簡介：現(xiàn)代分子生物學(xué)習(xí)題及答案現(xiàn)代分子生物學(xué)習(xí)題及答案一、填空題1基因工程是70年代發(fā)展起來的遺傳學(xué)的一個分支學(xué)科。2基因工程的兩個基本特點是1分子水平上的操作分子水平上的操作，2細(xì)胞水平上的表達細(xì)胞水平上的表達3基因克隆中三個基本要點是克隆基因的類型克隆基因的類型；受體受體的選擇；載體的選擇的選擇；載體的選擇4通過比較用不同組合的限制性內(nèi)切核酸酶處理某一特定基因區(qū)域所得到的不同大小的片段，可以構(gòu)建顯示該區(qū)域各限制性內(nèi)切核酸酶切點相互位置的限制性酶切圖譜限制性酶切圖譜。5限制性內(nèi)切核酸酶是按屬名和種名相結(jié)合的原則命名的，第一個大寫字母取自屬名的第一個字母，第二、三兩個字母取自_種名的前兩個字母，第四個字母則用株名表示。6部分酶切可采取的措施有1減少酶量；2縮短反應(yīng)時間；3增大反應(yīng)體積等。7第一個分離的限制性內(nèi)切核酸酶是ECOK；而第一個用于構(gòu)建重組體的限制性內(nèi)切核酸酶是_ECL。8限制性內(nèi)切核酸酶BSURI和HAEⅢ的來源不同，但識別的序列都是GGCC，它們屬于異源同工酶。9DNA聚合酶I的KLENOW大片段是用_枯草桿菌蛋白酶切割DNA聚合酶I得到的分子量為76KDA的大片段，具有兩種酶活性153合成酶的活性；235外切核酸酶的活性。10為了防止DNA的自身環(huán)化，可用堿性磷酸酶去雙鏈DNA_5’端的磷酸基團。11EGTA是_CA2_離子螯合劑。12測序酶是修飾了的T7DNA聚合酶，它只有_53合成酶的活性，而沒有35外切酶的活性。13切口移位NICKTRANSLATION法標(biāo)記DNA的基本原理在于利用DNA聚合酶I的__5一3外切核酸酶和5一3合成酶24野生型的M13不適合用作基因工程載體，主要原因是沒有合適的限制性內(nèi)切核酸酶識別位點和選擇標(biāo)記。25黏粒COS是質(zhì)粒噬菌體雜合載體，它的復(fù)制子來自質(zhì)粒、COS位點序列來自噬菌體，最大的克隆片段達到45KB。26野生型的噬菌體DNA不宜作為基因工程載體，原因是1分子量大，2酶的多切點，3無選擇標(biāo)記27噬菌粒是由質(zhì)粒和噬菌體DNA共同構(gòu)成的，其中來自質(zhì)粒的主要結(jié)構(gòu)是復(fù)制區(qū)，而來自噬菌體的主要結(jié)構(gòu)是IG區(qū)。28噬菌體載體由于受到包裝的限制，插入外源DNA片段后，總的長度應(yīng)在噬菌體基因組的75％～105％的范圍內(nèi)。29在分離DNA時要使用金屬離子螯合劑，如EDTA和檸檬酸鈉等，其目的是螯合MG2離子，抑制核酸酶的活性。30用乙醇沉淀DNA時，通常要在DNA溶液中加人單價的陽離子，如NACL和NAAC，其目的是中和DNA分子的負(fù)電荷，增加DNA分子間的凝聚力。31引物在基因工程中至少有4個方面的用途1合成探針；2合成CDNA；3用于PCR反應(yīng)；4進行序列分析32CLARK發(fā)現(xiàn)用TAQDNA聚合酶得到的PCR反應(yīng)產(chǎn)物不是平末端，而是有一個突出堿基末端的雙鏈DNA分子。根據(jù)這一發(fā)現(xiàn)設(shè)計了克隆PCR產(chǎn)物的T載體。33在CDNA的合成中要用到S1核酸酶，其作用是切除在第二鏈合成時形成的發(fā)夾環(huán)34乙醇沉淀DNA的原理是乙醇使DNA分子脫水。35假定克隆一個編碼某種蛋白質(zhì)的基因，必須考慮其表達的三個基本條件1保持正確的可讀框2能夠使其轉(zhuǎn)錄的啟動子3具有翻譯的起始和終止信號

簡介：1廣東海洋大學(xué)分子生物學(xué)復(fù)習(xí)題第1章緒論緒論中心法則（中心法則（CENTRALCENTRALDOGMADOGMA）答DNA通過復(fù)制將遺傳信息由親代傳遞到子代，通過轉(zhuǎn)錄和翻譯，將遺傳信息傳遞給蛋白質(zhì)分子，從而決定生物的表現(xiàn)型。蛋白質(zhì)的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和翻譯過程就構(gòu)成遺傳學(xué)的中心法則。第二章第二章染色體與染色體與DNADNA一、填空題1線粒體DNA的復(fù)制為____D環(huán)___方式，大腸桿菌染色體的復(fù)制為__型____方式，ФX174環(huán)狀染色體和噬菌體ΛDNA后期復(fù)制為____滾環(huán)__方式，真核生物染色體復(fù)制為____多起點雙向線形___方式。2DNA的二級結(jié)構(gòu)為_____DNA雙螺旋_______。3在真核細(xì)胞中DNA的三級結(jié)構(gòu)為______核小體______結(jié)構(gòu)，它由140BP的DNA纏繞于由______H2AH2BH3H4各兩個______組成的八聚體外，又以60BP的DNA及_____H1_______形成的細(xì)絲相連組成串珠狀結(jié)構(gòu)。4在DNA合成過程中改變DNA分子超螺旋構(gòu)型的酶是_____拓?fù)洚悩?gòu)酶_______。5原核生物DNA聚合酶有三種，其中參與DNA復(fù)制的是______DNA聚合酶1______和______DNA聚合酶3______，參與DNA切除修復(fù)的是______DNA聚合酶1______。6紫外線照射可在相鄰的兩個_____胸腺_______嘧啶間形成_____嘧啶二聚體_______。7在同源重組過程中，常常形成_______HOLLIDAY_____中間體。8大腸桿菌整個染色體DNA是_____環(huán)狀_______的，它的復(fù)制開始于______IC______，復(fù)制的方向是______5端向3端______，復(fù)制的機制是_______半保留半不連續(xù)_____。9假如將15N標(biāo)記的大腸桿菌在14N培養(yǎng)基中生長三代，提取其DNA，進行CSCL密度梯度離心，其15N14NDNA分子與純14NDNA分子之比為______13______。10在真核生物中DNA復(fù)制的主要酶是_____DNA聚合酶_______。11在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)中，除了需要模板DNA外，還必須加入______DNA聚合酶______、_______DNTP_____、______引物______、和鎂離子。12DNA復(fù)制時，合成DNA新鏈之前必需合成_____RNA引物_______，它在原核生物中的長度大約有_____610個堿基____BP。13DNA復(fù)制的兩大特點是_____半保留_____和______半不連續(xù)______。14DNA復(fù)制和修復(fù)的模板是______DNA______，原料是______4種脫氧核苷酸______。15引起DNA損傷的因素有_自發(fā)因素_、___物理因素__和__化學(xué)因素___等。二、選擇題1DNA復(fù)制中解開雙螺旋的酶是（B）。A拓?fù)涿窧解螺旋酶CDNA結(jié)合蛋白D連接酶2DNA受熱變性時（D）。A在260NM波長處吸光度下降B多核苷酸鏈斷裂C堿基對可形成共價連接D加入互補RNA鏈冷卻可形成DNARNA雜交分子3下列序列中，在雙鏈狀態(tài)下屬于完全回文結(jié)構(gòu)的序列是（C）。AAGTCCTGABAGTCAGTCCAGTCGACTDGACTCTGA4有關(guān)DNA結(jié)構(gòu)的正確說法是（D）。A雙螺旋的兩股鏈?zhǔn)窍嗤腂雙螺旋兩股鏈平行，也即走向同一方向C雙螺旋中的堿基平行于螺旋的軸D雙螺旋的兩股長鏈以反向平行方式盤繞5真核生物復(fù)制起點的特征包括（B）。33端向5端，兩個模板極性不同；2DNA聚合酶的合成方向都是5端向3端，而不是3端向5端；3DNA復(fù)制時局部解鏈暴露出模板鏈；4以3端向5端為模板的前導(dǎo)鏈的合成方向是5端向3端，與復(fù)制叉移動方向相同，能連續(xù)合成，以5端向3端為模板的滯后鏈的合成方向也是5端向3端，與復(fù)制叉前進方向相反，無法直接復(fù)制，一定要等前導(dǎo)鏈開始合成而將其合成模板暴露出來以后，合成才得以進行，因此只能分段地不連續(xù)合成。22有哪些酶和蛋白質(zhì)參與原核生物的有哪些酶和蛋白質(zhì)參與原核生物的DNADNA復(fù)制，它們在復(fù)制中的生物學(xué)功能是什么復(fù)制，它們在復(fù)制中的生物學(xué)功能是什么答1DNA聚合酶1除去岡崎片段上RNA引物，完成兩個岡崎片段間的DNA合成；2DNA聚合酶2可能在DNA的修復(fù)中起某種作用；3DNA聚合酶3合成新鏈DNA主要的酶；4引物酶或RNA聚合酶（引發(fā)酶）合成DNA復(fù)制所需的RNA引物；5解螺旋酶DNA兩條鏈解開；6DNA解旋酶消除復(fù)制叉前進時候帶來的扭曲張力；7單鏈DNA結(jié)合蛋白防止復(fù)性和保護單鏈DNA不被核酸酶降解；8DNA連接酶連接岡崎片段；9DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶消除或引人DNA的超螺旋結(jié)構(gòu)33什么是什么是DNADNA的半保留復(fù)制它的實驗依據(jù)是什么的半保留復(fù)制它的實驗依據(jù)是什么答在DNA復(fù)制過程中雙螺旋解旋并分開，然后以每條鏈為模板，按堿基互補配對原則，由DNA聚合酶催化合成新的互補鏈，結(jié)果由一條鏈成為互補的兩條鏈，這樣新形成的兩個DNA分子與原來的DNA分子的堿基序列完全相同。由于每個子代DNA的一條鏈來自親代DNA，另一條鏈則是新和成。這種復(fù)制方式成為半保留復(fù)制。實驗依據(jù)1958年，MESELSON和STAHL利用同位素標(biāo)記和密度梯度離心實驗，將大腸桿菌放在15NH4CL培養(yǎng)基中生長15代，使DNA被15N標(biāo)記后，再將細(xì)菌轉(zhuǎn)移到只含有14NH4CL的培養(yǎng)基中培養(yǎng)。分別取0代、1代、2代、3代的細(xì)胞，提取DNA，進行密度梯度離心，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，當(dāng)含有15NDNA的細(xì)胞在14NH4CL培養(yǎng)液中培養(yǎng)一代后，只有一條區(qū)帶介于14NDNA與15NDNA之間，表明DNA一條鏈來自15NDNA，另一條鏈為含有14N的新合成鏈；培養(yǎng)兩代后則出現(xiàn)兩條帶，一條帶在14NDNA區(qū)，另一條在14NDNA與15NDNA之間，按照半保留復(fù)制方式培養(yǎng)兩代，只能出現(xiàn)14NDNA和14N15NDNA兩種分子；培養(yǎng)三代后則出現(xiàn)三條代，一條帶14NDNA區(qū)，另一條帶在14NDNA與15NDNA之間，還有一條帶在15NDNA區(qū)，按照半保留復(fù)制方式培育三代，能出現(xiàn)14NDNA14N，15NDNA和15NDNA三種分子，隨代數(shù)的增加14NDNA逐漸增加而14N15NDNA區(qū)帶逐漸減弱。44原核生物中存在哪些類型的轉(zhuǎn)座子其轉(zhuǎn)座機理有哪些原核生物中存在哪些類型的轉(zhuǎn)座子其轉(zhuǎn)座機理有哪些答轉(zhuǎn)座機理①復(fù)制型轉(zhuǎn)座在相互作用時，轉(zhuǎn)座子被復(fù)制，因此轉(zhuǎn)座實體是原轉(zhuǎn)座子的一個拷貝。轉(zhuǎn)座子中作為移動的部分被拷貝。一個拷貝保留在原味點，另一個位點插入到新的位點，復(fù)制型轉(zhuǎn)座涉及到兩種類型的酶活性一是轉(zhuǎn)座酶，他們在原轉(zhuǎn)座子的末端起作用。另一種為拆分酶，它對復(fù)制拷貝起作用。②非復(fù)制型轉(zhuǎn)座轉(zhuǎn)座因子直接從原來位置插入新的位置，并保留在插入位置上，這中轉(zhuǎn)座只需轉(zhuǎn)座酶的作用。非復(fù)制轉(zhuǎn)座的結(jié)果是原來的位置上丟失了轉(zhuǎn)座因子，而在插入的位置上增加了轉(zhuǎn)座因子這可能是表型的變化③反轉(zhuǎn)座因子通過在將RNA轉(zhuǎn)錄成DNA拷貝的能力而遷移；DNA拷貝同時被整合在基因組的新位點，反轉(zhuǎn)座作用在出現(xiàn)在真核生物，所有反轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子都有一個共同的特點，即在其插入微點上產(chǎn)生短的正向重復(fù)序列。55簡述簡述DNADNA復(fù)制的過程，并比較原核生物和真核生物復(fù)制的過程，并比較原核生物和真核生物DNADNA復(fù)制的差異。復(fù)制的差異。答（1）DNA復(fù)制的過程可被分為三個階段復(fù)制的起始、延伸和終止。每個DNA復(fù)制的獨立單元主要包括復(fù)制的起始位點和終止位點。DNA復(fù)制的起始包括預(yù)引發(fā)和引發(fā)兩個階段。在預(yù)引發(fā)階段，DNA解旋解鏈，形成復(fù)制叉，引發(fā)體組裝；在引發(fā)階段，在引發(fā)酶的催化下以DNA鏈為模板合成一段短的RNA引物。復(fù)制時DNA鏈的延伸由DNA聚合酶催化，以親代DNA鏈為模板，引發(fā)體移動，從5ˊ→3ˊ方向聚合子代DNA鏈。當(dāng)子鏈延伸達到終止位點時，DNA復(fù)制就終止了，切除RNA引物，填補缺口，在DNA連接酶的催化下相鄰的岡崎片段連接起來形成完整的DNA長鏈。（2）原核生物和真核生物DNA復(fù)制的差異

