癌基因RMP與抑癌基因PTEN的相互拮抗作用及其對(duì)肝癌細(xì)胞增殖的影響.pdf

1、目的：
　　研究癌基因RMP在腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞中的功能差異性，探索抑癌基因PTEN與癌基因RMP的拮抗作用及其對(duì)肝癌細(xì)胞增殖與凋亡的影響。
　　方法：
　　1.選取了多種腫瘤細(xì)胞與正常細(xì)胞，收集了部分肝癌組織與癌旁組織，檢測(cè)了RMP的mRNA和蛋白表達(dá)水平，并測(cè)定HBX、AFP、BCL-2、BAX、BAD蛋白表達(dá)水平，分析RMP與各因子之間的相關(guān)性。
　　2.通過(guò)MTT增殖實(shí)驗(yàn)檢測(cè)RMP對(duì)于多種腫瘤細(xì)胞與正常細(xì)

2、胞增殖的影響；通過(guò)增殖實(shí)驗(yàn)與凋亡實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了RMP對(duì)腫瘤細(xì)胞與正常細(xì)胞的影響差異。
　　3.對(duì)比正常肝細(xì)胞與肝癌細(xì)胞中 RMP與 PTEN的表達(dá)差異，并構(gòu)建 PTEN的腺病毒載體感染肝癌細(xì)胞，探尋外源性的PTEN是否通過(guò)抑制RMP的表達(dá)，調(diào)控RMP介導(dǎo)的細(xì)胞增殖和細(xì)胞凋亡。
　　4.通過(guò)對(duì)比Ad-PTEN與AKT信號(hào)通路抑制劑LY294002分別處理的肝癌細(xì)胞，探尋RMP與AKT信號(hào)通路的關(guān)系。
　　5.選擇人肝癌Hep

3、G2細(xì)胞以及RMP過(guò)表達(dá)/干擾的HepG2細(xì)胞系建立裸鼠人肝癌移植瘤模型，進(jìn)一步觀察Ad-PTEN對(duì)裸鼠肝癌移植瘤生長(zhǎng)的影響。
　　結(jié)果：
　　1. RMP在腫瘤細(xì)胞中普遍高表達(dá)而在正常細(xì)胞中低表達(dá)；RMP在肝癌組織中高表達(dá)，并且與AFP，HBX，BCL-2的表達(dá)量呈正相關(guān)，與BAX、BAD的表達(dá)量呈負(fù)相關(guān)。
　　2.過(guò)表達(dá)RMP能夠促進(jìn)腫瘤細(xì)胞與正常細(xì)胞的增殖，干擾RMP能夠顯著抑制腫瘤細(xì)胞的增殖，但是RMP干擾對(duì)正

4、常細(xì)胞增殖影響不顯著。
　　3.干擾RMP表達(dá)能夠促進(jìn)肝癌細(xì)胞的凋亡，而正常肝細(xì)胞凋亡則不受RMP表達(dá)量的影響，相反過(guò)表達(dá)RMP能抑制肝癌HepG2細(xì)胞的凋亡，但不影響肝癌SMMC-7721細(xì)胞和正常肝細(xì)胞的細(xì)胞凋亡。
　　4.與RMP相反，PTEN在肝癌細(xì)胞中低表達(dá)；PTEN能夠抑制RMP表達(dá)且呈劑量依賴(lài)效應(yīng)，同時(shí)，RMP的促增殖和抑凋亡作用也受PTEN調(diào)控。
　　5. PTEN可以通過(guò)調(diào)控AKT信號(hào)通路抑制RMP的