雞胚和雛雞接種ALV-J相關(guān)急性纖維肉瘤浸出液的致病性比較.pdf

1、J亞群禽白血病病毒是1988年首先從英國的肉雞體內(nèi)分離得到的，近二十五年以來給全世界的養(yǎng)禽行業(yè)，特別是肉雞的養(yǎng)殖造成了極大的危害，經(jīng)濟(jì)損失無法估計。與傳統(tǒng)的ALV-A、ALV-B相似，大多數(shù)ALV-J能夠引起雞的潛伏期漫長發(fā)病率低下的慢性腫瘤。2010年本實(shí)驗室劉紹瓊、王鑫等先后從30日齡的817肉雜雞和開產(chǎn)后的海蘭褐蛋雞體內(nèi)各發(fā)現(xiàn)了一例由ALV-J引發(fā)的急性纖維肉瘤病例，在通過相應(yīng)的試驗驗證病因后，李傳龍等對817肉雜雞中分離到的病毒

2、在雞體上展開了系統(tǒng)的研究，而本研究則注重研究海蘭褐蛋雞中分離到的這株ALV-J急性病毒，接種雞胚以模擬更接近該病毒垂直傳播的狀態(tài)，對不同方式接種該ALV-J相關(guān)的急性纖維肉瘤浸出液的致病性進(jìn)行比較。將ALV-J相關(guān)急性病毒引發(fā)的新一代急性纖維肉瘤與PBS按1∶6的質(zhì)量體積比冰浴研磨，4℃，12000r離心5min，上清液0.22um濾器過濾后即為腫瘤浸出液，該浸出液接種于CEF細(xì)胞9天后，IFA驗證其中的ALV-J的存在并測定其中ALV

3、-J的TCID50。然后，分別于5日齡胚卵黃囊、11日齡胚絨毛尿囊膜、1日齡雛雞腹腔接種急性纖維肉瘤浸出液，出殼后統(tǒng)計接毒雞胚的腫瘤發(fā)生率和致死率，分別于1日齡、1-6周齡對各組每只雞無菌采集抗凝血、泄殖腔棉拭子、稱量體重，檢測各組雛雞帶毒排毒狀態(tài)。1周齡時，每只雞免疫雞新城疫、禽流感病毒H5亞型、禽流感病毒H9亞型疫苗，4-6周齡時每只雞采集血清，測定各疫苗抗體滴度、ALV-J抗體水平以及6周時各組雛雞免疫器官指數(shù)，并對1-6周內(nèi)死亡

4、雞只進(jìn)行剖檢觀察大體病變和病理學(xué)變化。
　　 結(jié)果表明，5日齡卵黃囊接種的雞胚在18-22日齡死胚率為14/30，腫瘤發(fā)生率為8/14;11日齡絨毛尿囊膜接種的雞胚在18-22日齡引起雞胚死亡率為17/30，腫瘤發(fā)生率為6/17。雛雞病毒血癥及泄殖腔棉拭子p27動態(tài)觀察發(fā)現(xiàn)，尿囊膜接毒不僅可以造成雛雞的高死亡率(100％)，而且病毒血癥和泄殖腔排毒均為100％;隨著周齡增大，其余兩個接毒組的雛雞病毒血癥和泄殖腔排毒也在不斷變化，

5、卵黃囊接毒組到3周齡時病毒血癥的檢出率也可達(dá)到100％，而1日齡腹腔接毒組直到4周齡時病毒血癥才達(dá)到最高的75％，這兩組泄殖腔p27棉試子的檢出率最高時也分別只有70％(4-6周齡時)和41.2％(1周齡)。對雛雞的致病性比較表明，絨毛尿囊膜接種的13只出殼雛雞全部死亡，有11只出現(xiàn)腫瘤。
　　 連續(xù)三周采血檢測新城疫、禽流感H5和H9三種病毒的抗體滴度發(fā)現(xiàn)，該ALV-J相關(guān)急性腫瘤病毒對這三種疫苗有不同程度的免疫抑制作用，都能

6、使疫苗的免疫效果降低。通過比較6周齡時各組雛雞的免疫器官指數(shù)發(fā)現(xiàn)，該病毒能顯著地抑制法氏囊的發(fā)育，而且血常規(guī)檢查也發(fā)現(xiàn)三個接毒組的雛雞在發(fā)病臨近死亡時血液中的白細(xì)胞數(shù)顯著地減少。
　　 病理組織學(xué)觀察顯示，三種接毒方式均可以引起雛雞腹腔積存與肉瘤的發(fā)生密切相關(guān)的淡紅色粘液;肝臟發(fā)生腫瘤，表現(xiàn)為肉瘤和血管瘤;而且在一定時間內(nèi)，隨著感染時間的延長，病死雛雞發(fā)生腫瘤的部位增多，腫瘤越明顯。
　　 結(jié)果提示，海蘭褐蛋雞分離株AL