簡介：第三章第三章DNADNA生物合成（復(fù)制）生物合成（復(fù)制）選擇題選擇題【A型題型題】1根據(jù)FCRIK中心法則，遺傳信息的傳遞方式是A蛋白質(zhì)→RNA→DNABRNA→DNA→蛋白質(zhì)CRNA→RNA→DNADDNA→RNA→蛋白質(zhì)EDNA→DNA→蛋白質(zhì)2FCRIK中心法則遺傳信息的傳遞方式不包括ADNA→RRNABDNA→DNACRNA→蛋白質(zhì)DMRNA→DNAEDNA→TRNA3HTEMIN對中心法則的補充內(nèi)容是AMRNA→蛋白質(zhì)BDNA→DNACRNA→DNADDNA→MRNAE蛋白質(zhì)→MRNA4HTEMIN對中心法則的補充內(nèi)容是A轉(zhuǎn)錄B逆轉(zhuǎn)錄C翻譯DDNA復(fù)制ERNA復(fù)制5下面說法不正確的是A轉(zhuǎn)座是RNA→RNAB轉(zhuǎn)錄是DNA→RNAC復(fù)制是DNA→DNAD逆轉(zhuǎn)錄是RNA→DNAE翻譯是RNA→蛋白質(zhì)6MMESELSON和FWSTAHL用15NH4CL證明的機制是ADNA轉(zhuǎn)錄為MRNABDNA半保留復(fù)制CMRNA翻譯為蛋白質(zhì)DDNA混合式復(fù)制EDNA全保留復(fù)制7以15N標(biāo)記DNA雙鏈為模板，當(dāng)以NH4CL作氮源復(fù)制DNA時，開始產(chǎn)生不含15N的子代DNA分子時在A第1代B第2代C第3代D第4代E第5代8真核DNA生物合成的特點不包括A半不連續(xù)復(fù)制B多復(fù)制子復(fù)制C半保留復(fù)制D雙向復(fù)制E滾環(huán)復(fù)制9如果以15N標(biāo)記的DNA雙鏈作模板，NH4CL作氮源進行復(fù)制，對子一代DNA分子做密度梯度離心分析，其密度帶應(yīng)位于CDNA復(fù)制延長的酶D有5→3外切酶活性E有5→3聚合酶活性19DNAPOLⅢ亞基功能的敘述，錯誤的是A亞基形成異源多聚體BΑ、Ε、Θ組成核心酶C10種亞基構(gòu)成全酶DΕ亞基與復(fù)制保真性有關(guān)E10種亞基又稱Γ復(fù)合物20關(guān)于DNAPOLⅠ，不正確的是A5→3核酸外切酶活性B3→5聚合酶活性C5→3聚合酶活性D3→5核酸外切酶活性EKLENOW片段有3→5外切酶活性21DNAPOLⅠ的作用不包括ADNA修復(fù)時填補空隙BDNA復(fù)制時填補空隙C合成RNA引物D校讀復(fù)制中的錯誤E能催化延長20個核苷酸左右22關(guān)于DNAPOLⅠ的敘述，錯誤的是A3→5酶活性水解錯配堿基B填補復(fù)制中出現(xiàn)的空隙C5→3酶活性切除突變片段D填補修復(fù)中出現(xiàn)的空隙E內(nèi)切酶活性切除引物23關(guān)于DNAPOLⅠ的敘述，錯誤的是A有即時校讀功能B細(xì)胞中的分子數(shù)最多C能填補DNA修復(fù)中的空隙D可被水解為大、小片段E是大腸桿菌主要的復(fù)制酶24關(guān)于DNAPOL的敘述，正確的是APOLⅡ能校讀復(fù)制中的錯誤BPOLⅢ參與SOS修復(fù)CPOLⅢ是催化復(fù)制延長的酶DPOLⅡ?qū)δ０宓奶禺愋宰罡逧POLⅠ的比活性最高25關(guān)于真核生物DNAPOL的敘述，不正確的是A已發(fā)現(xiàn)POLΑ、Β、Γ、Δ、ΕBPOLΒ還有拓?fù)涿傅淖饔肅POLΕ有校讀、修復(fù)作用DPOLΑ具有引物酶活性EPOLΓ催化線粒體DNA合成26真核生物DNAPOL作用正確的是APOLΑ有切除修復(fù)的功能BPOLΒ是線粒體DNA復(fù)制的酶CPOLΓ有引物酶活性DPOLΕ作用與POLⅡ相似EPOLΔ相當(dāng)于原核生物POLⅢ27原核和真核DNAPOL都不能A辨認(rèn)復(fù)制起始點B以DNTP作底物C5→3方向延長DNA子鏈D生成岡崎片段

簡介：1分子生物學(xué)需要掌握的重點分子生物學(xué)需要掌握的重點、、DNA、RNA、蛋白質(zhì)、質(zhì)粒、基因、端粒、聚合酶、密碼子、突變、變性的概念或結(jié)構(gòu)、性質(zhì)及特點；、、復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、逆轉(zhuǎn)錄、翻譯、加工修飾、靶向輸送的主要過程及特點；、、癌基因的概念、原癌基因產(chǎn)物的類型及細(xì)胞定位、癌基因活化致癌的主要機制；、、常用分子生物學(xué)技術(shù)的原理、主要步驟、酶學(xué)及特點；、、基因表及其調(diào)控的原理、主要過程或步驟，乳糖操縱子的正、負(fù)調(diào)節(jié)機制；、、常用的基因診斷及基因治療技術(shù)；、、基因克隆、基因診斷、基因治療、管家基因、抑癌基因、KLENOW片段、核蛋白體、限制性內(nèi)切核酸酶、人類基因組計劃、原位雜交的概念；、、雙脫氧末端終止法DNA測序、重組DNA技術(shù)的主要步驟；、、結(jié)構(gòu)基因、順式作用元件、啟動子、遺傳密碼、反式作用因子、氨基酰TRNA、基因組文庫、DNA多態(tài)性、轉(zhuǎn)位因子、探針、TM值、DNA微陣列、DNA甲基化的概念、性質(zhì)；、、核酸分子雜交的主要類型、PCR的主要步驟及引物設(shè)計；、、、DNA、RNA及多肽鏈的合成方向；、、、真核細(xì)胞轉(zhuǎn)染的基本方法；、、、細(xì)胞周期的主要調(diào)控點；、、、DNA損傷及修復(fù)的主要類型和機制；、、、基因文庫篩選的主要方法及原理。名詞解釋質(zhì)粒是細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)攜帶的染色體外的DNA分子，是共價閉合的環(huán)狀DNA分子，能獨立進行復(fù)制。質(zhì)粒只有在宿主細(xì)胞內(nèi)才能夠完成自己的復(fù)制?；蚧蛑纲A存有功能的蛋白質(zhì)多肽鏈或RNA序列及表達這些信息所需的全部核苷酸序列，是核酸分子中貯存遺傳信息的遺傳單位。癌基因癌基因是細(xì)胞內(nèi)控制細(xì)胞生長和分化的基因，具有潛在的誘導(dǎo)細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的特性，它的結(jié)構(gòu)異?；虮磉_異常，可以引起細(xì)胞癌變?；蚩寺』蚩寺∈侵赴岩粋€生物體的遺傳信息（基因片段）轉(zhuǎn)入另一個生物體3綜合內(nèi)容合內(nèi)容DNA的結(jié)構(gòu)、性構(gòu)、性質(zhì)及特點及特點①一級結(jié)構(gòu)是指DNA分子中核苷酸的排列順序，二級結(jié)構(gòu)是指兩條DNA單鏈形成的雙螺旋結(jié)構(gòu)、三股螺旋結(jié)構(gòu)和四股螺旋結(jié)構(gòu)；三級結(jié)構(gòu)是指雙鏈DNA進一步扭曲盤旋形成的超螺旋結(jié)構(gòu)。②DNA一級結(jié)構(gòu)的基本特點4種脫氧核糖核苷酸以3′，5′磷酸二酯鍵相連，形成長鏈，鏈中的脫氧核糖和磷酸都是相同的。組成DNA的堿基有腺嘌呤（A）、鳥嘌呤（G）、胞嘧啶（C）和胸腺嘧啶（T）。③DNA是由兩條單鏈結(jié)合在一起形成的雙鏈分子，兩條單鏈都是由A、T、G、C以千變?nèi)f化的排列組合而形成的。大多數(shù)生物的遺傳信息都是儲存在DNA分子中。④DNA分子主要攜帶兩類遺傳信息，即有功能活性的DNA序列所攜帶的信息和調(diào)控信息。⑤DNA二級結(jié)構(gòu)是指DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)，其特點為脫氧核糖與磷酸交替排列構(gòu)成了DNA主鏈；兩條脫氧核苷酸鏈?zhǔn)欠聪蚱叫信帕校粭l是5′→3′方向，另一條為3′→5′方向；以右手方向盤繞成雙螺旋構(gòu)型；A配T，G配C。⑥生物體的閉環(huán)DNA都以超螺旋形式存在，如細(xì)菌質(zhì)粒、一些病毒、線粒體的DNA等。RNA的結(jié)構(gòu)、功能、特點構(gòu)、功能、特點①由4種基本的核苷酸以3′，5′磷酸二酯鍵連接而成的長鏈，堿基中沒有T，而為尿嘧啶（U）。②分為MRNA（信使RNA），TRNA（轉(zhuǎn)RNA，轉(zhuǎn)運氨基酸）和核蛋白體RNA（RRNA）。MRNA結(jié)構(gòu)特點不穩(wěn)定、代謝活躍，更新迅速，壽命短。原核生物MRNA具有操縱子結(jié)構(gòu)，主要是多順反子，MRNA5′端無帽子結(jié)構(gòu)，3′端一般無多聚A尾巴，沒有修飾堿基；真核MRNA5′端有帽子結(jié)構(gòu)、3′端大多有多聚腺苷酸尾巴、分子中可能有修飾堿基，主要有甲基化、有編碼區(qū)和非編碼區(qū)。TRNA的結(jié)構(gòu)特點及作用作用在蛋白質(zhì)合成過程轉(zhuǎn)運氨基酸，參與蛋白質(zhì)的翻譯。一級結(jié)構(gòu)含有稀有堿基如DHU，3′端為3個同樣的核苷酸序列（CCA）序列，此序列是TRNA結(jié)合和轉(zhuǎn)運安基酸而生成氨酰TRNA所必需的。5′端為G、具有TΨC；二級結(jié)構(gòu)為三葉草形，三級結(jié)構(gòu)為倒L形；C、RRNA即核蛋白體RNA為細(xì)胞內(nèi)含量最豐富的RNA，約占細(xì)胞總RNA的80以上參與組成核蛋白體，作為蛋白質(zhì)生物合成的場所。原核生物核糖體的沉降系數(shù)為70S，由50S和30S兩個大小亞基組成，30S小亞基含16SRRNA和21種蛋白質(zhì)50S大亞基含23S和5SRRNA以及34種蛋白質(zhì)；真核生物細(xì)胞核糖體的沉降系數(shù)為80S，由大小亞基組成，40S小亞基含18SRRNA及30多種蛋白質(zhì)，60S大亞基含3種RRNA28S58S5S以及大約45種蛋白質(zhì)。④HNRNA即核內(nèi)不均RNA，為真核生物轉(zhuǎn)錄生成的MRNA前體。⑤SNRNA即小分子核內(nèi)RNA，不單獨存在，常與多種特異的蛋白質(zhì)結(jié)合在一起，形成小分子核內(nèi)核蛋白顆粒，在MRNA的剪接中起重要作用。⑥反義RNA，又稱調(diào)節(jié)RNA，主要封閉RNA。參與蛋白質(zhì)合成的氨基酸在特異的氨基酰TRNA合成酶催化下，與其相應(yīng)的TRNA結(jié)合成氨基酰TRNA。真核生物起始TRNA結(jié)合的氨基酸為蛋氨酸，結(jié)合形成METTRNAIMET，翻譯起始時首先與40S核糖體小亞基結(jié)合形成復(fù)合物。原核生物的起始氨基

簡介：第一章緒論11你對現(xiàn)代分子生物學(xué)的含義和包括的研究范圍是怎么理解的你對現(xiàn)代分子生物學(xué)的含義和包括的研究范圍是怎么理解的分子生物學(xué)是從分子水平研究生命本質(zhì)的一門新興邊緣學(xué)科，它以核酸和蛋白質(zhì)等生物大分子的結(jié)構(gòu)及其在遺傳信息和細(xì)胞信息傳遞中的作用為研究對象，是當(dāng)前生命科學(xué)中發(fā)展最快并正在與其它學(xué)科廣泛交叉與滲透的重要前沿領(lǐng)域。狹義偏重于核酸的分子生物學(xué)，主要研究基因或DNA的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、表達和調(diào)節(jié)控制等過程，其中也涉及與這些過程有關(guān)的蛋白質(zhì)和酶的結(jié)構(gòu)與功能的研究。分子生物學(xué)的發(fā)展為人類認(rèn)識生命現(xiàn)象帶來了前所未有的機會，也為人類利用和改造生物創(chuàng)造了極為廣闊的前景。所謂在分子水平上研究生命的本質(zhì)主要是指對遺傳、生殖、生長和發(fā)育等生命基本特征的分子機理的闡明，從而為利用和改造生物奠定理論基礎(chǔ)和提供新的手段。這里的分子水平指的是那些攜帶遺傳信息的核酸和在遺傳信息傳遞及細(xì)胞內(nèi)、細(xì)胞間通訊過程中發(fā)揮著重要作用的蛋白質(zhì)等生物大分子。這些生物大分子均具有較大的分子量，由簡單的小分子核苷酸或氨基酸排列組合以蘊藏各種信息，并且具有復(fù)雜的空間結(jié)構(gòu)以形成精確的相互作用系統(tǒng)，由此構(gòu)成生物的多樣化和生物個體精確的生長發(fā)育和代謝調(diào)節(jié)控制系統(tǒng)。闡明這些復(fù)雜的結(jié)構(gòu)及結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系是分子生物學(xué)的主要任務(wù)。22分子生物學(xué)研究內(nèi)容有哪些方面分子生物學(xué)研究內(nèi)容有哪些方面分子生物學(xué)主要包含以下三部分研究內(nèi)容A核酸的分子生物學(xué)，核酸的分子生物學(xué)研究核酸的結(jié)構(gòu)及其功能。由于核酸的主要作用是攜帶和傳遞遺傳信息，因此分子遺傳學(xué)（MOLECULARGEICS）是其主要組成部分。由于50年代以來的迅速發(fā)展，該領(lǐng)域已形成了比較完整的理論體系和研究技術(shù)，是目前分子生物學(xué)內(nèi)容最豐富的一個領(lǐng)域。研究內(nèi)容包括核酸基因組的結(jié)構(gòu)、遺傳信息的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄與翻譯，核酸存儲的信息修復(fù)與突變，基因表達調(diào)控和基因工程技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用等。遺傳信息傳遞的中心法則（CENTRALDOGMA）是其理論體系的核心。