煙草細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)輔酶Q-,10-及其動(dòng)力學(xué)研究.pdf

1、該實(shí)驗(yàn)以黃花煙草(Yellow Bright)無(wú)菌苗為材料,通過(guò)固態(tài)培養(yǎng)和懸浮培養(yǎng),建立了快速生長(zhǎng)的煙草細(xì)胞株系,優(yōu)化了煙草細(xì)胞懸浮培養(yǎng)的基本工藝參數(shù),考察了溫度、激素、有機(jī)物和前體物質(zhì)對(duì)煙草細(xì)胞生長(zhǎng)和輔酶Q<,10>含量的影響,并建立了培養(yǎng)過(guò)程的動(dòng)力學(xué)模型.得到的細(xì)胞最佳懸浮培養(yǎng)條件為MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 2.0mg/L,接種量8％,蔗糖濃度3％,培養(yǎng)8d可使細(xì)胞干重達(dá)到36.7g/L.實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),25℃是適合細(xì)胞生長(zhǎng)

2、和輔酶Q<,10>合成的溫度.0.5mg/L的IAA雖然不促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng),卻能有效提高輔酶Q<,10>的含量,最高達(dá)到9.34mg/L,增幅54.6％.添加一些有機(jī)物質(zhì)對(duì)輔酶Q<,10>的合成有促進(jìn)作用,4.0mg/L的鹽酸硫胺素使輔酶Q<,10>的最高含量達(dá)到9.96mg/L,比對(duì)照樣增加65.2％;100mg/L的半胱氨酸使輔酶Q<,10>最高含量達(dá)到8.99mg/L.在輔酶Q<,10>合成的前體物質(zhì)中,2.0mg/L的L-苯丙氨酸能

3、使輔酶Q<,10>含量達(dá)到9.35mg/L;3.0mg/L的對(duì)羥基苯甲酸能使輔酶Q<,10>含量達(dá)到9.92mg/L.在輔酶Q<,10>合成的優(yōu)化培養(yǎng)基MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 2.0mg/L+IAA 0.5mg/L+鹽酸硫胺素4.0mg/L+半胱氨酸100mg/L+L-苯丙氨酸2.0mg/L+對(duì)羥基苯甲酸3.0mg/L+茄尼醇0.1mg/L上,建立了煙草細(xì)胞生長(zhǎng)、底物消耗和輔酶Q<,10>生成的動(dòng)力學(xué)模型,各方程曲線與實(shí)