泡球蚴體外厭氧培養(yǎng)模型建立及影響體外培養(yǎng)泡球蚴生長(zhǎng)發(fā)育因素研究.pdf

1、泡狀棘球蚴病是由多房棘球絳蟲(chóng)續(xù)絳期幼蟲(chóng)引起的一種嚴(yán)重威脅著人類(lèi)生命安全的人獸共患寄生蟲(chóng)病。然而多房棘球絳蟲(chóng)與宿主之間的相互作用關(guān)系以及免疫逃避的分子機(jī)制目前仍不清楚。一個(gè)主要原因是在實(shí)驗(yàn)室條件下培養(yǎng)寄生性蠕蟲(chóng)存在著很大困難,且很難獲得足夠的寄生蟲(chóng)材料進(jìn)行分子水平上的研究。因此構(gòu)建體外培養(yǎng)系統(tǒng)對(duì)泡球蚴的研究非常重要。
　　 本文建立了泡球蚴與HeLa細(xì)胞體外共培養(yǎng)系統(tǒng):在含10％胎牛血清的DMEM中,HeLa細(xì)胞與泡球蚴共同培養(yǎng)。

2、在泡球蚴共培養(yǎng)系統(tǒng)中,HeLa細(xì)胞分泌泡球蚴生長(zhǎng)發(fā)育所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及維持泡球蚴生存所需的氧化還原平衡狀態(tài),泡球蚴因而能生長(zhǎng)發(fā)育。然而在有氧條件下,宿主細(xì)胞的存在不利于進(jìn)一步對(duì)泡球蚴研究,繼而建立了泡球蚴體外厭氧培養(yǎng)體系:在厭氧條件下,在HeLa滋養(yǎng)細(xì)胞上清液中加入還原劑β-巰基乙醇、L-半胱氨酸及螯合劑2,9-二甲基-4,7-二苯基-1,10-菲啉磺酸二鈉鹽后,泡球蚴能生長(zhǎng)發(fā)育。本論文研究發(fā)現(xiàn):在厭氧培養(yǎng)體系中,培養(yǎng)液中胎牛血清維持泡球蚴

3、的生存;HeLa滋養(yǎng)細(xì)胞分泌的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)促進(jìn)泡球蚴生長(zhǎng)發(fā)育;還原劑與螯合劑維持還原性環(huán)境,有助于穩(wěn)定泡球蚴所需氧化還原平衡狀態(tài),其各自作用效果不同,β-巰基乙醇對(duì)促進(jìn)泡球蚴生長(zhǎng)發(fā)育效果最明顯,其次L-半胱氨酸,2,9-二甲基-4,7-二苯基-1,10-菲啉磺酸二鈉鹽對(duì)泡球蚴生長(zhǎng)略有促進(jìn)作用,同時(shí)加入這三種泡球蚴生長(zhǎng)發(fā)育最快;在厭氧環(huán)境下,能獲得無(wú)宿主細(xì)胞的泡球蚴。通過(guò)泡球蚴體外厭氧培養(yǎng)體系將有助于深入分析特定宿主細(xì)胞分泌的生長(zhǎng)因子對(duì)泡球蚴