AWP1與整合素α-,v-的相互作用及其生物學(xué)功能研究.pdf

1、第一軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文AWP1與整合素α的相互作用及其生物學(xué)功能研究姓名：李旭艷申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：病理生理學(xué)指導(dǎo)教師：姜勇20060526中文摘要1 4 9 ．1 8 9 位氨基酸。一直以來，鋅指結(jié)構(gòu)域都被認(rèn)為參與D N A 結(jié)合并在轉(zhuǎn)錄因子中存在。最近有研究發(fā)現(xiàn)，鋅指結(jié)構(gòu)域也能夠參與蛋白與蛋白的相互作用。A 2 0蛋白能夠被大量的免疫刺激因素誘導(dǎo)，是凋亡的抑制劑。它的鋅指結(jié)構(gòu)域能夠與蛋白激酶C 相連。因此，A W P l 的鋅

2、指結(jié)構(gòu)域A 2 0 極有可能參與蛋白．蛋白的相互作用。同時，A W P I 也是強(qiáng)烈的N F ．K B 抑制劑，由此可見，A W P l 可能在哺乳動物信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中起到重要調(diào)控的作用。從A W P l 的發(fā)現(xiàn)和它的蛋白功能結(jié)構(gòu)域分析可以看出，A W P l 具有與多種蛋白分子相互作用的潛能。整合素是細(xì)胞表面受體的一個大家族，它是由非共價鍵聯(lián)結(jié)c 【亞基和B 亞基組成的異二聚體。螄亞基是整合素家族獨(dú)特的成員之一，能與至少5 種不同的B亞

3、基相聯(lián)結(jié)，參與細(xì)胞遷移、增殖、分化和基因轉(zhuǎn)錄等，尤其在腫瘤惡性轉(zhuǎn)移和新生血管形成中具有特殊作用。整合素的胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域在整合素介導(dǎo)的細(xì)胞功能中具有重要作用。整合素通過胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域與細(xì)胞骨架、信號分子及其他的細(xì)胞內(nèi)蛋白相互作用，介導(dǎo)雙向跨膜的生理功能。近年來的大量研究證明，細(xì)胞內(nèi)的很多蛋白能夠與整合素胞內(nèi)功能域直接作用，這種相互作用在整合素調(diào)控的生物反應(yīng)中具有重要作用。整合素在細(xì)胞黏附、遷移、分化、增殖及細(xì)胞程序性死亡中具有重要作用。我們前期利

4、用整合素a 亞基胞漿內(nèi)段作為“餌”，利用酵母雙雜交系統(tǒng)鑒定到了一個與其相互作用的陽性克隆——A w P l 蛋白。蛋白質(zhì)氨基酸序列以及c D N A 核苷酸序列的計(jì)算機(jī)比較分析顯示，整合素Q v 亞基胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域與C D C 3 4 序列極其相似。既然A W P l 與C D C 3 4 、P R K l 之間具有相互作用，那么它與整合素嘶亞基胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域是否也存在相互作用呢?在前期的離體結(jié)合研究中我們已經(jīng)證實(shí)，A W P l 蛋白在體外能

5、夠與整合素礬亞基胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域特異性結(jié)合，并且這種作用與C t 。亞基胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域Y 9 8 6 酪氨酸殘基的作用密切相關(guān)。既然兩者的相互作用在體外狀態(tài)下存在，那么在體內(nèi)這種相互作用仍有可能存在。這個問題在闡明兩者的生理功能中有著相當(dāng)重要的意義。利用基因重組技術(shù)構(gòu)建缺乏Y 9 s 6 氨基酸的％亞基胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域( ％．C ) 及含有Y 9 8 6 氨基酸的％亞基胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域( O , v ．C Y ) 的p E G F P ．C 2 融合蛋白表達(dá)