秦川牛心肌細(xì)胞色素C和輔酶Q-,10-提取純化及檢測(cè)的研究.pdf

1、本研究以秦川牛心肌為材料，采用酸化水提取，人造沸石吸附，硫酸銨鹽析，三氯乙酸沉淀，透析及過濾后測(cè)定其細(xì)胞色素C含量。用D-85離子交換樹脂在層析柱內(nèi)純化后，測(cè)定細(xì)胞色素C中含鐵量、酶活力，并用電泳鑒定其純度。利用提取細(xì)胞色素C后的牛心肌渣，采用醇?jí)A皂化、石油醚萃取，濃縮后低溫放置除去膽固醇等雜質(zhì)，上硅膠柱，收集黃色油狀物，無水乙醇結(jié)晶后得到精品CoQ10。用薄層層析，對(duì)照Rf值進(jìn)行定性鑒定，用紫外分光光度計(jì)在275nm下測(cè)定其純度。對(duì)提

2、取純化產(chǎn)品進(jìn)行分析，取得了以下主要結(jié)果： (1)研究分析表明，提取純化細(xì)胞色素C工藝合理，樣品定性鑒別正常，電泳分析為一條譜帶。樣品與標(biāo)準(zhǔn)品在紫外分光光度上掃描，紫外吸收光譜相同，在520nm和550nm處有最大吸收峰。 (2)細(xì)胞色素C樣品經(jīng)比色定量測(cè)定平均收率為146.3mg/kg，高于國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)。純化后樣品鐵含量平均為0.42﹪，酶活力平均為96.2﹪，符合中國(guó)藥典規(guī)定。 (3)從牛心肌渣中制備CoQ10

3、，經(jīng)研究醇?jí)A皂化適宜溫度為90℃，皂化時(shí)間為30min，萃取2次。經(jīng)薄層層析，僅有一個(gè)斑點(diǎn)，Rf=0.56(a=7.5cm，c=13.5cm)。樣品與標(biāo)準(zhǔn)CoQ10在紫外光度計(jì)掃描，紫外吸收光譜相同，在275nm處有最大吸收峰，定量測(cè)定樣品的純度為91.2﹪。 (4)根據(jù)牛心肌生理特征，采用較常規(guī)方法低的pH3.4酸化水，有利于提取細(xì)胞色素C。用國(guó)產(chǎn)D-85大孔弱酸性陽(yáng)離子交換樹脂替代常用的美國(guó)AmberliteIRC-50交換