低濃度ATP對(duì)低分化鼻咽癌細(xì)胞遷移的影響.pdf

1、本文主要研究了低濃度ATP對(duì)CNE-2Z細(xì)胞遷移的影響，并探討低濃度ATP對(duì)CNE-2Z細(xì)胞遷移影響的作用機(jī)制。 方法： 1)Transwell小室法完成CNE-2Z細(xì)胞的遷移過(guò)程；2)用ScionImage圖像分析軟件測(cè)量CNE-2Z細(xì)胞直徑和容積；3)MTT法+Transwell小室法測(cè)定細(xì)胞遷移抑制率；4)臺(tái)盼藍(lán)活細(xì)胞染色法測(cè)定藥物對(duì)CNE-2Z細(xì)胞的細(xì)胞毒作用。 結(jié)果： 1)低濃度的ATP(100

2、μmol/L)可以使CNE-2Z細(xì)胞的遷移率由(15.23±0.26)％(n=3)提高到(26.00±0.25)％(n=3，P＜0.01)，遷移率增加的百分比為(67.03±4.68)％。 2)嘌呤受體2的抑制劑反應(yīng)藍(lán)2抑制低濃度ATP(100μmol/L)對(duì)CNE-2Z細(xì)胞遷移率的影響，抑制率為(84.15±1.11)％(n=3,P＜0.01)。 3)氯通道阻斷劑NPPB和Tamoxifen(終濃度分別為100μmol

3、/L和20μmol/L)能夠完全抑制低濃度ATP對(duì)CNE-2Z細(xì)胞遷移率的促進(jìn)作用，并且其遷移率還低于對(duì)照組。 4)低濃度ATP灌流CNE-2Z細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞容積減少(7.41±0.67)％(n=23，P＜0.01)，去除ATP后細(xì)胞容積逐漸恢復(fù)正常。 5)滲透壓對(duì)CEN-2Z細(xì)胞的遷移有影響。低滲組的細(xì)胞的遷移率顯著高于等滲對(duì)照組，高滲組的細(xì)胞遷移率低于等滲對(duì)照組。正常對(duì)照組細(xì)胞的遷移率為(15.23±0.26)％，等滲

4、組的遷移率為(13.01±1.33)％(n=3，P＞0.5)。47％高滲，23％高滲，23％低滲，47％低滲的遷移率分別為(6.71±1.11)％(n=3，P＜0.01)，(8.27±0.75)％(n=3，P＜0.01)，(18.47±0.70)％(n=3，P＜0.05)，(20.01±0.83)％(n=3，P＜0.01)。 6)低濃度ATP對(duì)CNE-2Z細(xì)胞遷移的影響有Cl-依賴性。用對(duì)氯通道沒(méi)有通透性的或有低度通透性的葡萄糖

5、酸鈉、甘露醇置換Cl-后，低濃度ATP對(duì)細(xì)胞遷移率的影響消失。正常等滲條件下，加入低濃度ATP后CNE-2Z細(xì)胞的遷移率是(26.73±0.21)％(n=3)，用葡萄糖酸鈉、甘露醇置換Cl-后，再加入低濃度ATP后CNE-2Z細(xì)胞的遷移率分別是(0.93±0.07)％(n=3，P＜0.01)，(0.85±0.06)％(n=3，P＜0.01)。 結(jié)論：低濃度的ATP可以增加CNE-2Z細(xì)胞的遷移率，這種結(jié)果有賴于Cl-的存在，低濃