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1、輔酶Q<,10>(又名泛醌,ubiquinone)主要存在于動(dòng)物、植物、微生物等細(xì)胞體內(nèi)與線(xiàn)粒體內(nèi)膜相結(jié)合,是生物體呼吸鏈中重要的遞氫體。同時(shí),輔酶Q<,10>也是一種良好的抗氧化劑,在化妝品、醫(yī)藥、保健等方面有重要作用。本研究中,我們從根癌農(nóng)桿菌中克隆了十聚異戊二烯二磷酸合成酶基因(dps),并在大腸桿菌中成功表達(dá),并且輔酶Q<,10>的含量比大腸桿菌本身的輔酶Q<,8>含量高。為了建立更好的表達(dá)體系,我們克隆了大腸桿菌輔酶Q<,10
2、>途經(jīng)中的ubiA,ubiC, ubiG基因,建立共表達(dá)體系。結(jié)果表明,共表達(dá)dps和ubiCA基因比只表達(dá)dps基因更有效,輔酶Q<,10>含量提高了5倍。證明ubiA基因?yàn)榇竽c桿菌輔酶合成途經(jīng)中的限速酶。為了大規(guī)模生產(chǎn)輔酶Q<,10>我們對(duì)大腸桿菌進(jìn)行了高密度發(fā)酵研究。葡萄糖為底物IPTG誘導(dǎo)流加發(fā)酵32.5 h時(shí),細(xì)胞干重和輔酶Q<,10>含量分別為:85.4 g(DCW)/L和50.29 mg/L,甘油為底物乳糖誘導(dǎo)流加發(fā)酵27
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