來(lái)作為腫瘤診斷的腫瘤相關(guān)蛋白。5軟電離所謂“軟電離”是指樣品分子電離時(shí)保留整個(gè)分子的完整性，不會(huì)形成碎片離子。6腫瘤血清蛋白質(zhì)分析方法（TUMSEROLOGICPROTEOMEANALYSIS，SERPA）是從腫瘤免疫學(xué)觀點(diǎn)出發(fā)建立的一種蛋白質(zhì)組學(xué)和腫瘤免疫學(xué)相結(jié)合的方法。SERPA其實(shí)驗(yàn)過(guò)程如下①雙向電泳分離腫瘤組織（細(xì)胞）總蛋白質(zhì)；②轉(zhuǎn)膜；③建立WESTERNBLOTTING蛋白質(zhì)印跡反應(yīng)圖譜（與患者或正常人血清反應(yīng)）；④軟件分析確定差異反應(yīng)的蛋白質(zhì)斑點(diǎn)；⑤質(zhì)譜鑒定和生物信息對(duì)腫瘤組織平行膠REPLICAGEL中相應(yīng)的差異蛋白質(zhì)點(diǎn)進(jìn)行鑒定，篩選出腫瘤分子標(biāo)志物；⑥用ELISA、免疫組化等方法對(duì)該分子標(biāo)志物進(jìn)行原位驗(yàn)證，或者進(jìn)一步分析該蛋白功能，研究其在腫瘤進(jìn)展中發(fā)揮的作用。7蛋白質(zhì)芯片是將大量蛋白質(zhì)分子按預(yù)先設(shè)置的排列固定于一種載體表面，形成微陣列，根據(jù)蛋白質(zhì)分子間特異性結(jié)合的原理，構(gòu)建微流體生物化學(xué)分析系統(tǒng)，以實(shí)現(xiàn)對(duì)生物分子的準(zhǔn)確、快速、大信息量的檢測(cè)。8功能蛋白質(zhì)組學(xué)是指對(duì)蛋白質(zhì)間、蛋白質(zhì)與DNARNA間的相互作用的研究。以細(xì)胞內(nèi)與某個(gè)功能有關(guān)或某種條件下的一群蛋白質(zhì)為主要研究?jī)?nèi)容，由此建立細(xì)胞內(nèi)外信號(hào)傳遞的復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)。研究方法主要有蛋白質(zhì)芯片技術(shù)目前常用蛋白質(zhì)芯片有1SELDITOFMS蛋白質(zhì)芯片2抗體芯片3靶蛋白質(zhì)芯片4液相蛋白質(zhì)芯片噬菌體展示技術(shù)酵母雙雜交系統(tǒng)15CASPASE含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶，是一組對(duì)底物的天冬氨酸部位有特異水解作用的，活性中心富含半胱氨酸的蛋白水解酶。CASPASE功能1細(xì)胞骨架蛋白和核纖層蛋白，導(dǎo)致細(xì)胞解體成凋亡小體2激活DNA酶（CASPASEACTIVATEDDNASE，CAD）。CADCASPASE激活的DNA酶正常情況下CAD與其抑制劑ICAD結(jié)合，在胞質(zhì)內(nèi)，無(wú)活性。凋亡時(shí)CASPASE水解ICAD游離的CAD有活性，進(jìn)入胞核，切割DNA。3滅活凋亡抑制物如BCL2、ICAD4水解與DNA損傷修復(fù)相關(guān)的酶和蛋白質(zhì)如聚ADP核糖多聚酶（POLYADPRIBOSEPOLYMERASEPARP）16死亡受體途徑外源性途徑死亡受體TNFR1、FAS、CAR1、NGFR、DR3、DR4、DR5等是一類通過(guò)與相應(yīng)配體結(jié)合，傳遞細(xì)胞凋亡信號(hào)的細(xì)胞膜蛋白。