Fibrillin-1、Elastin在女性盆腔器官脫垂患者陰道前壁的表達(dá)及意義.pdf

1、盆腔器官脫垂（POP）即會(huì)陰疝是一個(gè)世界性的衛(wèi)生問題，中老年婦女發(fā)病率較高，隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，人口老齡化程度的加重，其發(fā)病率有逐年增高的趨勢(shì)。其雖然不是致死性疾病，但嚴(yán)重影響人們的身體健康及生活質(zhì)量。在美國，年齡50?79歲的婦女中約有40％患有不同程度的POP。POP的發(fā)病原因是多方面的，但其發(fā)生機(jī)制尚不明確。近年來研究發(fā)現(xiàn)盆底組織彈性纖維的薄弱、破壞或是POP發(fā)生的病理基礎(chǔ)之一。
　　彈性纖維是結(jié)締組織中重要的組成成分，彈性

2、纖維可賦予組織良好的伸縮性和可逆的變形性，從而可以維持組織正常的結(jié)構(gòu)和功能。彈性蛋白（Elastin）是彈性纖維最主要和最核心蛋白，原纖維蛋白-1（Fibrillin-1）是彈性蛋白形成的支架，對(duì)彈性蛋白的形成發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。有研究者發(fā)現(xiàn)腹股溝直疝患者腹橫筋膜中彈性纖維稀疏、分離，F(xiàn)ibrillin-1含量顯著降低，且分布異常，是導(dǎo)致腹股溝直疝患者腹橫筋膜抵抗能力減弱的原因。彈性纖維在女性盆底組織中含量豐富，在POP患者中，Ela

3、stin、Fibrillin-1是否也參與了POP的發(fā)生及發(fā)展國內(nèi)外文獻(xiàn)卻未見報(bào)道，因此，本實(shí)驗(yàn)試圖通過研究非POP患者、II°脫垂患者、III°脫垂患者組織中Elastin、Fibrillin-1在蛋白水平及基因水平的表達(dá)情況，探索兩者在POP的形成及發(fā)展中的作用及相互關(guān)系，從而為POP的發(fā)生原因及發(fā)展提供新的思路。
　　目的：
　　通過研究非POP患者、II°脫垂患者、III°脫垂患者組織中Elastin、Fibrill

4、in-1在蛋白水平及基因水平的表達(dá)情況，探索兩者在POP的形成及發(fā)展中的作用及相互關(guān)系，從而為POP的發(fā)生原因及發(fā)展提供新的思路。
　　材料和方法：
　　1.實(shí)驗(yàn)材料:收集我院2013年7月～2014年2月鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院婦科收治的患有盆腔器官脫垂的患者60例（均為絕經(jīng)后婦女），其中經(jīng)POP-Q評(píng)分II°脫垂30例，平均（59.93±1.98）歲， III°脫垂30例，平均（60.16±1.43）歲，術(shù)中均取其12點(diǎn)方位

5、陰道壁全層，大小約1.0cm*1.0cm作為研究組。選擇同期因?qū)m頸癌Ia1期至Ib1期患者的陰道前壁12點(diǎn)方位大小約1.0cm*1.0cm全層組織標(biāo)本30例作為對(duì)照組，平均（59.83±1.62）歲。所有標(biāo)本常規(guī)取材，離體后立即分為兩份，一份在離體的30分鐘內(nèi)儲(chǔ)存在-80℃冰箱里，另一部分離體后立即置于10%甲醛溶液中固定，常規(guī)石蠟包埋。所有病例均無雌激素相關(guān)疾病及肝硬化、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等影響膠原和彈性蛋白代謝的疾病，近6個(gè)月內(nèi)均未使用

6、過皮質(zhì)激素類及性激素類藥物。各組病例組在年齡、產(chǎn)次、孕次、體重指數(shù)等進(jìn)行單因素方差分析，組間各因素比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。術(shù)前患者均簽署了知情同意書。術(shù)后經(jīng)病理專家證實(shí)，診斷明確。
　　2.研究方法:分別采用免疫組化SP法及RT-PCR（逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)）法，嚴(yán)格按照試劑盒用法說明，檢測(cè)3組陰道壁組織中Elastin和Fibrillin-1在蛋白水平及基因水平的表達(dá)情況。
　　3.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件

7、包進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)數(shù)資料采用均值加減標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間采用單因素方差分析，?2檢驗(yàn)及關(guān)聯(lián)性分析,各檢驗(yàn)方法均以?=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。
　　結(jié)果：
　　1.Elastin主要定位于細(xì)胞質(zhì)中。Elastin在非POP患者陰道壁、II°脫垂患者陰道壁、及 III°脫垂患者陰道壁組織中均有表達(dá)，隨著脫垂程度的加重，細(xì)胞染色程度逐漸變淺，陽性染色細(xì)胞比例逐漸減少，三組樣本中陽性表達(dá)率分別為73.3%、46.67%、20.00%，差異有

8、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹤0.05）。
　　2.Fibrillin-1主要定位于細(xì)胞質(zhì)中。Fibrillin-1在非POP患者陰道壁、II°脫垂患者陰道壁、及III°脫垂患者陰道壁組織中均有表達(dá)，隨著脫垂程度的加重，細(xì)胞染色程度逐漸變淺，陽性染色細(xì)胞比例逐漸減少，三組樣本中陽性表達(dá)率分別為83.33%、33.33%、10.00%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹤0.05）。
　　3.根據(jù)關(guān)聯(lián)性分析顯示，陰道壁組織中Elastin和Fibrill

9、in-1蛋白的表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.957,p<0.01）。
　　4.瓊脂糖凝膠電泳顯示：1560bp處為Fibrillin-1表達(dá)的目的條帶，203bp處為Elastin表達(dá)的目的條帶，564bp處為內(nèi)參β-actin表達(dá)的條帶。其半定量測(cè)定的結(jié)果顯示： Elastin mRNA和Fibrillin-1 mRNA在三組中均為陽性表達(dá)， Elastin mRNA在電泳中半定量測(cè)定的結(jié)果顯示：對(duì)照組表達(dá)量為（0.2470.0039）

10、，II°脫垂組表達(dá)量為（0.1840.0035），III°脫垂組表達(dá)量為（0.0950.0031），各組兩兩比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.01）。Fibrillin-1 mRNA在電泳中半定量測(cè)定的結(jié)果顯示：對(duì)照組表達(dá)量為（0.158?0.0021），II°脫垂組表達(dá)量為（0.085?0.0023），III°脫垂組表達(dá)量為（0.048?0.0024），各組間兩兩比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.01）。
　　結(jié)論：
　　1.