嗜鹽微生物的分離、分類及應用研究.pdf

1、摘要摘要對采自渤海沿岸鹽場和青海鹽湖的80份樣品進行了不同類群的嗜鹽、耐鹽微生物的分離，得到了73個菌株，其中包括20株細菌，5l株放線菌及2株真菌。本實驗對這些分離菌株進行了耐鹽、耐堿測定；進行了形態(tài)、細胞化學分析：采用16SrDNA全序列分析等分類方法對其中一些中度嗜鹽放線菌進行了系統(tǒng)發(fā)育研究：此外，本實驗還對供試菌株的生理活性物質和降鹽效果進行了研究。／√研究發(fā)現(xiàn)，分離菌株多為中度嗜鹽菌，生長最適NaCI濃度為5lo％，有／＼的甚

2、至可在飽和鹽溶液中生長。其中的中度嗜鹽放線菌多數(shù)耐堿性強，在pH值n0的條件下生長良好。放線菌Dl叭l和G2叭3是嗜鹽嗜堿放線菌，鹽度低于2％，pH值低于80即不生長。對分離的放線菌和真菌進行了形態(tài)的電鏡觀察，除鏈霉菌屬外，大多數(shù)菌株無法根據(jù)形態(tài)判定其種屬，說明僅依靠形態(tài)特征進行分類是不準確的。測定了部分嗜鹽放線菌的細胞壁氨基酸組分，發(fā)現(xiàn)本次實驗分離的放線菌株多數(shù)含有mesoDAP，為稀有放線菌。對5株菌(編號分別為D1013、D311

3、5、D3116、D3414、D3615)進行了16SrDNA序列分析，結果表明D1013、D3ll5、D3414均屬于擬諾卡氏菌屬(Norcardiopsis)，D1013是與Ⅳantarctica關系最近的分類單元。D3115和D3414是與Ⅳdassonvillei關系最近的分類單元。D3116屬于鏈霉菌屬(Streptomyces)，是與Sgr括eussubspgriseus關系最近的分類單元。16SrDNA基因近乎全序列分析結果

4、表明菌株D36l5可能屬于二擬諾卡氏菌屬，根據(jù)16SrDNA基因全序列分析構建了擬諾卡氏菌屬的系統(tǒng)發(fā)育進化樹，由系統(tǒng)發(fā)育樹可以看出，菌株D3615屬于擬諾卡氏菌屬，且形成獨立的分支，與擬諾卡氏菌屬已描述的菌種的模式菌株的16SrDNA序列之間的差異數(shù)在20～6Int之問，差異較為明顯。生理生化特性試驗也發(fā)現(xiàn)其與擬諾卡氏菌屬的其他菌株有一定差異。因此菌株D3615可能為擬諾卡氏菌屬的一個新的分類單元?！猒_●___

5、_______—__________________●●————————————一一——j；AbstraetAbstractSeventy—threehalophilicandhalotolerantstrainswereisolatedfromeightysamplesinsaltpoolatBohaiseacoastandinsaltlakesofQinghai，whichincludedtwentybacteria，fifty—o

6、neactinomycetesandtwofungi，Inthisstudythehalotoleranceandalkalitoleranceranges，morphological，chemicalanalysisofthesenewisolatesweredetermined；Phylogeneticanalysiswascarriedoutonsomemoderatelyhalophilicactinomycetesmainly

7、dependedonthe16SrDNA／RNAsequencing；Inaddition，thebioactivemicrobiolproductsanddesalteffectweretestedonthesenewisolatesMostofthenewisolatesweremoderatelyhalophiliesTheygrewbestin510％NaCIcondition，someevencouldgrowinsatura

8、tesolutionsMostofthenewisolatedmoderatelyhalophilicactinomycetescouldtearhighalkalitconditionandcouldgrowwellatpH110Inthem，strainD1011andG2013werealkalihalophilicactinomycetesTheydidnotgrowwhenNaCllowerthan2％andpHlowerth

9、an80MorphologicalstudieswerecarriedoutonactinomycetesandfungiExceptstrainsofgenusStreptomycete，Itishardtodeterminemoststrains’taxonomystructureonlybymorphologicalcharacteristicsClassificationbasedprimarilyoncytochemistry

10、andmorphologyisnolongertenable16SrDNA／RNAsequencinganalysiswascarriedoutonfivestrains，D1013，D3115，D3116，D3414，D3615TheresultsshowedthatDt013，D3115，D3414werebelongingtoNorcardiopsisD1013wasrelatedtaxonsofMantarcticaD3115a

11、ndD3414weresimilartoⅣdassonvilleiD3116wasbelongingtoStreptomycesandwassimilartolSgriseussubspgriseusAlmostcompletedsequencesof16SrDNAofstrainD36t5wasobtainedandphylogeneticanalysiswascarriedoutofthegenusNocardiopsisThere

12、saltsshowedthatstrainD3615shouldclusteredintothegenusNocardiopsisandformedanindependentbranchPhysiologicalandbiochemicalcharacteristicsofstrainD3615wereobviouslydifferentfromotherstrainsofthegenusNocardiopsisThereforstra