黃河鯉魚魚鱗膠原蛋白的提取、性質(zhì)及膠原肽活性研究.pdf

1、在黃河鯉魚的加工過程中，魚鱗作為廢棄物大多被丟棄或者加工成魚飼料，其中含有豐富的膠原蛋白未被很好的利用。膠原蛋白具有天然的低毒性、生物降解性、低免疫活性、保濕性和營養(yǎng)性而廣泛地應(yīng)用于食品工業(yè)、化妝品、生物醫(yī)學(xué)材料等領(lǐng)域。本文從鯉魚魚鱗中提取膠原蛋白，對其提取工藝進(jìn)行了優(yōu)化，研究其性質(zhì)和膠原肽的活性，為鯉魚魚鱗膠原蛋白的開發(fā)和利用提供了理論依據(jù)。研究內(nèi)容及結(jié)果如下：
　　1.膠原蛋白含量是通過羥脯氨酸標(biāo)準(zhǔn)曲線法來測定的。試驗(yàn)測得標(biāo)準(zhǔn)

2、曲線為：y=0.0652x+0.0028，R2=0.9995，證明其含量與吸光度有著很好的線性關(guān)系。魚鱗脫鈣工藝優(yōu)化的最佳條件為：鹽酸濃度為1.0mol/L，液料比為8:1，脫除時間為150min，脫除率為92.4％。
　　2.魚鱗膠原蛋白的提取工藝優(yōu)化結(jié)果：酸提優(yōu)化最佳條件是乙酸溶液的濃度為0.54mol/L、提取時間為42h、提取液料比為10:1。在此參數(shù)條件下，黃河鯉魚魚鱗膠原蛋白的提取率的理論預(yù)測值為15.75%，實(shí)際測得

3、的提取率為16.89%。酶提的最佳工藝參數(shù)為胃蛋白酶溶液的濃度為13.50mg/mL、提取時間為12h、提取液料比為10:1；在此參數(shù)條件下，黃河鯉魚魚鱗膠原蛋白的提取率的理論預(yù)測值為15.06%，實(shí)際測得的提取率為16.75%。
　　3.膠原蛋白性質(zhì)：UV掃描結(jié)果顯示鯉魚魚鱗PSC和ASC在232nm波長處都有強(qiáng)烈吸收，符合Ⅰ型膠原的特征。紅外光譜掃描分析可以看出在3074.71 cm-1、2933.16 cm-1、2869.4

4、2 cm-1附近處的弱吸收是膠原蛋白特征吸收峰，可以證明提取物為膠原蛋白。SDS-PAGE凝膠電泳結(jié)果顯示 PSC和 ASC都有3條鏈，3條鏈為2條α鏈(α1和α2)和1條β鏈（2條α鏈的交聯(lián)體），這與相關(guān)文獻(xiàn)中報道的 I型膠原蛋白的特征一致。吸水性和保水性的試驗(yàn)可以直觀的看出提取的膠原蛋白膠有很好的吸水性，市售明膠的吸水性較差；市售明膠與提取的魚鱗膠原的保水性的對比可知，魚鱗膠原在存放一段時間內(nèi)可以保持一定的水分，其效果要好于市售明膠

5、。
　　4.膠原肽活性研究結(jié)果表明：AS1398中性蛋白酶的水解能力最強(qiáng)，水解度達(dá)到71.84%，對應(yīng)的酶解產(chǎn)物對ACE活性的抑制率效果也是最好的，抑制率為51.43%，所以酶解過程選取AS1398中性蛋白酶為最佳的酶。通過對ACE膠原肽的提取工藝中幾個重要因素的試驗(yàn)可以看出：提取溫度為45℃，pH為7.5，酶與底物的質(zhì)量體積比為1.5%，液料比為20:1時為最佳的提取條件，在此條件下的水解度為75.9%，ACE抑制率為55.8%