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文檔簡介
1、第一部分、不同胚胎期心外膜祖細胞的體外培養(yǎng)
目前通過胚胎小鼠心室爬片獲得心外膜祖細胞的胚胎期并不統一,E10.5-E13.5胚胎心室都有用來培養(yǎng)心外膜祖細胞。
目的:探討如何成功培養(yǎng)不同胚胎期的心外膜祖細胞。
方法:我們選擇E11.5、E13.5、E15.5胚胎小鼠心室來誘導心外膜祖細胞的爬出,并通過PCR和免疫細胞熒光鑒定其性質。
結果:從E11.5、E13.5、E15.5胚胎心室成功培養(yǎng)出心外
2、膜祖細胞。E11.5、E13.5、E15.5心外膜祖細胞爬出需要不同培養(yǎng)時間窗。
結論:可以根據不同的實驗目的適宜地選擇不同胚胎期的心室來培養(yǎng)心外膜祖細胞。
第二部分、探究不同胚胎期心外膜祖細胞之間生物學特性的差異
從心外膜早期形成到成年,心外膜細胞一直經歷著胚胎期基因表達的動態(tài)變化,與其相聯系的是心外膜細胞特性的改變。目前研究尚未明確各胚胎期心外膜祖細胞的生物學特性差異,而該差異可能對心外膜祖細胞相關的實
3、驗研究存在影響。
目的:探究不同胚胎期的心外膜祖細胞生物學特性的差異。
方法:通過劃痕實驗、流式細胞周期分析以及PDGF-BB誘導分別研究不同胚胎期心外膜祖細胞的遷移、增殖及分化特性的差異。
結果:E11.5、E13.5、E15.5心外膜祖細胞的遷移能力隨胚胎發(fā)育不斷降低。E11.5、E13.5、E15.5心外膜祖細胞的增殖能力總體上無差別。早期心外膜細胞較晚期心外膜細胞更容易表達平滑肌標志物,其祖細胞特性
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