通路（PATHWAY）死亡配體（細(xì)胞外）死亡受體（細(xì)胞膜）相關(guān)蛋白（中介蛋白，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)）激活CASPASE8激活CASPASE3細(xì)胞凋亡17線粒體損傷途徑內(nèi)源性途徑線粒體是細(xì)胞生命活動(dòng)的控制中心，它不僅是細(xì)胞呼吸鏈和氧化磷酸化的中心，而且是細(xì)胞凋亡的調(diào)控中心。①釋放細(xì)胞色素C（CYTC）②釋放凋亡誘導(dǎo)因子（APOPTOSISINDUCINGFACT，AIF）和限制性核酸內(nèi)切酶G（ENDOG）③釋放SMACDIABLOTHESECONDMITOCHONDRIADERIVEDACTIVATOFCASPASESMACDIRECTIAPBINGDINGPROTEINDIABLO④釋放活性氧ROS18細(xì)胞周期1G1期（FIRSTGAP）從有絲分裂到DNA復(fù)制前的一段時(shí)期，又稱合成前期，此期主要合成RNA和核糖體。該期特點(diǎn)是物質(zhì)代謝活躍，迅速合成RNA和蛋白質(zhì)，細(xì)胞體積顯著增大。這一期的主要意義在于為下階段S期的DNA復(fù)制作好物質(zhì)和能量的準(zhǔn)備。2S期（SYNTHESIS）即DNA合成期，在此期，除了合成DNA外，同時(shí)還要合成組蛋白。DNA復(fù)制所需要的酶都在這一時(shí)期合成。3G2期（SECONDGAP）期為DNA合成后期，是有絲分裂的準(zhǔn)備期。在這一時(shí)期，DNA合成終止，大量合成RNA及蛋白質(zhì)，包括微管蛋白和促成熟因子等。

簡(jiǎn)介：1第一章第一章緒論緒論1染色體具有哪些作為遺傳物質(zhì)的特征染色體具有哪些作為遺傳物質(zhì)的特征答①分子結(jié)構(gòu)相對(duì)穩(wěn)定；②能夠自我復(fù)制，使親子代之間保持連續(xù)性；③能夠指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成，從而控制整個(gè)生命過(guò)程；④能夠產(chǎn)生可遺傳的變異。。2什么是核小體簡(jiǎn)述其形成過(guò)程。什么是核小體簡(jiǎn)述其形成過(guò)程。答由DNA和組蛋白組成的染色質(zhì)纖維細(xì)絲是許多核小體連成的念珠狀結(jié)構(gòu)。核小體是由H2AH2BH3H4各兩個(gè)分子生成的八聚體和由大約200BP的DNA組成的。八聚體在中間，DNA分子盤繞在外，而H1則在核小體外面核小體的形成是染色體中DNA壓縮的第一階段。在核小體中DNA盤繞組蛋白八聚體核心，從而使分子收縮至原尺寸的17。200BPDNA完全舒展時(shí)長(zhǎng)約68NM卻被壓縮在10NM的核小體中。核小體只是DNA壓縮的第一步。核小體長(zhǎng)鏈200BP→核酸酶初步處理→核小體單體200BP→核酸酶繼續(xù)處理→核心顆粒146BP3簡(jiǎn)述真核生物染色體的組成及組裝過(guò)程簡(jiǎn)述真核生物染色體的組成及組裝過(guò)程答組成蛋白質(zhì)核酸。組裝過(guò)程1，首先組蛋白組成盤裝八聚體，DNA纏繞其上，成為核小體顆粒，兩個(gè)顆粒之間經(jīng)過(guò)DNA連接，形成外徑10NM的纖維狀串珠，稱為核小體串珠纖維；2，核小體串珠纖維在酶的作用下形成每圈6個(gè)核小體，外徑30NM的螺線管結(jié)構(gòu)；3，螺線管結(jié)構(gòu)再次螺旋化，形成超螺旋結(jié)構(gòu)；4，超螺線管，形成絆環(huán)，即線性的螺線管形成的放射狀環(huán)。絆環(huán)在非組蛋白上纏繞即形成了顯微鏡下可見(jiàn)的染色體結(jié)構(gòu)。