B蛋白質(zhì)的分子生物學(xué)蛋白質(zhì)的分子生物學(xué)研究執(zhí)行各種生命功能的主要大分子──蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能。盡管人類對蛋白質(zhì)的研究比對核酸研究的歷史要長得多，但由于其研究難度較大，與核酸分子生物學(xué)相比發(fā)展較慢。近年來雖然在認(rèn)識蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)及其與功能關(guān)系方面取得了一些進展，但是對其基本規(guī)律的認(rèn)識尚缺乏突破性的進展。33分子生物學(xué)發(fā)展前景如何分子生物學(xué)發(fā)展前景如何21世紀(jì)是生命科學(xué)世紀(jì)，生物經(jīng)濟時代，分子生物學(xué)將取得突飛猛進的發(fā)展，結(jié)構(gòu)基因組學(xué)、功能基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、生物信息學(xué)、信號跨膜轉(zhuǎn)導(dǎo)成為新的熱門領(lǐng)域，將在農(nóng)業(yè)、工業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域帶來新的變革。44人類基因組計劃完成的社會意義和科學(xué)意義是什么人類基因組計劃完成的社會意義和科學(xué)意義是什么社會意義人類基因組計劃與曼哈頓原子計劃、阿波羅登月計劃并稱為人類科學(xué)史上的三大工程，具有重大科學(xué)意義、經(jīng)濟效益和社會效益。1）極大地促進生命科學(xué)領(lǐng)域一系列基礎(chǔ)研究的發(fā)展，闡明基因的結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系、生命的起源和進化、細(xì)胞發(fā)育、生產(chǎn)、分化的分子機理，疾病發(fā)生的機理等，為人類自身疾病的診斷和治療提供依據(jù)，為醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)帶來翻天覆地的變化；2）促進生命科學(xué)與信息科學(xué)、材料科學(xué)和與高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)相結(jié)合，刺激相關(guān)學(xué)科與技術(shù)領(lǐng)域的發(fā)展，帶動起一批新興的高技術(shù)產(chǎn)業(yè)；3）基因組研究中發(fā)展起來的技術(shù)、數(shù)據(jù)庫及生物學(xué)資源，還將推動對農(nóng)業(yè)、畜牧業(yè)（轉(zhuǎn)基因動、植物）、能源、環(huán)境等相關(guān)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，改變?nèi)祟惿鐣a(chǎn)、生活和環(huán)境的面貌，把人類帶入更佳的生存狀態(tài)。科學(xué)意義1）確定人類基因組中約5萬個編碼基因的序列基因在基因組中的物理位置，研究基因的產(chǎn)物及其功能2）了解轉(zhuǎn)錄和剪接調(diào)控元件的結(jié)構(gòu)和位置，從整個基因組結(jié)構(gòu)的宏觀水平上了解基因轉(zhuǎn)錄與轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)3）從總體上了解染色體結(jié)構(gòu)，了解各種不同序列在形成染色體結(jié)構(gòu)、DNA復(fù)制、基因轉(zhuǎn)錄及表達調(diào)控中的影響與作用4）研究空間結(jié)構(gòu)對基因調(diào)節(jié)的作用（2）A和T通常形成兩個氫鍵，而C和G可形成三個氫鍵。正常情況下，可形成兩個氫鍵的堿基不與可形成三個氫鍵的堿基配對。9為什么只有為什么只有DNADNA適合作為遺傳物質(zhì)適合作為遺傳物質(zhì)答是磷酸二酯鍵連接的簡單核苷酸多聚體，其雙鏈結(jié)構(gòu)保證了依賴于模板合成的準(zhǔn)確性，DNA的以遺傳密碼的形式編碼多肽和蛋白質(zhì)，其編碼形式多樣而復(fù)雜第三章第三章1比較基因組的大小和基因組復(fù)雜性的不同。比較基因組的大小和基因組復(fù)雜性的不同。一個基因組有兩個序列，一個是一個基因組有兩個序列，一個是A，另一個是，另一個是B，各有，各有2000BP2000BP，其中一個是由，其中一個是由400BP400BP的序列重復(fù)的序列重復(fù)5次而成，另一個則由次而成，另一個則由50BP50BP的序列重復(fù)的序列重復(fù)4040次而成的，問次而成的，問（1）這個基因組的大小怎樣）這個基因組的大小怎樣（2）這個基因組的復(fù)雜性如何）這個基因組的復(fù)雜性如何答基因組的大小是指在基因組中DNA的總量。復(fù)雜性是指基因組中所有單一序列的總長度。（1）基因組的大小是4000BP（2）基因組的復(fù)雜性是450BP2一個基因如何產(chǎn)生兩種不同類型的一個基因如何產(chǎn)生兩種不同類型的MRNAMRNA分子分子答第一種是，一個原初產(chǎn)物含有一個以上的多聚腺苷化位點，能產(chǎn)生具不同3端的MRNA。第二種是，如果一個原初轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物含有幾個外顯子，發(fā)生不同的剪接，產(chǎn)生多種MRNA。3在一個克隆基因的分析中發(fā)現(xiàn)一個含有轉(zhuǎn)錄位點上游在一個克隆基因的分析中發(fā)現(xiàn)一個含有轉(zhuǎn)錄位點上游38KB38KBDNADNA的克隆，其的克隆，其MRNAMRNA直接轉(zhuǎn)錄活性比直接轉(zhuǎn)錄活性比僅含有僅含有31KB31KB上游上游DNADNA克隆的轉(zhuǎn)錄活性大克隆的轉(zhuǎn)錄活性大5050倍。這表明了什么倍。這表明了什么答在轉(zhuǎn)錄起始位點上游的3138KB處有一增強子。4被加工的假基因與其他假基因有哪些不同它是如何產(chǎn)生的被加工的假基因與其他假基因有哪些不同它是如何產(chǎn)生的答已加工過的假基因具有明顯的RNA加工反應(yīng)的印跡。如缺少內(nèi)含子，有些在3端已經(jīng)經(jīng)過加工。推測已加工過的假基因是在基因轉(zhuǎn)錄成前體MRNA、RNA加工后，又經(jīng)反轉(zhuǎn)錄形成DNA，再將反轉(zhuǎn)錄出的DNA重新整合進基因組。5非轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)與轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)分別位于非轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)與轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)分別位于RRNARRNA重復(fù)的什么位置轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)與內(nèi)含子有何區(qū)別重復(fù)的什么位置轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)與內(nèi)含子有何區(qū)別答RRNA的非轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)位于串聯(lián)轉(zhuǎn)錄單位之間，而轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)位于轉(zhuǎn)錄單位的18SRNA基因與28SRNA基因之間。6RNARNA分子能被運到細(xì)胞器中嗎分子能被運到細(xì)胞器中嗎答一般來說只有蛋白質(zhì)才能被輸入。但在錐蟲線粒體基因組中沒有發(fā)現(xiàn)TRNA7什么證據(jù)什么證據(jù)表明細(xì)胞器與原核生物的關(guān)系比細(xì)胞器與真核生物的關(guān)系密切表明細(xì)胞器與原核生物的關(guān)系比細(xì)胞器與真核生物的關(guān)系密切答細(xì)胞器蛋白質(zhì)合成對抗生素的敏感性與原核生物相似。此外，細(xì)胞器核糖體蛋白和RNA聚合酶亞基也與大腸桿菌中的同源8酵母酵母RHORHO小菌落突變株的線粒體小菌落突變株的線粒體DNADNA發(fā)生了什么變化發(fā)生了什么變化答RHO酵母線粒體基因組具有大量的缺失和重復(fù)。剩余的DNA通過擴增形成多貝。9為什么動物中為什么動物中線粒體線粒體DNADNA進化的速率，幾乎是核進化的速率，幾乎是核DNADNA的1010倍倍答因為線粒體DNA復(fù)制過程中存在更多的錯配，并且其修復(fù)機制的效率更低。1010為什么研究者認(rèn)為某些植物的為什么研究者認(rèn)為某些植物的COXCOXIIII基因是經(jīng)由基因是經(jīng)由RNARNA的過渡，從線粒體轉(zhuǎn)移到了核基因組中的過渡，從線粒體轉(zhuǎn)移到了核基因組中答線粒體內(nèi)發(fā)現(xiàn)的COXII假基因含有一內(nèi)含子，而核基因組內(nèi)的COXII基因已缺失了內(nèi)含子。

簡介：1分子生物學(xué)復(fù)習(xí)思考題分子生物學(xué)復(fù)習(xí)思考題2004102004101寫出分子生物學(xué)廣義的與狹義的定義，現(xiàn)代分子生物學(xué)研究的主要內(nèi)容，以及寫出分子生物學(xué)廣義的與狹義的定義，現(xiàn)代分子生物學(xué)研究的主要內(nèi)容，以及5個分子生物學(xué)發(fā)展的主要大事紀(jì)（年代、發(fā)明者、簡要內(nèi)容）分子生物學(xué)發(fā)展的主要大事紀(jì)（年代、發(fā)明者、簡要內(nèi)容）。廣義上分子生物學(xué)包括對蛋白質(zhì)和核酸等生物大分子結(jié)構(gòu)與功能的研究、以及從分子水平上闡明生命的現(xiàn)象和生物學(xué)規(guī)律。狹義概念既將分子生物學(xué)的范疇偏重于核酸（基因）的分子生物學(xué)，主要研究基因或DNA結(jié)構(gòu)與功能、復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、表達和調(diào)節(jié)控制等過程。其中也涉及到與這些過程相關(guān)的蛋白質(zhì)和酶的結(jié)構(gòu)與功能的研究?，F(xiàn)代分子生物學(xué)研究的主要內(nèi)容有基因與基因組的結(jié)構(gòu)與功能，DNA的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和翻譯，基因表達調(diào)控的研究，DNA重組技術(shù)，結(jié)構(gòu)分子生物學(xué)等。5個分子生物學(xué)發(fā)展的主要大事紀(jì)（年代、發(fā)明者、簡要內(nèi)容）111944年著名微生物學(xué)家AVERY等人在對肺炎雙球菌的轉(zhuǎn)化實驗中證實了DNA是生物的遺傳物質(zhì)。這一重大發(fā)現(xiàn)打破了長期以來，許多生物學(xué)家認(rèn)為的只有象蛋白質(zhì)那樣的大分子才能作為細(xì)胞遺傳物質(zhì)的觀點，在遺傳學(xué)上樹立了DNA是遺傳信息載體的理論。2221953年，是開創(chuàng)生命科學(xué)新時代具有里程碑意義的一年，WATSON和CRICK發(fā)表了“脫氧核糖核酸的結(jié)構(gòu)”的著名論文，他們在FRANKLIN和WILKINSX射線衍射研究結(jié)果的基礎(chǔ)上，推導(dǎo)出DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型，為人類充分揭示遺傳信息的傳遞規(guī)律奠定了堅實的理論基礎(chǔ)。同年，SANGER歷經(jīng)8年，完成了第一個蛋白質(zhì)胰島素的氨基酸全序列分析。331954年GAMNOW從理論上研究了遺傳密碼的編碼規(guī)律CRICK在前人研究工作基礎(chǔ)上，提出了中心法則理論，對正在興起的分子生物學(xué)研究起了重要的推動作用。441956年VOLKIN和ASTRACHAN發(fā)現(xiàn)了MRNA當(dāng)時尚未用此名。551985年SAIKI等發(fā)明了聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)PCR；SINSHEIMER首先提出人類基因組圖譜制作計劃設(shè)想；SMITH等報導(dǎo)了DNA測序中應(yīng)用熒光標(biāo)記取代同位素標(biāo)記的方法；MILLER等發(fā)現(xiàn)DNA結(jié)合蛋白的鋅指結(jié)構(gòu)。22作為主要遺傳物質(zhì)的作為主要遺傳物質(zhì)的DNADNA具有哪些特性，研究具有哪些特性，研究DNADNA一級結(jié)構(gòu)有什么重要意義，什么是一級結(jié)構(gòu)有什么重要意義，什么是DNADNA的超螺旋結(jié)構(gòu)有哪些類型解釋的超螺旋結(jié)構(gòu)有哪些類型解釋DNADNA拓?fù)洚悩?gòu)體，它們之間互變異構(gòu)依賴于拓?fù)洚悩?gòu)體，它們之間互變異構(gòu)依賴于什么簡述真核生物的染色體結(jié)構(gòu)，它們是如何組裝的有幾種組蛋白參與核小體的什么簡述真核生物的染色體結(jié)構(gòu)，它們是如何組裝的有幾種組蛋白參與核小體的形成形成作為遺傳物質(zhì)的DNA具有以下特性①貯存并表達遺傳信息；3引起DNA變性的主要因素有溫度、PH值、有機溶劑等。