IFITM3基因?qū)Ω伟┘?xì)胞侵襲及遷移能力的影響.pdf

1、背景：
　　肝細(xì)胞性肝癌（簡(jiǎn)稱肝癌，Hepatocellular carcinoma，HCC）發(fā)病率高，惡性程度高，易復(fù)發(fā)。我國(guó)乙型肝炎大國(guó)，由此引起肝硬化，肝癌的患者也十分常見(jiàn)。肝癌早期多無(wú)明顯癥狀，中、晚期出現(xiàn)血管侵犯、包膜侵犯和肝內(nèi)外轉(zhuǎn)移。隨著科學(xué)的發(fā)展，目前臨床上采取不同的方法治療肝癌的早期的復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移。目前臨床上多采用經(jīng)皮穿刺肝動(dòng)脈栓塞(TAE)或栓塞化療(TACE)，射頻消融，和生物靶向治療等干預(yù)措施，但是這些措施的長(zhǎng)

2、期效果不容樂(lè)觀。肝癌患者之所以不能得到長(zhǎng)期生存，是由于我們無(wú)法解釋肝癌發(fā)生、發(fā)展的分子機(jī)制，對(duì)肝癌形成的原因及其分子調(diào)控網(wǎng)絡(luò)研究不深，因此進(jìn)一步的了解肝癌轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)的分子調(diào)控機(jī)制，采取有效而正確的預(yù)防和治療措施是我們醫(yī)學(xué)領(lǐng)域需要探究的重大問(wèn)題。
　　干擾素誘導(dǎo)的跨膜蛋白（IFITM)是一種近來(lái)發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞內(nèi)抗病毒蛋白家族，它能抑制多種有或者無(wú)包膜的病毒的復(fù)制而起到抗病毒作用；同時(shí)近期有研究顯示IFITM3與人類多種腫瘤細(xì)胞及干細(xì)胞的

3、遷移等起重要作用，然而IFITM3在肝癌的發(fā)生、發(fā)展、擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移的作用機(jī)制尚不明確。
　　目的:
　　研究IFITM3對(duì)肝癌細(xì)胞侵襲及遷移能力的影響。
　　方法：
　　1、培養(yǎng)肝癌細(xì)胞株，利用Western-Blot方法檢測(cè)IFITM3在各個(gè)肝癌細(xì)胞株中的表達(dá)，篩選出IFITM3高表達(dá)的肝癌細(xì)胞株。
　　2、構(gòu)建針對(duì)IFITM3的特異性shRNA表達(dá)載體，轉(zhuǎn)染至IFITM3高表達(dá)的肝癌細(xì)胞株。利用Weste

4、rn Blot或Q-PCR篩選出干擾效果最好的shRNA片段。
　　3、將篩選出干擾效果最好的shRNA片段轉(zhuǎn)染至IFITM3高表達(dá)的肝癌細(xì)胞株，并與非干擾組的IFITM3高表達(dá)的肝癌細(xì)胞株比較，通過(guò)劃痕、侵襲、遷移實(shí)驗(yàn)檢測(cè)兩組肝癌細(xì)胞的侵襲、轉(zhuǎn)移能力。
　　結(jié)果：
　　1、Western blot方法檢測(cè)出IFITM3蛋白含量在HePG2細(xì)胞株中的表達(dá)最高。
　　2、構(gòu)建的IFITM3的特異性shRNA表達(dá)載體