4簡(jiǎn)述簡(jiǎn)述DNA的一的一二三級(jí)結(jié)構(gòu)的特征三級(jí)結(jié)構(gòu)的特征答DNA一級(jí)結(jié)構(gòu)4種核苷酸的的連接及排列順序，表示了該DNA分子的化學(xué)結(jié)構(gòu)DNA二級(jí)結(jié)構(gòu)指兩條多核苷酸鏈反向平行盤繞所生成的雙螺旋結(jié)構(gòu)DNA三級(jí)結(jié)構(gòu)指DNA雙螺旋進(jìn)一步扭曲盤繞所形成的特定空間結(jié)構(gòu)6簡(jiǎn)述簡(jiǎn)述DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)及其在現(xiàn)代分子生物學(xué)發(fā)展中的意義雙螺旋結(jié)構(gòu)及其在現(xiàn)代分子生物學(xué)發(fā)展中的意義1DNA雙螺旋是由兩條互相平行的脫氧核苷酸長(zhǎng)鏈盤繞而成的多核苷酸的方向由核苷酸間的磷酸二酯鍵的走向決定，一條是53，另一條是35。（2）DNA雙螺旋中脫氧核糖和磷酸交替連接，排在外側(cè)，構(gòu)成基本骨架，堿基排列在內(nèi)側(cè)（3）其兩條鏈上的堿基通過(guò)氫鍵相結(jié)合，形成堿基對(duì)意義該模型揭示了DNA作為遺傳物質(zhì)的穩(wěn)定性特征，最有價(jià)值的是確認(rèn)了堿基配對(duì)原則，這是DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和反轉(zhuǎn)錄的分子基礎(chǔ)，亦是遺傳信息傳遞和表達(dá)的分子基礎(chǔ)。該模型的提出是20世紀(jì)生命科學(xué)的重大突破之一，它奠定了生物化學(xué)和分子生物學(xué)乃至整個(gè)生命科學(xué)飛速發(fā)展的基石。7DNA復(fù)制通常采取哪些方式復(fù)制通常采取哪些方式①線性DNA雙鏈的復(fù)制將線性復(fù)制子轉(zhuǎn)變?yōu)榄h(huán)狀或多聚分子3個(gè)相同或高度同源的IS序列，表明IS序列插入到某個(gè)功能基因兩端時(shí)就可能產(chǎn)生復(fù)合轉(zhuǎn)座子。一旦形成復(fù)合轉(zhuǎn)座子，IS序列就不能再單獨(dú)移動(dòng)，因?yàn)樗鼈兊墓δ鼙恍揎椓耍荒茏鳛閺?fù)合體移動(dòng)。大部分情況下，這些轉(zhuǎn)座子的轉(zhuǎn)座能力是由IS序列決定和調(diào)節(jié)的。除了末端帶有IS序列的復(fù)合轉(zhuǎn)座子外，還存在一些沒(méi)有IS序列的，體積龐大的轉(zhuǎn)座子（5000BP以上）TNA家族。12請(qǐng)說(shuō)說(shuō)插入序列與復(fù)合型轉(zhuǎn)座子之間異同。請(qǐng)說(shuō)說(shuō)插入序列與復(fù)合型轉(zhuǎn)座子之間異同。答轉(zhuǎn)座子是存在于染色體DNA上的可自主復(fù)制和位移的基本單位。最簡(jiǎn)單的轉(zhuǎn)座子不含有任何宿主基因而被稱為插入序列（IS），他們是細(xì)菌染色體或質(zhì)粒DNA的正常組成部分。她常常被定位到特定的基團(tuán)中，造成基因突變。、復(fù)合式轉(zhuǎn)座子是一類帶有某些抗藥性基因的轉(zhuǎn)座子，其兩翼是相同的或高度同源的IS序列，且IS序列是不能單獨(dú)移動(dòng)的只能作為復(fù)合體移動(dòng)而且IS序列也決定和調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)座子的轉(zhuǎn)座能力。