敲除抑癌基因PTPRO對小鼠乳腺發(fā)育的影響.pdf

1、酪氨酸磷酸化/去磷酸化作用是調(diào)節(jié)諸多細胞行為和生命活動的基礎(chǔ)調(diào)控機制，由蛋白酪氨酸激酶（PTKs）家族與磷酸酶（PTPs）家族共同介導(dǎo)。酪氨酸磷酸化/去磷酸化過程不僅涉及細胞生長、增殖、分化、細胞粘附和遷移、細胞間相互作用和器官發(fā)育等諸多方面，而且在腫瘤形成過程中，同樣發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。近年來，由于受體型酪氨酸磷酸酶PTPRO(Protein Tyrosine Phosphatase Receptor-type O, PTPRO)在

2、發(fā)育中的重要功能及潛在的抑癌作用而被廣泛關(guān)注。
　　在發(fā)育方面，PTPRO主要表達于腎臟及腦組織中，調(diào)節(jié)腎小球足細胞及中間神經(jīng)元的發(fā)育、成熟及分化等功能；在腫瘤細胞中，PTPRO啟動子區(qū)往往處于甲基化狀態(tài)而表達失活，而PTPRO重新表達展示出潛在的抑癌作用，抑制細胞的增殖和轉(zhuǎn)移。盡管如此，PTPRO調(diào)控器官發(fā)育、抑制腫瘤生長及轉(zhuǎn)移的分子機制尚不明確。我們以PTPRO基因敲除（PTPRO-/-）小鼠為研究模型，首次在體內(nèi)初步研究了P

3、TPRO基因缺失對小鼠乳腺發(fā)育的影響。
　　我們首先采用原位雜交（In Situ Hybrization）與RT-PCR方法共同檢測了PTPRO在乳腺組織中的表達情況，PTPRO主要表達于乳腺的導(dǎo)管上皮細胞，在青春期（Virgin）及退化期（Involutuion）表達較高，在懷孕期（Pregnancy）及哺乳期（Lactation）表達較低；通過Whole Mount及HE染色進一步分析PTPRO的缺失對小鼠乳腺發(fā)育的影響，結(jié)果

4、顯示了PTPRO-/-小鼠乳腺諸多方面的異常發(fā)育，具體表現(xiàn)為virgin期TEB(Terminal End Bud, TEB)數(shù)目的減少以及導(dǎo)管延伸的增加；Pregnancy期腺泡形成受到抑制；Involution期乳腺退化與導(dǎo)管重塑過程受到抑制等。
　　深入研究發(fā)現(xiàn)，PTPRO的缺失導(dǎo)致了小鼠乳腺發(fā)育過程中細胞增殖與分化指標的異常。PCNA與Ki67免疫組化結(jié)果顯示，在PTPRO-/-小鼠乳腺的TEB結(jié)構(gòu)中細胞增殖有所降低，這可