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1、【目的】間質(zhì)在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用越來(lái)越受到關(guān)注,本課題在前期研究的基礎(chǔ)上,探討間質(zhì)蛋白 Periostin高表達(dá)后對(duì)鼻咽癌細(xì)胞侵襲、遷移能力等生物學(xué)行為的影響及機(jī)理。
【材料和方法】構(gòu)建POSTN的慢病毒表達(dá)載體,建立Periostin高表達(dá)的6-10B細(xì)胞,經(jīng)Western blot結(jié)合PCR技術(shù)驗(yàn)證,采用MTT、細(xì)胞遷移侵襲及明膠酶譜等實(shí)驗(yàn)觀察Periostin高表達(dá)后鼻咽癌細(xì)胞生物學(xué)特性的改變。免疫組織化學(xué)檢測(cè)Peri
2、ostin和整合素在組織及細(xì)胞中的表達(dá)情況,統(tǒng)計(jì)學(xué)分析二者在鼻咽癌組織中表達(dá)強(qiáng)度的相關(guān)性。
【結(jié)果】通過(guò)建立穩(wěn)定表達(dá) Periostin的鼻咽癌細(xì)胞株(6-10B-POSTN)和空白載體轉(zhuǎn)染的細(xì)胞株(6-10B-GFP)株后,生物學(xué)特性分析結(jié)果顯示:(1)與對(duì)照組比較,高表達(dá) Periostin的6-10B細(xì)胞的生長(zhǎng)速度較對(duì)照組明顯加快;(2)6-10B-POSTN的侵襲、遷移能力較對(duì)照組明顯提高;(3)明膠酶譜實(shí)驗(yàn)提示,6-
3、10B-POSTN組的細(xì)胞培養(yǎng)上清中基質(zhì)金屬蛋白酶活性較對(duì)照組明顯增加。免疫組化結(jié)果顯示 Periostin主要在間質(zhì)中表達(dá),在鼻咽癌間質(zhì)中的表達(dá)明顯強(qiáng)于正常鼻咽粘膜;而整合素主要在細(xì)胞膜上表達(dá),其在鼻咽癌組織及 Periostin高表達(dá)的6-10B細(xì)胞中的表達(dá)均明顯強(qiáng)于對(duì)照組;Spearman相關(guān)性分析結(jié)果提示 Periostin和整合素在鼻咽癌組織中的表達(dá)強(qiáng)度成正相關(guān)。
【結(jié)論】Periostin蛋白可能是通過(guò)與鼻咽癌細(xì)胞
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