鴨腸炎病毒基因組末端的克隆及部分基因的序列分析.pdf

1、鴨病毒性腸炎(Duck virus enteritis， DVE)又名鴨瘟(Duck plague)，是由鴨腸炎病毒(Duck enteritis virus， DEV)引起的鴨、鵝等禽類的一種急性、接觸性傳染病，其特征是血管損傷、組織出血、消化道黏膜糜爛、淋巴器官病變、實(shí)質(zhì)性器官退行性病變，各種年齡的禽均可發(fā)病。目前，DEV基因組末端及大部分基因結(jié)構(gòu)特征尚不為人們所知，其分子生物學(xué)方面的研究相對滯后，嚴(yán)重制約了針對病毒基因的功能及病毒

2、在機(jī)體細(xì)胞、組織中的復(fù)制機(jī)理、感染過程以及機(jī)體抗病毒感染機(jī)制等多方面的研究。
　　 為研究鴨腸炎病毒基因組末端的組成與結(jié)構(gòu)，本研究根據(jù)皰疹病毒復(fù)制機(jī)理，設(shè)計(jì)兩對引物采用PCR技術(shù)擴(kuò)增出兩段序列，并對序列進(jìn)行分析，結(jié)果顯示兩對引物擴(kuò)增的重疊序列部分完全一致。該段序列G+C含量高達(dá)75％，含有大量直接和反向重復(fù)序列，并發(fā)現(xiàn)四個(gè)末端特征序列，分別為具有回文結(jié)構(gòu)的α序列，包含兩測末端接合位點(diǎn)的β序列，高度保守序列的γ序列和AnTn序列。

3、將該序列與馬皰疹病毒(Ⅰ)型(EHV-1)、牛皰疹病毒(Ⅰ)型(BHV-1)、水痘帶狀皰疹病毒(VZV)、偽狂犬病毒(PRV)末端序列比較，證實(shí)所得到的序列為鴨腸炎病毒基因組末端序列，這些特征序列的發(fā)現(xiàn)對進(jìn)一步了解DEV復(fù)制機(jī)制有很大幫助。
　　 根據(jù)ICTV(國際病毒分類委員會(huì))第八次報(bào)告，鴨腸炎病毒的分類地位仍未確定，本研究在成功構(gòu)建鴨腸炎病毒基因庫的基礎(chǔ)上，選取UL2、UL5、UL9、UL18、UL19、UL23、UL25

4、、UL29、UL30、UL39、UL40、UL52、US3、US4、US5、US6、US7、US8共18種基因?qū)喣c炎病毒與a皰疹病毒亞科成員的進(jìn)化關(guān)系進(jìn)行了分析，其中11種基因包括UL5、UL9、UL18、UL19、UL23、UL30、UL39、UL52、US3、US6、US7、US8的編碼產(chǎn)物進(jìn)化樹表明鴨腸炎病毒與馬立克病毒屬的馬立克病毒、火雞皰疹病毒的進(jìn)化關(guān)系相近;UL2、UL19和US5編碼產(chǎn)物與水痘病毒屬接近;UL25和UL2