RNA干擾TXR1基因?qū)Ρ茄拾┘?xì)胞耐藥的影響.pdf

1、目的:探索TXR1基因在鼻咽癌紫杉醇耐藥中的作用，利用RNA干擾技術(shù)抑制鼻咽癌紫杉醇耐藥細(xì)胞CNE-1/Taxol的TXR1基因表達(dá)，同時(shí)研究TXR1基因的表達(dá)與鼻咽癌紫杉醇耐藥的相關(guān)性。
　　方法:
　　1.通過脂質(zhì)體介導(dǎo)轉(zhuǎn)染siRNA至鼻咽癌紫杉醇耐藥細(xì)胞株CNE-1/Taxol。
　　2.利用實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR、Western-blot方法分別檢測(cè)RNA干擾前、后的鼻咽癌紫杉醇耐藥CNE-1/Taxol細(xì)胞

2、株的TXR1基因表達(dá)差異。
　　3.利用MTT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)TXR1基因表達(dá)抑制后的鼻咽癌紫杉醇耐藥細(xì)胞CNE-1/Taxol的耐藥性變化，觀察TXR1基因在紫杉醇耐藥過程中的作用。
　　結(jié)果:
　　1.針對(duì)TXR1基因的siRNA轉(zhuǎn)染耐藥細(xì)胞CNE-1/Taxol后，耐藥細(xì)胞TXR1的mRNA及蛋白表達(dá)均明顯下調(diào)。干擾組和陰性對(duì)照組的mRNA表達(dá)分別是脂質(zhì)體組mRNA表達(dá)量的0.12±0.02倍、0.97±0.07倍，干擾

3、組分別和陰性對(duì)照組、脂質(zhì)體組比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。干擾組、陰性對(duì)照組的蛋白表達(dá)量分別是脂質(zhì)體組的0.36±0.07、1.02±0.03倍，干擾組與脂質(zhì)體組、陰性對(duì)照組的蛋白表達(dá)相比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　2.TXR1基因表達(dá)抑制后，CNE-1/Taxol對(duì)紫杉醇的敏感性顯著增高，其IC50值降低了2.12倍，從而部分逆轉(zhuǎn)CNE-1/Taxol耐藥。
　　結(jié)論:
　　1.特異性si