水通道蛋白-3,4和鈉鉀ATP酶α1在不同時(shí)期大鼠腎臟的表達(dá).pdf

1、目的：本實(shí)驗(yàn)研究在生理?xiàng)l件下，不同時(shí)期大鼠腎臟形態(tài)學(xué)變化及水通道蛋白3（Aquaporin3, AQP3）、水通道蛋白4（Aquaporin4, AQP4）和Na+, K+-ATPaseα1表達(dá)變化，為進(jìn)一步探討不同時(shí)期大鼠腎臟AQP3、AQP4和Na+, K+-ATPaseα1生理功能提供理論資料。
　　方法：選取孕19天（-2天）、出生1天、7天、14天、21天、28天、35天、60天、180天、420天、540天和850天S

2、prague Dawley(SD)大鼠腎臟，左腎用于提取總RNA，用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）檢測(cè)AQP3、AQP4和Na+, K+-ATPaseα1在基因水平的表達(dá)。選取出生后180天、420天、540天和850天大鼠右腎，用4％多聚甲醛固定24h。蘇木素-伊紅（HE）染色觀察出生后180天、420天、540天和850天腎臟形態(tài)學(xué)變化，免疫組織化學(xué)（IHC）染色測(cè)量AQP3、AQP4在出生后420天、540天和850天表達(dá)量并

3、用圖像分析軟件等方法進(jìn)行分析。
　　結(jié)果：（1）HE染色結(jié)果：出生后180天腎臟結(jié)構(gòu)明顯，隨著時(shí)間增加，腎小球體積縮小，伴隨腎小球分葉、腎小球基底膜增厚、管腔壁變薄、管腔內(nèi)容物增加、管腔融合、細(xì)胞呈顆?？张轄钭冃灾饾u明顯。（2）IHC結(jié)果：腎皮質(zhì)及髓質(zhì)AQP3和AQP4蛋白表達(dá)量在420天較高、在540天降低、在850天再次升高，540天表達(dá)量與850天表達(dá)量之間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。AQP3和AQP4在腎髓質(zhì)表達(dá)量較

4、腎皮質(zhì)多。AQP3在420天表達(dá)量相對(duì)于在850天表達(dá)量較多，AQP4在850天表達(dá)量相對(duì)于在420天表達(dá)量較多。（3）RT-PCR結(jié)果：AQP3 mRNA、AQP4 mRNA、Na+, K+-ATPaseα1 mRNA從-2天至出生后14天表達(dá)水平均較低，21天后表達(dá)量明顯升高， AQP3 mRNA、AQP4 mRNA均在35天至表達(dá)高峰而后降低，AQP3 mRNA在850天表達(dá)量與出生后1天、7天、14天、21天、60天、180天和

5、420天表達(dá)量比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05),但和-2天、出生后28天、35天和540天表達(dá)量比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。AQP4 mRNA在850天的表達(dá)量與出生后1天、7天、14天、21天、60天、180天、420天和540天表達(dá)量比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，但和-2天、出生后28天和35天表達(dá)量比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。Na+, K+-ATPaseα1 mRNA表達(dá)量從出生21天后一直處于高表達(dá)狀態(tài)，在1

6、80天出現(xiàn)表達(dá)高峰而后降低。850天表達(dá)量與28天、35天和60天表達(dá)量比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，與-2天、1天、7天、14天、21天、180天、420天和540天表達(dá)量比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　結(jié)論：（1）隨著年齡增加，大鼠腎小球和腎小管發(fā)生結(jié)構(gòu)變化。腎小球體積、腎小球囊腔及腎小管管腔變小，腎小管管壁變薄，腎小球基底膜增厚及小管腔內(nèi)容物增多。（2）不同時(shí)期AQP3和AQP4在大鼠腎皮質(zhì)和髓質(zhì)表達(dá)趨勢(shì)是一致的