紫外吸收光譜的變化是檢測變性最簡單的定性和定量方法。DNA的復(fù)性必須滿足二個條件①一定的離子強度，用以削弱兩條鏈中磷酸基團之間的排斥力。②較高的溫度，用以避免隨機形成的無規(guī)則氫鍵。影響DNA復(fù)性速度的因素包括（1）DNA分子的復(fù)雜程度。（2）DNA的濃度。（3）DNA片段的大小。（4）溫度的影響。（5）陽離子的濃度。規(guī)定復(fù)性實驗的標(biāo)準(zhǔn)條件是400核苷酸長度，TM25℃的溫度，陽離子強度018MOLL，此時的復(fù)性速度常數(shù)К≈5105。通過下列3種方法可以測定DNA序列復(fù)性的程度（1）S1核酸酶水解的雙鏈DNA量。（2）減色效應(yīng)，在復(fù)性過程中可跟蹤測定A260的光吸收值；（3）S1核酸酶只催化單鏈DNA的水解，不能作用于雙鏈DNA，因此將樣品限定水解后測定抗羥基磷灰石層析，羥基磷灰石是一種磷酸鈣鹽，經(jīng)過一定的處理后，具有吸附雙鏈DNA的能力，洗脫時，只允許單鏈通過，從而可以計算出剩余雙鏈DNA的量。DNA的TM值大小一般與下列因素有關(guān)（1）DNA的均一性。2GC對含量。3介質(zhì)中離子強度。以CC0對COT作圖得到的復(fù)性對濃度的依賴關(guān)系的曲線稱為COT曲線。分子雜交有多種類型，將不同來源的DNA變性后，在溶液里進行雜交，稱為溶液雜交（SOLUTIONHYBRIDIZATION）；用硝酸纖維素制成的濾膜，可以吸附單鏈DNA或RNA，將變性DNA或RNA吸附到濾膜上，再進行雜交，稱為濾膜雜交（FILTERHYBRIDIZATION）。濾膜雜交包括（1）SOUTHERN印跡法用于檢測DNA。（2）NTHERN印跡法用于檢測RNA。（3）WESTHERN印跡法用于檢測蛋白質(zhì)。44簡述基因的概念什么是反向生物學(xué)什么是順反子現(xiàn)代分子生物學(xué)中順反子與簡述基因的概念什么是反向生物學(xué)什么是順反子現(xiàn)代分子生物學(xué)中順反子與基因是什么關(guān)系基因是什么關(guān)系基因（GENE）是原核、真核生物以及病毒的DNA和RNA分子中具有遺傳效應(yīng)的核苷酸序列是遺傳的基本單位。反向生物學(xué)是指利用重組DNA技術(shù)和離體定向誘變的方法研究已知結(jié)構(gòu)的基因相應(yīng)的功能，在體外使基因突變，再導(dǎo)入體內(nèi)，檢測突變的遺傳效應(yīng)，即以表型來探索基因的結(jié)構(gòu)。一個順反子就是一段核苷酸序列，能編碼一條完整的多肽鏈。現(xiàn)代分子生物學(xué)文獻中，順反子和基因這兩個術(shù)語是互相通用的。一般而言，一個順反子就是一個基因，大約1500個核苷酸。它是由一群突變單位和重組單位組成的線性結(jié)構(gòu)（因為任何一個基因都是突變體或重組體）。因此，順反子的概念表明了基因不是最小單位，它仍然是可分的，并非所有的DNA

簡介：第2章染色體與染色體與DNA名詞解釋名詞解釋原癌基因原癌基因細(xì)胞內(nèi)與細(xì)胞增殖相關(guān)的正?；?，是維持機體正常生命活動所必須的，在進化上高等保守。當(dāng)原癌基因的結(jié)構(gòu)或調(diào)控區(qū)發(fā)生變異，基因產(chǎn)物增多或活性增強時，使細(xì)胞過度增殖，從而形成腫瘤。復(fù)制復(fù)制以親代DNA或RNA為模板，根據(jù)堿基配對的原則，在一系列酶的作用下，生成與親代相同的子代DNA或RNA的過程。轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)座子TRANSPOSON或TRANSPOSABLEELEMENT位于染色體DNA上可自主復(fù)制和位移的基本單位。包括插入序列和復(fù)合轉(zhuǎn)座子。半保留復(fù)制半保留復(fù)制以親代DNA雙鏈為模板以堿基互補方式合成子代DNA，這樣新形成的子代DNA中，一條鏈來自親代DNA，而另一條鏈則是新合成的，這種復(fù)制方式叫半保留復(fù)制。染色體染色體染色體是遺傳信息的載體，由DNA、RNA和蛋白質(zhì)構(gòu)成，其形態(tài)和數(shù)目具有種系的特性。在細(xì)胞間期核中，以染色質(zhì)形式存在。在細(xì)胞分裂時，染色質(zhì)絲經(jīng)過螺旋化、折疊、包裝成為染色體，為顯微鏡下可見的具不同形狀的小體。核小體是構(gòu)成真核生物染色體的基本單位，是DNA和蛋白質(zhì)構(gòu)成的緊密結(jié)構(gòu)形式，包括200BP左右的DNA和9個組蛋白分子構(gòu)成的致密結(jié)構(gòu)。填空題填空題1真核細(xì)胞核小體的組成是DNA和蛋白2天然染色體末端不能與其他染色體斷裂片段發(fā)生連接，這是因為天然染色體末端存在端粒結(jié)構(gòu)。3在聚合酶鏈反應(yīng)中，除了需要模板DNA外，還需加入引物、DNA聚合酶、DNTP和鎂離子。4引起DNA損傷的因素有自發(fā)因素、物理因素、化學(xué)因素。5DNA復(fù)制時與DNA解鏈有關(guān)的酶和蛋白質(zhì)有拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ、解螺旋酶、單鏈DNA結(jié)合蛋白。6參與DNA切除修復(fù)的酶有DNA聚合酶Ⅰ、DNA連接酶、特異的核酸內(nèi)切酶。7在真核生物中DNA復(fù)制的主要酶是DNA聚合酶Δ。在原核生物中是DNA聚合酶Ⅲ。8端粒酶是端粒酶是含一段RNA的逆轉(zhuǎn)錄酶。9DNA的修復(fù)方式有錯配修復(fù)、堿基切除修復(fù)、核苷酸切除修復(fù)、DNA的直接修復(fù)。選擇題選擇題1真核生物復(fù)制起點的特征包括（B）A富含GC區(qū)B富含AT區(qū)CZDNAD無明顯特征2插入序列（IS）編碼（A）A轉(zhuǎn)座酶B逆轉(zhuǎn)錄酶CDNA合成酶D核糖核酸酶3紫外線照射對DNA分子的損傷主要是DA堿基替換B磷酸脂鍵斷裂C。堿基丟失D形成共價連接的嘧啶二聚體4自然界中以DNA為遺傳物質(zhì)的大多數(shù)生物DNA的復(fù)制方式（C）A環(huán)式BD環(huán)式C半保留D全保留5原核生物基因組中沒有（A）A內(nèi)含子B外顯子C轉(zhuǎn)錄因子D插入序列6關(guān)于組蛋白下列說法正確的是DA為中性蛋白B為酸性蛋白C進化上不具保守性D染色體結(jié)合蛋白7DNA聚合酶Ⅰ（C）A是復(fù)制酶，但不是修復(fù)酶B沒有模板依賴性C有5′→3′外切酶活性6、PCR的基本原理PCR是在試管中進行的DNA復(fù)制反應(yīng)，基本原理是依據(jù)細(xì)胞內(nèi)DNA半保留復(fù)制的機理，以及體外DNA分子于不同溫度下雙鏈和單鏈可以互相轉(zhuǎn)變的性質(zhì)，人為地控制體外合成系統(tǒng)的溫度，以促使雙鏈DNA變成單鏈，單鏈DNA與人工合成的引物退火，然后耐熱DNA聚合酶以DNTP為原料使引物沿著單鏈模板延伸為雙鏈DNA。PCR全過程每一步的轉(zhuǎn)換是通過溫度的改變來控制的。需要重復(fù)進行DNA模板解鏈、引物與模板DNA結(jié)合、DNA聚合酶催化新生DNA的合成，即高溫變性、低溫退火、中溫延伸３個步驟構(gòu)成PCR反應(yīng)的一個循環(huán)，此循環(huán)的反復(fù)進行，就可使目的DNA得以迅速擴增。DNA模板變性模板雙鏈DNA單鏈DNA，94℃。退火引物＋單鏈DNA雜交鏈，引物的TM值。引物的延伸溫度至70℃左右，TAQDNA聚合酶以４種DNTP為原料，以目的DNA為模板，催化以引物３’末端為起點的5’→3’DNA鏈延伸反應(yīng)，形成新生DNA鏈。新合成的引物延伸鏈經(jīng)過變性后又可作為下一輪循環(huán)反應(yīng)的模板PCR，就是如此反復(fù)循環(huán)，使目的DNA得到高效快速擴增。第三章第三章啟動子啟動子是一段位于結(jié)構(gòu)基因5，端上游區(qū)的DNA序列，能活化RNA聚合酶，使之與模板DNA準(zhǔn)確地相結(jié)合并具有轉(zhuǎn)錄起始的特異性。指RNA聚合酶識別、結(jié)合和開始轉(zhuǎn)錄的一段特定的DNA序列。增強子增強子能強化轉(zhuǎn)錄起始的序列稱為增強子。轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄以DNA為模板，按照堿基配對原則合成RNA，即將DNA所含的遺傳信息傳給RNA，形成一條與DNA鏈互補的RNA的過程。RNA的編輯的編輯是某些RNA，特別是MRNA的一種加工方式，它導(dǎo)致了DNA所編碼的遺傳信息的改變。外顯子外顯子EXON真核細(xì)胞基因DNA中的編碼序列，這些序列被轉(zhuǎn)錄成RNA并進而翻譯為蛋白質(zhì)。內(nèi)含子內(nèi)含子INTRON真核細(xì)胞基因DNA中的間插序列，這些序列被轉(zhuǎn)錄成RNA，但隨即被剪除而不翻譯。復(fù)制子生物體的復(fù)制單位稱為復(fù)制子（REPLICON，是在同一個復(fù)制起點控制下的一段DNA序列。轉(zhuǎn)錄單元是一段啟動子開始至終止子結(jié)束的DNA序列。轉(zhuǎn)錄起點是與新生RNA鏈的第一個核苷酸相對應(yīng)的DNA鏈上的堿基，通常為一個嘌呤。轉(zhuǎn)錄開始時模板上的第一個堿基，在原核中常為A或G，而且位置固定。填空填空1轉(zhuǎn)錄的基本過程包括模板識別，轉(zhuǎn)錄起始，轉(zhuǎn)錄的延伸，轉(zhuǎn)錄的終止。2基因表達包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個階段。3RNA的編輯方式堿基突變，尿甘酸的缺失和添加。4在原核生物中，35區(qū)與10區(qū)之間的距離大約是1619BP5帽子結(jié)構(gòu)的功能〔1〕在翻譯中起識別作用〔2〕使MRNA免遭核苷酸的破壞6原核生物只有一種RNA聚合酶而真核生物有三種，每一種都有其特定的功能。聚合酶Ⅰ合成RRNA聚合酶Ⅱ合成MRNA，聚合酶Ⅲ合成TRNA和5SRRNA。三種聚合酶都是具有多亞基的大的蛋白復(fù)合體。7轉(zhuǎn)錄因子通常具有兩個獨立的結(jié)構(gòu)域一個結(jié)合DNA，一個激活轉(zhuǎn)錄。8在真核細(xì)胞MRNA的修飾中，“帽子”結(jié)構(gòu)由甲基組成，“尾”由多聚腺嘌呤組成。9原核生物的絕大部分起啟動子都存在共同的序列，即位于10BP處的區(qū)和35BP處的區(qū)，他們都是RNA聚合酶與啟動子結(jié)合的位點，能與Σ因子相互識別而具高度親和性。真核生物中，在轉(zhuǎn)錄起始位點上游2535BP處有區(qū)和位于7080BP處

簡介：核酸一、填空題一、填空題1堿基互變異構(gòu)是指堿基的酮式與烯醇式或氨基式與亞氨基式異構(gòu)體發(fā)生互變的現(xiàn)象，如果這種現(xiàn)象在DNA復(fù)制的時候發(fā)生，則可以導(dǎo)致堿基錯配。然而，在生理PH下，堿基主要以酮式或氨基式形式存在。2DNA雙螺旋中只存在2種不同堿基對。A總是與_T___配對，G總是與C配對，此規(guī)則稱為GAFF法則。但在RNA雙螺旋中，還含有第三種堿基配對，它是GU。3X線衍射證明，核苷中堿基與核糖環(huán)平面相互垂直。4一個雙鏈RNA分子與一個雙鏈DNA分子的差別有分別含U與T、核糖與脫氧核糖和A型與B型雙螺旋。5核酸在260NM附近有強吸收，這是由于堿基環(huán)上的共軛雙鍵。6給動物食用3H標(biāo)記的胸苷，可使DNA帶有放射性，而RNA不帶放射性。如果要讓RNA帶有放射性，應(yīng)該給動物食用3H標(biāo)記的尿苷。7TM是指DNA熱變性時候的熔鏈溫度，雙鏈DNA中若GC含量多，則其TM值高。DNA樣品的均一性愈高，其熔解過程的溫度范圍愈窄。DNA所處溶液的離子強度越低，其熔解過程的溫度范圍越寬，熔解溫度越低，所以DNA應(yīng)保存在較高濃度的鹽溶液中。8雙鏈DNA熱變性曲線通常呈S形，這種曲線說明DNA的變性具有協(xié)同效應(yīng)；在DNA發(fā)生熱變性后，在PH2以下，或PH12以上時，其A260增加，同樣條件下，單鏈DNA的A260不變。9核酸分子中的糖苷鍵均為ΒN糖苷鍵型，但假尿苷中的糖苷鍵為ΒC糖苷鍵。核苷酸之間通過35磷酸二酯鍵連接形成多聚物。10細(xì)胞內(nèi)總含有T的RNA是TRNA，它是通過U的后加工形成的。11DNA雙螺旋的構(gòu)型可以有三種，它們分別為B型，A型，Z型。BDNA的螺距為34NM，每圈螺旋的堿基對數(shù)為10，細(xì)胞里的BDNA每圈螺旋的實際堿基對數(shù)為104。ZDNA是左手螺旋，每圈螺旋的堿基對數(shù)為12。ZDNA與BDNA相比，前者的每對核苷酸之間的軸向距離大于后者，前者的直徑小于后者。Z型DNA沒有明顯的大溝。12雙鏈RNA以及RNADNA雜交雙鏈形成的雙螺旋為A型，這是因為核糖2OH造成的空間位阻。13HDNA的形成需要一條鏈全部由嘧啶（或嘌呤核苷酸組成，它除了含有WATSONCRICK堿基對以外，還含有HOOGSTEEN堿基對。14維持DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的主要作用力有氫鍵和堿基堆積力。15測定DNA一級結(jié)構(gòu)的方法主要有SANGER提出的雙脫氧末端終止法和MAXAM和GILBERT提出化學(xué)斷裂法，現(xiàn)在普遍使用的是雙脫氧末端終止法。16DNA在酸性溶液中會發(fā)生脫嘌呤，所以DNA應(yīng)該存放在堿性溶液中；RNA在堿性溶液中發(fā)生水解，所以RNA應(yīng)該存放在酸性溶液中。