人AWP1與整合素αV胞內(nèi)功能域的相互作用及其生物學功能的初步鑒定.pdf

1、用人Ubiquitin結合酶CDC34作誘餌,從一酶母雙雜交系統(tǒng)中分離出來的陽性克隆之一,能夠與哺乳動物細胞的PRK1(protein kinase C related kinase 1,PRK1,又稱PKN)共免疫沉淀.因此,這一與PRK1相關的、新鑒定的蛋白就被命名為AWP1(associated with PRK1,AWP1).PRK1是一種由脂質激活的絲/蘇氨酸激酶,它通過N端與小G蛋白RhoA結合,并以GTP依賴模式被激活.P

2、RK1能與多種細胞分子,主要是結構蛋白,如Vimentin,α-actinin和neurofilament protein等,或相關,或相互作用,并參與細胞凋亡.從APW1的蛋白質功能結構域分析可以看出,AWP1具有與多種蛋白質分子相互作用的潛能.因此,AWP1能夠通過調節(jié)PRK1的亞細胞定位或調節(jié)PRK1與其調節(jié)劑或/和作用底物的相互作用而參與復雜的細胞信號網(wǎng)絡的調節(jié),擔當一個信號分子的角色.整合素是由非共價鍵聯(lián)結α亞基和β亞基組成的

3、異二聚體,αV亞基是整合素家族獨特的成員之一,能與至少5種不同的β亞基相聯(lián)結,使其成為廣泛表達的整合素亞基,參與細胞遷移、增殖、分化和包括特殊的基因轉錄在內(nèi)的細胞反應,尤其在腫瘤惡性轉移和新生血管形成中具有特殊的地位.蛋白質氨基酸序列以及cDNA核苷酸序列的計算機比較分析顯示,CDC34與整合素αV亞基胞漿內(nèi)段之間存在許多相似的序列.該室的合作者美國Scrippt研究室利用的新蛋白,剛好也是AWP1蛋白.因此,我們選擇整合素αV亞基胞漿