根瘤土壤桿菌發(fā)酵生產(chǎn)輔酶Q-,10-的研究.pdf

1、本文對根瘤土壤桿菌(AgrobacteriumtumefaciensKY-3085)發(fā)酵制備輔酶Q10的發(fā)酵條件及代謝途徑進行了研究。 本文以根瘤土壤桿菌為出發(fā)菌株，對發(fā)酵培養(yǎng)基組成進行了優(yōu)化，優(yōu)化培養(yǎng)基組成為：蔗糖4％、牛肉粉1％、蛋白胨0.5％、硫酸銨0.2％、K2HPO40.05％、KH2PO40.05％，MgSO4·7H2O0.03％。并確定了種子液的最佳培養(yǎng)時間為24h和最佳發(fā)酵時間為120h。另外，還確定了最佳的發(fā)

2、酵條件為：初始pH值為7.5、接種量為5％、裝液量為60mL。 在對代謝途徑分析的基礎(chǔ)上，研究添加前體物質(zhì)(對羥基苯甲酸、茄尼醇和CoQ0)對輔酶Q10合成的影響，并確定了最佳添加方式。結(jié)果表明，添加前體物質(zhì)對輔酶Q10含量均有提高。其中，在發(fā)酵48h添加0.6g/L茄尼醇時，輔酶Q10含量最高為8.92mg/L，比不添加茄尼醇時提高了43％。本文還探討了添加維生素B12，甘油和甲硫氨酸對輔酶Q10合成的影響。 由于

3、CoQ10是胞內(nèi)產(chǎn)物，必須將細胞破壁，使之得以釋放，才能進一步提取，故細胞破碎是提取胞內(nèi)產(chǎn)物的關(guān)鍵步驟?？疾炝搜心シā⒂袡C溶劑法和超聲波破碎法對根瘤土壤桿菌細胞破碎的影響。結(jié)果表明，在有機溶劑破碎條件下，最佳攪拌時間為3.5h，此時CoQ10的含量為5.703mg/L；由正交實驗分析得出，菌體濃度為40mg/mL，作用時間為12min，破碎功率為250W時，超聲波破碎的效果最佳；與上述兩種常規(guī)破碎方法比較，在研磨的條件下，加入抗氧化劑B