17雙鏈DNA在蒸餾水中會立刻變性，這是因為雙鏈骨架上的磷酸基團因無金屬中和而相互排斥，導(dǎo)致解鏈。18導(dǎo)致DNA形成超螺旋的原因是兩條鏈過度纏繞或者纏繞不足。細(xì)胞內(nèi)的DNA超螺旋通常屬于負(fù)超螺旋。不利于DNA復(fù)制或轉(zhuǎn)錄的超螺旋是正超螺旋。當(dāng)環(huán)形DNA每一圈的堿基對大于或者小于104BP的時候，通常形成超螺旋結(jié)構(gòu)。19在DNA合成過程中改變DNA分子超螺旋構(gòu)型的酶是拓?fù)洚悩?gòu)酶。20描述閉合環(huán)狀DNA空間關(guān)系可用關(guān)系式LTWL為連接數(shù)，T為雙螺旋數(shù)，W為超螺旋數(shù)表示。一個超螺旋DNA分子的某一個區(qū)域從B型雙螺旋變成Z型雙螺旋，這種構(gòu)象的改變不會影響到這個超螺旋分子的連接數(shù)。21細(xì)胞內(nèi)的DNA形成的雙螺旋通常是B型，枯草桿菌的孢子內(nèi)的DNA形成的雙螺旋通常為A10細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)的質(zhì)粒DNA的存在形式是（A）。A共價閉環(huán)負(fù)超螺旋B共價閉環(huán)正超螺旋C共價閉環(huán)松弛型D線性負(fù)超螺旋E線性正超螺旋11人DNA分子中引入天然的超螺旋的能量來自（E）。AATP和DNA旋轉(zhuǎn)酶的作用BDNA拓?fù)洚悩?gòu)酶工的作用CDNA拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ的作用D解鏈酶的作用EDNA與組蛋白的結(jié)合12有關(guān)DNA結(jié)構(gòu)的正確說法是（D）。A雙螺旋的兩股鏈?zhǔn)窍嗤腂雙螺旋兩股鏈平行，也即走向同一方向C雙螺旋中的堿基平行于螺旋的軸D雙螺旋的兩股長鏈以反向平行方式向右盤繞13雙股DNA的WATSONCRICK結(jié)構(gòu)模型中（A）。A堿基平面和核糖平面都垂直于螺旋軸B堿基平面和核糖平面都平行與螺旋軸C堿基平面垂直于螺旋軸，核糖平面平行于螺旋軸D堿基平面平行于螺旋軸，核糖平面垂直于螺旋軸14下列有關(guān)DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型描述，哪個是不正確的（C）。A同種生物體不同組織中的DNA堿基組成極為相似BDNA雙螺旋中堿基對位于內(nèi)側(cè)C兩股多核苷酸鏈通過AT，CT之間的氫鍵連接D維持雙螺旋穩(wěn)定的主要因素是氫鍵和堿基堆積力15雙鏈DNA的穩(wěn)定性是由（D）決定的。AAT比例BDNA修飾C核苷酸排列D上述所有原因總和16以下有關(guān)DNA變性的敘述，正確的是（C）。A是磷酸二酯鍵的短裂B可由溫度的降低而引起C涉及氫鍵的斷裂D涉及DNA雙螺旋的解開17以下那一項不是維持DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性的力是（C）。A堿基對之間的氫鍵B雙螺旋內(nèi)的疏水作用C二硫鍵D堿基堆積力18在一條單鏈DNA分子上，相鄰的G和C之間的連接方式是（E）。A氫鍵B堿基堆積力C離子鍵D一磷酸一脫氧核糖一磷酸一E一脫氧核糖一磷酸一脫氧核糖一19根劇中心法則，遺傳信息的傳遞方式是（B）。ARNADNA蛋白質(zhì)BDNARNA蛋白質(zhì)CRNARNADNAD蛋白質(zhì)RNADNA20蛋白質(zhì)更喜歡在大溝里與DNA結(jié)合，這是因為（C）。A小溝太窄，蛋白質(zhì)結(jié)合不上去B大溝能提供獨特的疏水作用和范德華力，而小溝不能C大溝能提供具有較高特異性的氫鍵受體和供體D小溝具有太多的靜電斥力EDNA只有大溝，沒有小溝21在相同的條件下，最可能形成ZDNA的序列是（C）。

簡介：1分子生物學(xué)試題一、名詞解釋一、名詞解釋1CDNACDNA與CCCDNACCCDNACDNA是由MRNA通過反轉(zhuǎn)錄酶合成的雙鏈DNA；CCCDNA是游離于染色體之外的質(zhì)粒雙鏈閉合環(huán)形DNA。2標(biāo)準(zhǔn)折疊單位標(biāo)準(zhǔn)折疊單位蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)單元?。菪cΒ－折疊通過各種連接多肽可以組成特殊幾何排列的結(jié)構(gòu)塊，此種確定的折疊類型通常稱為超二級結(jié)構(gòu)。幾乎所有的三級結(jié)構(gòu)都可以用這些折疊類型，乃至他們的組合型來予以描述，因此又將其稱為標(biāo)準(zhǔn)折疊單位。3CAPCAP環(huán)腺苷酸（CAMP）受體蛋白CRP（CAMPRECEPTPROTEIN），CAMP與CRP結(jié)合后所形成的復(fù)合物稱激活蛋白CAP（CAMPACTIVATEDPROTEIN）4回文序列回文序列DNA片段上的一段所具有的反向互補序列，常是限制性酶切位點。5MICRNAMICRNA互補干擾RNA或稱反義RNA，與MRNA序列互補，可抑制MRNA的翻譯。6核酶核酶具有催化活性的RNA，在RNA的剪接加工過程中起到自我催化的作用。7模體模體蛋白質(zhì)分子空間結(jié)構(gòu)中存在著某些立體形狀和拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)頗為類似的局部區(qū)域8信號肽信號肽在蛋白質(zhì)合成過程中N端有1536個氨基酸殘基的肽段，引導(dǎo)蛋白質(zhì)的跨膜。9弱化子弱化子在操縱區(qū)與結(jié)構(gòu)基因之間的一段可以終止轉(zhuǎn)錄作用的核苷酸序列。10魔斑魔斑當(dāng)細(xì)菌生長過程中，遇到氨基酸全面缺乏時，細(xì)菌將會產(chǎn)生一個應(yīng)急反應(yīng)，停止全部基因的表達。產(chǎn)生這一應(yīng)急反應(yīng)的信號是鳥苷四磷酸PPGPP和鳥苷五磷酸（PPPGPP）。PPGPP與PPPGPP的作用不只是一個或幾個操縱子，而是影響一大批，所以稱他們是超級調(diào)控子或稱為魔斑。11上游啟動子元件上游啟動子元件是指對啟動子的活性起到一種調(diào)節(jié)作用的DNA序列，10區(qū)的TATA、35區(qū)的TGACA及增強子，弱化子等。12DNADNA探針探針是帶有標(biāo)記的一段已知序列DNA，用以檢測未知序列、篩選目的基因等方面廣泛應(yīng)用。13SDSD序列序列是核糖體與MRNA結(jié)合序列，對翻譯起到調(diào)控作用。14單克隆抗體單克隆抗體只針對單一抗原決定簇起作用的抗體。15考斯質(zhì)粒考斯質(zhì)粒是經(jīng)過人工構(gòu)建的一種外源DNA載體，保留噬菌體兩端的COS區(qū)，與質(zhì)粒連接構(gòu)成。16藍(lán)白斑篩選白斑篩選含LACZ基因（編碼Β半乳糖苷酶）該酶能分解生色底物XGAL5溴4氯3吲哚ΒD半乳糖苷產(chǎn)生藍(lán)色，從而使菌株變藍(lán)。當(dāng)外源DNA插入后，LACZ基因不能表達，菌株呈白色，以此來篩選重組細(xì)菌。稱之為藍(lán)白斑篩選。17順式作用元件順式作用元件在DNA中一段特殊的堿基序列，對基因的表達起到調(diào)控作用的基因元件。18KLENOWKLENOW酶DNA聚合酶I大片段，只是從DNA聚合酶I全酶中去除了5’→3’外切酶活性19錨定錨定PCRPCR用于擴增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端加上一段多聚DG的尾巴，然后分別用多聚DC和已知的序列作為引物進行PCR擴增。20融合蛋白融合蛋白真核蛋白的基因與外源基因連接，同時表達翻譯出的原基因蛋白與外源蛋白結(jié)合在一起所組成的蛋白質(zhì)。二、填二、填空1DNA的物理圖譜是DNA分子的（限制性內(nèi)切酶酶解限制性內(nèi)切酶酶解）片段的排列順序。2RNA酶的剪切分為（自體催化自體催化）、（異體催化異體催化）兩種類型。3原核生物中有三種起始因子分別是（IF1IF1）、（IF2IF2）和（IF3IF3）。4蛋白質(zhì)的跨膜需要（信號肽信號肽）的引導(dǎo)，蛋白伴侶的作用是（輔助肽鏈折疊成天然構(gòu)象的蛋白質(zhì)）。5啟動子中的元件通?？梢苑譃閮煞N（核心啟動子元件核心啟動子元件）和（上游啟動子元件上游啟動子元件）。6分子生物學(xué)的研究內(nèi)容主要包含（結(jié)構(gòu)分子生物學(xué)結(jié)構(gòu)分子生物學(xué)）、（基因表達與調(diào)控基因表達與調(diào)控）、（DNADNA重組技術(shù)重組技術(shù)）三部分。7證明DNA是遺傳物質(zhì)的兩個關(guān)鍵性實驗是（肺炎球菌感染小鼠肺炎球菌感染小鼠）、（T2T2噬菌體感染大腸桿菌噬菌體感染大腸桿菌）這兩個實驗中主要的論點證據(jù)是（生物體吸收的外源生物體吸收的外源DNADNA改變了其遺傳潛能改變了其遺傳潛能）。8HNRNA與MRNA之間的差別主要有兩點（HNRNAHNRNA在轉(zhuǎn)變?yōu)樵谵D(zhuǎn)變?yōu)镸RNAMRNA的過程中經(jīng)過剪接的過程中經(jīng)過剪接，）、（MRNAMRNA的5′5′末端被加上一個末端被加上一個M7PGPPPM7PGPPP帽子，在帽子，在MRNA3′MRNA3′末端多了一個多聚腺苷酸末端多了一個多聚腺苷酸POLYAPOLYA尾巴尾巴）。9蛋白質(zhì)多亞基形式的優(yōu)點是（亞基對亞基對DNADNA的利用來說是一種經(jīng)濟的方法的利用來說是一種經(jīng)濟的方法）、（可以減少蛋白質(zhì)合成過程中隨機可以減少蛋白質(zhì)合成過程中隨機的錯誤對蛋白質(zhì)活性的影響的錯誤對蛋白質(zhì)活性的影響）、（活性能夠非常有效和迅速地被打開和被關(guān)閉活性能夠非常有效和迅速地被打開和被關(guān)閉）。10蛋白質(zhì)折疊機制首先成核理論的主要內(nèi)容包括（成核成核）、（結(jié)構(gòu)充實結(jié)構(gòu)充實）、（最后重排最后重排）。11半乳糖對細(xì)菌有雙重作用；一方面（可以作為碳源供細(xì)胞生長可以作為碳源供細(xì)胞生長）；另一方面（它又是細(xì)胞壁的成分它又是細(xì)胞壁的成分）。所以3增強子GCCAATTATAA5MGPP起始位點11070253對天然質(zhì)粒的人工構(gòu)建主要表現(xiàn)在哪些方面對天然質(zhì)粒的人工構(gòu)建主要表現(xiàn)在哪些方面天然質(zhì)粒往往存在著缺陷，因而不適合用作基因工程的載體，必須對之進行改造構(gòu)建A、加入合適的選擇標(biāo)記基因，如兩個以上，易于用作選擇通常是抗生素基因。B、增加或減少合適的酶切位點，便于重組。C、縮短長度，切去不必要的片段，提高導(dǎo)入效率，增加裝載量。D、改變復(fù)制子，變嚴(yán)緊為松弛，變少拷貝為多拷貝。E、根據(jù)基因工程的特殊要求加裝特殊的基因元件4舉例說明差示篩選組織特異舉例說明差示篩選組織特異CDNACDNA的方法的方法制備兩種細(xì)胞群體，目的基因在其中一種細(xì)胞中表達或高表達，在另一種細(xì)胞中不表達或低表達，然后通過雜交對比找到目的基因。例如在腫瘤發(fā)生和發(fā)展過程中，腫瘤細(xì)胞會呈現(xiàn)與正常細(xì)胞表達水平不同的MRNA，因此，可以通過差示雜交篩選出與腫瘤相關(guān)的基因。也可利用誘導(dǎo)的方法，篩選出誘導(dǎo)表達的基因。5雜交瘤細(xì)胞系的產(chǎn)生與篩選雜交瘤細(xì)胞系的產(chǎn)生與篩選脾B細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞，加聚乙二醇（PEG）促進細(xì)胞融合，HAT培養(yǎng)基中培養(yǎng)（內(nèi)含次黃嘌呤、氨基蝶呤、T）生長出來的脾B骨髓瘤融合細(xì)胞繼續(xù)擴大培養(yǎng)。細(xì)胞融合物中包含脾脾融合細(xì)胞不能生長，脾細(xì)胞不能體外培養(yǎng)。骨骨融合細(xì)胞不能利用次黃嘌呤，但可通過第二途徑利用葉酸還原酶合成嘌呤。氨基蝶呤對葉酸還原酶有抑制作用，因此不能生長。骨脾融合細(xì)胞在HAT中能生長，脾細(xì)胞可以利用次黃嘌呤，骨細(xì)胞提供細(xì)胞分裂功能。6、利用雙脫氧末端終止法（、利用雙脫氧末端終止法（SANGERSANGER法）測定法）測定DNADNA一級結(jié)構(gòu)的原理與方法一級結(jié)構(gòu)的原理與方法原理是采用核苷酸鏈終止劑2，，3，雙脫氧核苷酸終止DNA的延長。由于它缺少形成35磷酸二脂鍵所需要的3OH，一旦參入到DNA鏈中，此DNA鏈就不能進一步延長。根據(jù)堿基配對原則，每當(dāng)DNA聚合酶需要DNMP參入到正常延長的DNA鏈中時，就有兩種可能性，一是參入DDNTP結(jié)果導(dǎo)致脫氧核苷酸鏈延長的終止；二是參入DNTP使DNA鏈仍可繼續(xù)延長，直至參入下一個DDNTP。根據(jù)這一方法，就可得到一組以DDNTP結(jié)尾的長短不一的DNA片段。方法是分成四組分別為DDAMP、DDGMP、DDCMP、DDTMP反應(yīng)后，聚丙烯酰胺凝膠電泳按泳帶可讀出DNA序列。7、激活蛋白（、激活蛋白（CAPCAP）對轉(zhuǎn)錄的正調(diào)控作用）對轉(zhuǎn)錄的正調(diào)控作用環(huán)腺苷酸（CAMP）受體蛋白CRP（CAMPRECEPTPROTEIN），CAMP與CRP結(jié)合后所形成的復(fù)合物稱激活蛋白CAP（CAMPACTIVATEDPROTEIN）。當(dāng)大腸桿菌生長在缺乏葡萄糖的培養(yǎng)基中時，CAP合成量增加，CAP具有激活乳糖（LAC）等啟動子的功能。