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1、小球藻(Chlorella vulgaris)是一類單細(xì)胞淡水綠藻,含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì)和活性成分。各種臨床研究表明小球藻具有顯著的抗腫瘤、抗氧化、抗菌以及抗炎癥等活性,對(duì)人體健康非常有益。逆流色譜(CCC)是一種不用固相載體的液-液分配色譜技術(shù),具有分離量大、分離環(huán)境溫和、回收率高、溶劑消耗少等優(yōu)點(diǎn),在天然生物活性物質(zhì)的分離純化中具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。本論文采用逆流色譜技術(shù),針對(duì)小球藻中的低極性化學(xué)組分如類胡蘿卜素、植物甾醇等建立了幾種新型分
2、離制備方法,主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下:
1、采用正己烷-乙醇(1∶1,v/v)溶劑體系超聲提取小球藻中的低極性組分,并通過皂化處理去除葉綠素及脂肪酸等雜質(zhì),獲得小球藻皂化提取物。本實(shí)驗(yàn)分別針對(duì)其中主要成分,如類胡蘿卜素和植物甾醇等物質(zhì)建立了超高效液相色譜分析方法。
2、建立了小球藻中葉黃素的逆流色譜分離方法。采用正己烷-乙醇-水(4∶3∶1,v/v)溶劑體系,成功從100 mg小球藻皂化提取物中一步制備分離30.7 m
3、g葉黃素,純度達(dá)94.1%。實(shí)驗(yàn)對(duì)比研究了逆流色譜與半制備型高效液相色譜,結(jié)果表明逆流色譜具有分離量大、產(chǎn)率高、溶劑消耗少等優(yōu)點(diǎn),是一種高效、經(jīng)濟(jì)的制備型分離方法,非常適合食品中活性物質(zhì)的分離提取。
3、設(shè)計(jì)開發(fā)了綠色、環(huán)保、純天然的檸檬烯-乙醇-水體系作為逆流色譜溶劑體系,建立了小球藻中葉黃素的新型綠色逆流色譜分離方法。實(shí)驗(yàn)通過研究檸檬烯、正己烷等溶劑的理化性質(zhì)和檸檬烯-乙醇-水溶劑體系的三元相圖,得出檸檬烯可以代替正己烷作
4、為逆流色譜溶劑體系;采用檸檬烯-乙醇-水(10∶9∶1,v/v)溶劑體系,成功從300 mg小球藻超聲提取物中一步制備分離得到20.4 mg葉黃素,純度達(dá)94.6%。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明本實(shí)驗(yàn)所建立的逆流色譜分離方法更綠色、環(huán)保。
4、建立了小球藻中植物甾醇的閉合循環(huán)逆流色譜分離方法。實(shí)驗(yàn)采用正己烷-二氯甲烷-乙腈(10∶3∶7,v/v)溶劑體系,從300 mg小球藻皂化提取物中制備分離得到40 mg植物甾醇混合物;應(yīng)用閉合循環(huán)逆流色
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