降壓避風(fēng)片的成分測(cè)定和體內(nèi)分析.pdf

1、降壓避風(fēng)片是由黃芩，槐角，落花生枝葉，鹽酸甲基左炔芐胺，氫氯噻嗪五味藥物組成的一種新型的中西藥合劑降壓藥，該藥不僅降壓平穩(wěn)，而且具有軟化和修復(fù)血管的功效，是一種可以長(zhǎng)期服用的降壓藥。研究表明，降壓避風(fēng)片中富含的黃酮類成分以及鹽酸甲基左炔芐胺，氫氯噻嗪是該藥降壓作用的主要活性成分，但部頒標(biāo)準(zhǔn)中僅將單一成分氫氯噻嗪作為該藥質(zhì)量控制的主要指標(biāo)。建立降壓避風(fēng)片中多組分測(cè)定的方法體系和以多組分為指標(biāo)的質(zhì)量控制體系，是保證該藥質(zhì)量控制的有效途徑。另

2、外，降壓避風(fēng)片是一種以多活性成分為藥效的一種藥物，這些活性成分進(jìn)入生物體內(nèi)之后的藥代動(dòng)力學(xué)及組織分布研究對(duì)于我們了解該藥的活性機(jī)制及安全性評(píng)價(jià)具有重要意義。目前關(guān)于該藥質(zhì)量控制及活性成分體內(nèi)分析的研究缺乏報(bào)導(dǎo)?；诮祲罕茱L(fēng)片藥物質(zhì)量控制及藥物安全性評(píng)價(jià)方面存在的問(wèn)題，本研究進(jìn)行了如下工作：
　　 ⑴降壓避風(fēng)片中鹽酸甲基丙炔芐胺的毛細(xì)管電泳-電致化學(xué)發(fā)光法測(cè)定。通過(guò)實(shí)驗(yàn)條件優(yōu)化，首次建立了降壓避風(fēng)片中的鹽酸甲基丙炔芐胺的毛細(xì)管電泳

3、-電致化學(xué)發(fā)光測(cè)定方法，測(cè)定了其中鹽酸甲基丙炔芐胺的含量。在最佳的實(shí)驗(yàn)條件下，鹽酸甲基丙炔芐胺的線性范圍為0.08～2.0 mg/L，最低檢測(cè)限為1.2μg/L(S/N=3)。對(duì)濃度為1.2 mg/L的鹽酸甲基丙炔芐胺進(jìn)行平行測(cè)定6次，得到峰高和遷移時(shí)間的RSD分別為1.5％、3.2％，可應(yīng)用與降壓避風(fēng)片及其相關(guān)制劑中鹽酸甲基丙炔芐胺的含量測(cè)定。該方法相對(duì)于文獻(xiàn)報(bào)道的高效液相色譜方法，具有靈敏，快速，試樣量少等優(yōu)點(diǎn)，并且樣品處理簡(jiǎn)單，不

4、消耗有機(jī)試劑。
　　 ⑵高效液相色譜法測(cè)定大鼠血漿中的鹽酸甲基丙炔芐胺。在優(yōu)化的色譜條件和血漿樣品前處理?xiàng)l件下，建立了大鼠血漿中鹽酸甲基丙炔芐胺的高效液相色譜測(cè)定方法，并對(duì)鹽酸甲基丙炔芐胺在大鼠血漿中的藥代動(dòng)力學(xué)進(jìn)行探討。結(jié)果表明，大鼠體內(nèi)的鹽酸甲基丙炔芐胺含量在480min時(shí)達(dá)到最大，這與鹽酸甲基丙炔芐胺的作用時(shí)間較慢相符合。鹽酸甲基丙炔芐胺在大鼠體內(nèi)的代謝呈現(xiàn)兩室模型，主要的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)為：Ka/h-1=88.097，T1

5、/2α/h=3.343，T1/2β/h=3.663，Cmax/mg L-1=0.4983，AUC(0～t)/mg h L-1=4.523，AUC(0～∞)/mg h L-1=5.501。這些數(shù)據(jù)對(duì)鹽酸甲基丙炔芐胺的臨床監(jiān)測(cè)以及應(yīng)用提供一定的參考。
　　 ⑶高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定降壓避風(fēng)片中的八種活性成分。通過(guò)優(yōu)化色譜條件，建立了三波長(zhǎng)-梯度洗脫高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定降壓避風(fēng)片中八種活性成分。流動(dòng)相為乙腈-0.05 mol/L磷酸

6、二氫銨溶液(磷酸調(diào)pH值為2.8)，線性洗脫梯度為：0 min85％(B)，12 min78％(B)，22 min67％(B)，32 min57％(B)，流速：1.0 ml/min。在選定的色譜條件下，八種成分的R2均大于0.999，可以應(yīng)用于降壓避風(fēng)片不同批次的測(cè)定。該方法對(duì)降壓避風(fēng)片的質(zhì)量控制具有一定的參考意義。
　　 ⑷固相萃取-高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定大鼠經(jīng)灌胃降壓避風(fēng)片后血漿中的六種黃酮類化合物。通過(guò)優(yōu)化血漿樣品的固相萃

7、取方法，建立了降壓避風(fēng)片中的六種黃酮類化合物在大鼠血漿中含量測(cè)定的高效液相色譜分析方法，并對(duì)其的藥代動(dòng)力學(xué)進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，大鼠經(jīng)灌胃0.5 g降壓避風(fēng)片后六種黃酮類化合物在血漿中的C-T曲線呈現(xiàn)二室模型。從藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)可以看出，六種黃酮在大鼠體內(nèi)的分布和消除較快，并且具有廣泛的分布。該研究為臨床應(yīng)用和研究提供一定的參考。
　　 ⑸固相萃取-高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定大鼠灌胃降壓避風(fēng)片后組織中的六種黃酮類化合物。通過(guò)優(yōu)化組織樣

8、品的固相萃取方法，建立了降壓避風(fēng)片中的六種黃酮類化合物在大鼠八處組織(心、肝、脾、肺、腎、腦、腸、胃)中含量測(cè)定的高效液相色譜分析方法，對(duì)降壓避風(fēng)片中的六種黃酮類化合物在大鼠組織中不同時(shí)間點(diǎn)的分布進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，大鼠經(jīng)灌胃0.5 g降壓避風(fēng)片后六種黃酮類化合物在胃腸道內(nèi)即發(fā)生代謝、吸收。從藥物在各組織中分布的濃度高低來(lái)看，黃酮類化合物主要經(jīng)胃腸易化擴(kuò)散吸收分布于胃腸道，并在肝、腎、心、肺、脾、肺、腦等各處組織都有一定分布。而黃酮苷