一些依賴于CRP的啟動子缺乏一般啟動子所具有的典型的35區(qū)序列特征（TTGACA）。因此RNA聚合酶難以與其結(jié)合。CAP的存在（功能）能顯著提高酶與啟動子結(jié)合常數(shù)。主要表現(xiàn)以下二方面①CAP通過改變啟動子的構(gòu)象以及與酶的相互作用幫助酶分子正確定向以便與10區(qū)結(jié)合，起到取代35區(qū)功能的作用。②CAP還能抑制RNA聚合酶與DNA中其它位點的結(jié)合，從而提高與其特定啟動子結(jié)合的概率。8、典型的、典型的DNADNA重組實驗通常包括哪些步驟重組實驗通常包括哪些步驟A、提取供體生物的目的基因（或稱外源基因），酶接連接到另一DNA分子上（克隆載體），形成一個新的重組DNA分子。B、將這個重組DNA分子轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞并在受體細(xì)胞中復(fù)制保存，這個過程稱為轉(zhuǎn)化。C、對那些吸收了重組DNA的受體細(xì)胞進行篩選和鑒定。D、對含有重組DNA的細(xì)胞進行大量培養(yǎng)，檢測外援基因是否表達。9、基因文庫的構(gòu)建對重組子的篩選舉出、基因文庫的構(gòu)建對重組子的篩選舉出3種方法并簡述過程。種方法并簡述過程。抗生素抗性篩選、抗性的插入失活、蘭白斑篩選或PCR篩選、差式篩選、DNA探針多數(shù)克隆載體均帶有抗生素抗性基因（抗氨芐青霉素、四環(huán)素）。當(dāng)質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸桿菌中后，該菌便獲得抗性，沒有轉(zhuǎn)入的不具有抗性。但不能區(qū)分是否已重組。在含有兩個抗性基因的載體中，如果外源DNA片段插入其中一個基因并導(dǎo)致該基因失活，就可用兩個分別含不同藥物的平板對照篩選陽性重組子。如PUC質(zhì)粒含LACZ基因（編碼Β半乳糖苷酶）該酶能分解生色底物XGAL5溴4氯3吲哚ΒD半乳糖苷產(chǎn)生藍(lán)色，從而使菌株變藍(lán)。當(dāng)外源DNA插入后，LACZ基因不能表達，菌株呈白

簡介：1分子生物學(xué)復(fù)分子生物學(xué)復(fù)習(xí)思考思考題21寫出分子生物學(xué)廣義的與狹義的定義，現(xiàn)代分子生物學(xué)研究的主要內(nèi)容，寫出分子生物學(xué)廣義的與狹義的定義，現(xiàn)代分子生物學(xué)研究的主要內(nèi)容，以及以及5個分子生物學(xué)發(fā)展的主要大事紀(jì)（年代、發(fā)明者、簡要內(nèi)容）個分子生物學(xué)發(fā)展的主要大事紀(jì)（年代、發(fā)明者、簡要內(nèi)容）。廣義上分子生物學(xué)包括對蛋白質(zhì)和核酸等生物大分子結(jié)構(gòu)與功能的研究、以及從分子水平上闡明生命的現(xiàn)象和生物學(xué)規(guī)律。狹義概念既將分子生物學(xué)的范疇偏重于核酸（基因）的分子生物學(xué)，主要研究基因或DNA結(jié)構(gòu)與功能、復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、表達和調(diào)節(jié)控制等過程。其中也涉及到與這些過程相關(guān)的蛋白質(zhì)和酶的結(jié)構(gòu)與功能的研究?，F(xiàn)代分子生物學(xué)研究的主要內(nèi)容有基因與基因組的結(jié)構(gòu)與功能，DNA的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和翻譯，基因表達調(diào)控的研究，DNA重組技術(shù)，結(jié)構(gòu)分子生物學(xué)等。5個分子生物學(xué)發(fā)展的主要大事紀(jì)（年代、發(fā)明者、簡要內(nèi)容）111944年著名微生物學(xué)家AVERY等人在對肺炎雙球菌的轉(zhuǎn)化實驗中證實了DNA是生物的遺傳物質(zhì)。這一重大發(fā)現(xiàn)打破了長期以來，許多生物學(xué)家認(rèn)為的只有象蛋白質(zhì)那樣的大分子才能作為細(xì)胞遺傳物質(zhì)的觀點，在遺傳學(xué)上樹立了DNA是遺傳信息載體的理論。2221953年，是開創(chuàng)生命科學(xué)新時代具有里程碑意義的一年，WATSON和CRICK發(fā)表了“脫氧核糖核酸的結(jié)構(gòu)”的著名論文，他們在FRANKLIN和WILKINSX射線衍射研究結(jié)果的基礎(chǔ)上，推導(dǎo)出DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型，為人類充分揭示遺傳信息的傳遞規(guī)律奠定了堅實的理論基礎(chǔ)。同年，SANGER歷經(jīng)8年，完成了第一個蛋白質(zhì)胰島素的氨基酸全序列分析。331954年GAMNOW從理論上研究了遺傳密碼的編碼規(guī)律CRICK在前人研究工作基礎(chǔ)上，提出了中心法則理論，對正在興起的分子生物學(xué)研究起了重要的推動作用。441956年VOLKIN和ASTRACHAN發(fā)現(xiàn)了MRNA當(dāng)時尚未用此名。551985年SAIKI等發(fā)明了聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)PCR；SINSHEIMER首先提出人類基因組圖譜制作計劃設(shè)想；SMITH等報導(dǎo)了DNA測序中應(yīng)用熒光標(biāo)記取代同位素標(biāo)記的方法；MILLER等發(fā)現(xiàn)DNA結(jié)合蛋白的鋅指結(jié)構(gòu)。22作為主要遺傳物質(zhì)的作為主要遺傳物質(zhì)的DNADNA具有哪些特性，研究具有哪些特性，研究DNADNA一級結(jié)構(gòu)有什么重要意一級結(jié)構(gòu)有什么重要意義，什么是義，什么是DNADNA的超螺旋結(jié)構(gòu)有哪些類型解釋的超螺旋結(jié)構(gòu)有哪些類型解釋DNADNA拓?fù)洚悩?gòu)體，它拓?fù)洚悩?gòu)體，它們之間互變異構(gòu)依賴于什么簡述真核生物的染色體結(jié)構(gòu)，它們是如何們之間互變異構(gòu)依賴于什么簡述真核生物的染色體結(jié)構(gòu)，它們是如何組裝的有幾種組蛋白參與核小體的形成組裝的有幾種組蛋白參與核小體的形成作為遺傳物質(zhì)的DNA具有以下特性①貯存并表達遺傳信息；3堿滴定曲線改變；生物活性喪失等。引起DNA變性的主要因素有溫度、PH值、有機溶劑等。紫外吸收光譜的變化是檢測變性最簡單的定性和定量方法。DNA的復(fù)性必須滿足二個條件①一定的離子強度，用以削弱兩條鏈中磷酸基團之間的排斥力。②較高的溫度，用以避免隨機形成的無規(guī)則氫鍵。影響DNA復(fù)性速度的因素包括（1）DNA分子的復(fù)雜程度。（2）DNA的濃度。（3）DNA片段的大小。（4）溫度的影響。（5）陽離子的濃度。規(guī)定復(fù)性實驗的標(biāo)準(zhǔn)條件是400核苷酸長度，TM25℃的溫度，陽離子強度018MOLL，此時的復(fù)性速度常數(shù)К≈5105。通過下列3種方法可以測定DNA序列復(fù)性的程度（1）S1核酸酶水解的雙鏈DNA量。（2）減色效應(yīng)，在復(fù)性過程中可跟蹤測定A260的光吸收值；（3）S1核酸酶只催化單鏈DNA的水解，不能作用于雙鏈DNA，因此將樣品限定水解后測定抗羥基磷灰石層析，羥基磷灰石是一種磷酸鈣鹽，經(jīng)過一定的處理后，具有吸附雙鏈DNA的能力，洗脫時，只允許單鏈通過，從而可以計算出剩余雙鏈DNA的量。DNA的TM值大小一般與下列因素有關(guān)（1）DNA的均一性。2GC對含量。3介質(zhì)中離子強度。以CC0對COT作圖得到的復(fù)性對濃度的依賴關(guān)系的曲線稱為COT曲線。分子雜交有多種類型，將不同來源的DNA變性后，在溶液里進行雜交，稱為溶液雜交（SOLUTIONHYBRIDIZATION）；用硝酸纖維素制成的濾膜，可以吸附單鏈DNA或RNA，將變性DNA或RNA吸附到濾膜上，再進行雜交，稱為濾膜雜交（FILTERHYBRIDIZATION）。濾膜雜交包括（1）SOUTHERN印跡法用于檢測DNA。（2）NTHERN印跡法用于檢測RNA。（3）WESTHERN印跡法用于檢測蛋白質(zhì)。44簡述基因的概念什么是反向生物學(xué)什么是順反子現(xiàn)代分子生物學(xué)中簡述基因的概念什么是反向生物學(xué)什么是順反子現(xiàn)代分子生物學(xué)中順反子與基因是什么關(guān)系順反子與基因是什么關(guān)系基因（GENE）是原核、真核生物以及病毒的DNA和RNA分子中具有遺傳效應(yīng)的核苷酸序列是遺傳的基本單位。反向生物學(xué)是指利用重組DNA技術(shù)和離體定向誘變的方法研究已知結(jié)構(gòu)的基因相應(yīng)的功能，在體外使基因突變，再導(dǎo)入體內(nèi)，檢測突變的遺傳效應(yīng)，即以表型來探索基因的結(jié)構(gòu)。一個順反子就是一段核苷酸序列，能編碼一條完整的多肽鏈?，F(xiàn)代分子生物學(xué)文獻中，順反子和基因這兩個術(shù)語是互相通用的。一般而言，一個順反子就是一個基因，大約1500個核苷酸。它是由一群突變單位和重組單位組成的線性結(jié)構(gòu)（因為任何一個基因都是突變體或重組體）。

簡介：緒論緒論思考題（P9）1從廣義和狹義上寫出分子生物學(xué)的定義廣義上講的分子生物學(xué)包括對蛋白質(zhì)和核酸等生物大分子結(jié)構(gòu)與功能的研究，以及從分子水平上闡明生命的現(xiàn)象和生物學(xué)規(guī)律。狹義的概念，即將分子生物學(xué)的范疇偏重于核酸（基因）的分子生物學(xué)，主要研究基因或DNA結(jié)構(gòu)與功能、復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、表達和調(diào)節(jié)控制等過程。其中也涉及與這些過程相關(guān)的蛋白質(zhì)和酶的結(jié)構(gòu)與功能的研究。2、現(xiàn)代分子生物學(xué)研究的主要內(nèi)容有哪幾個方面什么是反向生物學(xué)什么是后基因組時代研究內(nèi)容DNA的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和翻譯；基因表達調(diào)控的研究；DNA重組技術(shù)和結(jié)構(gòu)分子生物學(xué)。反向生物學(xué)是指利用重組DNA技術(shù)和離體定向誘變的方法研究已知結(jié)構(gòu)的基因相應(yīng)的功能，在體外使基因突變，再導(dǎo)入體內(nèi)，檢測突變的遺傳效應(yīng)，即以表型來探索基因結(jié)構(gòu)。后基因組時代研究細(xì)胞全部基因的表達圖式和全部蛋白質(zhì)圖式，人類基因組研究由結(jié)構(gòu)向功能轉(zhuǎn)移。3、寫出三個分子生物寫學(xué)展的主要大事件（年代、發(fā)明者、簡要內(nèi)容）1953年WATSON和CLICK發(fā)表了“脫氧核糖核苷酸的結(jié)構(gòu)”的著名論文，提出了DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)模型。19721973年，重組DNA時代的到來。HBOYER和PBERG等發(fā)展了重組DNA技術(shù)，并完成了第一個細(xì)菌基因的克隆，開創(chuàng)了基因工程新紀(jì)元。19902003年美、日、英、法、俄、中六國完成人類基因組計劃。解讀人類遺傳密碼。4、21世紀(jì)分子生物學(xué)的發(fā)展趨勢是怎樣的隨著基因組計劃的完成，人類已經(jīng)掌握了模式生物的所有遺傳密碼。又迎來了后基因組時代，人類基因組的研究重點由結(jié)構(gòu)向功能轉(zhuǎn)移。相關(guān)學(xué)說理論相應(yīng)誕生，如功能基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)和生物信息學(xué)。生命科學(xué)又進入了一個全新的時代。第四章思考題（P130）1、基因的概念如何基因的研究分為幾個發(fā)展階段概念基因是原核、真核生物以及病毒的DNA和RNA分子中具有遺傳效應(yīng)的核苷酸序列，是遺傳的基本單位和突變單位以及控制形狀的功能單位。發(fā)展階段20世紀(jì)50年代以前，主要從細(xì)胞的染色體水平上進行研究，屬○1于基因的染色體遺傳學(xué)階段。20世紀(jì)50年代以后，主要從DNA大分子水平上進行研究，屬于○2分子的生物學(xué)階段。編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因為單拷貝的，但RRNA基因一般為多拷貝的?！?非編碼DNA所占比例很少，類似于病毒基因?！?基因組DNA具有多種調(diào)控區(qū)。如復(fù)制起始區(qū)、復(fù)制終止區(qū)、轉(zhuǎn)錄啟動○6子、轉(zhuǎn)錄終止區(qū)等特殊序列，以及還有重復(fù)序列，比病毒基因組復(fù)雜。與真核生物基因類似，也具有可移動的DNA序列組分?！?真核生物基因組真核生物的單倍染色體組、細(xì)胞器中所含的一整套基因。特點真核基因組的分子質(zhì)量大。相當(dāng)?shù)膹?fù)雜度?！?線狀染色體，每條染色體多個復(fù)制起點?！?細(xì)胞核DNA與蛋白質(zhì)穩(wěn)定的結(jié)合，形成染色質(zhì)的復(fù)雜高級結(jié)構(gòu)?！?