也是有沒(méi)有IS序列的轉(zhuǎn)座子TNA家族，其兩翼帶有38BP的倒置重復(fù)序列13組蛋白上都存在哪些修飾其作用是什么組蛋白上都存在哪些修飾其作用是什么P27答甲基化、乙?；?、磷酸化、泛素化及ADP核糖基化等。以甲基化（基因激活與沉默）、乙?；ㄞD(zhuǎn)錄激活，轉(zhuǎn)錄延伸，DNA修復(fù)拼接復(fù)制，染色體組裝，基因沉默，信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)）為主。影響染色體的結(jié)構(gòu)和功能、基因的表達(dá)和沉默。第三章第三章生物信息的傳遞（上）生物信息的傳遞（上）從DNA到RNA1，什么是編碼鏈?zhǔn)裁词悄０骀?，什么是編碼鏈?zhǔn)裁词悄０骀湸鹋cMRNA序列相同的那條DNA鏈稱為編碼鏈（或有意義鏈）；另一條根據(jù)堿基互補(bǔ)原則指導(dǎo)MRNA合成DNA鏈稱為模版鏈（或反義鏈）。2，簡(jiǎn)述，簡(jiǎn)述RNARNA轉(zhuǎn)錄的概念及其基本過(guò)程。轉(zhuǎn)錄的概念及其基本過(guò)程。答RNA轉(zhuǎn)錄以DNA中的一條單鏈為模板，游離堿基為原料，在DNA依賴的RNA聚合酶催化下合成RNA鏈的過(guò)程。基本過(guò)程模版識(shí)別轉(zhuǎn)錄開(kāi)始轉(zhuǎn)錄延伸轉(zhuǎn)錄終止。3，大腸桿菌的，大腸桿菌的RNARNA聚合酶有哪些組成成分各個(gè)亞基的作用如何聚合酶有哪些組成成分各個(gè)亞基的作用如何答大腸桿菌的RNA聚合酶由2個(gè)Α亞基、一個(gè)Β亞基、一個(gè)Β’亞基和一個(gè)Ω亞基組成的核心酶，加上一個(gè)Σ亞基后則成為聚合酶全酶。Α亞基肯能與核心酶的組裝及啟動(dòng)子的識(shí)別有關(guān)，并參與RNA聚合酶和部分調(diào)節(jié)因子的相互作用；Β亞基和Β’亞基組成了聚合酶的催化中心，Β亞基能與模版DNA、新生RNA鏈及核苷酸底物相結(jié)合。4，什么是封閉復(fù)合物、開(kāi)放復(fù)合物以及三元復(fù)合物，什么是封閉復(fù)合物、開(kāi)放復(fù)合物以及三元復(fù)合物答模版的識(shí)別階段，聚合酶與啟動(dòng)子可逆性結(jié)合形成封閉性復(fù)合物；封閉性復(fù)合物形成后，此時(shí)，DNA鏈仍然處于雙鏈狀態(tài)，伴隨著DNA構(gòu)象的重大變化，封閉性復(fù)合物轉(zhuǎn)化為開(kāi)放復(fù)合物；開(kāi)放復(fù)合物與最初的兩個(gè)NTP相結(jié)合并在這兩個(gè)核苷酸之間形成磷酸二脂鍵后即轉(zhuǎn)變成包括RNA聚合酶、DNA和新生RNA的三元復(fù)合物。5，簡(jiǎn)述，簡(jiǎn)述Σ因子的作用。因子的作用。答1，Σ因子的作用是負(fù)責(zé)模版鏈的選擇和轉(zhuǎn)錄的起始，它是酶的別構(gòu)效應(yīng)物，使酶專一性識(shí)別模版上的啟動(dòng)子；2，Σ因子可以極大的提高RNA聚合酶對(duì)啟動(dòng)子區(qū)DNA序列的親和力；3，Σ因子還能使RNA聚合酶與模版DNA上非特異性位點(diǎn)結(jié)合常數(shù)降低。6，什么是，什么是PRIBNOWPRIBNOWBOXBOX它的保守序列是什么它的保守序列是什么

