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1、南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文癌基因pim3的克隆及其對(duì)肝癌細(xì)胞凋亡的影響姓名:鄧歡申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專(zhuān)業(yè):內(nèi)科學(xué)(消化系?。┲笇?dǎo)教師:張吉翔20070522Abstract—————————————————————————————————————————————————————————一一一_ABSTRACTAIM:Tocloneratp/m一3cDNAandconstructitspim3eukaryoticexpressingplas
2、midandtoinvestigatetheexpressionofpim3ineukaryocyteanditseffectOilapoptosisMETHODS:TotalRNAwasisolatedfromratskeletalmuscletissueswithTRIz01pim3eDNAwasmadebyRTPCRandconstructedintoeukaryoticexpressionvectorpEGFPN2,whiche
3、xpressesgreenfluorescentproteinTherecombinantpEGFPN2|p/m一3WasthentransformedintoEcoliJMl09hostbacteriaAfterauthenticatedbyrestrictiondigestiveenzymesandsequencing,plasmidpEGFPN260im一3WaStransfectedintoSMMC一7721cellsbylip
4、osomeFluorescentmicroscopeWaSusedtoexaminetheexpressionofpim一3,andthebiologicbehavioroftransfectedcellswastestedbyflowcytometryandMTTRESULTS:Restrictionenzymedigestionanalysisandsequencingshowedthattherecombinantplasmido
5、fratpim一3Wascorrectlyconstructed;FlowcytometryshowedthepercentageofapoptosiscellstransfectedbytherecombinantplasmidpEGFP—N2仞im一3Was348%,andtheplasmidpEGFPN2transfectedcellgroupWaS1074%儼如05),andnon—transfectedcellgroupWas
6、1101%thereweresignicantdifferencesbetweentherecombinantplasmidtransfectedgroupandtheothertwocontrolgroups(氏005);FluorescentmicroscopeandMTTshowedapim3expressioninSMMC一7721cellandtheapoptosisofthetransfectedcellsWassignif
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