基因表達中，轉(zhuǎn)錄和翻譯在時間和空間上被分隔，不偶聯(lián)?！?大量重復(fù)序列，且單位長度不一，重復(fù)程度各異?！?基因一般以點拷貝形式存在，轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為單順反子MRNA。○6存在著可移動的DNA序列?！?絕大多數(shù)真核生物基因都含有內(nèi)含子，基因編碼區(qū)是不連續(xù)排列的?！?異同紅色標(biāo)記相同點；綠色為不同點9、簡要敘述真核生物的DNA序列的幾種類型。單拷貝的DNA序列○1低度重復(fù)的DNA序列，有210個拷貝數(shù)；○2中度重復(fù)的DNA序列，有幾十至數(shù)十萬個拷貝數(shù)○3高度重復(fù)DNA，重復(fù)次數(shù)上萬至數(shù)百次?！?10、內(nèi)含子有什么功能其存在有何意義促進重組。○1增加基因組的復(fù)雜性?！?含有可讀框○3基因組中外顯子和內(nèi)含子是相對的，有些內(nèi)含子具有編碼序列，能產(chǎn)生○4蛋白質(zhì)或功能RNA含有部分剪接信號○5產(chǎn)生核仁小RNA○6內(nèi)含子對基因表達有影響。○7存在意義有利于變異與進化，增加重組機率，提高進化率。14、人類基因組研究哪些內(nèi)容研究人類基因組有何重大意義研究內(nèi)容對人類全基因組作圖，或染色體作圖（包括遺傳連鎖作圖和○1物理作圖），也就是對基因組進行標(biāo)記和劃分，為基因或特定DNA序列在染色體上的位置提供標(biāo)志。進一步還包括繪制轉(zhuǎn)錄圖譜。對基因組DNA進行裂解切割和基因克隆。把幾百甚至幾千堿○2基長度的DNA片段按已知的標(biāo)識進行有序的排列。測定基因組的全部DNA序列。對全部DNA進行序列分析，按其○3在染色體上的位置進行排列，得到在染色體上DNA序列的全部?；虻蔫b定，即確定每個基因的結(jié)構(gòu)，分離和鑒定具有重要功○4能以及與重大疾病相關(guān)的基因。建立基因的信息系統(tǒng)、基因信息的儲存、處理以及開發(fā)相應(yīng)的○5軟件。

簡介：分子生物學(xué)試題及答案分子生物學(xué)試題及答案一、名一、名詞解釋1CDNA與CCCDNACDNA是由是由MRNA通過反轉(zhuǎn)錄酶轉(zhuǎn)錄酶合成的雙合成的雙鏈DNA；CCCDNA是游離于染色體之外的是游離于染色體之外的質(zhì)粒雙粒雙鏈閉鏈閉合環(huán)形DNA。2標(biāo)準(zhǔn)折疊準(zhǔn)折疊單位蛋白位蛋白質(zhì)二級結(jié)級結(jié)構(gòu)單元?。菪c－螺旋與Β－折疊通－折疊通過各種各種連接多接多肽可以可以組成特殊幾何排列的成特殊幾何排列的結(jié)構(gòu)塊，此種確定的折疊，此種確定的折疊類型通常型通常稱為超二超二級結(jié)級結(jié)構(gòu)。幾乎所有的三構(gòu)。幾乎所有的三級結(jié)級結(jié)構(gòu)都可以用構(gòu)都可以用這些折疊些折疊類型，乃至型，乃至他們的組合型來予以描述，因此又將其稱合型來予以描述，因此又將其稱為標(biāo)為標(biāo)準(zhǔn)折疊準(zhǔn)折疊單位。位。3CAP環(huán)腺苷酸（腺苷酸（CAMP）受體蛋白）受體蛋白CRP（CAMPRECEPTPROTEIN），），CAMP與CRP結(jié)合后所形成的復(fù)合物稱激活蛋白合后所形成的復(fù)合物稱激活蛋白CAP（CAMPACTIVATEDPROTEIN）4回文序列回文序列DNA片段上的一段所具有的反向互片段上的一段所具有的反向互補序列，常是限制序列，常是限制性酶切位點。切位點。5MICRNA互互補干擾RNA或稱反或稱反義RNA，與，與MRNA序列互序列互補，可，可抑制抑制MRNA的翻的翻譯。6核核酶具有催化活性的具有催化活性的RNA，在，在RNA的剪接加工的剪接加工過程中起到自我程中起到自我催化的作用。催化的作用。7模體蛋白模體蛋白質(zhì)分子空分子空間結(jié)間結(jié)構(gòu)中存在著某些立體形狀和拓?fù)錁?gòu)中存在著某些立體形狀和拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)頗為頗為類似的局部區(qū)域似的局部區(qū)域8信號信號肽在蛋白在蛋白質(zhì)合成合成過程中程中N端有端有1536個氨基酸殘基的個氨基酸殘基的肽段，段，引導(dǎo)蛋白蛋白質(zhì)的跨膜。的跨膜。去除了去除了5’3’外切外切酶活性活性19錨定PCR用于用于擴增已知一端序列的目的增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端。在未知序列一端加上一段多聚加上一段多聚DG的尾巴，然后分的尾巴，然后分別用多聚用多聚DC和已知的序列作和已知的序列作為引物進行PCR擴增。增。20融合蛋白真核蛋白的基因與外源基因融合蛋白真核蛋白的基因與外源基因連接，同接，同時表達翻表達翻譯出的出的原基因蛋白與外源蛋白原基因蛋白與外源蛋白結(jié)合在一起所合在一起所組成的蛋白成的蛋白質(zhì)。二、填二、填空1DNA的物理的物理圖譜圖譜是DNA分子的（限制性內(nèi)切分子的（限制性內(nèi)切酶酶酶酶解）片段的排）片段的排列順序。序。2RNA酶的剪切分的剪切分為（自體催化（自體催化）、）、（異體催化（異體催化）兩種）兩種類型。型。3原核生物中有三種起始因子分原核生物中有三種起始因子分別是（是（IF1）、）、（IF2）和（）和（IF3）。）。4蛋白蛋白質(zhì)的跨膜需要（的跨膜需要（信號信號肽）的引）的引導(dǎo)，蛋白伴，蛋白伴侶的作用是（的作用是（輔助肽鏈折疊成天然構(gòu)象的蛋白折疊成天然構(gòu)象的蛋白質(zhì)）。）。5啟啟動子中的元件通?？梢苑肿又械脑ǔ？梢苑譃閮煞N（核心啟兩種（核心啟動子元件子元件）和（上游啟）和（上游啟動子元件子元件）。）。6分子生物學(xué)的研究內(nèi)容主要包含（分子生物學(xué)的研究內(nèi)容主要包含（結(jié)構(gòu)分子生物學(xué)構(gòu)分子生物學(xué)）、）、（基因表達與（基因表達與調(diào)控）、）、（DNA重組技術(shù)）三部分。）三部分。7證明DNA是遺傳遺傳物質(zhì)的兩個關(guān)的兩個關(guān)鍵性實驗實驗是（肺炎球菌感染小鼠是（肺炎球菌感染小鼠）、）、（T2噬菌體感染大噬菌體感染大腸桿菌桿菌）這兩個兩個實驗實驗中主要的中主要的論點證據(jù)是（生物據(jù)是（生物體吸收的外源體吸收的外源DNA改變了其了其遺傳遺傳潛能潛能）。）。8HNRNA與MRNA之間的差的差別主要有兩點（主要有兩點（HNRNA在轉(zhuǎn)變?yōu)檗D(zhuǎn)變?yōu)镸RNA的過程中程中經(jīng)過經(jīng)過剪接，剪接，）、）、

簡介：1原核生物原核生物DNA具有哪些不同于真核生物具有哪些不同于真核生物DNA的特征的特征真核生物①真核基因組龐大。②存在大量的重復(fù)序列。③大部分為非編碼序列90％。④轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為單順反子。⑤是斷裂基因，有內(nèi)含子結(jié)構(gòu)。⑥存在大量的順式作用元件啟動子、增強子、沉默子。⑦存在大量的DNA多態(tài)性。⑧具有端粒TELOMERE結(jié)構(gòu)原核生物①基因組很小，大多只有一條染色體，且DNA含量少。②主要是單拷貝基因，只有很少數(shù)基因〔如RRNA基因〕以多拷貝形式存在。③整個染色體DNA幾乎全部由功能基因與調(diào)控序列所組成；④幾乎每個基因序列都與它所編碼的蛋白質(zhì)序列呈線性對應(yīng)狀態(tài)1試述基因克隆載體進化過程。試述基因克隆載體進化過程。①PSC101質(zhì)粒載體，第一個基因克隆載體②COLE1質(zhì)粒載體，松弛型復(fù)制控制的多拷貝質(zhì)粒③PBR322質(zhì)粒載體，具有較小的分子量（4363BP）。能攜帶68KB的外源DNA片段，操作較為便利④PUC質(zhì)粒載體，具有更小的分子量和更高的拷貝數(shù)⑤PGEM3Z質(zhì)粒，編碼有一個氨芐青霉素抗性基因和一個LACZ基因⑥穿梭質(zhì)粒載體，由人工構(gòu)建的具有原核和真核兩種不同復(fù)制起點和選擇標(biāo)記，可在不同的寄主細(xì)胞內(nèi)存活和復(fù)制的質(zhì)粒載體⑦PBLUE噬菌粒載體，一類從PUC載體派生而來的噬菌粒載體2試述試述PCR擴增的原理和步驟。對比擴增的原理和步驟。對比DNA體內(nèi)復(fù)制的差異。體內(nèi)復(fù)制的差異。原理首先將雙鏈DNA分子在臨近沸點的溫度下加熱分離成兩條單鏈DNA分子，DNA聚合酶以單鏈DNA為模板并利用反應(yīng)混合物中的四種脫氧核苷三磷酸、合適的MG2濃度和實驗中提供的引物序列合成新生的DNA分子。步驟①將含有待擴增DNA樣品的反應(yīng)混合物放置在高溫（94℃）環(huán)境下加熱1分鐘，使雙鏈DNA變性，形成單鏈模板DNA②降低反應(yīng)溫度（退火，約50℃），約1分鐘，使寡核苷酸引物與兩條單鏈模板DNA結(jié)合在靶DNA區(qū)段兩端的互補序列位置上③將反應(yīng)混合物的溫度上升到72℃左右保溫1數(shù)分鐘，在DNA聚合酶的作用下，從引物的3端加入脫氧核苷三磷酸，并沿著模板分子按5→3方向延伸，合成新生DNA互補鏈與體內(nèi)復(fù)制的差別①PCR不產(chǎn)生岡崎片段②在高溫條件下反應(yīng)，不需要DNA解旋酶③PCR可經(jīng)過多個循環(huán)④在體外進行，可調(diào)控第六章1基因敲除基因敲除原理又稱基因打靶，通過外源DNA與染色體DNA之間的同源重組，進行精確的定點修飾和基因改造，具有專一性強、染色體DNA可與目的片段共同穩(wěn)定遺傳等特點方法高等動物基因敲除技術(shù)，植物基因敲除技術(shù)2完全基因敲除和條件型基因敲除完全基因敲除和條件型基因敲除完全基因敲除是指通過同源重組法完全消除細(xì)胞或者動植物個體中的靶基因活性，條件型基因敲除是指通過定位重組系統(tǒng)實現(xiàn)特定時間和空間的基因敲除3基因定點突變基因定點突變原理通過改變基因特定位點核苷酸序列來改變所編碼的氨基酸序列，用于研究某個（些）氨基酸殘基對蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)、催化活性以及結(jié)合配體能力的影響，也可用于改造DNA調(diào)控元件特征序列、修飾表達載體、引入新的酶切位點等3、原核生物的細(xì)胞中除了主染色體以外，還含有各種質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座因子。質(zhì)粒常為雙鏈環(huán)狀DNA，可獨立復(fù)制，有的既可以游離于細(xì)胞質(zhì)中，也可以整合到染色體上。轉(zhuǎn)座因子一般都是整合在基因組中。真核生物除了核染色體以外，還存在細(xì)胞器DNA，如線粒體和葉綠體的DNA，為雙鏈環(huán)狀，可自主復(fù)制。有的真核細(xì)胞中也存在質(zhì)粒，如酵母和植物。4、原核生物的DNA位于細(xì)胞的中央，稱為類核（NUCLEOID）。真核生物有細(xì)胞核，DNA序列壓縮為染色體存在于細(xì)胞核中。5、真核基因組都是由DNA序列組成，原核基因組還有可能由RNA組成，如RNA病毒。第七章第七章1簡述代謝物對基因表達調(diào)控的兩種方式。簡述代謝物對基因表達調(diào)控的兩種方式。答①轉(zhuǎn)錄水平上的調(diào)控；②轉(zhuǎn)錄水平上的調(diào)控，包括MRNA加工成熟水平上的調(diào)控和翻譯水平上的調(diào)控3簡述乳糖操縱子的調(diào)控模型。簡述乳糖操縱子的調(diào)控模型。答A、乳糖操縱子的組成大腸桿菌乳糖操縱子含Z、Y、A三個結(jié)構(gòu)基因，分別編碼半乳糖苷酶、透酶和半乳糖苷乙酰轉(zhuǎn)移酶，此外還有一個操縱序列O，一個啟動子P和一個調(diào)節(jié)基因I。B、阻遏蛋白的負(fù)性調(diào)節(jié)沒有乳糖存在時，I基因編碼的阻遏蛋白結(jié)合于操縱序列O處，乳糖操縱子處于阻遏狀態(tài)，不能合成分解乳糖的三種酶；有乳糖存在時，乳糖作為誘導(dǎo)物誘導(dǎo)阻遏蛋白變構(gòu)，不能結(jié)合于操縱序列，乳糖操縱子被誘導(dǎo)開放合成分解乳糖的三種酶。所以，乳糖操縱子的這種調(diào)控機制為可誘導(dǎo)的負(fù)調(diào)控。C、CAP的正性調(diào)節(jié)在啟動子上游有CAP結(jié)合位點，當(dāng)大腸桿菌從以葡萄糖為碳源的環(huán)境轉(zhuǎn)變?yōu)橐匀樘菫樘荚吹沫h(huán)境時，CAMP濃度升高，與CAP結(jié)合，使CAP發(fā)生變構(gòu)，CAP結(jié)合于乳糖操縱子啟動序列附近的CAP結(jié)合位點，激活RNA聚合酶活性，促進結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄，調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合于操縱子后促進結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄，對乳糖操縱子實行正調(diào)控，加速合成分解乳糖的三種酶。D、協(xié)調(diào)調(diào)節(jié)乳糖操縱子中的I基因編碼的阻遏蛋白的負(fù)調(diào)控與