簡(jiǎn)介：核酸結(jié)構(gòu)與功能核酸結(jié)構(gòu)與功能一、填空題1病毒ΦX174及M13的遺傳物質(zhì)都是單鏈DNA。2AIDS病毒的遺傳物質(zhì)是單鏈RNA。3X射線分析證明一個(gè)完整的DNA螺旋延伸長(zhǎng)度為34NM。4氫鍵負(fù)責(zé)維持AT間（或GC間）的親和力5天然存在的DNA分子形式為右手B型螺旋。二、選擇題（單選或多選）1證明DNA是遺傳物質(zhì)的兩個(gè)關(guān)鍵性實(shí)驗(yàn)是肺炎球菌在老鼠體內(nèi)的毒性和T2噬菌體感染大腸桿菌。這兩個(gè)實(shí)驗(yàn)中主要的論點(diǎn)證據(jù)是（C）。A從被感染的生物體內(nèi)重新分離得到DNA作為疾病的致病劑BDNA突變導(dǎo)致毒性喪失C生物體吸收的外源DNA（而并非蛋白質(zhì)）改變了其遺傳潛能DDNA是不能在生物體間轉(zhuǎn)移的，因此它一定是一種非常保守的分子E真核心生物、原核生物、病毒的DNA能相互混合并彼此替代21953年WATSON和CRICK提出（A）。A多核苷酸DNA鏈通過(guò)氫鍵連接成一個(gè)雙螺旋BDNA的復(fù)制是半保留的，常常形成親本子代雙螺旋雜合鏈C三個(gè)連續(xù)的核苷酸代表一個(gè)遺傳密碼D遺傳物質(zhì)通常是DNA而非RNAE分離到回復(fù)突變體證明這一突變并非是一個(gè)缺失突變3DNA雙螺旋的解鏈或變性打斷了互補(bǔ)堿基間的氫鍵，并因此改變了它們的光吸收特性。以下哪些是對(duì)DNA的解鏈溫度的正確描述（CD）A哺乳動(dòng)物DNA約為45℃，因此發(fā)燒時(shí)體溫高于42℃是十分危險(xiǎn)的B依賴于AT含量，因?yàn)锳T含量越高則雙鏈分開(kāi)所需要的能量越少C是雙鏈DNA中兩條單鏈分開(kāi)過(guò)程中溫度變化范圍的中間值D可通過(guò)堿基在260NM的特征吸收峰的改變來(lái)確定E就是單鏈發(fā)生斷裂（磷酸二酯鍵斷裂）時(shí)的溫度4DNA的變性（ACE）。A包括雙螺旋的解鏈B可以由低溫產(chǎn)生C是可逆的D是磷酸二酯鍵的斷裂E包括氫鍵的斷裂5在類似RNA這樣的單鏈核酸所表現(xiàn)出的“二級(jí)結(jié)構(gòu)”中，發(fā)夾結(jié)構(gòu)的形成（AD）。A基于各個(gè)片段間的互補(bǔ)，形成反向平行雙螺旋B依賴于AU含量，因?yàn)樾纬傻臍滏I越少則發(fā)生堿基配對(duì)所需的能量也越少C僅僅當(dāng)兩配對(duì)區(qū)段中所有的堿基均互補(bǔ)時(shí)才會(huì)發(fā)生D同樣包括有像GU這樣的不規(guī)則堿基配對(duì)E允許存在幾個(gè)只有提供過(guò)量的自由能才能形成堿基對(duì)的堿基6DNA分子中的超螺旋（ACE）。從信息方面看，儲(chǔ)存在DNA中的信息是指堿基的順序，而堿基不參與核苷酸之間的共價(jià)連接，因此儲(chǔ)存在DNA的信息不會(huì)影響分子結(jié)構(gòu)，來(lái)自突變或重組的信息改變也不會(huì)破壞分子。2在何種情況下有可能預(yù)測(cè)某一給定的核苷酸鏈中“G”的百分含量答由于在DNA分子中互補(bǔ)堿基的含量相同的，因此只有在雙鏈中GC的百分比可知時(shí)，G（GC）真核基因組的哪些參數(shù)影響C0T12值答C0T12值受基因組大小和基因組中重復(fù)DNA的類型和總數(shù)影響。4哪些條件可促使DNA復(fù)性（退火）降低溫度、PH和增加鹽濃度。5為什么DNA雙螺旋中維持特定的溝很重要形成溝狀結(jié)構(gòu)是DNA與蛋白質(zhì)相互作用所必需。