河南省HIV感染者并發(fā)弓形蟲(chóng)感染狀況.pdf

1、背景：
　　艾滋病是挑戰(zhàn)人類健康最嚴(yán)重的疾病之一，至今全球約7000萬(wàn)人感染，近3000千萬(wàn)人因感染HIV病毒而死亡。我省又是艾滋病疫情高發(fā)省份之一，由于我省人口基數(shù)大，以及局部地區(qū)有爆發(fā)性感染，HIV感染者的絕對(duì)數(shù)很大，據(jù)河南省疾控中心數(shù)據(jù)，截至2014年10月31日，河南省累計(jì)確認(rèn)艾滋病感染者59380例，累計(jì)死亡18962例，HIV感染者累計(jì)報(bào)告數(shù)已位列全國(guó)第二，我省艾滋病的防控形式依然不容樂(lè)觀。隨著HIV感染者的不斷增加、

2、感染人群的不斷變化，艾滋病已成為最嚴(yán)重的制約我省政治、經(jīng)濟(jì)發(fā)展的公共衛(wèi)生問(wèn)題之一，人們對(duì)其相關(guān)性疾病也更加重視。弓形蟲(chóng)可寄生于人和溫血類動(dòng)物的有核細(xì)胞內(nèi)，是HIV感染者較為常見(jiàn)的繼發(fā)感染病原體，弓形蟲(chóng)腦膜炎也是艾滋病患者腦部發(fā)生病變的一種常見(jiàn)疾病，已成為AIDS患者死亡的主要原因之一。HIV是一種逆轉(zhuǎn)錄病毒，侵入機(jī)體后的增殖過(guò)程中機(jī)體的CD44+淋巴細(xì)胞遭到大量的破壞。當(dāng)HIV感染到骨髓干細(xì)胞時(shí)，可抑制CD4+T淋巴細(xì)胞的生成，從而造成

3、CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)量的進(jìn)行性減少。HIV感染者CD4+T淋巴細(xì)胞下降并且導(dǎo)致機(jī)體的免疫功能受到損傷時(shí)，機(jī)體免疫力下降，不但容易受到弓形蟲(chóng)感染，而且患者體內(nèi)隱性感染弓形蟲(chóng)的蟲(chóng)體也會(huì)被激活。并且弓形蟲(chóng)的感染本身就可以誘導(dǎo)免疫抑制，兩者相互促進(jìn)感染，形成惡性循環(huán)，最終導(dǎo)致艾滋病病人出現(xiàn)各種感染弓形蟲(chóng)的臨床癥狀甚至死亡。
　　目的：
　　了解河南省HIV感染者弓形蟲(chóng)的感染狀況，以及合并感染與CD4+T淋巴細(xì)胞和HIV病毒載量之間的

4、關(guān)系，為艾滋病的預(yù)防控制和診斷治療提供一些基本信息，對(duì)預(yù)防HIV的繼發(fā)弓形蟲(chóng)感染、改善預(yù)后以及延長(zhǎng)艾滋病病人生命、降低死亡率、提高艾滋病病人生命質(zhì)量有著重要意義。
　　研究對(duì)象：
　　1、實(shí)驗(yàn)組:河南省1038份經(jīng)一步法（蛋白印記法）確證實(shí)驗(yàn)證實(shí)的HIV感染者外周血液標(biāo)本。
　　2、對(duì)照組:河南省210份經(jīng)ELISA法HIV初篩陰性的健康體檢人員的外周血液標(biāo)本。
　　方法：
　　1、弓形蟲(chóng)IgG抗體檢測(cè)

5、r>　　對(duì)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的血清樣品弓形蟲(chóng)IgG進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)，通過(guò)對(duì)兩組弓形蟲(chóng)感染率的比較，驗(yàn)證HIV患者與非HIV患者之間弓形蟲(chóng)的感染率的是否存在差異，以及兩種疾病感染之間的關(guān)系。
　　2、血液弓形蟲(chóng)DNA的檢測(cè)
　　建立單管一步法套式PCR的方法，擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組血液標(biāo)本的弓形蟲(chóng)529bp片段。通過(guò)兩組弓形蟲(chóng)感染率的比較，驗(yàn)證HIV患者與非HIV患者之間弓形蟲(chóng)的感染率的是否存在差異，以及兩種疾病感染之間的關(guān)系

6、。
　　3、HIV感染者血液中CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞數(shù)檢測(cè)
　　利用流式細(xì)胞儀提取并計(jì)算實(shí)驗(yàn)組HIV感染者外周血標(biāo)本中CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+T淋巴細(xì)胞數(shù)各自所占的比例，然后將實(shí)驗(yàn)組分成兩個(gè)小組，比較弓形蟲(chóng)檢測(cè)陽(yáng)性和陰性兩組感染者之間的各個(gè)T淋巴細(xì)胞的數(shù)量是否存在差異，并用統(tǒng)計(jì)學(xué)的方法計(jì)算出弓形蟲(chóng)感染對(duì)HIV感染者的T淋巴細(xì)胞的影響。
　　4、HIV感染者血液中病毒載量檢測(cè)