簡介：第2章染色體與染色體與DNADNA名詞解釋名詞解釋原癌基因原癌基因細(xì)胞內(nèi)與細(xì)胞增殖相關(guān)的正常基因，是維持機體正常生命活動所必須的，在進化上高等保守。當(dāng)原癌基因的結(jié)構(gòu)或調(diào)控區(qū)發(fā)生變異，基因產(chǎn)物增多或活性增強時，使細(xì)胞過度增殖，從而形成腫瘤。復(fù)制復(fù)制以親代DNA或RNA為模板，根據(jù)堿基配對的原則，在一系列酶的作用下，生成與親代相同的子代DNA或RNA的過程。轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)座子TRANSPOSON或TRANSPOSABLEELEMENT位于染色體DNA上可自主復(fù)制和位移的基本單位。包括插入序列和復(fù)合轉(zhuǎn)座子。半保留復(fù)制半保留復(fù)制以親代DNA雙鏈為模板以堿基互補方式合成子代DNA，這樣新形成的子代DNA中，一條鏈來自親代DNA，而另一條鏈則是新合成的，這種復(fù)制方式叫半保留復(fù)制。染色體染色體染色體是遺傳信息的載體，由DNA、RNA和蛋白質(zhì)構(gòu)成，其形態(tài)和數(shù)目具有種系的特性。在細(xì)胞間期核中，以染色質(zhì)形式存在。在細(xì)胞分裂時，染色質(zhì)絲經(jīng)過螺旋化、折疊、包裝成為染色體，為顯微鏡下可見的具不同形狀的小體。核小體是構(gòu)成真核生物染色體的基本單位，是DNA和蛋白質(zhì)構(gòu)成的緊密結(jié)構(gòu)形式，包括200BP左右的DNA和9個組蛋白分子構(gòu)成的致密結(jié)構(gòu)。填空題填空題1真核細(xì)胞核小體的組成是DNA和蛋白2天然染色體末端不能與其他染色體斷裂片段發(fā)生連接，這是因為天然染色體末端存在端粒結(jié)構(gòu)。3在聚合酶鏈反應(yīng)中，除了需要模板DNA外，還需加入引物、DNA聚合酶、DNTP和鎂離子。4引起DNA損傷的因素有自發(fā)因素、物理因素、化學(xué)因素。5DNA復(fù)制時與DNA解鏈有關(guān)的酶和蛋白質(zhì)有拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ、解螺旋酶、單鏈DNA結(jié)合蛋白。6參與DNA切除修復(fù)的酶有DNA聚合酶Ⅰ、DNA連接酶、特異的核酸內(nèi)切酶。7在真核生物中DNA復(fù)制的主要酶是DNA聚合酶Δ。在原核生物中是DNA聚合酶Ⅲ。8端粒酶是端粒酶是含一段RNA的逆轉(zhuǎn)錄酶。9DNA的修復(fù)方式有錯配修復(fù)、堿基切除修復(fù)、核苷酸切除修復(fù)、DNA的直接修復(fù)。選擇題選擇題1真核生物復(fù)制起點的特征包括（B）A富含GC區(qū)B富含AT區(qū)CZDNAD無明顯特征2插入序列（IS）編碼（A）A轉(zhuǎn)座酶B逆轉(zhuǎn)錄酶CDNA合成酶D核糖核酸酶3紫外線照射對DNA分子的損傷主要是DA堿基替換B磷酸脂鍵斷裂C。堿基丟失D形成共價連接的嘧啶二聚體4自然界中以DNA為遺傳物質(zhì)的大多數(shù)生物DNA的復(fù)制方式（C）A環(huán)式BD環(huán)式C半保留D全保留5原核生物基因組中沒有（A）（3）、在類組蛋白（HU、ATP參與下DANA蛋白變性13個BP的重復(fù)序列形成開鏈復(fù)合物。（4）、DNAB借助于水解ATP產(chǎn)生的能量在DNAC的幫助下沿5’→3’方向移動，解開DNA雙鏈，形成前引發(fā)復(fù)合物。（5）、單鏈結(jié)合蛋白結(jié)合于單鏈。（6）、引物合成酶（DNAG蛋白）開始合成RNA引物。鏈的延長（岡崎片段的合成）在DNA聚合酶Ш的催化下，以四種5’脫氧核苷三磷酸為底物，在RNA引物的3’端以磷酸二酯鍵連接上脫氧核糖核苷酸并釋放出焦磷酸。DNA鏈的延伸同時進行前導(dǎo)鏈和滯后鏈的合成。兩條鏈方向相反。6、PCR的基本原理PCR是在試管中進行的DNA復(fù)制反應(yīng)，基本原理是依據(jù)細(xì)胞內(nèi)DNA半保留復(fù)制的機理，以及體外DNA分子于不同溫度下雙鏈和單鏈可以互相轉(zhuǎn)變的性質(zhì)，人為地控制體外合成系統(tǒng)的溫度，以促使雙鏈DNA變成單鏈，單鏈DNA與人工合成的引物退火，然后耐熱DNA聚合酶以DNTP為原料使引物沿著單鏈模板延伸為雙鏈DNA。PCR全過程每一步的轉(zhuǎn)換是通過溫度的改變來控制的。需要重復(fù)進行DNA模板解鏈、引物與模板DNA結(jié)合、DNA聚合酶催化新生DNA的合成，即高溫變性、低溫退火、中溫延伸３個步驟構(gòu)成PCR反應(yīng)的一個循環(huán)，此循環(huán)的反復(fù)進行，就可使目的DNA得以迅速擴增。DNA模板變性模板雙鏈DNA單鏈DNA，94℃。退火引物＋單鏈DNA雜交鏈，引物的TM值。引物的延伸溫度至70℃左右，TAQDNA聚合酶以４種DNTP為原料，以目的DNA為模板，催化以引物３’末端為起點的5’→3’DNA鏈延伸反應(yīng)，形成新生DNA鏈。新合成的引物延伸鏈經(jīng)過變性后又可作為下一輪循環(huán)反應(yīng)的模板PCR，就是如此反復(fù)循環(huán)，使目的DNA得到高效快速擴增。第三章第三章啟動子啟動子是一段位于結(jié)構(gòu)基因5，端上游區(qū)的DNA序列，能活化RNA聚合酶，使之與模板DNA準(zhǔn)確地相結(jié)合并具有轉(zhuǎn)錄起始的特異性。指RNA聚合酶識別、結(jié)合和開始轉(zhuǎn)錄的一段特定的DNA序列。增強子增強子能強化轉(zhuǎn)錄起始的序列稱為增強子。轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄以DNA為模板，按照堿基配對原則合成RNA，即將DNA所含的遺傳信息傳給RNA，形成一條與DNA鏈互補的RNA的過程。RNARNA的編輯的編輯是某些RNA，特別是MRNA的一種加工方式，它導(dǎo)致了DNA所編碼的遺傳信息的改變。外顯子外顯子EXONEXON真核細(xì)胞基因DNA中的編碼序列，這些序列被轉(zhuǎn)錄成RNA并進而翻譯為蛋白質(zhì)。內(nèi)含子內(nèi)含子INTRONINTRON真核細(xì)胞基因DNA中的間插序列，這些序列被轉(zhuǎn)錄成RNA，但隨即被剪除而不翻譯。復(fù)制子生物體的復(fù)制單位稱為復(fù)制子（REPLICON，是在同一個復(fù)制起點控制下的一段DNA序列。轉(zhuǎn)錄單元是一段啟動子開始至終止子結(jié)束的DNA序列。轉(zhuǎn)錄起點是與新生RNA鏈的第一個核苷酸相對應(yīng)的DNA鏈上的堿基，通常為一個嘌呤。

簡介：LPC2013051第一章第一章緒論緒論一簡述分子生物學(xué)的主要內(nèi)容。一簡述分子生物學(xué)的主要內(nèi)容。1DNA重組技術(shù)（又稱基因工程）2基因表達調(diào)控研究3生物大分子的結(jié)構(gòu)功能的研究結(jié)構(gòu)分子生物學(xué)4基因組、功能基因組與生物信息學(xué)研究二什么是遺傳學(xué)的中心法則和反中心法則二什么是遺傳學(xué)的中心法則和反中心法則遺傳學(xué)中心法則描述從一個基因到相應(yīng)蛋白質(zhì)的信息流的途徑。遺傳信息貯存在DNA中，DNA被復(fù)制傳給子代細(xì)胞，信息被拷貝或由DNA轉(zhuǎn)錄成RNA，然后RNA翻譯成多肽。反中心法則由RNA逆轉(zhuǎn)錄到DNA，再由DNA轉(zhuǎn)錄到RNA，然后RNA翻譯成多肽、蛋白質(zhì)。第二章第二章染色體與染色體與DNADNA一、名詞解釋一、名詞解釋半保留復(fù)制半保留復(fù)制DNA復(fù)制時，以親代DNA的每一條鏈作為模版，合成完全相同的兩個雙鏈自帶DNA分子，每個子代DNA分子中都含有一條親代DNA鏈的復(fù)制方式。岡崎片段岡崎片段在DNA復(fù)制過程中，前導(dǎo)鏈能連續(xù)合成，而滯后鏈只能是斷續(xù)的合成53的多個短片段，這些不連續(xù)的小片段稱為岡崎片段。復(fù)制子復(fù)制子從復(fù)制原點到終點，組成一個復(fù)制單位，叫復(fù)制子。插入序列插入序列最簡單的轉(zhuǎn)座子，不含有任何宿主基因，它們是細(xì)菌染色體或質(zhì)粒DNA的正常組成部分。DNADNA的變性和復(fù)性變性的變性和復(fù)性變性指DNA雙鏈的氫鍵斷裂，完全變成單鏈。復(fù)性復(fù)性指熱變性的DNA緩慢冷卻，單鏈恢復(fù)成雙鏈。雙向復(fù)制雙向復(fù)制復(fù)制從一個固定的起始點開始，同時向兩個方向等速進行。引物酶引物酶一種特殊的RNA聚合酶，在DNA模版上合成一段RNA鏈，這段RNA鏈?zhǔn)荄NA復(fù)制起始時必需的引物。轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)座子存在與染色體DNA上可自主復(fù)制和位移的基本單位。堿基切除修復(fù)堿基切除修復(fù)首先由糖苷水解酶識別特定受損核苷酸上的NΒ糖苷鍵，在DNA上形成AP位點，由AP核酸內(nèi)切酶把受損的核苷酸的糖苷磷酸鍵切開，移去包括AP位點在內(nèi)的小片段DNA，由聚合酶Ⅰ合成新片段，DNA連接酶最終把兩者連接成新的DNA鏈。DNADNA重組修復(fù)重組修復(fù)即“復(fù)制后修復(fù)”。機體細(xì)胞對在復(fù)制起始時尚未修復(fù)的DNA部位可先復(fù)制再修復(fù)。在復(fù)制時，先跳過損傷部位，在和成鏈中留下一個缺口。對該缺口的修復(fù)即“DNA重組修復(fù)”先從同源DNA母鏈上將相應(yīng)核苷酸序列片段移至子鏈缺口處，然后再用新合成的序列補上母鏈空缺。解旋酶解旋酶通過水解ATP獲得能量來解開雙鏈DNA的酶。單鏈結(jié)合蛋白單鏈結(jié)合蛋白與解開的DNA單鏈緊密結(jié)合，防止重新形成雙鏈，并免受核酸酶降解。在復(fù)制中維持模板處于單鏈狀態(tài)。DNADNA連接酶連接酶連接DNA鏈3OH末端和相鄰DNA鏈5P末端，形成磷酸二酯鍵，從而把兩段相鄰的DNA鏈連接成完整的鏈。轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)座子一段DNA順序可以從原位上單獨復(fù)制或斷裂下來，環(huán)化后插入另一位點，并對其后的基因起調(diào)控作用。P轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)座子是一種能夠誘發(fā)雜種不育的果蠅轉(zhuǎn)座子，果蠅中幾乎所有的雜種不育都由P轉(zhuǎn)座子引起。二、理解題二、理解題1DNADNA和RNARNA分子的基本組成成分。分子的基本組成成分。1、DNA由4種主要的脫氧核苷酸DAMP、DGMP、DCMT和DTMP通過3′，5′磷酸二酯鍵連接而成。2、RNA是由核糖核苷酸經(jīng)磷酯鍵縮合而成長鏈狀分子。一個核糖核苷酸分子由磷酸，核糖和堿基構(gòu)成。RNA的堿基主要有4種，即A腺嘌呤，G鳥嘌呤，C胞嘧啶，U尿嘧啶。2DNA2DNA分子的一級結(jié)構(gòu)定義、組成和表示方法。分子的一級結(jié)構(gòu)定義、組成和表示方法。LPC2013053原核生物DNA聚合酶種類的比較POLIPOLIPOLIIPOLIIPOLIIIPOLIII5→35→3聚合酶活性聚合酶活性3→53→5外切酶活性外切酶活性5→35→3外切酶活性外切酶活性–構(gòu)成亞基數(shù)單體不詳多亞基體外鏈延長速度核苷酸分600309000分子數(shù)細(xì)胞400不詳10～20功能修復(fù)合成去除引物填補空隙校對不詳復(fù)制校對6DNA6DNA復(fù)制的基本過程和終止機理復(fù)制的基本過程和終止機理1、DNA雙螺旋的解旋DNA在復(fù)制時，其雙鏈?zhǔn)紫冉忾_，形成復(fù)制叉，這是一個有多種蛋白質(zhì)以及酶參與復(fù)制的過程。2DNA復(fù)制的引發(fā)所有的DNA聚合酶都從3’羥基端起始DNA合成。DNA復(fù)制時，往往先由引發(fā)每在DNA復(fù)制時，往往先由引發(fā)酶在DNA模版上合成一段RNA鏈，它提供引發(fā)末端（即引物），接著由DNA聚合酶從RNA聚合酶從RNA引物3’端開始合成新的DNA鏈。3、在DNA聚合酶的作用下，水解切除RNA引物，填補空缺。4、在DNA連接酶的作用下，連接相鄰DNA片段。5、終止機理當(dāng)復(fù)制叉前移遇到22個堿基的重復(fù)性終止序列（TER）時，TERTUS復(fù)合物能使DNAB不再將DNA解鏈，阻擋復(fù)制叉的繼續(xù)遷移，等到相反方向的復(fù)制叉到達后，停止復(fù)制。期間，人后50100BP未被復(fù)制，由修復(fù)方式填補空缺，而后兩條鏈解開。7DNA7DNA復(fù)制保真信的原理復(fù)制保真信的原理至少依賴三種機制1遵守嚴(yán)格的堿基配對規(guī)律；2聚合酶在復(fù)制延長中對堿基的選擇功能；3復(fù)制中的即時校讀功能。88什么是什么是RNARNA反轉(zhuǎn)錄，以及他的生物學(xué)意義反轉(zhuǎn)錄，以及他的生物學(xué)意義定義以RNA為模版以四種DNTP為原料，在PBA指導(dǎo)的DNA聚合酶的催化下，按照堿基互補配對的原則合成DNA的過程。意義對分子生物學(xué)的中心法則進行了修正和補充；在實際工作中，有助于基因工作的實施，可用于目的基因的制備。99什么是什么是DNADNA自發(fā)性損傷自發(fā)性損傷復(fù)制過程中堿基配對時產(chǎn)生的誤差，經(jīng)DNA聚合酶校正和SSB等綜合校對，任未被校正的DNA損傷。包括DNA復(fù)制中的錯誤；DNA的自發(fā)性化學(xué)變化（堿基的異構(gòu)互變、堿基的脫氨基作用、脫嘌呤與嘧啶、堿基修飾與鏈斷裂）；10DNA10DNA修復(fù)包括哪些類型修復(fù)包括哪些類型