6大腸桿菌染色體的分子質(zhì)量大約是25109DA，核苷酸的平均分子質(zhì)量是330DA，兩個(gè)鄰近核苷酸對(duì)之間的距離是034NM，雙螺旋每一轉(zhuǎn)的高度（即螺距）是34NM，請(qǐng)問(wèn)（1）該分子有多長(zhǎng)（2）該DNA有多少轉(zhuǎn)答1堿基330DA，1堿基對(duì)660DA堿基對(duì)2510966038106KB染色體DNA的長(zhǎng)度3810603413106NM13MM答轉(zhuǎn)數(shù)3810603434381057曾經(jīng)有一段時(shí)間認(rèn)為，DNA無(wú)論來(lái)源如何，都是4個(gè)核苷酸的規(guī)則重復(fù)排列（如ATCG、ATCG、ATCG、ATCG），所以DNA缺乏作為遺傳物質(zhì)的特異性。第一個(gè)直接推翻該四核苷酸定理的證據(jù)是什么答在19491951年間，EGAFF發(fā)現(xiàn)（1）不同來(lái)源的DNA的堿基組成變化極大（2）A和T、C和G的總量幾乎是相等的（即GAFF規(guī)則）（3）雖然（AG）（CT）1，但（AT）（GC）的比值在各種生物之間變化極大8為什么在DNA中通常只發(fā)現(xiàn)AT和CG堿基配對(duì)答（1）CA配對(duì)過(guò)于龐大而不能存在于雙螺旋中；GT堿基對(duì)太小，核苷酸間的空間空隙太大無(wú)法形成氫鍵。（2）A和T通常形成兩個(gè)氫鍵，而C和G可形成三個(gè)氫鍵。正常情況下，可形成兩個(gè)氫鍵的堿基不與可形成三個(gè)氫鍵的堿基配對(duì)。9為什么只有DNA適合作為遺傳物質(zhì)答是磷酸二酯鍵連接的簡(jiǎn)單核苷酸多聚體，其雙鏈結(jié)構(gòu)保證了依賴于模板合成的準(zhǔn)確性，DNA的以遺傳密碼的形式編碼多肽和蛋白質(zhì)，其編碼形式多樣而復(fù)雜DNA的復(fù)制的復(fù)制

簡(jiǎn)介：1第一章第一章緒論緒論1染色體具有哪些作為遺傳物質(zhì)的特征染色體具有哪些作為遺傳物質(zhì)的特征答①分子結(jié)構(gòu)相對(duì)穩(wěn)定；②能夠自我復(fù)制，使親子代之間保持連續(xù)性；③能夠指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成，從而控制整個(gè)生命過(guò)程；④能夠產(chǎn)生可遺傳的變異。。2什么是核小體簡(jiǎn)述其形成過(guò)程。什么是核小體簡(jiǎn)述其形成過(guò)程。答由DNA和組蛋白組成的染色質(zhì)纖維細(xì)絲是許多核小體連成的念珠狀結(jié)構(gòu)。核小體是由H2AH2BH3H4各兩個(gè)分子生成的八聚體和由大約200BP的DNA組成的。八聚體在中間，DNA分子盤繞在外，而H1則在核小體外面核小體的形成是染色體中DNA壓縮的第一階段。在核小體中DNA盤繞組蛋白八聚體核心，從而使分子收縮至原尺寸的17。200BPDNA完全舒展時(shí)長(zhǎng)約68NM卻被壓縮在10NM的核小體中。核小體只是DNA壓縮的第一步。核小體長(zhǎng)鏈200BP→核酸酶初步處理→核小體單體200BP→核酸酶繼續(xù)處理→核心顆粒146BP3簡(jiǎn)述真核生物染色體的組成及組裝過(guò)程簡(jiǎn)述真核生物染色體的組成及組裝過(guò)程答組成蛋白質(zhì)核酸。組裝過(guò)程1，首先組蛋白組成盤裝八聚體，DNA纏繞其上，成為核小體顆粒，兩個(gè)顆粒之間經(jīng)過(guò)DNA連接，形成外徑10NM的纖維狀串珠，稱為核小體串珠纖維；2，核小體串珠纖維在酶的作用下形成每圈6個(gè)核小體，外徑30NM的螺線管結(jié)構(gòu)；3，螺線管結(jié)構(gòu)再次螺旋化，形成超螺旋結(jié)構(gòu)；4，超螺線管，形成絆環(huán)，即線性的螺線管形成的放射狀環(huán)。