7、>　　檢測(cè)每個(gè)實(shí)驗(yàn)組HIV感染者外周血標(biāo)本的HIV病毒載量，對(duì)各個(gè)數(shù)量級(jí)病毒載量標(biāo)本弓形蟲(chóng)陽(yáng)性率進(jìn)行相關(guān)性和顯著性分析，驗(yàn)證弓形蟲(chóng)感染對(duì)HIV患者的病毒載量是否有影響，以及兩者之間的相互關(guān)系。
　　5、HIV感染者感染方式與弓形蟲(chóng)PCR結(jié)果的相關(guān)性分析
　　利用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析HIV患者感染方式與弓形蟲(chóng)PCR結(jié)果之間相關(guān)性。
　　結(jié)果：
　　1、弓形蟲(chóng)抗體檢測(cè):實(shí)驗(yàn)組1014份HIV感染者（1038個(gè)HIV感染者2

8、4人未采集到血清樣品）弓形蟲(chóng)抗體陽(yáng)性者41人，陰性者973人，陽(yáng)性率為4.04％;對(duì)照組210份非HIV感染者弓形蟲(chóng)抗體陽(yáng)性者10人，陰性者200人，抗體陽(yáng)性率為4.76％。實(shí)驗(yàn)組HIV感染者和對(duì)照組非HIV感染者之間，血清中弓形蟲(chóng)感染陽(yáng)性率(X2=0.224926,P=0.635312)沒(méi)有顯著性差異。
　　2、弓形蟲(chóng)PCR檢測(cè):HIV感染者弓形蟲(chóng)PCR陽(yáng)性率為6.36％，非HIV感染者弓形蟲(chóng)PCR陽(yáng)性率為8.09％(X2=0.

9、848702,P=0.356920)，兩者之間沒(méi)有顯著性差異。
　　3、HIV感染者血液中CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞數(shù)檢測(cè):HIV感染者弓形蟲(chóng)PCR陽(yáng)性和陰性之間的CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞數(shù)、以及CD4+/CD8+之間均無(wú)顯著性差異。不同CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)區(qū)間弓形蟲(chóng)陽(yáng)陰性之間無(wú)顯著性差異。
　　4、HIV感染者血液中HIV病毒載量檢測(cè):病毒載量＜3log/mL、3-4log/mL、4-5log/m

10、L、＞5log/mL四個(gè)數(shù)量級(jí)所對(duì)應(yīng)弓形蟲(chóng)IgG抗體檢測(cè)陽(yáng)性率(X2=2.032309，P=0.565728)和PCR檢測(cè)陽(yáng)性率(X2=6.192383，P=0.102616)無(wú)顯著差異。隨著CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)的增高，病毒載量呈下降趨勢(shì)，用統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行相關(guān)回歸分析，CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)與病毒載量之間存在負(fù)相關(guān)(r=-0.36)。
　　5、HIV感染者感染方式與弓形蟲(chóng)PCR結(jié)果的相關(guān)性分析:同性性行為方式弓形蟲(chóng)感染率為8.9％，輸

11、血方式感染HIV弓形蟲(chóng)感染率為2.8％，兩種感染途徑之間(X2=6.346623，P=0.01176)具有顯著性差異，其他HIV感染方式與弓形蟲(chóng)感染無(wú)顯著性差異。
　　結(jié)論：
　　1、本實(shí)驗(yàn)通過(guò)形蟲(chóng)IgG抗體和PCR兩種方法對(duì)實(shí)驗(yàn)組HIV感染者和對(duì)照組非HIV感染者進(jìn)行弓形蟲(chóng)感染率的檢測(cè)并用軟件統(tǒng)計(jì)進(jìn)行分析，我省HIV感染者和非感染者感染弓形蟲(chóng)的概率之間沒(méi)有顯著性差異。與其他相關(guān)報(bào)道對(duì)比分析，我省非HIV患者的弓形蟲(chóng)感染率與

12、前人的研究大體相同，而HIV患者的弓形蟲(chóng)的陽(yáng)性率低于前人的研究。
　　2、對(duì)HIV感染者弓形蟲(chóng)感染情況與外周血CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)和HIV病毒載量進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析顯示:①感染了弓形蟲(chóng)對(duì)HIV患者的免疫系統(tǒng)的影響并不大，在對(duì)HIV患者的免疫系統(tǒng)的影響上AIDS依舊占主導(dǎo)地位;②HIV病毒在機(jī)體內(nèi)的活躍程度并不是機(jī)體感染弓形蟲(chóng)的主要風(fēng)險(xiǎn)因素;③IV感染者外周血CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)與病毒載量之間存在負(fù)相關(guān)。
　　3、通過(guò)對(duì)HIV感染者