寬譜中波紫外線、17β-雌二醇對(duì)人表皮黑素細(xì)胞非經(jīng)典Wnt通路的作用初探及黃褐斑病因、加重因素、對(duì)生活質(zhì)量影響的橫斷面研究.pdf

1、第一部分寬譜中波紫外線、17β-雌二醇對(duì)人表皮黑素細(xì)胞非經(jīng)典Wnt通路的作用初探
　　目的:研究寬譜中波紫外線照射、雌激素刺激對(duì)黑素細(xì)胞增殖率、酪氨酸酶活性、黑素含量的影響，初步探討非經(jīng)典的Wnt通路相關(guān)基因?qū)ψ贤饩€照射或雌激素刺激后黑素生成相關(guān)基因的可能作用。
　　方法:原代培養(yǎng)人表皮黑素細(xì)胞，用不同劑量的寬譜中波紫外線照射黑素細(xì)胞或用含不同濃度的雌激素培養(yǎng)基培養(yǎng)黑素細(xì)胞，采用CCK8法測定黑素細(xì)胞增殖率、多巴比色法測定酪

2、氨酸酶活性、NaOH溶解法測定黑素含量。根據(jù)結(jié)果選擇合適的紫外線劑量和雌激素濃度作用于黑素細(xì)胞，實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測作用后非經(jīng)典通路相關(guān)因子mRNA的表達(dá)，蛋白印跡法檢測作用前后非經(jīng)典通路相關(guān)因子蛋白的表達(dá)。使用單因素的方差分析法分析各組之間的差異。
　　結(jié)果:不同劑量的寬譜中波紫外線照射后，黑素細(xì)胞增殖率均降低(P＜0.01)，酪氨酸酶活性均增加（P＜0.05），100mJ/cm2紫外線照射后，黑素細(xì)胞黑素含量較對(duì)照組升高(P

3、＜0.01)。100m J/cm2紫外線照射后WIF-1 mRNA的表達(dá)較對(duì)照組減少(P＜0.01)，WNT5A、JNK、MITF、RAC1、TYR的mRNA表達(dá)均較對(duì)照組升高（P＜0.05）。100mJ/cm2紫外線照射后，WIF-1蛋白的表達(dá)量較對(duì)照組降低，WNT5A、JNK、MITF、RAC1、TYR蛋白表達(dá)較對(duì)照組升高。雌激素濃度為10-13mol/L～10-5mol/L時(shí)黑素細(xì)胞增殖率較對(duì)照上升(P＜0.01)。雌激素刺激后酪

4、氨酸酶活性和黑素含量均較對(duì)照組升高(P＜0.01)。10-9mol/L雌激素作用后，WIF-1基因mRNA表達(dá)升高(P＜0.01)，JNK、MITF、RAC1基因mRNA表達(dá)均降低(P＜0.01)，WNT5A、TYR基因mRNA的表達(dá)與對(duì)照組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。10-9mol/L雌激素作用后，WNT5A、WIF-1、TYR蛋白表達(dá)升高，MITF、JNK、RAC1蛋白表達(dá)量降低。
　　結(jié)論:紫外線照射降低黑素細(xì)胞增殖率

5、，提高黑素細(xì)胞酪氨酸酶活性和黑素含量。雌激素作用可提高黑素細(xì)胞增殖率、酪氨酸酶活性和黑素含量。非經(jīng)典通路相關(guān)基因參與了紫外線和雌激素對(duì)黑素細(xì)胞黑素生成的調(diào)節(jié)作用。WIF-1基因可能抑制黑素生成。WIF-1基因表達(dá)降低可能通過對(duì)非經(jīng)典通路Wnt蛋白的作用激活JNK/MITF/TYR通路，最終促進(jìn)黑素的合成。
　　第二部分黃褐斑病因、加重因素、對(duì)生活質(zhì)量影響的橫斷面研究
　　目的:研究黃褐斑患者的病因、加重因素、嚴(yán)重程度及對(duì)生活

6、質(zhì)量的影響。
　　方法:通過問卷形式收集166例女性黃褐斑患者的人口學(xué)資料、行為學(xué)資料、疾病的臨床資料并進(jìn)行黃褐斑面積及嚴(yán)重程度評(píng)分(MASI)、皮膚病生活質(zhì)量評(píng)分(DLQI)、黃褐斑生活質(zhì)量評(píng)分(MELA-SQOL)。通過多元線性回歸分析，尋找黃褐斑嚴(yán)重程度及生活質(zhì)量影響因素。
　　結(jié)果:55人在發(fā)病前1年內(nèi)有懷孕史。8例患者發(fā)病前有1月內(nèi)明確日光暴曬史。103人有睡眠質(zhì)量差導(dǎo)致皮損加重。患者M(jìn)ASI評(píng)分為（5.99±4.

7、01）分;DLQI評(píng)分為（4.34±4.41）分;MELASQOL評(píng)分為（30.54±17.91）分。隨著年齡的增大黃褐斑M(jìn)ELA-SQOL評(píng)分降低，隨著皮損顏色的加深MELA-SQOL評(píng)分增加(P＜0.05)。MELA-SQOL評(píng)分與MASI評(píng)分無關(guān)。絕經(jīng)前黃褐斑患者隨著年齡的增大MASI評(píng)分增加，F(xiàn)itzpatrick皮膚分型Ⅳ型皮膚的人群MASI評(píng)分較Ⅲ型皮膚高(P＜0.05)。
　　結(jié)論:黃褐斑的發(fā)病與激素水平波動(dòng)與日曬有