絆環(huán)在非組蛋白上纏繞即形成了顯微鏡下可見(jiàn)的染色體結(jié)構(gòu)。4簡(jiǎn)述簡(jiǎn)述DNA的一的一二三級(jí)結(jié)構(gòu)的特征三級(jí)結(jié)構(gòu)的特征答DNA一級(jí)結(jié)構(gòu)4種核苷酸的的連接及排列順序，表示了該DNA分子的化學(xué)結(jié)構(gòu)DNA二級(jí)結(jié)構(gòu)指兩條多核苷酸鏈反向平行盤繞所生成的雙螺旋結(jié)構(gòu)DNA三級(jí)結(jié)構(gòu)指DNA雙螺旋進(jìn)一步扭曲盤繞所形成的特定空間結(jié)構(gòu)6簡(jiǎn)述簡(jiǎn)述DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)及其在現(xiàn)代分子生物學(xué)發(fā)展中的意義雙螺旋結(jié)構(gòu)及其在現(xiàn)代分子生物學(xué)發(fā)展中的意義1DNA雙螺旋是由兩條互相平行的脫氧核苷酸長(zhǎng)鏈盤繞而成的多核苷酸的方向由核苷酸間的磷酸二酯鍵的走向決定，一條是53，另一條是35。（2）DNA雙螺旋中脫氧核糖和磷酸交替連接，排在外側(cè)，構(gòu)成基本骨架，堿基排列在內(nèi)側(cè)（3）其兩條鏈上的堿基通過(guò)氫鍵相結(jié)合，形成堿基對(duì)意義該模型揭示了DNA作為遺傳物質(zhì)的穩(wěn)定性特征，最有價(jià)值的是確認(rèn)了堿基配對(duì)原則，這是DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和反轉(zhuǎn)錄的分子基礎(chǔ)，亦是遺傳信息傳遞和表達(dá)的分子基礎(chǔ)。該模型的提出是20世紀(jì)生命科學(xué)的重大突破之一，它奠定了生物化學(xué)和分子生物學(xué)乃至整個(gè)生命科學(xué)飛速發(fā)展的基石。7DNA復(fù)制通常采取哪些方式復(fù)制通常采取哪些方式①線性DNA雙鏈的復(fù)制將線性復(fù)制子轉(zhuǎn)變?yōu)榄h(huán)狀或多聚分子3個(gè)相同或高度同源的IS序列，表明IS序列插入到某個(gè)功能基因兩端時(shí)就可能產(chǎn)生復(fù)合轉(zhuǎn)座子。一旦形成復(fù)合轉(zhuǎn)座子，IS序列就不能再單獨(dú)移動(dòng)，因?yàn)樗鼈兊墓δ鼙恍揎椓?，只能作為?fù)合體移動(dòng)。大部分情況下，這些轉(zhuǎn)座子的轉(zhuǎn)座能力是由IS序列決定和調(diào)節(jié)的。除了末端帶有IS序列的復(fù)合轉(zhuǎn)座子外，還存在一些沒(méi)有IS序列的，體積龐大的轉(zhuǎn)座子（5000BP以上）TNA家族。12請(qǐng)說(shuō)說(shuō)插入序列與復(fù)合型轉(zhuǎn)座子之間異同。請(qǐng)說(shuō)說(shuō)插入序列與復(fù)合型轉(zhuǎn)座子之間異同。答轉(zhuǎn)座子是存在于染色體DNA上的可自主復(fù)制和位移的基本單位。最簡(jiǎn)單的轉(zhuǎn)座子不含有任何宿主基因而被稱為插入序列（IS），他們是細(xì)菌染色體或質(zhì)粒DNA的正常組成部分。她常常被定位到特定的基團(tuán)中，造成基因突變。