相關(guān)譜技術(shù)在生物大分子檢測上的應(yīng)用.pdf_第1頁
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1、華南師范大學(xué)碩士學(xué)位論文相關(guān)譜技術(shù)在生物大分子檢測上的應(yīng)用姓名:李軍鋒申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):光學(xué)指導(dǎo)教師:邢達20050601摘要摘要相關(guān)譜技術(shù)是一種統(tǒng)計方法,它通過對時間序列的漲落信號作相關(guān)運算(自相關(guān)和互相關(guān)),從而得到引起漲落過程的參數(shù),例如擴散系數(shù),濃度,結(jié)合和分離常數(shù)等。目前應(yīng)用廣泛的兩種相關(guān)譜技術(shù)包括:光子散射相關(guān)譜技術(shù)(photonscatteringcorrelationspectroscopyPSCS)和熒光相關(guān)譜技

2、術(shù)(fluorescencecorrelationspectroscopyFCS)。參與改進了本實驗室自行研制的小型低強度激光光子散射相關(guān)譜儀。與現(xiàn)有的同類型儀器相比,該儀器采用雙層折射率樣品匹配池,從而可以減小雜散光的干擾;采用帶梯度折射率透鏡的單模光纖接收、傳輸散射光信號提高了散射光的收集傳輸效率;用低強度的激光避免了對樣品的輻射損傷,同時可以使激光器和系統(tǒng)集成在一起,整個系統(tǒng)小型實用。用標準的不同粒徑的聚苯乙烯球檢驗了自行設(shè)計的系

3、統(tǒng),系統(tǒng)的測量范圍從幾個納米到一個微米都很精確。利用光子散射相關(guān)譜技術(shù)研究了牛血清白蛋白分子的擴散系數(shù)在不同強度離子溶液中隨著蛋白分子濃度變化的規(guī)律。結(jié)果表明在低離子強度環(huán)境中蛋白的擴散系數(shù)隨蛋白的濃度增加而增加,隨著離子強度的逐步增大,蛋自分子的擴散系數(shù)隨其濃度的增加而減小。利用平均勢場理論的兩體硬球相互作用模型解釋了蛋白分子的相互作用變化規(guī)律:隨著離子強度的增加,離子氛厚度減小,蛋白分子間的相互作用由排斥變?yōu)槲鞍组_始聚集。根據(jù)

4、擴散系數(shù)隨蛋白濃度變化的斜率與離子濃度變化的相關(guān)性,回歸出了蛋白相互作用參數(shù),蛋白所帶的有效電荷zP一90e、Hamaker常量=28KBT。這項工作說明了光子散射相關(guān)譜技術(shù)是研究蛋白分子相互作用的一種有效技術(shù)。參與了從德國Zeiss公司進口的熒光相關(guān)譜儀的組裝工作。與現(xiàn)有的同類型儀器相比,該儀器采用雙通道探測,不僅可以同時進行自相關(guān)熒光譜測量,還可以進行熒光互相關(guān)光譜測量;該儀器裝有三個激光器光源,一個氬離子激光器和兩個氦氖激光器,可

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