具EcobNPV解旋酶基因的重組BmNPV的構(gòu)建及BmCPV基因組片段2的序列分析.pdf_第1頁(yè)
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1、本研究中，我們通過PCR，獲得了茶尺蠖核型多角體病毒(Ectropis obliquanuclear polyhedrosis virus，EcobNPV)73.7-78.9kb區(qū)域的全長(zhǎng)序列，分析結(jié)果顯示，該區(qū)域編碼有該病毒的odv-e25、odv-e28和P143。通過對(duì)P143的基序分析發(fā)現(xiàn)，該蛋白具有典型的helicase解螺旋結(jié)構(gòu)域，基于P143氨基酸序列的系統(tǒng)進(jìn)化分析表明，EeobNPV屬于核型多角體病毒屬GROUP II，

2、并且昆蟲桿狀病毒的進(jìn)化與宿主是相關(guān)聯(lián)的。
　　 我們通過RT-PCR和分段克隆，獲得了家蠶質(zhì)型多角體病毒(Bombyx moriCytoplasmic polyhedrosis virus)蘇州株(BmCPV-suzhou)的S2全長(zhǎng)序列。分析顯示，BmCPV-suzhou S2片段的全長(zhǎng)為3854bp(GenBank登錄號(hào)：GQ924586)，含有一個(gè)3678bp的編碼RNA Dependent RNA Polymerase(

3、RDRP)基因的開放閱讀框，并分別在5’和3’末端發(fā)現(xiàn)了保守序列AGUAA和GUUAGCC。基于RDRP氨基酸序列的系統(tǒng)進(jìn)化分析表明，BmCPV的不同株系與LdCPV1、DpCPV1聚為一類。
　　 EcobNPV是茶尺蠖的病原性天敵，可以作為生物殺蟲劑來防治茶尺蠖。利用Bac-to-Bac系統(tǒng)，首先構(gòu)建了包含有BmNPV的多角體基因表達(dá)盒和EcobNPV的helicase表達(dá)盒的重組轉(zhuǎn)座載體pFastBacTMDual-pol

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