、復(fù)合式轉(zhuǎn)座子是一類帶有某些抗藥性基因的轉(zhuǎn)座子，其兩翼是相同的或高度同源的IS序列，且IS序列是不能單獨(dú)移動(dòng)的只能作為復(fù)合體移動(dòng)而且IS序列也決定和調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)座子的轉(zhuǎn)座能力。也是有沒(méi)有IS序列的轉(zhuǎn)座子TNA家族，其兩翼帶有38BP的倒置重復(fù)序列13組蛋白上都存在哪些修飾其作用是什么組蛋白上都存在哪些修飾其作用是什么P27答甲基化、乙?；⒘姿峄?、泛素化及ADP核糖基化等。以甲基化（基因激活與沉默）、乙?；ㄞD(zhuǎn)錄激活，轉(zhuǎn)錄延伸，DNA修復(fù)拼接復(fù)制，染色體組裝，基因沉默，信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)）為主。影響染色體的結(jié)構(gòu)和功能、基因的表達(dá)和沉默。第三章第三章生物信息的傳遞（上）生物信息的傳遞（上）從DNA到RNA1，什么是編碼鏈?zhǔn)裁词悄０骀湥裁词蔷幋a鏈?zhǔn)裁词悄０骀湸鹋cMRNA序列相同的那條DNA鏈稱為編碼鏈（或有意義鏈）；另一條根據(jù)堿基互補(bǔ)原則指導(dǎo)MRNA合成DNA鏈稱為模版鏈（或反義鏈）。2，簡(jiǎn)述，簡(jiǎn)述RNARNA轉(zhuǎn)錄的概念及其基本過(guò)程。轉(zhuǎn)錄的概念及其基本過(guò)程。答RNA轉(zhuǎn)錄以DNA中的一條單鏈為模板，游離堿基為原料，在DNA依賴的RNA聚合酶催化下合成RNA鏈的過(guò)程。基本過(guò)程模版識(shí)別轉(zhuǎn)錄開(kāi)始轉(zhuǎn)錄延伸轉(zhuǎn)錄終止。3，大腸桿菌的，大腸桿菌的RNARNA聚合酶有哪些組成成分各個(gè)亞基的作用如何聚合酶有哪些組成成分各個(gè)亞基的作用如何答大腸桿菌的RNA聚合酶由2個(gè)Α亞基、一個(gè)Β亞基、一個(gè)Β’亞基和一個(gè)Ω亞基組成的核心酶，加上一個(gè)Σ亞基后則成為聚合酶全酶。Α亞基肯能與核心酶的組裝及啟動(dòng)子的識(shí)別有關(guān)，并參與RNA聚合酶和部分調(diào)節(jié)因子的相互作用；Β亞基和Β’亞基組成了聚合酶的催化中心，Β亞基能與模版DNA、新生RNA鏈及核苷酸底物相結(jié)合。4，什么是封閉復(fù)合物、開(kāi)放復(fù)合物以及三元復(fù)合物，什么是封閉復(fù)合物、開(kāi)放復(fù)合物以及三元復(fù)合物答模版的識(shí)別階段，聚合酶與啟動(dòng)子可逆性結(jié)合形成封閉性復(fù)合物；封閉性復(fù)合物形成后，此時(shí)，DNA鏈仍然處于雙鏈狀態(tài)，伴隨著DNA構(gòu)象的重大變化，封閉性復(fù)合物轉(zhuǎn)化為開(kāi)放復(fù)合物；開(kāi)放復(fù)合物與最初的兩個(gè)NTP相結(jié)合并在這兩個(gè)核苷酸之間形成磷酸二脂鍵后即轉(zhuǎn)變成包括RNA聚合酶、DNA和新生RNA的三元復(fù)合物。5，簡(jiǎn)述，簡(jiǎn)述Σ因子的作用。因子的作用。答1，Σ因子的作用是負(fù)責(zé)模版鏈的選擇和轉(zhuǎn)錄的起始，它是酶的別構(gòu)效應(yīng)物，使酶專一性識(shí)別模版上的啟動(dòng)子；2，Σ因子可以極大的提高RNA聚合酶對(duì)啟動(dòng)子區(qū)DNA序列的親和力；3，Σ因子還能使RNA聚合酶與模版DNA上非特異性位點(diǎn)結(jié)合常數(shù)降低。6，什么是，什么是PRIBNOWPRIBNOWBOXBOX它的保守序列是什么它的保守序列是什么